IIB期骨肉瘤XIAP表达及其预后预测的意义

Objective:To evaluate X-linked inhibitor of apoptosis protein (XIAP) expression in biopsy specimens from the patients with stage IIB osteosarcomas before chemotherapy to study XIAP expression and its predictive significance of prognosis in stage IIB osteosarcomas.Methods:The expression of XIAP was retrospectively detected by SP immunohistochemistry in 31 cases biopsy specimens from stage IIB osteosarcomas before chemotherapy,and the relationship between XIAP expression and clinicopathologic features of the patients with stage IIB osteosarcomas was analyzed.Results:The osteosarcoma specimens showed strong cell nucleus immunoreaction of XIAP while normal bone specimens showed weak.High XIAP positive expression independently predicted the patient's poor outcome and had no relationship with clinicopathologic variables such as age,gender,location,tumor size,rate of tumor necrosis to preoperative chemotherapy,local recurrence (P＞0.05).Significant correlations were found between high XIAP expression and metastasis (P=0.022),and also between high XIAP expression and final survival (P=0.011).Conclusion:XIAP plays an important role in the development of stage IIB osteosarcomas and XIAP expression of biopsy specimens before chemotherapy can be seen as a promising prognostic marker in early predicting the outcome of patlenta suffering from stage IIB osteosarcomas.     

P53、C-erbB-2和VEGF在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

Objective: To investigate the expressions and the clinical significance of P53, C-erbB-2 and vascular endothelial growth factor(VEGF)in non-small cell lung cancer(NSCLC).Methods: 121 specimens of NSCLC were examined for P53, C-erbB-2 and VEGF by immunohistochemical staining.Results: The positive rates of P53, C-erbB-2 and VEGF in the carcinomatous tissue were 43%, 39% and 31% respectively.P53 gene protein expression in lung cancer was significantly related to histological type and P-TNM staging of lung cancer patients(P＜0.05), and was not associated with the sex, age, the size of primary cancer, lymph node metastasis and cell differentiation(P＞0.05).C-erbB-2 gene protein expression in lung cancer was closely related to histological type and cell differentiation(P＜0.05), and was not associated with the sex, age, the size of primary cancer, lymph node metastasis and P-TNM staging of lung cancer patients(P＞0.05).VEGF in lung cancer was only closely related to cell differentiation(P＜0.05), and was not associated with the sex, age, the size of primary cancer, lymph node metastasis, histological type and P-TNM staging of lung cancer patients(P＞0.05).Conclusion: It is possible for P53, C-erbB-2 and VEGF to play an important role in the oncogenesis and development of non-small cell lung cancer.     

极化调节相关蛋白在胆管癌中的表达及意义

Objective: To investigate the expressions of atypical protein kinase C 1 subtype(aPKC-1)and E-cadherin in cholangiocarcinoma, and analyze molecular mechanisms of the invasion and metastasis of cholangiocarcinoma.Methods: The expressions of aPKC-1 and E-cadherin in 9 specimens of benign bile duct tissues and 35 specimens of cholangiocarcinoma were detected by EnVision immunohistochemistry, and their correlations to the clinicopathologic characteristics and invasion of cholangiocarcinoma were analyzed.Results: The positive rate of aPKC-1 was significantly higher in cholangiocarcinoma than in benign bile duct tissues(68.6% vs.11.1%, P=0.006), while the positive rate of E-cadherin was significantly lower in cholangiocarcinoma than in benign bile duct tissues(37.1% vs.88.9%, P=0.016).aPKC-1 expression was negatively correlated to E-cadherin expression(r=-0.287, P＜0.05).aPKC-1 expression was positively and E-cadherin expression was negatively correlated to the differentiation and invasion of cholangiocarcinorna(P＜0.05).Conclusion: The expressions of aPKC-1 and E-cadherin may reflect the differentiation and invasive potential of cholangiocarcinoma.As a polar regulation-associated protein, aPKC-1 may play an important role in the invasion and metastasis of cholangiocarcinoma.     

MGMT在人脑胶质瘤中的表达及其意义

目的:探讨MGMT的表达水平与脑胶质瘤的关系.方法: 53例脑胶质瘤标本分为4组,经免疫组化染色后,观察MGMT的表达部位和程度.结果: MGMT在脑胶质瘤中的表达呈棕黄色或棕褐色粗大颗粒,定位于胞浆内,阳性细胞散在或局灶性,染色强度及分布不均、缺乏明显规律.不同病理分级脑胶质瘤的MGMT阳性表达率无显著性差异(P=0.335);MGMT表达阳性与MGMT表达阴性的脑胶质瘤患者的平均年龄组间无显著性差异(P=0.457);男性与女性脑胶质瘤患者的MGMT阳性表达率之间无显著性差异(P=0.519).结论: MGMT的表达水平与脑胶质瘤的恶性度、患者的年龄及性别无明显相关性,仅根据肿瘤恶性度而使用烷化剂进行化疗是不科学的,测定MGMT在脑胶质瘤中的表达水平有助于评估人脑胶质瘤细胞对烷化剂的耐药程度.     

CD 44V6、β-catenin 在骨肉瘤中的表达及其临床意义

目的：检测CD44V6、β-catenin在骨肉瘤组织中的表达,分析其表达与人骨肉瘤细胞侵袭及转移能力的相关性。方法：应用免疫组织化学方法检测35例骨肉瘤、15例骨软骨瘤、15例正常骨组织中CD 44V6、β-catenin的表达。结果：骨肉瘤组织中CD 44V6、β-catenin的阳性表达显著高于骨软骨瘤及正常骨组织（P〈0.01）;两者的表达分别与骨肉瘤临床分期、肿瘤转移及2年内死亡有关（P〈0.05）,而与患者性别、年龄、肿瘤大小、病理分型、术前化疗无关（P〉0.05）;两者的阳性表达呈正相关（P〈0.01）。结论：CD 44V6、β-catenin在骨肉瘤中的阳性表达与骨肉瘤的发生、发展和转移密切相关,可能在骨肉瘤细胞侵袭、转移的过程中起协同作用;联合检测CD 44V6、β-catenin可以作为骨肉瘤诊断及其转移预测的指标。     

α-、β-catenin和cyclin D1在乳腺癌中的表达及意义

Objective:To study the relationship between expressions of α-,β-catenins and cyclin D1 and the occurrence,infiltration and metastasis of breast cancer.Methods:High sensitive S-P immunohistochemical method was used to detect the protein expressions of α-,β-catenins and cyclin D1 in the 60 cases of breast cancer tissues.Results:Abnormal immunoreactivities of α- and β-catenins were observed in 37(61.7%)and 42(70%)cases of breast Cancer tissues,respectively.There were 28 cases(46.7%)who showed cyclin D1 overexpression.The abnormal expression rates of α -and β-catenins in infiltrating lobular carcinoma(ILC)were significantly higher than those in infiltrating ductal Carcinoma(IDC)(P＜0.05),but they had no relations to the extenl of differentiation and lymphatic metastasis of breasl Cancer(P＞0.05).The overexpression rate of cyclin D1 was correlated with tumor stage and lymphatic metastasis of breast cancer(P＜0.05),but not with histological type and lhe extent of differentiation(P＞0.05).Cyclin D1 overexpression was observed in 57.1%(24/42)of these cases that showed abnormal staining of β-catenin,but only observed in 22.2%(4/18)of these cases with normal membranous staining of β-catenin.There was a significantly positive correlation between the abnormal expression of β-catenin and overexpression of cyclin D1(rs=0.321.P＜0.05).Conclusion:The abnormal expression of β-Catenin may play an important role in the genesis of breast cancer by triggering cyclin D1 overexpression in breast cancer.The abnormal expressions of α- and β-catenins are not a key factor in malignant cell metastasis in breast cancer,but may also involve in the progress.     

Ezrin在乳腺癌发生发展中的表达及意义

目的:探讨Ezrin在乳腺癌发生、发展中的作用,研究其在乳腺癌中的表达及临床意义.方法:应用免疫组化SP法测定Ezrin的表达,所有实验数据录入计算机,用SPSS13.0进行统计学分析.结果:Ezrin异常阳性表达率在乳腺普通导管增生、不典型导管增生、导管内癌、浸润性导管癌中分别为21.4%、25.0%、44.4%、70.3%,差异有显著统计学意义(P＜0.01).比较普通导管增生组(21.4%)与不典型增生组(25.0%),差异无统计学意义(P>0.05).而导管内癌组(44.4%)与浸润性导管癌组(70.3%)间差异有统计学意义(P＜0.05).乳腺增生组(23.1%)与乳腺癌组(64.6%)比较,差异有显著统计学意义(P＜0.01).在浸润性导管癌中,Ezrin高表达与患者年龄无关(P>0.05),与原发肿瘤大小、组织学分级、临床TNM分期、腋淋巴结转移均有关(P＜0.05),同时随着淋巴结转移数目增多,Ezrin异常阳性表达率增高(P＜0.05).结论:Ezrin高表达参与乳腺癌的发生、发展,与原发肿瘤大小、组织学分级、临床TNM分期、腋淋巴结转移等预后指标有关,提示检测Ezrin可作为判定乳腺癌发生、发展及预后的可靠指标.     

p14ARFmRNA及其蛋白在肺鳞癌组织中的表达及意义

目的 检测肺鳞癌组织中p14ARF mRNA及其蛋白的表达,探讨此因子在肺鳞癌发生和发展中的作用及临床应用价值. 方法采用原位杂交方法检测56例肺鳞癌和13例癌旁鳞化及炎症肺组织(对照组) 中p14ARFmRNA的表达,同时采用免疫组化方法检测相应标本中p14ARF蛋白的表达.结果 在肺鳞癌和对照组中p14ARF mRNA的阳性表达率分别为44 .6%和84.6%,两者比较差异有统计学意义(χ2＝6.756,P=0.009).p14 ARF蛋白表达的阳性率分别为41.1%和76.9%,肺鳞癌组远低于对照组,差异有统计学意义(χ2＝5.435,P=0.020).p14ARF mRNA和蛋白在肺鳞癌组织中的阳性表达具有一致性(rs=0.930,P＜0.05),并且都随组织分化程度的降低而降低,高分化鳞癌与低分化鳞癌之间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 p14ARF蛋白的表达异常可能与肺鳞癌的发生、发展有关,p14ARF蛋白的检测可能为临床判断组织恶性程度提供参考.     

葡萄糖神经酰胺合成酶基因在人耐多柔比星乳腺癌细胞株MCF-7/ADR中的表达及意义

背景与目的:多药耐药是肿瘤化疗失败的主要原因,近年来神经酰胺的糖基化水平增高与多药耐药的关系引起了广泛关注.本研究旨在探讨葡萄糖神经酰胺合成酶(GCS)基因在人乳腺癌细胞株MCF-7和人耐多柔比星(阿霉素)乳腺癌细胞株MCF-7/ADR中的表达及意义.方法:采用四氮唑盐(MTT)法检测多柔比星对MCF-7/ADR和MCF-7的抑制率和IC50,用浓度为5、10、20μmol/L的GCS抑制剂D,L-threo-1-phenyl-2-decanoyl-amino-3-morpholino-1-propanol(PDMP)预处理MCF-7/ADR 24、48 h后检测抑制率和IC50;应用实时荧光定量PCR(real time PCR)检测MCF-7、MCF-7/ADR以及PDMP预处理后MCF-7/ADR中GCS mRNA的表达.结果:MCF-7/ADR 对MCF-7的耐药倍数为22.69倍,PDMP作用后多柔比星对MCF-7/ADR的抑制率升高,IC50从(19.0±0.5)μg/ml 下降到(5.6±0.6)μg/ml.MCF-7/ADR中GCS mRNA的表达高于MCF-7(P<0.01),PDMP使MCF-7/ADR中GCS mRNA的表达水平GCSN(48±17)下降到(21±4).结论:GCS可能参与乳腺癌的发生过程,并在MCF-7/ADR多药耐药中起重要作用.     

VEGF-D及其受体Flt-4在胰腺癌中的表达及意义

目的：探讨血管内皮生长因子D（vascular endothelial growth factor D，VEGF—D）及其受体Flt-4（fms—like tyrosine kinase-4）在胰腺癌中的表达及其与胰腺癌临床病理特征及预后的关系。方法：利用免疫组织化学染色法检测48例胰腺癌组织、32例癌旁胰腺组织及13例正常胰腺组织中VEGF—D及Flt-4蛋白的表达情况，结合临床病理特征及预后对其进行统计学分析。结果：VEGF-D及Flt-4在胰腺癌组织中的表达率显著低于癌旁胰腺组织中的表达率（P〈0．05）并显著高于正常胰腺组织中的表达率（P〈0．05），胰腺癌组织中有淋巴结转移的VEGF-D及Flt-4的表达率显著高于无淋巴结转移组的表达率（P〈0．05），VEGF-D阳性组和Flt-4阳性组患者的中位生存期及1、2、3年生存率均显著低于阴性组（P〈0．05）。结论：VEGF-D及Flt-4可促进胰腺癌淋巴结转移的发生，并可作为判断胰腺癌患者预后的预测因素。     

趋化因子受体CCR7在骨肉瘤组织中的表达和临床意义

目的：研究 CCR7在人骨肉瘤组织中的表达情况,并探讨 CCR7表达与临床病理之间的关系。方法：收集临床50例骨肉瘤组织及20例骨软骨瘤组织,使用免疫组织化学方法检测其 CCR7的表达水平。结果：CCR7在骨肉瘤组织和骨软骨瘤组织中的阳性表达率分别为80．00％和15．00％。CCR7阳性表达和骨肉瘤肿瘤大小及转移密切相关（P ＜0．05）,而与年龄、性别、临床分期及组织学分型没有明显关系（P ＞0．05）。结论：骨肉瘤组织中 CCR7高表达预示着其在肿瘤增长和肿瘤转移可能起到一定的作用。因此 CCR7可能会成为临床上治疗骨肉瘤一个新的靶点。     

CXCR7在骨肉瘤组织中的表达及其临床意义

目的：探讨趋化因子受体7（CXCR7）在骨肉瘤组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系。方法：采用免疫组化检测48例骨肉瘤组织标本、10例骨软骨瘤组织中 CXCR7的表达,分析其表达与患者临床病理参数之间的关系。结果：CXCR7在骨肉瘤组织和骨软骨瘤组织的阳性表达率是分别为75％和20％,差异具有统计学意义。CXCR7的表达与临床分期、有无转移密切相关（P ＜0．05）,与性别、年龄及肿瘤分化程度无明显关系（P ＞0．05）。结论：CXCR7在介导骨肉瘤侵袭及转移过程中可能起重要作用,有望作为骨肉瘤治疗的分子靶点。     

人骨肉瘤组织中Livin和Caspase-7蛋白的表达及其临床意义

分析Livin和Caspase-7蛋白在骨肉瘤中的表达,探讨两者在骨肉瘤的临床诊断、治疗及预后中的意义。方法：收集2001年2月至2012年12月我院骨科收治的51例骨肉瘤患者的石蜡切片标本及12例正常骨痂组织标本,采用免疫组化法检测标本中Livin和Caspase-7蛋白的表达,并分析两者表达的相关性及与骨肉瘤各临床病理指标和预后之间的关系。结果：与正常骨痂组织相比,骨肉瘤患者组织中Livin蛋白的阳性表达率明显增高[66.7%（34/51） vs 8.3%（1/12）,P<001];而Caspase-7蛋白的阳性表达率则明显降低[49.0%（25/51）vs 100.0%（12/12）,P<0.01]。Livin和Caspase-7蛋白的阳性表达与骨肉瘤的大小、Enncking分期及患者5年生存率显著相关（P<0.01）,与患者年龄、性别、病理分型及肿瘤的部位无相关性（P＞0.05）;Livin蛋白的阳性表达和Caspase-7蛋白的阳性表达之间呈负相关性（ r=-0.305,P=0.029）。结论：Livin蛋白在骨肉瘤组织中高表达,而Caspase-7蛋白在骨肉瘤组织中低表达,两者表达呈负相关性;Livin可能通过某种机制调控Caspase-7的表达,从而抑制了骨肉瘤细胞凋亡并促使骨肉瘤的发生与发展。     

黏着斑激酶在骨肉瘤中的表达及临床意义

  目的   探讨骨肉瘤组织中黏着斑激酶（focal adhesion kinase,FAK）的表达情况及其与临床病理特征和预后的关系。  方法   收集1999年12月至2011年l2月东南大学附属中大医院和南京军区南京总医院收治的经手术病理确诊的骨肉瘤标本113例,免疫组织化学检测病灶中FAK表达量及磷酸化水平,并通过RNA干扰观察改变FAK的表达与激活水平对骨肉瘤细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭活动的影响。  结果  70例标本（61.95%）FAK过表达,其中42例（37.17%）pFAK阳性。FAK表达谱与性别、年龄、AJCC ⅡA/ⅡB期、病灶部位、术式、术前化疗效果等临床病理参数均无显著相关性。生存分析显示FAK的过表达及其磷酸化显著缩短了总生存时间（overall survival,OS）和无转移生存时间（metastasis-free survival,mFS）,其与术前化疗效果是预测骨肉瘤生存时间和转移早晚的两个独立预后因素。细胞学实验则显示FAK的表达和激活可以促进骨肉瘤细胞的增殖、迁移及侵袭活动,并能抑制凋亡。  结论  FAK的过表达及其磷酸化与骨肉瘤恶性程度密切相关,可为生存期及预后判断提供一定参考。      

G蛋白偶联受体54基因在骨肉瘤中的表达及其临床意义

目的:研究G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptor,GPR)54基因的表达与骨肉瘤生物学行为和临床预后的关系。方法:应用RT-PCR检测3种人骨肉瘤细胞(MG-63、Saos-2、U-2 OS细胞)和正常人成骨hF-OB1.19细胞中GPR54 mRNA的表达情况,免疫组织化学技术检测44例骨肉瘤和12例骨软骨瘤组织中GPR54蛋白的表达情况,应用Transwell侵袭实验比较不同骨肉瘤细胞的侵袭、迁移能力。结果:在人骨肉瘤MG-63、Saos-2、U-2 OS细胞和正常人成骨hF-OB1.19细胞中,GPR54mRNA表达水平均较高,各组细胞间差别无统计学意义[(0.87±0.05)、(0.88±0.07)、(0.88±0.08)、(0.86±0.05),P>0.05]。骨肉瘤MG-63、Saos-2、U-2 OS细胞侵袭、迁移细胞数逐渐降低[(61.00±7.15)vs(32.40±5.36)、(18.10±3.21)个,P<0.05或P<0.01]。人骨肉瘤组织中GPR54蛋白表达阳性率显著高于骨软骨瘤组织(81.82%vs 41.67%,P<0.05)。GPR54蛋白阳性表达的骨肉瘤患者平均生存期明显短于GPR54蛋白阴性表达的患者[(27.39±6.05)vs(40.33±4.88)月,P<0.05]。结论:GPR54基因在骨肉瘤组织中的表达阳性率增高,且与患者临床生存期呈负相关。     

共刺激分子B7-H3在骨肉瘤组织中的表达及临床意义

背景与目的：B7-H3是近年来新发现的协同刺激分子B7家族成员,但目前其在骨肿瘤中的表达及作用机制尚不明确。该研究旨在通过检测人骨肉瘤中B7-H3分子的表达,分析其与患者临床病理因素以及术后生存时间之间的关系。方法：采用免疫组织化学法检测61例人骨肉瘤组织、对应癌旁组织及良性骨肿瘤组织中B7-H3分子的表达以及肿瘤浸润T淋巴细胞的浸润程度。结果：骨肉瘤组织中B7-H3分子表达的阳性率为91.8(56/61),而B7-H3在癌旁及骨纤维结构发育不良组织中几乎不表达。B7-H3分子在骨软骨瘤中表达率为56.8%,但染色强度明显弱于骨肉瘤组织。B7-H3的表达与患者的Ennecking分期、是否发生肺转移之间的差异有统计学意义(P<0.05),与肿瘤组织中CD8⁺T淋巴细胞浸润程度呈负相关(P<0.05),与患者预后呈负相关(P<0.05)。结论：B7-H3在人骨肉瘤中组织异常高表达,并与肿瘤的进展、患者的预后密切相关;B7-H3可能参与了骨肉瘤微环境中的CD8⁺T细胞功能的调节,促使肿瘤细胞逃避免疫监视。     

骨肉瘤患者血清中miRNA-448的表达水平及临床意义

目的:探讨骨肉瘤患者血清中miRNA-448 的作用及意义。方法:采用qRT-PCR检测健康志愿者和骨肉瘤患者外周血miRNA-448的表达。microRNA靶基因数据库预测miRNA-448与Bcl-2基因可能的作用位点。qRT-PCR及Western blot实验分析miRNA-448对Bcl-2的靶向抑制作用。CCK8法检测对照组、miRNA-448 mimics转染组、miRNA-448 mimics和Bcl-2转染组中R-1059-D增殖情况。结果:骨肉瘤患者血清中miRNA-448表达水平明显低于健康志愿者（P＜0.05）,复发型骨肉瘤患者血清中miRNA-448表达水平明显低于原发型骨肉瘤患者（P＜0.05）,miRNA-448在血清中的表达水平与骨肉瘤病变及恶性程度呈负相关（P＜0.05）。microRNA靶基因数据库预测潜在的miRNA-448靶基因为Bcl-2,miRNA-448通过结合Bcl-2的3'-UTR进而抑制Bcl-2的表达。miRNA-448可以抑制R-1059-D的增殖,而这种抑制效果可以被Bcl-2回补。ROC曲线分析显示,血清中miRNA-448表达水平可以有效区分骨肉瘤患者和健康对照组。结论:miRNA-448通过抑制Bcl-2表达促进细胞凋亡,在骨肉瘤的病理过程中起着关键作用。miRNA-448可作为一种抑癌基因成为诊断骨肉瘤的生物标志物。     

血清血管生成因子在骨肉瘤组织中的表达及其临床意义

目的:探讨血清血管形成相关因子在骨肉瘤组织中的表达,及其与临床病理和微血管密度(MVD)的关系。方法:免疫组化SP法检测80例骨肉瘤组织中VEGF、CD34和FⅧRag等蛋白表达,并根据CD34和FⅧRag免疫组化染色结果计数MVD。同时采用酶联免疫分析定量检测36例骨肉瘤患者血清中的血管生成因子:血管内皮生成因子(VEGF)、碱性成纤维因子(bFGF)、转化生长因子(TGFβ1)以及内皮抑制素(edostatin,ES)的表达。结果:1)术前血清VEGF(1706ng/dL)和ES(302.4ng/dL)水平明显高于正常对照组,是VEGF的升高与肿瘤的微血高管密度、患者早期复发及其组织高表达密切相关;2)血清VEGF水平(1706ng/dL)和ES(302.4ng/dL)水平呈正相关;3)术后VEGF(490.0ng/dL)和ES(32.7ng/dL)水平明显下降,VEGF复发组较未复发组高,但差异无统计学意义,而复发组的ES水平明显低于未复发组。结论:术前血清VEGF和术后ES水平能反映骨肉瘤血管生成特性,对骨肉瘤早期复发具有重要预测价值,可作为抗血管生成的重要靶标。     

HER2基因表达与骨肉瘤预后

目的:研究骨肉瘤中HER2基因的表达与临床预后的关系。方法:对82例骨肉瘤患者的临床病理资料进行回顾性研究,应用HER2单克隆抗体对组织切片进行免疫组织化学染色,并将上述资料与患者的预后进行分析。结果:骨肉瘤患者HER2表达与患者预后相关(P<0.05),HER2高表达的骨肉瘤患者预后较差。结论:HER2检测是骨肉瘤预后判断的一项有价值的指标;同时,HER2为骨肉瘤的治疗提供一种可能的生物靶点。     

Gene expression array profile of human osteosarcoma

The aims of this pilot study were to determine whether needle and open biopsies from osteosarcoma (OS) provide sufficient quality of mRNA for cDNA array analyses to gain insights into the expression profile of OS. A total of 22 samples collected from OS were used for array analyses. A primary cell culture was also established from one of the OS biopsies. Total RNA was extracted and probes were generated for cDNA arrays. cDNA probes were made for all the 22 samples. Two of these samples were needle core bone biopsies. Statistical analysis confirmed the reliability of array data obtained in 16 of the 22 samples. Known genes involved in bone metabolism and osteosarcoma were identified as highly expressed, and the putative new marker Ezrin was also identified. Confirmatory immunohistochemical staining using the Ezrin antibody was performed in a selection of samples.