海洋中药厚藤的质量标准研究

为了建立海洋中药厚藤(Ipomoea pes-caprae (Linn.)Sweet)的质量标准,本研究采用薄层色谱法,以咖啡酸为对照品,对厚藤进行定性鉴别;采用高效液相色谱法,对厚藤中绿原酸、咖啡酸、异槲皮苷、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C等6个成分进行含量测定。结果显示,本研究建立的厚藤薄层色谱鉴别法,色谱图斑点清晰,分离度好,专属性强;检测得到10批不同产地厚藤中6个成分的含量范围。表明本研究建立的质量标准可有效控制厚藤的质量。     

斑马鱼模型评价5 种中药肝脏毒性

摘要: 目的研究壮骨关节丸、益肾乌发口服液、牛黄解毒片、雷公藤多苷和柴胡皂苷D 对斑马鱼的肝脏毒性,并验证斑马鱼模型用于中药肝毒性快速评价的实用性,为临床用药提供依据。方法受精后3 d( 3dpf) 斑马鱼分别用不同浓度的中药处理2 d 后,在显微镜下拍照分析,观察斑马鱼肝变性、肝脏形态学变化和卵黄囊吸收情况。结果与对照组相比,壮骨关节丸处理后的斑马鱼肝脏肿大,肝脏变性明显,卵黄囊吸收延迟; 益肾乌发口服液致肝脏萎缩,肝脏变性明显,卵黄囊吸收显著延迟; 牛黄解毒片致肝脏萎缩,卵黄囊吸收显著延迟; 雷公藤多苷和柴胡皂苷D 致肝脏肿大,斑马鱼卵黄囊吸收均显著延迟。结论壮骨关节丸、益肾乌发口服液、牛黄解毒片、雷公藤多苷和柴胡皂苷D 对斑马鱼幼鱼具有不同程度的肝脏毒性。斑马鱼模型评价中药肝脏毒性具有较好的预测性。     

斑马鱼模型在药物早期安全性评价中的应用

在药物研发领域,建立经济、有效的药物早期安全性评价技术已成为当前国内外的迫切需求。斑马鱼作为常用的三大模式动物之一,是一种理想的药物早期安全性评价模型。采用该模型对新药进行早期安全性评价可以提高药物早期毒性预测的可靠性和灵敏度,缩短新药研发周期,降低新药研发成本,提高新药研发成功率。本文综述了斑马鱼模型在药物早期安全性评价,如一般毒性评价、发育毒性评价、神经毒性评价、器官毒性评价、生殖毒性评价等中的作用。随着生物与医药技术的发展,斑马鱼在药物研发的早期安全性评价领域将发挥更大的作用,并推动药物研发的进程。     

斑马鱼胚胎在毒理学研究中的应用

斑马鱼胚胎对化学品暴露高度敏感,同时具有许多其他动物模型所没有的优势,因此,在毒理学研究中得到广泛应用。除化学品浓度外,在毒性检测中还需要考虑一系列因素的影响,如胚胎膜屏障作用、胚胎暴露时间、化学品的性状及不同化学品间的相互作用。目前,胚胎毒性评价方法由表型的观察逐渐向分子水平发展,更加侧重于对化学品作用机理的研究,使斑马鱼胚胎在毒性检测中具有更高特异性和灵敏性。     

邻苯二甲酸酯对斑马鱼胚胎发育的联合毒性

通过48 h单一毒性试验和正交试验,研究了邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二正丁酯(DBP)和邻苯二甲酸二异辛酯(DEHP)4种邻苯二甲酸酯类化合物暴露对斑马鱼胚胎发育的毒性效应。结果表明:这些化合物对斑马鱼胚胎发育有明显的抑制作用,可以造成胚胎发育畸形甚至死亡,具有特定最敏感的毒理学终点;4种邻苯二甲酸酯(PAEs)单独作用时毒性大小顺序依次为DBPDEHPDEPDMP;在4种PAEs对斑马鱼胚胎发育的混合暴露正交试验中,DBP和DEHP存在交互作用,对其致死毒性和发育毒性影响最大;DBP虽然对斑马鱼胚胎的致死毒性和发育毒性影响不明显,但DBP可导致胚胎发育的严重畸形。     

甲拌磷对斑马鱼胚胎的毒性研究

采用0(对照),10,20,40,80,160mg/L的甲拌磷给受精后4h的斑马鱼胚胎进行染毒,观察斑马鱼胚胎发育全过程,并在96h摄像,结果表明:斑马鱼卵在24h,48h的半致死浓度分别为25.63mg/L,14.96mg/L.染毒斑马鱼胚胎发育过程中出现尾部弯曲、心律消失、发育停止等特点.     

戊唑醇对斑马鱼的急性毒性与安全评价

农药在防治农作物病虫草害方面发挥着重要作用,但其对农田环境及非靶标有益生物的影响也不容忽视。本研究选取斑马鱼（Brachydaniorerio）作为受试生物,研究农药戊唑醇对其的急性毒性,从而初步评价戊唑醇对水生生物的潜在生态风险。结果表明,受试物戊唑醇对受试鱼的24h—Lc50为7．45mg／L,95％置信限为6．70～8．30ms／L;48h—LC50为6．65ms／L,95％置信限为5．9l一7．50mg／L;72h-LC50为6．21mg／L,95％置信限为5．48～7．03ms／L;96h-LC50为6．00mg／L,95％置信限为5．34～6．74ms／L。根据《化学农药环境安全评价试验准则》（2010）“鱼类急性毒性试验”对鱼类毒性评价标准,判定戊唑醇对鱼类的毒性等级为中毒。     

基于斑马鱼模型的鳗弧菌减毒活疫苗的生物安全性评价

利用疫苗对养殖鱼类进行疾病预防正得到逐步应用,而减毒活疫苗通过浸泡方式也能使鱼体获得较高的免疫保护力。利用模式动物斑马鱼对鳗弧菌减毒活疫苗MVAV6203的生物安全性进行了评价。首先进行了疫苗对斑马鱼毒性实验,每条鱼注射免疫的半致死量为9．26×10^4CFU;其次分析了鳗弧茵在水体中的存活情况,菌体浓度在1．0×10...     

熊果苷抑制斑马鱼胚胎黑色素合成的研究

为探讨美白化学品熊果苷对黑色素合成的抑制效果,以斑马鱼胚胎为模型,将其暴露于不同浓度的熊果苷溶液后,观察其黑色素生成情况,并进一步测定体内黑色素合成通路上部分关键基因的表达.定性观察表明,随着熊果苷浓度的增加,其对黑色素生成的抑制明显增强.基因表达分析表明,熊果苷通过对眼皮肤白化病II型(OCA2),酪氨酸酶(TYR)和银色毛发(SILV)等黑色素合成相关基因的抑制,进而抑制了黑色素的合成.上述结果解释了熊果苷在黑色素抑制过程中的作用机理,为斑马鱼胚胎模型在美白物质筛选中的应用提供了基础.     

灭多威暴露下斑马鱼的组织学变化

以斑马鱼为受试生物检测灭多威对生物体组织器官的影响．实验结果显示,暴露在较高浓度（〉0．017ul／ml）的灭多威溶液中,斑马鱼的存活率降低．鳃组织结构出现异常,鳃小片被破坏,堵塞鳃丝被堵塞和基部血管被破坏;斑马鱼肝脏出现白色絮状物,失去原有的饱满感,肝细胞受到破坏;卵巢及鳔也出现不同程度病变．本实验结果表明高浓度的灭多威对生物体有毒副作用．     

木榄的质量标准研究

为了建立海洋药物木榄(Bruguiera gymnorrhiza (Linn.)Savigny)的质量标准,以便为其质量控制提供参考,本研究采用薄层色谱法对木榄样品进行定性鉴别,并测定样品的水分、灰分和浸出物,采用分光光度法测定木榄中总黄酮含量。薄层色谱结果显示,在对照品(芦丁)色谱相应位置上显相同颜色的荧光斑点;木榄样品水分含量为7.95%～10.53%,总灰分含量为8.53%～9.52%,醇溶性浸出物(热浸法)的含量为13.05%～16.14%;总黄酮含量为33.36～37.57mg/g。据此初步拟定木榄的质量标准:水分含量不得超过12.0%、总灰分含量不得超过11.0%、醇溶性浸出物(热浸法)含量不得低于12.0%、总黄酮含量不得低于3.0%。制订的标准可用于木榄药材的质量控制。     

厚藤提取物对胶原诱导关节炎模型大鼠的治疗作用研究

为探究厚藤(Ipomoea pes-caprae)提取物对胶原诱导关节炎(Collagen-induced Arthritis,CIA)模型大鼠的治疗作用,本研究采用牛Ⅱ型胶原诱导建立CIA大鼠模型,观察厚藤提取物高、中、低剂量组(2.2712,1.1356,0.5678 g/kg)对CIA大鼠踝关节肿胀、足跖肿胀、关...     

瑶药五爪金龙中牛蒡苷元薄层色谱及含量测定

探索瑶药五爪金龙活性成分牛蒡子苷元的薄层色谱(TLC)定性鉴别和高效液相色谱(HPLC)定量检测方法,寻找瑶药五爪金龙质量控制的依据。本研究采用薄层色谱法对药材中的牛蒡苷元进行定性鉴别,采用高效液相色谱法对药材中的牛蒡苷元进行含量测定。通过实验,确定了TLC定性鉴别和HPLC定量检测的方法。薄层色谱中牛蒡苷元斑点集中、清晰。高效液相色谱法中牛蒡苷元对照品在0.42～5.26μg时,进样量与峰面积呈良好的线性关系。牛蒡苷元平均回收率为100.43%,RSD=2.09%。10批五爪金龙药材中牛蒡苷元含量在0.06%～0.52%。     

The expression of vasa gene during zebrafish ( Danio rerio ) oogenesis

vasa gene expression pattern during oogenesis of zebrafish was examined usingin situ hybridization and fluorescent quantitative RT-PCR. During zebrafish oogensis,vasa mRNA is expressed strongly and uniformly distributed in the cytoplasm in stage II oocytes, followed by a distribution among vacuome in stage III. Later in stage IV and V,vasa mRNA is enriched at the cortex and finally localized at the cortex. The fluorescent quantitative RT-PCR shows that the quantity ofvasa mRNA decreases from stage II to stage III, but remains relatively invariable from stage III to stage V. The observed differences invasa mRNA expression in the different stages of zebrafish oogenesis suggest thatvasa gene plays an important role during oogenesis. Foundation item: Supported by the National Natural Science Foundation of China (30370744, 30150005) Biography: XIANG Fang (1979-), male, Master candidate, research direction: molecular development of animals.     

兰香草的显微鉴定

目的对马鞭草科莸属植物兰香草的显微特征进行研究。方法采用石蜡切片、表皮制片、解离组织片对药材的茎、叶横切面组织结构进行研究,粉末制片对全草粉末进行显微鉴定。结果茎横切面可见表皮被有多数非腺毛及腺毛,木质部及髓部宽广。叶横切面中主脉维管束1~3个,上表皮下厚角组织不明显,韧皮部细胞较小排列紧密。粉末中可见叶上下表皮细胞垂周壁弯曲,气孔不定式,同时可见黏液细胞、非腺毛、腺毛、导管等。结论上述显微特征可作为兰香草的显微鉴定依据。     

桑寄生繁殖技术研究

本文从接种方法、时间、部位及接种后的栽培管理等方面对桑寄生Taxillus chinensis(DC.)Danser的繁殖技术进行比较系统的研究,旨在为将来的桑寄生栽培提供理论依据和技术指导。试验结果表明,不同接种部位、接种时间、接种方法及管理措施对桑寄生的萌芽率、寄生率有重要的影响;模拟桑寄生野生繁殖状态,3月份将种子与鸟粪以1∶5的比例拌匀后接种到桑树上部枝条并进行人工管理的萌发率和寄生率最高。本文建立了一种高效的桑寄生繁殖方法。     

救心菜、明月草和铜钱草的总黄酮含量测定与评价

为探索救心菜Coral dealbatus、明月草Gynura divaricata（Linn.）DC.和铜钱草Hydrocotyle chinensis（Dunn）Craib作为特色蔬菜的开发价值,采用超声波辅助醇溶液法提取3种药食兼用蔬菜的总黄酮含量,并评价其粗提液体外抗氧化能力。结果表明,在救心菜、明月草和铜钱草各自的较优提取条件下,其总黄酮类物质的最高含量分别为2.14%、1.27%和5.37%,以铜钱草总黄酮含量最高。3种菜粗提液对DPPH·的清除能力以救心菜最高,总还原力为VC > 救心菜 > 铜钱草 > 明月草。救心菜在推广种植、市场开发方面的优势更好,总黄酮含量也相对较高,是药食兼用的理想保健品。明月草和铜钱草总黄酮含量虽高,但其抗氧化活性不好,开发成为药食兼用的理想保健品的价值相对较低。     

尾巨桉化感作用对广金钱草化学成分的影响

【目的】研究尾巨桉Eucalyptus urophylla×Eucalyptus grandis对广金钱草Desmodium styracifolium(Osb.)Merr.药材化学成分的影响,探索尾巨桉-广金钱草复合经营模式的可行性。【方法】在试验田中,以不同类型和重量的尾巨桉落叶铺盖在土壤上并种植广金钱草,同时另在尾巨桉人工林中直接套种广金钱草,待药材成熟后统计其产量,并利用HPLC指纹图谱法及含量测定法检测其化学成分变化。【结果】广金钱草在尾巨桉林下种植时,产量稍有下降,但药材指纹图谱与正常种植无显著差异。【结论】广金钱草可以套种在尾巨桉人工林下。     

乳苣水提取物诱导肺癌细胞H1299和A549的凋亡

为探讨乳苣水提取物对体外培养的肺癌细胞H1299和A549的影响,用不同浓度的乳苣水提取物分别作用于H1299和A549细胞,从细胞形态(显微镜观察)、细胞增殖活力(cck8法)、细胞凋亡(AnexinⅤ-FITC/PI染色)、线粒体膜电位(JC-1染色)几个方面检测乳苣水提取物对H1299和A549细胞的影响.当处理浓度达到1.2 mg/mL,作用细胞48 h后,细胞出现明显皱缩的凋亡形态学特征,与对照组相比处理组细胞增殖活力显著下降(P0.05).进一步用流式细胞仪检测发现浓度达到1.2 mg/mL的处理组细胞凋亡率显著提高,同时检测到细胞的膜电位都明显下降,呈剂量依赖关系.这些结果表明乳苣可以通过诱导H1299和A549细胞凋亡从而抑制其生长和增殖,是一种潜在的预防和抑制肿瘤生长的药食两用植物.