地衣芽孢杆菌对鸡致病性的研究

本文主要研究了地衣芽孢杆菌引起鸡病的流行病学、临诊症状变化、病原鉴定与免疫防治试验。从患病鸡脏器和渗出液，选分得鸡源（Ｓ１－Ｓ２０）２０个菌株，根据形态及染色特征、培养特性和生化鉴定Ｓ１－Ｓ２０均定为地衣芽孢杆菌。经试验动物小白鼠和本动物鸡的回归试验，大部分能发病，所表现的临诊症状、病理变化与自然病例基本一致，死后从脏器中分离到原注射菌。并进行了免疫攻毒试验。１９８８－１９９３年用研制的“鸡八联灭     

地衣芽孢杆菌S6固体发酵羽毛蛋白工艺研究

研究通过单因素试验和正交试验,确定了地衣芽孢杆菌S6固体发酵羽毛蛋白的条件:初始含水量为60%,接种量为108CFU芽孢,初始pH值为7.5,发酵无机盐水平为磷源(1.8/0.9)g/l,硫酸镁0.2 g/l,氯化钠0.3 g/l。利用地衣芽孢杆菌S6的芽孢固体发酵羽毛蛋白,在发酵进行96 h时,可溶性蛋白含量最高达3 236μg/ml,为更充分的利用羽毛蛋白奠定了一定的基础。     

地衣芽孢杆菌的研究进展

本文就地衣芽孢杆菌的生物学特性、作用机理及其在饲料生产和环境防治中的应用作一综述。     

不同碳氮源对地衣芽孢杆菌S6降解羽毛蛋白的影响研究

通过外加碳氮源对地衣芽孢杆菌S6降解羽毛蛋白的影响进行研究,碳源中麦芽糖对地衣芽孢杆菌S6降解羽毛特性的影响最显著,其酶活力达到224.5 U/ml,可溶性蛋白量达到30 672.07μg/ml,氮源中半胱氨酸对地衣芽孢杆菌S6降解羽毛蛋白的影响最显著,其酶活力达到101.55 U/ml,可溶性蛋白量达到582.46μg/ml,对提高羽毛利用率具有重要的意义。     

饲用地衣芽孢杆菌的生物学特性研究

从饲料应用学的角度对地衣芽孢杆菌的各项特性进行测试,并总结出一套可行的试验方法和结果判断标准.通过对地衣芽孢杆菌的形态和生化培养性质观察,不同梯度的温度、酸度、胆盐和人工胃液处理对地衣芽孢杆菌存活率的影响,及常用药物添加剂和微量元素对地衣芽孢杆菌的影响,及地衣芽孢杆菌对几种致病菌和抗营养因子的影响进行研究.结果表明,地衣芽孢杆菌对各种试验处理呈现出特征性表现,这说明,地衣芽孢杆菌具备良好的饲料学特性,是优良的益生菌菌株.     

地衣芽孢杆菌对多宝鱼生长的影响

为探讨地衣芽孢杆菌对多宝鱼生长性能的影响,选用地衣芽孢杆菌作为多宝鱼饲料添加剂进行投喂试验。试验选择一批健康度良好、大小接近的多宝鱼幼苗120尾,进行随机分组,分为对照组和试验1组、试验2组、试验3组,每组30尾,对照组饲喂基础日粮,试验1组、试验2组、试验3组分别在饲喂添加105、107、109cfu/g密度的地衣芽孢杆菌的基础日粮。试验过程记录多宝鱼的体重变化、存活数、体长变换,然后通过计算成活率、质量相对增长率、体长增重率来判断地衣芽孢杆菌多宝鱼生长的影响。结果显示体长增长率试验3组、2组和对照组的相比差异显著（P<0.05）,试验3组和试验2组相比体长增长率有下降的趋势;质量增长率试验组和对照组相比增长率差异显著（P<0.05）,以试验2组的质量增长率最高;成活率试验2组和对照组对比差异极显著（P<0.01）,试验3组和对照组相比差异显著（P<0.05）,以上结果表明地衣芽孢杆菌能促进多宝鱼生长并提高其成活率,而且地衣芽孢杆菌添加密度的高或过低都不利于提高多宝鱼的生长。     

地衣芽孢杆菌产芽孢培养基和培养条件的优化

本研究以地衣芽孢杆菌CICC 20514为对象,芽孢数和芽孢率为目标参数,采用单因素、正交试验方法对培养基配方进行筛选,并在此配方基础上对培养条件进一步优化。结果表明：最终产芽孢发酵培养基的最佳组合为20 g/L果糖、20 g/L豆粕、5 g/L K₂HPO₄、7 g/L NaCl、0.8 g/L CaCO₃和0.8 g/L MgSO₄;产芽孢最佳培养条件为37℃,220 r/min,接种量5%,装样量20%,初始pH 6.5～7.5,发酵培养时间48 h。优化后的地衣芽孢杆菌CICC 20514培养基芽孢数及芽孢率均具有良好的稳定性,发酵液芽孢数达5.8×10⁹CFU/mL,比优化前提高了58倍。     

2株地衣芽孢杆菌抗逆性及益生性的研究

对2株地衣芽孢杆菌(Bacillus clicheniformis)C10和C46进行耐酸性及耐胆盐等抗逆性试验,进而进行抑菌测定、产酸和产酶等益生性试验,对13种抗生素进行药敏性测定.结果表明,2株地衣芽孢杆菌C10和C46在pH 2.0、3.0和4.0的人工胃液中处理2和6 h,存活率均为94 %,0.03 %～0.3 %胆盐溶液里存活率均超过91 %,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌K88和鸡白痢沙门菌均有明显的抑制作用,有机酸总量分别达到1 230.99和298.69 mg/L,蛋白酶活力分别为256和291 IU/mL,对10种抗生素有耐药性,对3种抗生素有药敏性.说明2株地衣芽孢杆菌具有很强的抗消化道生境及较好的益生功能.     

发酵床中耐高温地衣芽孢的分离鉴定及产酶分析

 从健康猪生长的发酵床垫料中筛选到1株耐高温的高效降解菌Y34,把其接种到猪粪水中反应25 d后,对COD与NH3 N降解率分别为84.7%,83.5%。生长特性表明其最适生长温度为50 ℃。通过形态观察、生理生化鉴定及16S rDNA序列比对,鉴定菌株Y34为地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）,其与Bacillus licheniformis相似性为99.0%。对此菌发酵过程中产酶情况作了研究,结果表明,在50℃培养条件下,菌株Y34能够分泌过氧化氢酶、蛋白酶、脲酶,具有用于研制发酵床微生物制剂的潜力。     

饲粮中添加地衣芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌对断奶仔猪生长性能及血液指标的影响

【目的】研究饲粮中添加地衣芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌对断奶仔猪生长性能、血常规、血清生化及抗炎抗氧化指标的影响。【方法】选取108头28日龄杜长大断奶仔猪,按体重分为3组,每组6个重复,每个重复6头。对照组饲喂基础饲粮,其余两组分别在基础饲粮中添加1 g/kg地衣芽孢杆菌、1 g/kg解淀粉芽孢杆菌,试验期28 d。在试验第14和28天,空腹称重并计算采食量,每个重复选取2头仔猪,前腔静脉采血并用血细胞分析仪和试剂盒方法测定血常规及血清生化指标。【结果】各组断奶仔猪之间的平均日增重、平均日采食量、料重比均无显著性差异（P＞0.05）。与对照组相比,解淀粉芽孢杆菌组断奶仔猪的腹泻率显著降低（P＜0.05）;地衣芽孢杆菌组和解淀粉芽孢杆菌组断奶仔猪第14天血液淋巴细胞百分含量均显著升高,白细胞介素-2（IL-2）、丙二醛含量及乳酸脱氢酶、谷草转氨酶活性均显著降低（P＜0.05）;解淀粉芽孢杆菌组断奶仔猪第14天血液中碱性磷酸酶活性显著降低,血红蛋白含量显著升高,第28天血液中IL-2含量显著降低,总蛋白、球蛋白含量均显著升高（P＜0.05）。【结论】饲粮中添加地衣芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌对断奶仔猪生长性能无显著影响,但能够改善仔猪血液指标,保护肝脏功能,且添加解淀粉芽孢杆菌还可以提高仔猪新陈代谢,降低仔猪腹泻率。     

不同检测因素对地衣芽胞杆菌菌落数的影响

为了探究不同检测因素对地衣芽胞杆菌菌落数的影响,该试验对标示菌落数为220亿CFU/g的地衣芽胞杆菌菌粉样品在不同的温度条件下,采用不同的稀释方法、不同的培养基进行处理。结果表明,不同的稀释方法对地衣芽胞杆菌菌落数的检测误差率影响最小,培养基的影响作用次之,而80℃高温处理10 min对地衣芽胞杆菌菌落数的检测误差率影响最大。     

沼泽红假单胞菌与地衣芽胞杆菌对奶牛生产性能的影响

沼泽红假单胞菌和地衣芽胞杆菌可调节动物消化系统的微生态环境,为宿主提供优质的营养物质及多种利于消化功能的生物活性酶。以泌乳末期荷斯坦奶牛为实验动物,探究沼泽红假单胞菌和地衣芽胞杆菌对奶牛采食量、产奶量和发病情况等生产性能指标的影响。结果表明:在奶牛全混合日粮(TMR)中添加沼泽红假单胞菌和地衣芽胞杆菌可以显著提升奶牛生产性能,日采食量下降8.05%,日产奶量显著提高5.42%(P<0.05),饲料转化率提高14.70%,同时,奶牛消化水平和健康状况也得到明显改善。     

Comparison of Bacillus thuringiensis with other bacillus species based on enzymoserological examinations of their proteolytic enzymes

Investigated strains of Bacillus thuringiensis were all good producers of casein precipitating proteinases (CP-enzymes).CP-enzymes produced by five strains of B. thuringiensis were serologically compared with enzymes produced by strains of B. cereus, B. licheniformis and B. subtilis. The technique used is a special enzymoserological procedure by which the proteolytic activity is neutralized by specific antisera. A close enzymoserological relationship was demonstrated between B. thuringiensis and B. cereus, while no interspecies cross-reactions occurred between enzymes of these species, and those of B. licheniformis and B. subtilis.The possibility of undetected transference of B. thuringiensis from bacteriologically treated plant material to animals is discussed in relation to the high degree of similarity between B. cereus and B. thuringiensis.     

地衣芽孢杆菌对热应激公兔甲状腺和甲状旁腺组织的影响

将成年塞北兔公兔随机分成3组:常温组、热应激组(基础日粮)和地衣芽孢杆菌组(基础日粮+1 000 mg/kg地衣芽孢杆菌),常温组温度为20?25℃,其他2个组人工模拟夏季温度.在试验期间测定血浆皮质醇含量.试验结束后测定甲状腺质量,计算甲状腺指数;观察光镜下甲状腺组织、透射电镜下甲状腺滤泡上皮细胞和甲状旁腺嗜酸性细胞...     

地衣芽孢杆菌D3.11凝乳酶对切达干酪质地特性的影响

为揭示地衣芽孢杆菌D3.11凝乳酶对切达干酪成熟过程中质地的影响,利用地衣芽孢杆菌D3.11凝乳酶制作切达干酪(CDF组)和切达干酪类似物(CD3组),采用商品凝乳酶作为对照(CCF组),分析干酪成熟过程中质构、流变特性、微观结构的变化规律.结果表明:3组干酪的硬度随着干酪的成熟而增加,而弹性和咀嚼性则呈现下降趋势,C...     

地衣芽孢杆菌对肉鸡生长性能、血清生化指标和肠道形态结构的影响

【目的】研究饲粮中添加不同水平地衣芽孢杆菌BCG对肉鸡生长性能和健康的影响,探究其对肉鸡的益生作用效果,为其在实际生产中的应用提供理论依据。【方法】采用单因素试验设计,选取180只体重相近（42.62 g±0.82 g）、健康状况良好的1日龄爱拔益加（AA）肉仔鸡,随机分为3个处理,每个处理6个重复,每个重复10只鸡。对照组（CT组）饲喂基础饲粮,地衣芽孢杆菌处理组（BCG1和BCG2组）分别在基础饲粮中添加1.0×10⁸和1.0×10⁹ CFU/kg地衣芽孢杆菌。试验鸡分1~21和22~42日龄2个阶段饲养,试验期为42 d。在21和42日龄时以重复为单位对各组肉鸡空腹称重并统计各阶段采食量,计算平均日增重（ADG）和平均日采食量（ADFI）;每个重复选取2只鸡采集血液,测定血常规、血清生化和免疫指标;42日龄时屠宰并分离肠道,观察小肠形态结构,测定肠绒毛高度（VH）和隐窝深度（CD）,计算绒毛高度与隐窝深度比值（VH/CD）。【结果】①与CT组相比,42日龄时,BCG2组肉鸡体重显著提高（P<0.05）;在22~42日龄,BCG2组肉鸡ADG和ADFI均显著提高（P<0.05）,其ADG显著高于BCG1组（P<0.05）;在1~42日龄,BCG1和BCG2组ADG和ADFI均显著提高（P<0.05）,且两组间无显著差异（P>0.05）。②21日龄时,与CT组相比,BCG2组肉鸡血清免疫球蛋白A （IgA）、IgM和IgG含量均显著提高（P<0.05）,内毒素（ET）活性显著降低（P<0.05）,且血清IgA和IgM含量均显著高于BCG1组（P<0.05）;在42日龄时,饲粮中添加BCG对血常规指标和IgA、IgM及IgG含量均无显著影响（P>0.05）。③42日龄时,BCG2组空肠VH显著高于CT组（P<0.05）,VH/CD显著高于CT和BCG1组（P<0.05）。【结论】地衣芽孢杆菌BCG能够提高肉鸡生长性能,增强肉鸡前期体液免疫和肠道屏障功能,改善肉鸡肠道形态结构,以添加1.0×10⁹ CFU/kg地衣芽孢杆菌的益生效果更佳。     

Characterization and partial purification of a bacteriocin‐like substance produced by thermophilic Bacillus licheniformis H1 isolated from cow manure compost

The production and partial characterization of bacteriocin‐like substances (BLSs) produced by bacteria isolated from cow manure compost were investigated. Eight BLS producers, which exhibited inhibitory activity against pathogenic bacteria, were isolated from cow manure compost at different stages of the composting process. The pile temperature ranged from 9.1°C to 73.2°C. The BLSs showed thermostability, but the BLS producers were not thermostable except for the H1 producer. Thermophilic Bacillus licheniformis H1 was further characterized. The culture supernatant of B. licheniformis H1 exhibited antagonistic activity against various species of Gram‐positive bacteria such as Listeria monocytogenes ATCC19111 but not against Gram‐negative bacteria except Pseudomonas fluorescens ATCC11251. Inactivation of bacteriocin‐like activity by α‐chymotrypsin, trypsin, and papain was highly significant (P < 0.001). The BLS was found to be stable under a pH range from 3 to 9 and at temperatures up to 75°C for 60 min, but it lost activity after being autoclaved at 121°C for 15 min. The optimum production of BLS by B. licheniformis H1 was obtained at a temperature of 55°C. Sodium dodecyl sulfate – polyacrylamide electrophoresis analysis of concentrated partially purified supernatants collected after resting the bacterial cells at 55°C revealed a bacteriocin‐like protein with a molecular mass of approximately 3.5 kDa. This study is the first report of a BLS from thermophilic B. licheniformis with an animal compost origin.     

地衣芽孢杆菌对脂多糖应激仔猪肠道形态、肠黏膜抗氧化能力和免疫力的影响

本试验旨在研究地衣芽孢杆菌对脂多糖(LPS)应激仔猪肠道形态、肠黏膜抗氧化能力和免疫力的影响。试验选用35日龄、平均体重为(10.0±0.5)kg的苏山猪90头,随机分成3组(对照组、LPS组和BL+LPS组),每组3个重复,每个重复10头仔猪。其中,对照组和LPS组仔猪均饲喂基础饲粮;BL+LPS组仔猪饲喂添加500 mg/kg地衣芽孢杆菌的基础饲粮。预试期3 d,正试期21 d,于正试期第21天从每个重复中选2头仔猪腹腔注射LPS(LPS组和BL+LPS组)或等量的灭菌生理盐水(对照组),注射24 h后屠宰取样。结果显示:1)与对照组相比,LPS应激显著降低了仔猪十二指肠二胺氧化酶(DAO)、空肠一氧化氮合成酶(NOS)活性及空肠一氧化氮(NO)含量(P<0.05),显著提高了血浆中NO含量和NOS活性(P<0.05);显著降低了空肠绒毛高度和绒隐比、回肠绒隐比(P<0.05);显著降低了十二指肠、空肠和回肠谷胱甘肽过氧化物酶(GSH⁃Px)、十二指肠和回肠超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.05);显著降低了空肠上皮细胞中淋巴细胞、空肠和回肠上皮细胞中杯状细胞数量(P<0.05);显著降低了血清免疫球蛋白G(IgG)含量,提高了回肠黏膜白细胞介素-6(IL⁃6)和白细胞介素-1β(IL⁃1β)含量(P<0.05)。2)与LPS组相比,饲粮添加地衣芽孢杆菌显著提高了LPS应激仔猪回肠DAO和NOS活性(P<0.05);显著提高了空肠黏膜GSH⁃Px活性显著提高(P<0.05),显著降低了十二指肠黏膜丙二醛(MDA)含量(P<0.05);显著提高了血清IgG含量(P<0.05)。由此可见,LPS应激导致仔猪肠黏膜损伤,在饲粮中添加地衣芽孢杆菌可提高LPS应激仔猪的肠黏膜抗氧化能力和免疫力,一定程度上促进肠道形态的修复,减缓LPS应激导致的肠道损伤。