假单胞菌TS1138菌株L-半胱氨酸酶法合成途径的代谢控制分析（英文）

建立了假单胞菌 TS1138菌株L-半胱氨酸酶法合成途径的动力学模型。在L-半胱氨酸合成途径中有L-半胱氨酸合成酶和L- 半胱氨酸脱巯基酶两种酶参与作用,它们的动力学模型是基于米氏动力学建立的,L- 半胱氨酸对L- 半胱氨酸合成酶有非竞争性抑制作用。通过测定L- 半胱氨酸酶法合成过程中的中间产物和终产物的浓度,利用动力学模型进行了L- 半胱氨酸合成途径的代谢控制分析。弹性系数首先可以从动力学方程中求出,根据代谢控制分析理论,流量控制系数由弹性系数求出。研究发现,在 L- 半胱氨酸酶法合成过程中,L- 半胱氨酸合成酶和L- 半胱氨酸脱巯基酶的流量控制系数存在一个交叉点。     

L-半胱氨酸的开发与应用进展

全文介绍了L-半胱氨酸的性能,主要生产的技术路线与最佳的操作条件等有关进展情况.对目前工业化采用的主要L-半胱氨酸生产工艺的技术特点进行了具体的分析和总结,阐述了国内外研究开发的现状与发展趋势.并探讨扩大应用与市场需求.     

L-半胱氨酸盐酸盐对栀子黄色素稳定性的影响

目的:研究L-半胱氨酸盐酸盐对储存在自然、光照、黑暗、真空四种环境中的天然栀子黄色素稳定性的影响。方法:采用等量稀释法将添加到栀子黄色素中的L-半胱氨酸盐酸盐配制成含量分别为0.09%、0.39%、1.56%、6.25%等四种均匀混合样品,在20cm的培养皿中均匀分装2g样品,各种环境中保存3份相同L-半胱氨酸盐酸盐含量栀子黄色素样品,在240d内,每隔15d 60d取各样品配制相同浓度溶液,在440nm处测定吸光度。结果:L-半胱氨酸盐酸盐含量为0.09%和0.39%时对四种保存环境中栀子黄色素品质都有明显的稳定作用(P﹤0.05),当L-半胱氨酸盐酸盐含量为6.25%时对栀子黄色素品质的稳定作用不明显,真空环境中栀子黄色素的稳定性保持最好。结论:含少量的L-半胱氨酸盐酸盐能明显改善长期储存的栀子黄色素品质。     

途径工程改造谷氨酸棒杆菌合成L-半胱氨酸

L-半胱氨酸是一种重要的含硫氨基酸,广泛应用在医药、食品和化妆品等行业。该文以实验室保藏的一株高产L-丝氨酸的谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)A36为出发菌株,通过加强表达丝氨酸O-乙酰基转移酶(serine O-acetyltransferase, SAT)、O-乙酰基-L-丝氨酸巯基化酶-A和转运蛋白Bcr编码基因强化L-半胱氨酸合成和转运,敲除L-半胱氨酸降解途径关键酶弱化其降解,构建系列重组菌株,其中重组菌S-C-7的L-半胱氨酸产量最高,为286.7 mg/L。进一步通过优化硫源提高菌株S-C-7的L-半胱氨酸产量,结果表明,最佳硫源为硫代硫酸钠,当发酵24 h时添加12 g/L硫代硫酸钠,L-半胱氨酸的产量最高,为581.6 mg/L,较优化前提高1.0倍。最后,在5 L发酵罐对S-C-7进行发酵评价,L-半胱氨酸产量达到1.2 g/L,是目前文献报道谷氨酸棒杆菌产L-半胱氨酸的最高产量;为实现谷氨酸棒杆菌发酵生产L-半胱氨酸奠定了基础。     

海藻酸钠/明胶协同固定化假单胞菌B-3酶法合成L-半胱氨酸

目的:研究海藻酸钠/明肢协同固定化假单胞菌B-3的制备条件.以及固定化细胞酶法转化DL-2-氨基-△2-噻唑啉-4-羧酸(DL-ATC)生物合成L-半胱氨酸的工艺条件.方法:比较8种不同的细胞固定化方法,优选海藻酸钠/明胶协同固定化为假单胞菌B-3最佳的固定化方法,并对凝胶组成,增殖活化时间和菌体包埋量等条件进行优化;通过向转化液中添加表面活性剂Tween-60,N-氨甲酰-L-半胱氨酸酰胺水解酶(L-NCC水解酶)激活剂Mn2+和L-半胱氨酸脱巯基酶抑制剂盐酸羟胺来提高L-半胱氧酸产量.结果:以增殖活化10 h的固定化细胞为酶源,DL-ATC·3H2O质量浓度为20g/L,pH 8.0,42℃酶促反应10 h,产物L-半胱氨酸含量达9.18g/L,较游离细胞提高了29.0%,底物转化率达75.83%.固定化细胞重复使用4批次后相对转化率仍能维持在初始值的71.5%.结论:海藻酸钠/明胶协同包埋假单胞菌B-3细胞具有良好的生物转化活性;转化液中添加适量的Tween-60、Mn2+和盐酸羟胺能明显提高L-半胱氨酸产量.     

L-半胱氨酸抑制多酚氧化酶的机制研究

采用分光光度法和凝胶过滤色谱法研究了L-半胱氨酸抑制多酚氧化酶(PPO)活性的机理。结果表明:以邻苯二酚为底物时,PPO酶促反应产物与L-半胱氨酸结合生成的无色硫氢化合物在295nm处有最大吸收,可作为测定PPO活性的检测波长;分别在410nm和295nm波长下检测醌类物质和硫氢化合物时,已生成的醌类物质可迅速与L-半胱氨酸结合,使410nm处的吸光度迅速降低,而295nm处的则迅速升高;经50mmol/LL-半胱氨酸处理30min的PPO酶液经凝胶过滤色谱分离之后其活性基本没有变化。研究认为:L-半胱氨酸并不是通过对PPO活性中心的结构性修饰,或是发生共价结合来抑制其活性,而是直接与其酶促反应产物——醌类物质结合生成无色的硫氢化合物,从而抑制褐变的发生。利用这一抑制原理,可改进PPO酶活的测定方法。     

L-半胱氨酸处理对玉米醇溶蛋白提取的影响

在单因素试验的基础上,通过正交试验优化玉米醇溶蛋白(zein)的提取工艺,研究L-半胱氨酸用量、液料比、超声波时间、超声波温度、pH值因素对玉米醇溶蛋白提取率的影响,并确定最佳工艺条件为L-半胱氨酸用量0.65%、液料比7:1、超声波时间1.5h、超声波温度40℃、pH5.0,在此条件下得到最终玉米醇溶蛋白提取率为89.06%,纯度为92.51%。     

废旧羊绒制品的L-半胱氨酸回收法

采用L-半胱氨酸对废旧羊绒纤维进行降解,并提取其中的角蛋白。通过分析L-半胱氨酸浓度、尿素浓度、pH、温度、时间对羊绒降解率和角蛋白提取率的影响,得到羊绒纤维降解的最优工艺为:pH=10,L-半胱氨酸0.7 mol/L,尿素4 mol/L,温度85℃,时间6 h。羊绒纤维的降解率最高为89%,角蛋白提取率为79%。提取到的角蛋白粉末分子质量为10000~40000 g/mol,可以纺丝加工或用作功能助剂。     

氨基酸自动分析仪测定游离L-半胱氨酸

目的对比讨论含硫氨基酸的传统测定方法过甲酸氧化法,针对添加了L-半胱氨酸的保健食品,提出一个操作简便、计算准确的测定游离L-半胱氨酸含量的方法。方法称取试样用上机缓冲液超声溶解,微孔滤膜过滤,应用氨基酸自动分析仪分析,用Na型离子交换色谱柱分离,L-半胱氨酸标准品定量计算其含量。结果L-半胱氨酸浓度在0.3861~3.0648 mg/m L的范围内与峰面积的线性良好,相关系数r0.999。在80%、100%、120%添加水平下,L-半胱氨酸的平均回收率为97.2%。结论该方法操作简便、准确、重现性好,适用于保健食品中游离L-半胱氨酸的含量测定。     

L-半胱氨酸/蛋白酶对羊毛防缩整理效果研究

羊毛纤维是纺织工业中重要的生产原材料,但其固有的缩绒性会严重影响产品的使用性能和寿命,因此防缩整理是毛纺加工中必不可少的工艺流程。文中利用还原试剂L-半胱氨酸和蛋白酶16L的协同作用,对羊毛毛条进行防缩整理,探讨了整理效果、最优工艺及整理后羊毛纤维的性能变化。通过设计响应面试验,获得最优防缩工艺条件为：L-半胱氨酸浓度9 g/L、蛋白酶浓度1 g/L、浸轧时间30 s、浸轧次数5次、处理温度50℃。经该工艺处理后,羊毛纤维的各项重要性能未受到明显破坏,防缩性能得到显著改善。     

海藻糖的酶法合成及在食品工业中的应用

海藻糖具有独特的生物学功能，在医药、食品等行业应用潜力巨大。本就海藻糖的性质、生物学功能、酶法合成的研究进展进行了综述，并简要叙述了海藻糖在食品工业中的应用。     

Enzymatic Hydrolysis and Synthesis of Soy Protein to Improve its Amino Acid Composition and Functional Properties

Soy protein was enzymatically modified and ultrafiltred, and functional properties were evaluated. After enzymatic hydrolysis, hydrolysate (20 g/100 mL) was incubated with chymotrypsin and glycerol at 37°C. Different methionine methyl-ester concentrations, pHs, and time were tested. Amino acid composition and functional properties of ultrafiltrated fractions (FI>10, 10>FII>3, and 3>FII>1 kDa) were evaluated. Optimum hydrolysis conditions were 12 h and 50°C, and those of synthesis were 0.07585 g Met/g, pH 7, and 3 h, binding 2.2% to 5% methionine. Fractions under 10 kDa presented 100% solubility and the best clarity. High-methionine fractions had higher foam volume, lower emulsifying capacity and hydrophobicity. Modified hydrolysates have a potential for use in soluble high nutritional products.     

假单胞菌TS1138菌株L-半胱氨酸酶法合成途径的代谢控制分析

建立了假单胞菌TS1138菌株L-半胱氨酸酶法合成途径的动力学模型.在L-半胱氨酸合成途径中有L-半胱氨酸合成酶和L-半胱氨酸脱巯基酶两种酶参与作用,它们的动力学模型是基于米氏动力学建立的,L-半胱氨酸对L-半胱氨酸合成酶有非竞争性抑制作用.通过测定L-半胱氨酸酶法合成过程中的中间产物和终产物的浓度,利用动力学模型进行了L-半胱氨酸合成途径的代谢控制分析.弹性系数首先可以从动力学方程中求出,根据代谢控制分析理论,流量控制系数由弹性系数求出.研究发现,在L-半胱氨酸酶法合成过程中,L-半胱氨酸合成酶和L-半胱氨酸脱巯基酶的流量控制系数存在一个交叉点.     

酪蛋白酶解产物及其分离组分对小鼠脾淋巴细胞功能的影响

为探讨酪蛋白的胃蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶-胰蛋白酶双酶酶解产物分离组分对小鼠脾淋巴细胞功能的调节作用,采用凝胶过滤层析法对酶解产物进行初步分离,测定了分离组分对小鼠脾淋巴细胞增殖活性及IL-2生成量的影响。结果显示,胃蛋白酶-胰蛋白酶酶解产物作用效果优于单酶酶解产物,且其分离组分间具有一定协同作用。因此,将胃蛋白酶-胰蛋白酶酶解混合物用于保健食品的生产效果更优。     

酶法合成生物表面活性剂

总结了外源酶催化法和整胞微生物代谢法合成生物表面活性剂的特点,并将外源酶催化法对整胞微生物代谢法及传统化学合成法的优势进行了比较.详细介绍了单甘酯、糖酯、(溶血)磷脂、纯异头烷基糖苷和氨基酸型表面活性剂等生物表面活性剂的酶催化合成方法及其研究进展;展望了酶工程的进步、化学 酶催化技术进展、外源多酶联合催化技术的开发与应用、酶膜反应器和其它连续酶反应器的开发,以及反应 分离耦合技术在酶催化过程中的应用将给酶法合成生物表面活性剂带来的机遇.     

L-半胱氨酸修饰电极测定维生素C的方法研究

研究了L-半胱氨酸修饰电极的制备方法和其电化学行为,并用于维生素C的测定,发现该电极对VC有明显的电催化作用,在pH=10.0的NH4Cl-NH3·H2O缓冲溶液中,VC在L-半胱氨酸修饰电极上产生一灵敏的氧化峰,峰电流与VC的浓度在1.0×10-3￣1.0×10-6mol/L的范围内呈良好的线形关系,相关系数为0.9962,其最低检测限可达1.0×10-6mol/L,与紫外光谱法测定的结果一致。     

L-半胱氨酸快速绿色提取稻米中汞形态的前处理方法研究

本研究选择L-半胱氨酸作为提取剂,超声破碎作为提取方式,通过优化L-半胱氨酸浓度和超声破碎参数,建立了 L-半胱氨酸超声破碎快速绿色提取稻米中无机汞和甲基汞的前处理方法.结果表明,在确保前处理过程中不同汞形态间不发生相互转化的前提下,超声破碎功率150W,1％L-半胱氨酸15 min即可完成稻米中2种汞形态的提取.本方...