肾小球系膜细胞增殖抑制因子

肾小球系细胞增对肾小球疾病的炎症过程及其进展具有重要作用，探讨其抑制因子对深入了解肾小球疾病发病机理及寻求治疗药物日益受到重视。本文对近年来在体外细胞培养，肾小球疾病的动物模型等研究中发现的肾小球膜细胞增殖抑制因子及其作用机制进行了综述。     

肝素对人肾小球系膜细胞增殖及细胞因子产生的作用

系膜细胞（ＭＣ）的增生及细胞因子的分泌在肾小球疾病的进展中起重要作用。我们旨在探讨肝素对脂多糖（ＬＰＳ）诱导人肾小球ＭＣ增殖及分泌白细胞介素６、肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）的影响作用，为临床治疗肾小球疾病提供一定的实验依据。一、资料与方法１．按经典...     

细胞间粘附分子对肾小球系膜细胞增殖的影响

近年来免疫病理学研究已证实细胞间粘附分子-1(ICAM-1)作为细胞粘附分子中免疫球蛋白超家族成员之一,通过与炎性细胞表面同族型配体之间相互作用形成粘附,在免疫监督、炎症反应和动脉粥样硬化等过程中起着重要的作用。因此,有关ICAM-1与肾小球系膜细胞增殖的相关研究对进一步阐明肾小球炎性疾病的发病机理及治疗的进展具有重大意义。 一、材料与方法 1.按经典方法培养、鉴定C57BL/6小鼠肾小球系膜细胞及巨噬细胞,选取第4～6代细胞用于本实验。 2.取系膜细胞,胰酶消化后,将制成的浓度为1.0×10~4/L细胞悬液加入24孔培养板内,正常对照组和     

肿瘤坏死因子介导内皮素所致人肾小球系膜细胞增殖的研究

内皮素（endothelin，ET）不但是强烈缩血管多肽，而且还是一个强有力促有丝分裂因子，能够刺激肾小球系膜细胞增殖[1]，但机理仍欠清楚。为探讨内皮素致系膜细胞由肿瘤坏死因子α（TNFα）介导的可能性，我们利用细胞培养、放射免疫及分子杂交等技术进行了本实验。一、材料和方法1．实验对象：第2－3代亚培养人肾小球系膜细胞（humanmesangialbell，HMC）。2．TNFu测定：分试验组和对照组，试验组加10－’mol／L人ET－l，孵育8。12和24h后收集上清，放射免疫法测定’FNFa蛋白浓度。3Northern杂交：实验分5组，第1组仅加含2．5％FC…     

洛伐他丁对大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响

目的：研究他丁类降脂药物对肾小球系膜细胞增殖的影响。方法：应用羟甲基戊二酰辅酶A（HMG－CoA)还原酶抑制剂洛伐他丁来观察其对培养的大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响。用含有或没有洛伐他丁和甲羟戊酸及其代谢产物的10％胎牛血清或血小板源生长因子（PDGF）刺激培养的大鼠肾小球系膜细胞，然后用测定溴化脱氧尿嘧啶核苷（BrdU)的整合来评估DNA的合成并测定细胞的数量，结果：洛伐他丁对10％的胎牛血清刺激系膜细胞DNA的合成抑制是剂量依赖性，并且能够抑制细胞的生长，甲羟戊酸，焦磷酸牛儿基牛儿酯能够显著地逆转洛伐他丁的抑制作用。结论：洛伐他丁通过影响甲羟戊酸的合成抑制鼠肾小球第膜细胞的增殖，这可能为治疗系膜增殖性肾小球疾病提供一个新的方法。     

性激素对系膜细胞增殖的影响

由肾小球肾炎和高血压性肾小球硬化所致的终末期肾功能衰竭中男性发病率高于女性。多种肾脏病发展男性快于女性［１］。肾小球硬化包括细胞增殖和细胞外基质合成，我们实验观察性激素对体外培养大鼠肾小球系膜细胞（ＭＣ）增殖和基质合成的直接影响。一、材料和方法１．ＭＣ的培养与鉴定：雄性ＳＤ大白鼠４只，６～８周龄，１５０～２００ｇ，由河南医科大学动物实验中心提供。ＭＣ的培养与鉴定按谌贻璞等建立的方法进行［２］。２．性激素对ＭＣ增殖的影响：（１）对活细胞计数的影响：将亚培养第五代ＭＣ种于２４孔（１００００个／孔）培…     

雷帕霉素对肾小球系膜细胞增殖及凋亡的影响

目的 观察不同浓度雷帕霉素对大鼠肾小球系膜细胞增殖及凋亡的影响,探讨其可能的作用机制。 方法 使用不同浓度雷帕霉素（1 μg/L、2 μg/L、4 μg/L、8 μg/L、16 μg/L）处理大鼠肾小球系膜细胞,并设正常对照组。MTT法测不同浓度雷帕霉素干预24 h、48 h、72 h后对细胞增殖的影响,并描记生长曲线。干预72 h后,采用RT-PCR和Western印迹法分别检测各浓度雷帕霉素组细胞周期负调蛋白p27和p53的mRNA和蛋白表达变化;用流式细胞计量术检测各浓度雷帕霉素组细胞周期及凋亡率。 结果 小剂量雷帕霉素（1 μg/L）对系膜细胞增殖即具有明显的抑制作用,停滞于G1期的细胞数明显增加,但对系膜细胞凋亡无明显影响。较大剂量雷帕霉素(8~16 μg/L)能够明显增加肾小球系膜细胞凋亡。雷帕霉素能够增加肾小球系膜细胞p27、p53 mRNA和蛋白表达,且呈剂量依赖性。 结论 雷帕霉素可能通过增加p27、p53表达抑制肾小球系膜细胞增殖和促进系膜细胞凋亡。     

白细胞介素-13对肾小球系膜细胞增殖及细胞周期的影响

目的：探讨白细胞介素—13(IL—13)对肾小球系膜细胞(MC)增殖及其细胞周期的影响。方法：用甲基偶氮唑法(MTT)测定MC增殖，流式细胞术分析细胞周期。结果：IL—13在1ng／ml、5ng／ml、10ng／ml、100ng／ml浓度范围呈剂量依赖性抑制5％FCS培养的和脂多糖(LPS)诱导的MC增殖，抑制率分别为19．8％和29．23％、24．35％和37．05％、30．03％和46．6％、46．93％和55．23％。IL—13作用MC48h，使MC较多滞留于G1期，而S期细胞减少。结论：IL—13通过参与细胞周期的调控而抑制MC增殖。     

中药对肾小球系膜细胞增殖作用机制研究进展

肾小球系膜细胞（mesangial cell,MC）属于肾脏血管周围固有细胞,在正常情况下,MC的数量、形态和位置均保持相对稳定,其合成基质的能力也较小;但在慢性肾脏病发展过程中MC不仅是受害者,而且是病变过程中的主动参与者。MC增生是慢性肾脏病进展至肾小球硬化和纤维化的关键环节。     

白细胞介素8对培养的人类肾小球系膜细胞增殖的影响

白细胞介素８（ＩＬ－８）如何影响肾小球细胞增殖仍不清楚，是否具有直接的促增殖作用亦认识不一。我们初步观察了ｒｈＩＬ－８在有和无中性粒细胞（ＰＭＮ）参与的两种情况下，对培养的人胎肾肾小球系膜细胞（ＭＣ）增殖的影响。 一、材料与方法 １．ＭＣ培养与鉴定：参照文献［１］。 ２．实验设计与分组：标记４块９６孔培养板分为１２ ｈ、２４ ｈ、４８ ｈ、９６ ｈ ４个时相点。每块孔板设计为Ａ、Ｂ组。Ａ组用于无ＰＭＮ参与的实验出组用于有ＰＭＮ参与的实验。Ａ、Ｂ组又各分４个小组：对照组、实验组１、实验组２、实验组３，每小…     

OX-LDL诱导活化的巨噬细胞对肾小球系膜细胞增殖的影响

目的:采用细胞共培养方法,研究氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)诱导活化的巨噬细胞对肾小球系膜细胞增殖的影响.方法:用OX-LDL刺激大鼠腹腔巨噬细胞,ELISA测定上清液中IL-1浓度鉴定巨噬细胞活化程度;用普通培养皿和细胞共培养皿分别将活化巨噬细胞上清液和活化巨噬细胞与大鼠肾小球系膜细胞共培养;用MTT法和流式细胞检测细胞周期测定细胞增殖.结果:OX-LDL刺激后大鼠腹腔巨噬细胞上清液中IL-1浓度明显升高;无论是活化的巨噬细胞还是其上清液均能明显促进系膜细胞增殖,但以共培养组最为显著.结论:在细胞共培养状态下由于脂质诱导活化的巨噬细胞及其上清液可能通过促进系膜细胞增殖导致肾脏损伤.     

系膜细胞增殖及其调控机制

系膜细胞增殖是各种类型肾小球肾炎中常见的病理改变。许多因素参与细胞增殖的调节，这些因子通过各自的信号系统首先激活一些即早反应基因，后者编码的产物进一步调控细胞周期某些蛋白的表达，影响细胞分裂。     

旱莲草下调P16INK4a抑制LPS诱导的肾小球系膜细胞增殖及炎症反应

目的:探讨旱莲草调控细胞周期素依赖蛋白激酶抑制剂P16INK4a对脂多糖(LPS)诱导的肾小球系膜细胞增殖及炎症因子表达的影响.方法:体外培养肾小球系膜细胞HBZY-1,LPS(10μg/ml)处理HBZY-1细胞构建系膜增生性肾小球肾炎细胞模型.将HBZY-1细胞分为对照组、LPS组、LPS+旱莲草-低(L)组、LP...     

氨氯地平防治肾小球系膜细胞肥大与增殖的实验研究

钙通道阻滞剂（ＣＣＢ）对于肾脏的作用是目前研究热点之一。ＣＣＢ可能存在抗系膜细胞肥大、增殖的肾脏保护效应。本研究旨在观察双氢吡啶类ＣＣＢ－氨氯地平（ａｍｌｏｄｉｐｉｎｅ）能否抑制系膜细胞的肥大与增殖；同时将ａｍｌｏｄｉｐｉｎｅ与ＡＣＥＩ－ｂｅｎａｚｅｐｒｉｌａｔ ＬＺ及 Ａｎｇ ＩＩ受体拮抗剂（ＡＴＩＲＡ）－ｌｏｓａｒｔａｎ比较，观察单用或合用的不同作用。 一、材料与方法 １．材料与试剂：包括自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）、正常血压大鼠（ＷＫＹ）（上海市高血压研究所动物房），ＡｕｇⅡ（Ｓｉｇｍａ），血小…     

白细胞介素—10对鼠肾小球系膜细胞增殖和核因子κB的抑制作用

目的：研究白细胞介素－10（rhIL-10)对小鼠肾小球系膜细胞（mesangial cell,MC)增殖的影响及其细胞内作用机制。方法：采用3H－TdR掺入法观察MC的增殖反应,采用电泳适移改变法（EMSA）检测核因子κB（nuclear factorκB,NF-κB)活性。结果：rhIL-10(20ng/ml)抑制LPS刺激的小鼠MC增殖（P＜0．05）,同时rhIL-10亦显抑制LPS诱导的MC中NF－κB活化,结论：IL－10对LPS诱导的小鼠MC增殖的抑制作用至少部分与其对NF－κB活化的抑制有关。     

白细胞介素13对肾小球系膜细胞增殖及白细胞介素1β表达的影响

目的：探讨白细胞介素13（IL－13）对体外培养的大鼠系膜细胞的增殖及其产生白细胞介素1β（IL-1β）的影响。方法：用四甲基偶氮唑（MTT）法测定系膜细胞增殖,用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）及酶联免疫吸附（ELISA）法测定系膜细胞IL－1β mRNA表达IL-1β蛋白水平。结果IL－13在1．0,10,100ng/ml浓度范围呈剂量依赖性地抑制系膜细胞的增殖。含5％小牛血清（FCS）的RPMI 1640培养状态下的系膜细胞检测不出IL－1β,IL－13在抑制系膜细胞的增殖的相应浓度坷显著地抑制LPS诱导的系膜细胞IL－1β mRNAg表达及L-1β分必,IL－13在10ng/ml浓度时即可几乎完全抑制LPS诱导的系膜细胞IL－1β mRNA表达,结论：IL－13对体外培养的系膜细胞增殖及炎症效应具有抑制作用。     

细胞因子信号传导抑制蛋白1抑制高糖诱导的肾小球系膜细胞单核细胞趋化蛋白1的表达

目的 探讨细胞因子信号传导抑制蛋白1(SOCS-1)对高糖状态下肾小球系膜细胞单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）表达的影响。 方法 体外培养人肾小球系膜细胞,应用脂质体2000分别转染pCR3.1-SOCS-1表达质粒和pCR3.1 空质粒载体,G418筛选阳性克隆。分别采用低糖（5.5 mmol/L）、高糖（30 mmol/L）、低糖+甘露醇（24.5 mmol/L甘露醇）和JAK-STAT信号通路抑制剂AG490 （10 μmol/L）进行刺激。Western印迹检测系膜细胞SOCS-1、信号转导和转录活化因子1、3（STAT1、STAT3）及其磷酸化蛋白（p-STAT1、p-STAT3）的表达。ELISA法和放免法测定细胞上清液中MCP-1、FN和Ⅳ型胶原的含量。RT-PCR法检测SOCS-1和MCP-1 mRNA的表达。 结果 高糖刺激系膜细胞SOCS-1蛋白和mRNA表达呈时间依赖性变化, 4 h表达达到峰值,然后逐渐减低,24 h达基线水平。与低糖组相比,高糖组系膜细胞STAT1和STAT3磷酸化水平显著上调（P < 0.01）; MCP-1 mRNA水平表达显著上调[（0.39±0.05）比（0.16±0.02）,P < 0.01];上清液中MCP-1[（459±67）比（241±19） ng/L]、FN[（5.84±0.61）比（3.41±0.31） mg/L]和Ⅳ型胶原[（16.45±2.30）比（9.56±1.52） μg/L] 含量均显著增加（均P < 0.01）。与空载体对照组相比,SOCS-1过表达组系膜细胞STAT1和STAT3的磷酸化水平显著下降（P < 0.05）;MCP-1 mRNA表达下调[（0.34±0.04）比（0.42±0.05）,P < 0.05]; 上清液中MCP-1[(387±47）比（463±56） ng/L]、 FN[（4.61±0.57）比（5.76±0.74） mg/L]和Ⅳ型胶原[(13.4±2.32)比（17.1±2.57） μg/L] 含量显著减少（均P < 0.05）。与高糖组相比,AG490组系膜细胞MCP-1 mRNA（0.31±0.04）表达显著下调;上清液中MCP-1[（361±53） ng/L]、FN[（5.46±0.71）mg/L]和Ⅳ型胶原[（15.2±1.97） μg/L]含量均减少。 结论 SOCS-1过表达抑制高糖状态下肾小球系膜细胞MCP-1及细胞外基质的分泌可能部分是通过影响STAT1和STAT3的激活而实现。     

尿酸活化ERK1/2信号通路刺激大鼠肾小球系膜细胞增殖

目的 探讨尿酸（UA）对大鼠肾小球系膜细胞（GMC）增殖的影响及其可能的机制。 方法 体外培养大鼠GMC,应用不同浓度的UA（50、100、300 μmol/L）刺激或应用细胞外信号调节激酶（ERK1/2）特异性抑制剂U0126（10 μmol/L）、NADPH氧化酶特异性抑制剂夹竹桃麻素（500 μmol/L）、线粒体复合体Ⅰ抑制剂鱼藤酮（10 μmol/L）预处理 30 min 后,再加入UA（300 μmol/L）。于实验终点收集细胞,应用3H-TdR掺入法、细胞计数及流式细胞术测定GMC增殖和细胞周期变化;应用实时定量PCR、Western印迹法检测细胞周期素cyclin D1和cyclin A2的表达及ERK1/2的磷酸化水平;应用荧光探针2,7-二氯二氢荧光素乙酰乙酸（DCFDA）检测细胞内活性氧（ROS）的变化。 结果 （1）与对照组相比,3H-TdR掺入法和细胞计数均显示,UA呈剂量依赖性促进GMC增殖,300 μmol/L UA刺激组其细胞数为对照组的1.5倍以上。（2）流式细胞术显示,UA呈剂量依赖性减少G1/G0期细胞数,增加S期细胞数,300 μmol/L UA刺激组其S期细胞数为对照组的2倍以上。（3）UA呈剂量依赖性促进系膜细胞周期蛋白cyclin D1和cyclin A2的表达。（4）UA呈剂量依赖性促进系膜细胞ERK1/2磷酸化且U0126能够抑制UA诱导的GMC增殖。细胞计数和3H-TdR掺入法分别显示,U0126的抑制率分别是UA 300 μmol/L刺激组的22%和31%（均P < 0.05）。（5）UA呈剂量依赖性促进ROS产生增加,夹竹桃麻素能够明显抑制UA诱导的ROS生成、ERK1/2的磷酸化和系膜细胞增殖（均P < 0.05）,而鱼藤酮对其无明显影响。 结论 UA可促进GMC增殖,其可能的机制为UA诱导NADPH 氧化酶来源的 ROS 产生增加,从而激活ERK1/2信号通路,引起周期蛋白表达增加,促进GMC增殖。     

细胞外信号调节蛋白激酶介导醛固酮诱导的肾小球系膜细胞增殖

Objective To determine the role of extracellular signal-regulated kinases (ERK1/2) in aldosterone-induced rat mesangial cells (RMCs) proliferation. Methods RMCs were obtained from intact glomeruli of 4- to 6-week-old Sprague-Dawley rats and characterized according to published methods. RMCs between passages 5 and passages 10 were used. Protein levels of mineralocorticoid receptor(MR) in RMCs were analyzed by Western blotting. The cells were divided into the following groups: control group, PD98059(10 ?滋mol/L) group, eplerenone (1 ?滋mol/L) group, aldosterone (100 nmol/L) group, aldosterone (100 nmol/L) ＋PD98059 (10 ?滋mol/L) group, aldosterone(100 nmol/L)＋eplerenone (1 ?滋mol/L) group. ERK1/2 activity was measured by Western blotting. Cell proliferation of RMCs was evaluated by [3H]-thymidine uptake measurements. Results MR protein expression in RMCs was confirmed by Western blotting. Aldosterone activated ERK1/2, and the maximal ERK1/2 activation induced by aldosterone was at a concentration of 100 nmol/L. Aldosterone (100 nmol/L)-induced activation of ERK1/2 peaked at 10 minutes (P<0.05). Pretreatment with a selective MR antagonist eplerenone (1 ?滋mol/L) significantly attenuated aldosterone-induced ERK1/2 phosphorylation. Aldosterone (100 nmol/L) treatment for 30 hours increased [3H]-thymidine incorporation of RMCs (135%±8% of controls, P<0.05). Cellular proliferation induced by aldosterone could be prevented by pretreatment with eplerenone or an ERK (MEK) inhibitor PD988059. Conclusion Aldosterone induces RMCs proliferation through MR and ERK1/2 activation, which may contribute to the pathogenesis of glomerular mesangial injury.