冷冻干燥法制备阿魏酸酯酶和阿拉伯木聚糖酶固体混合酶制剂

阿魏酸酯酶和阿拉伯木聚糖酶在食品、饲料和造纸工业中具有广泛的应用前景,本研究探讨了冷冻干燥制备固体酶制剂的方法。结果表明,在干燥过程中酶活力有所损失,酶液厚度增大会增加干燥时间,但对酶活力的影响不显著。为此,实验研究了不同保护剂对减少酶活损失的效果,得出了以下结论:添加1%～2%的聚乙二醇可以有效保护酶制剂在冷冻干燥过程中不失活。      

超滤法浓缩阿魏酸酯酶和阿拉伯木聚糖酶混合酶制剂的研究

用截留分子量2万的中空纤维膜超滤阿魏酸酯酶与阿拉伯木聚糖酶的混合酶制剂。研究了超滤进口压力、超滤温度对膜通量和酶活的影响,确定了进口压力0.10～0.15MPa、超滤温度25～30℃为最佳操作工艺参数。酶的浓缩倍数可达7倍以上,使酶制剂更加方便保存。采用2次超滤的方法可以去除浓缩酶液中90%的低聚糖和阿魏酸等小分子物质,解决了酶制剂使用中的产物抑制问题。     

采用黑曲霉发酵制备阿拉伯木聚糖酶和阿魏酸酯酶的研究

采用黑曲霉发酵麦麸、蔗渣和玉米麸皮都能获得阿魏酸酯酶和阿拉伯木聚糖酶,并在第3d达到产酶高峰。但不同发酵基质产酶活性差别很大,麦麸最好,蔗渣最差。同时,酶制剂因发酵基质不同会产生底物专一性,因此,在生产酶制剂时应注意根据所降解的对象选择发酵基质。     

冷冻干燥法制备植物酯酶

以酯酶为试剂可以有效地检测有机磷农药的存在,在农残分析中已广泛应用,但目前还没有工业化酯酶产品。本文探讨了冷冻干燥制备植物酯酶干粉的方法,对冷冻干燥中装液厚度、干燥时间和保护剂选择等参数进行了实验研究。结果表明,在干燥过程中,酶液厚度增大会增加干燥时间,但对酶活力无显著影响;添加5%的聚乙二醇可以有效保护酶制剂在冷冻干燥过程中不失活,并且有良好的稳定性。     

阿魏酸酯酶的制备

阿魏酸酯酶是一种新型酶制剂,在食品、饲料和造纸工业中都有着广阔的应用前景,但目前还没有工业化产品。文中研究了超滤和冷冻干燥制备阿魏酸酯酶的工艺条件,结果表明,酶液pH值为8.06时有利于酶蛋白截留;装液厚度为6mm时,酶粉剂冷冻干燥时间为24h;添加1%～2%的聚乙二醇可以保护酶液在冷冻干燥过程中不失活;阿魏酸酯酶的液体和固体产品在保存过程中均表现出了较好的稳定性。     

酶解麦麸制备低聚糖和阿魏酸的研究

本研究以黑曲霉(Aspergillus niger)作菌种,采用液体深层发酵法制备出含有阿魏酸酯酶(FAE)和阿拉伯木聚糖酶(AX)的混合酶制剂,探讨了它们协同作用麦麸制备阿魏酸和低聚糖的工艺条件.结果表明,FAE和AX协同作用的最适反应pH为4.4,最适反应温度为50℃.采用混合酶制剂作用于去淀粉麦麸(DSWB)发现,通过3次降解后,麦麸降解率达55.46%,大大高于文献报道的、采用单一酶作用的结果.扫描电子显微镜(SEM)观察发现,DSWB在酶处理前后的微观结构发生了显著变化.     

双酶法降解玉米麸皮制备低聚糖和阿魏酸的研究

利用阿魏酸酯酶和阿拉伯木聚糖酶的混合酶制剂可以实现高效降解玉米麸皮,制备功能性食品原料阿魏酸和低聚木糖。探讨了利用双酶法降解去淀粉玉米麸皮的工艺条件。确定了酶的最适反应条件:温度40℃、pH值4.4,料液比8%。在最适条件下酶解24 h,可以释放出去淀粉玉米麸皮中23.5%的阿魏酸和18.4%的还原糖。探讨了高温高压预处理底物对酶解的影响,结果表明在160℃(0.52 MPa)的高温下预处理去淀粉玉米麸皮30 m in,酶解24 h后释放阿魏酸的量比未经高温高压预处理时提高1倍,还原糖量提高3倍。     

酶解麦麸制备阿魏酸和低聚糖的研究

本研究以黑曲霉(Aspergillus niger)作菌种,采用液体深层发酵法制备出含有阿魏酸酯酶(FAE)和阿拉伯木聚糖酶(AX)的混合酶制剂,探讨了它们协同作用麦麸制备阿魏酸和低聚糖的工艺条件。结果表明,FAE和AX协同作用的最适反应pH为4.4,最适反应温度为50℃。采用混合酶制剂作用于去淀粉麦麸(DSWB)发现,通过3次降解后,麦麸降解率达55.46%,大大高于文献报道的、采用单一酶作用的结果。扫描电子显微镜(SEM)观察发现,DSWB在酶处理前后的微观结构发生了显著变化。     

离子交换法纯化阿魏酸的研究

本研究采用黑曲霉固体发酵法制备的酶制剂降解麦麸,以酶解液为原料,采用D201#大孔树脂对阿魏酸进行分离提纯,探讨了上柱工艺条件和洗脱条件对离子交换的影响,确定最适离子交换操作工艺室温下,料液阿魏酸浓度在2000mg/l～3000 mg/l之间,pH值为9.0,上柱流速为1 ml/min;洗脱剂配比(V/V)为无水乙醇水盐酸=60364,洗脱流速为1 ml/min.在该操作工艺条件下,阿魏酸收率达97%以上,且经过薄层层析法验证纯度大大提高.     

产阿魏酸酯酶乳酸菌的乳杆菌筛选以及基因克隆

运用平板法和高效液相色谱法筛选出一株具有阿魏酸酯酶活性的发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum ATCC9338),其酶活力为260mU/L,并成功运用鸟枪法对该菌株进行阿魏酸酯酶克隆并测序,为产阿魏酸酯酶益生菌的开发提供理论依据。      

阿魏酸酯酶功能特性及应用概述

阿魏酸酯酶(ferulic acid esterase,FAE)广泛存在于自然界,属于羧酸酯水解酶的一个亚类.经过一系列反应,其能将天然半纤维素和果胶中的酚酸、阿魏酸(ferulic acid,FA)及对香豆酸等释放出来,是一种具有应用潜力的酶.因此,各行业通过相关科学技术来利用FAE,以获得如人畜食品、纸浆和纸张、燃...     

阿魏酸酯酶在黑曲霉中的同源表达

利用食品级黑曲霉表达系统同源表达阿魏酸酯酶是提高阿魏酸酯酶产量、降低生产成本的有效途径。利用PCR技术扩增黑曲霉阿魏酸酯酶A基因（faeA）的编码区,构建黑曲霉表达载体pSZHG-faeA,并通过农杆菌介导法转化黑曲霉。经筛选获得将faeA基因整合到糖化酶基因位点的同源重组转化子4株。在酶摇瓶发酵条件下,重组菌株培养液上清中的阿魏酸酯酶活性最高达18.6mU/mL。SDS-PAGE分析显示,4株重组菌株都有约36ku目的蛋白条带,表达量为188²62μg/mL。结果表明,实现了阿魏酸酯酶在黑曲霉中的同源表达,为食品级阿魏酸酯酶的大规模工业化生产奠定了基础。      

乳化挥发法和薄膜-超声法制备阿魏酸固体脂质纳米粒工艺比较

阿魏酸在食品医药行业应用广泛,但是容易受温度、p H等环境因素的影响。固体脂质纳米粒(solid lipid nanoparticles,SLNs)能有效地保护生物活性物质不被降解。采用薄膜-超声法和乳化挥发法制备阿魏酸固体脂质纳米粒(ferulic acid loaded SLNs,FA-SLNs),通过单因素实验进行制备工艺的选择,分别得到薄膜-超声法和乳化挥发法制备FA-SLNs的适宜工艺条件。实验结果表明,采用薄膜-超声法制备FA-SLNs,阿魏酸添加量10%(质量分数),卵磷脂添加量90%(质量分数),超声时间5 min,可得平均粒径44. 33 nm,电位-12. 35 m V的FA-SLNs,包封率为62. 97%;采用乳化挥发法制备FA-SLNs,阿魏酸添加量4%(质量分数),卵磷脂的添加量16%(质量分数),单硬脂酸甘油酯的添加量80%(质量分数),聚醚F-68质量浓度10 g/L,可得平均粒径141. 37nm,电位-10. 25 m V的FA-SLNs,包封率为69. 54%。薄膜-超声法制得FA-SLNs的粒径较小,乳化挥发法制得的FA-SLNs包封率较高,2种方式在适宜工艺条件下制备得到的样品在4℃下能够稳定储存21 d,未见明显沉淀。     

阿魏酸酯酶对晒青毛茶发酵过程的影响

以晒青毛茶为原料,研究阿魏酸酯酶对晒青毛茶发酵过程中活性物质的影响。利用高效液相色谱法以及分光光度计法测定茶叶中各种活性物质含量的变化。实验结果表明,发酵8 d后茶叶的水浸出物、还原糖、阿魏酸及低聚木糖均比晒青毛茶高,茶汤的p H值及游离氨基酸含量下降。在晒青毛茶中同时添加3 m L(75 U/m L)阿魏酸酯酶和3 m L(75 U/m L)木聚糖酶,在发酵第8天阿魏酸及低聚木糖分别可达838. 9μg/g及3. 78μg/g,比不添加任何酶的茶样分别高20. 9%及38. 6%。在晒青毛茶发酵过程中,同时添加阿魏酸酯酶与木聚糖酶有利于提高茶叶的品质,从而提升茶叶的附加值。该研究结果对发酵型茶的保健功效提供一定的理论依据。     

高产阿魏酸酯酶菌株的筛选及其产酶条件优化

通过初筛、复筛从茯砖茶中筛选到了1株产阿魏酸酯酶活力较高的菌株,经个体形态和菌落特征初步鉴定其为冠突散囊菌;以阿魏酸酯酶酶活为衡量指标,选取黑毛茶含水量、接种量、培养温度、培养时间为因子,研究确定筛选出来的冠突散囊菌进行固态发酵黑毛茶的产酶条件。结果表明:黑毛茶固态发酵实验中,黑毛茶含水量26%,接种量1‰,温度30℃条件下培养4d,其酶活力最高可以达到142m U/g。     

高产阿魏酸酯酶菌株的筛选及其产酶条件优化

通过初筛、复筛从茯砖茶中筛选到了1株产阿魏酸酯酶活力较高的菌株,经个体形态和菌落特征初步鉴定其为冠突散囊菌;以阿魏酸酯酶酶活为衡量指标,选取黑毛茶含水量、接种量、培养温度、培养时间为因子,研究确定筛选出来的冠突散囊菌进行固态发酵黑毛茶的产酶条件。结果表明:黑毛茶固态发酵实验中,黑毛茶含水量26%,接种量1‰,温度30℃条件下培养4d,其酶活力最高可以达到142m U/g。      

高产阿魏酸酯酶菌株的筛选鉴定及产酶条件优化

为提高白酒酿造过程中阿魏酸的含量,该研究从浓香型白酒大曲中分离筛选产阿魏酸酯酶的菌株,通过形态观察、生理生化试验及分子生物学技术对其进行菌种鉴定,并以阿魏酸酯酶活力为评价指标,采用单因素试验及响应面试验对其发酵条件进行优化。结果表明,筛选得到一株产阿魏酸酯酶的菌株,编号为M2。经鉴定,其为一株蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）,该菌株产阿魏酸酯酶的最佳发酵条件为接种量5%,发酵温度30℃,初始pH值5.5,发酵时间72 h。在此优化条件下,阿魏酸酯酶活力为33.89 U/L,比优化前提高10.03%,具有较强的产阿魏酸酯酶能力。