CO上调大鼠胸主动脉中硫化氢/胱硫醚-γ-裂解酶体系

目的研究一氧化碳(CO)对正常大鼠主动脉中硫化氢(H2S)/胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)体系的影响。方法取W istar大鼠胸主动脉分为对照组、血红素组(终浓度10-4mol/L)和锌原卟啉组(终浓度10-5mol/L),每组各9例,用硫电极法测定孵育液中H2S含量和组织中H2S生成率。结果与对照组相比,血红素组孵育液中H2S含量明显升高(P<0.01),而锌原卟啉组H2S含量明显降低(P<0.05)。与对照组相比,血红素组胸主动脉组织中H2S生成率明显升高(P<0.01),锌原卟啉组H2S生成率明显降低(P<0.05)。结论在正常大鼠胸主动脉组织孵育中CO上调H2S/CSE体系。     

一氧化氮对胎兔动脉导管胱硫醚-γ-裂解酶/硫化氢体系的影响

目的探讨H2S、NO对早产胎兔动脉导管的作用及其相互影响,进一步探索动脉导管开放与关闭的病理生理机制、意义及其影响因素,为临床上全面认识动脉导管的开放与关闭提供理论依据。方法将孕21d日本大耳白兔24只随机分成四组：空白对照组及三个处理组,处理组待孕龄23d和25d时分别腹腔注射以不同剂量的一氧化氮前体-硝普钠,待孕龄26d时解剖孕兔取胎兔,胎兔心脏取血1mL后立即解剖胎兔取动脉导管组织,进行实验。结果随着注射硝普钠浓度的增加,胎兔血浆中硫化氢含量、动脉导管组织CSEmRNA表达量均逐渐随注射剂量的增加而增加。各组间相比较,P<0.01,具有显著性差异。结论早产兔血浆中有H2S存在,早产兔动脉导管组织中存在CSEmRNA表达;给孕兔注射不同剂量硝普钠(在一定范围内)对早产兔动脉导管中H2S/CSE体系具有浓度依赖性促进作用。     

心脏横纹肌中胱硫醚-γ-裂解酶的表达及意义

目的探讨心脏横纹肌中胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine-γ-lyase,CSE)的表达及意义。方法以SD大鼠心肌为研究对象,采用免疫组化SP法观察心脏横纹肌中CSE的表达,棕褐色为阳性表达。结果心脏横纹肌组织中无CSE阳性表达,心脏血管组织中有CSE阳性表达。结论心脏横纹肌不含有CSE。在心血管系统中起重要调节作用的硫化氢不在心脏横纹肌中代谢生成,主要由外源途径生成。     

胱硫醚-γ-裂解酶在三种微血管内皮细胞上的表达

目的鉴定微血管内皮细胞上是否表达生成硫化氢（H2s）的酶,为深入研究硫化氢的心血管作用提供新线索。方法原代培养大鼠心脏微血管内皮细胞（CMEC）,设计相应引物后用RT—PCR的方法检测胱硫醚-1-裂解酶（CSE）和胱硫醚-β-成酶（CBS）基因转录情况,进一步用兔抗大鼠CSE和CBS多克隆抗体对CMEC进行蛋白水平的免疫荧光染色。此外对另两种微血管内皮细胞株RF／6A和bEnd．3也检测了H2S生成酶的表达。结果三种微血管内皮细胞都扩增出CSE基因的特异条带,而CBS基因都未扩增出相应产物。CMEC的免疫荧光染色显示CSE抗体染色为阳性,CBS抗体染色为阴性。结论首次发现了微血管内皮细胞上存在CSE的表达,提示内皮细胞可以通过生成硫化氢调节心血管活动。     

胱硫醚-β-合成酶和胱硫醚-β-裂解酶在颈动脉体中的分布

本研究探讨胱硫醚-β-合成酶(CBS)和胱硫醚-β-裂解酶(CSE)在颈动脉体中的分布.应用组织化学技术检测CBS和CSE在颈动脉体中的表达分布并进一步用激光共聚焦对该酶在细胞中的分布进行定位研究.结果表明小鼠颈动脉体Ⅰ型上皮细胞表达CBS和CSE免疫活性,主要分布在胞浆的近细胞膜部位.结论为颈动脉体中氧感受器细胞表达CBS和CSE,提示内源性H2S可能影响颈动脉体化学感受器功能.     

硫化氢对烧伤大鼠肠道组织干扰素-γ、肿瘤坏死因子-α含量的影响

目的实验研究硫化氢(H2S)对烧伤大鼠肠道组织干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的影响,探讨H2S在烧伤大鼠肠道黏膜屏障功能中发挥的作用。方法将104只健康雄性SD大鼠随机分为烧伤组(96只)和正常对照组(8只),其中烧伤组又分为单纯烧伤组(n=32)、炔丙基甘氨酸(PPG)干预组(n=32)、硫氢化钠(NaHS)干预组(n=32)。各烧伤组分别于伤后2d、7d、14d、21d四个时相点取8只SD大鼠回肠组织,匀浆后取上清液用ELISA方法检测各组大鼠肠道组织中IFN-γ、TNF-α的含量变化情况。正常对照组适应性饲养1周后取回肠组织,检测IFN-γ、TNF-α的含量。结果与正常对照组相比,单纯烧伤组、NaHS干预组、PPG干预组各时相点TNF-α和IFN-γ水平均明显升高(P<0.05),在烧伤后2d TNF-α水平最高,烧伤后14d IFN-γ水平达到最高值,之后呈逐渐下降趋势。NaHS干预组各时相点TNF-α水平较单纯烧伤组均明显降低(P<0.05),而IFN-γ水平明显升高;PPG干预组各时相点TNF-α水平较单纯烧伤组均升高,差异有统计学意义(P<0.05),而IFN-γ均降低。结论 H2S可以显著降低烧伤大鼠肠道组织TNF-α水平,升高IFN-γ的水平,表明H2S可减轻肠道炎性反应,保护肠道黏膜屏障作用,为烧伤后应用外源性H2S加强肠道黏膜屏障功能提供了新思路。     

硫化氢对糖尿病大鼠皮肤溃疡创面愈合的影响

目的:探讨硫化氢对糖尿病大鼠皮肤溃疡创面愈合的影响。方法:将30只健康雄性SD大鼠,随机分为正常对照组(NDC组)、糖尿病对照组(UDC组)和硫化氢处理组(TDA组),每组10只。腹腔注射链脲佐菌素(65 mg/kg)柠檬酸缓冲液(p H 4.5)建立糖尿病大鼠模型。1周后,将正常大鼠及糖尿病大鼠背部剪开直径为20mm的圆形切口,正常组和糖尿病组大鼠的溃疡创面以空白基质处理,硫氢化处理组则用2%的硫氢化钠涂抹溃疡创面。分别在给药后第5、10、15、20天测定伤口愈合率。21 d后处死大鼠,分别收集血浆以及肉芽组织,检测血浆的凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、凝血酶时间(thrombin time,TT)及纤维蛋白原(fibrinogen,FIB),白细胞和淋巴细胞计数,ELISA检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)的含量,Western blot检测肉芽组织中血红素加氧酶1(HO-1)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达水平;肉芽组织进行HE染色,光镜观察组织形态的变化。结果:与糖尿病组比较,硫氢化钠处理明显加快大鼠伤口愈合(P0.01),提高了血清SOD活性(P0.01),同时降低了MDA水平(P0.01);血液学检测显示,硫氢化钠明显降低白细胞及淋巴细胞数量,延长PT及TT,降低FIB水平。病理切片观察显示,糖尿病对照组大鼠肉芽组织有炎症细胞浸润,胶原纤维排列疏松且不规则,而硫化氢组大鼠肉芽组织中胶原排列整齐,血管生成增多(P0.05)。此外,TDA组HO-1表达明显高于UDC组,而TNF-α的水平则显著低于UDC组。结论:硫化氢可促进糖尿病大鼠伤口愈合,其机制可能与其提高抗炎及抗氧化作用、改善微循环进而修复组织损伤有关。     

烧伤对大鼠单核巨噬细胞转化生长因子-βmRNA表达的影响

在烧伤后脓毒症发生发展过程中,转化生长因子β(TGF-β)在机体自分泌反馈环中有重要意义.TGF-β可为单核巨噬细胞(Mφ)系统所分泌,又转而进一步激发Mφ系统产生过量肿瘤坏死因子-α(TNF—α),对机体高代谢及器官损伤起重要作用。将Wistar大鼠分为对照组及烧伤组,分别自血中分离单个核细胞,用AGPC一步法提取总RNA,以260/280比例鉴定RNA的纯度,以1％琼脂糖电泳鉴定RNA的完整性,再进行RNA的定量,与已标~(32)P的TGF-β探针进行狭缝杂交(Slot)。每份标本点膜量为15微克,所用α~(32)P-     

转化生长因子β1对香烟诱导的大鼠肺泡巨噬细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合酶表达的影响

目的:探讨转化生长因子(TGF)-β1对香烟诱导的大鼠肺泡巨噬细胞?-谷氨酰半胱氨酸合酶(γ-GCS)和活化蛋白(AP)-1亚单位c-fos mRNA及其蛋白表达的影响.方法:通过支气管肺泡灌洗获取大鼠肺泡巨噬细胞,随机分为对照组、香烟组和TGF-β1组.TGF-β1组加入终浓度为3μg/L的TGF-β1,2 h后除对照组外,余2组均加入香烟烟雾提取物,对照组加入磷酸盐缓冲液.分别用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫细胞化学方法检测肺泡巨噬细胞中γ-GCSh(重链亚单位)及c-fos mRNA和蛋白的表达.结果:香烟组γ-GCSh和c-fos mRNA及其蛋白表达水平显著高于对照组(分别P＜0.05,P＜0.01).TGF-β1组γ-GCSh mRNA及其蛋白表达水平明显低于香烟组(均P＜0.01);而c-fos mRNA及其蛋白表达水平明显高于香烟组(均P＜0.01).结论:转化生长因子-β1参与香烟所致慢性阻塞性肺疾病肺氧化/抗氧化失衡的发病机制.     

转化生长因子β1对香烟诱导的大鼠肺泡巨噬细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合酶表达的影响

目的：探讨转化生长因子（TGF）-β1对香烟诱导的大鼠肺泡巨噬细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合酶（γ-GCS）和活化蛋白(AP)-1亚单位c-fos mRNA及其蛋白表达的影响。方法:通过支气管肺泡灌洗获取大鼠肺泡巨噬细胞，随机分为对照组、香烟组和TGF-β1组。TGF-β1组加入终浓度为3 μg/L的TGF-β1,2 h后除对照组外，余2组均加入香烟烟雾提取物,对照组加入磷酸盐缓冲液。分别用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）和免疫细胞化学方法检测肺泡巨噬细胞中γ-GCSh(重链亚单位)及c-fos mRNA和蛋白的表达。结果:香烟组γ-GCSh和c-fos mRNA及其蛋白表达水平显著高于对照组(分别P<0.05,P<0.01)。TGF-β1组γ-GCSh mRNA及其蛋白表达水平明显低于香烟组(均P<0.01)；而c-fos mRNA及其蛋白表达水平明显高于香烟组(均P<0.01)。结论:转化生长因子-β1参与香烟所致慢性阻塞性肺疾病肺氧化/抗氧化失衡的发病机制。     

中药石膏对烧伤大鼠创面修复的影响及T淋巴细胞，腹腔巨噬细胞功能变化的观察

本实验用Wistar大鼠复制烧伤模型,应用中药石膏治疗,观察烧伤及其修复过程中血液中T淋巴细胞及腹腔巨噬细胞功能的变化。结果表明:烧伤大鼠血中T淋巴细胞数和功能明显低于对照组(对照组T淋巴细胞数为52.19±2.82%,烧伤组值为36.00±3.01%,经统计学处理P<0.01);对照组腹腔巨噬细胞吞噬率为75.13±2.50%,而烧伤组值为66.25±1.58%(P<0.01)。应用石膏后大鼠烧伤创面明显恢复,且血中T淋巴细胞数及功能亦明显增高(46.19±3.53%),腹腔巨噬细胞吞噬率亦接近对照组值(73.75±2.99%)。因此,作者推论:中药石膏治疗烧伤的作用可能与机体细胞免疫功能增强有关。     

胱硫醚β-合酶的研究现状

胱硫醚β-合酶的活性降低是心脑血管系统等系统疾病独立的危险因子。目前研究发现使酶活性降低或丧失的胱硫醚合酶基因的变异在人群中存在多态性。     

自噬对烧伤创面愈合的影响

细胞自噬是细胞在应激状态下应用溶酶体对自身损伤细胞器等物质进行分解,将产生的大分子物质予以回收利用,从而保留细胞活性的降解过程。自噬在细胞的发育和分化进程中起着至关重要的作用。烧伤创面经历炎症期、细胞增殖期和组织重塑期3个时期完成组织愈合。细胞自噬在烧伤创面愈合过程中,具有促进病原体清除,参与新生血管增殖、肉芽组织形成,改善上皮的角质化以及瘢痕重塑的作用。调控自噬,可影响烧伤创面愈合。本文综述细胞自噬在烧伤创面愈合中的研究进展。     

湿润烧伤膏干预烧伤模型大鼠创面愈合及α-平滑肌肌动蛋白的表达

背景:湿润烧伤膏能够抑制炎症反应,降低氧化应激水平,加速创面愈合速度,广泛用于治疗烧伤创面、皮肤放射性损伤、糖尿病足病,并取得了显著效果,但对其机制的研究仍处于空白阶段。目的:基于转化生长因子β1/Smad家族成员3信号通路探讨湿润烧伤膏对烧伤模型大鼠创面愈合及α-平滑肌肌动蛋白表达的影响。方法:将80只SPF级SD雄性大鼠随机分为假烫伤组、模型组、湿润烧伤膏组、转化生长因子β1组,后3组采用圆形烫伤仪(直径为2.5 cm)构建大鼠模型,伤后湿润烧伤膏组创面涂抹湿润烧伤膏,转化生长因子β1组注射转化生长因子β1,假烫伤组、模型组创面涂抹生理盐水。第21天麻醉处死,观察各组大鼠伤后创面愈合情况;采用苏木精-伊红染色观察大鼠创面组织病理学表现;免疫组化染色检测创面组织表皮生长因子受体、α-平滑肌肌动蛋白表达水平;ELISA法检测大鼠血清炎症因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6的表达水平;黄嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸显色法检测创面组织氧化应激指标超氧化物歧化酶、丙二醛水平;Western-blot检测创面组织转化生长因子β1、磷酸化Smad家族成员3蛋白表达水平。结果与结论:(1...     

反复热性惊厥过程中气体信号分子硫化氢对一氧化氮/一氧化氮合酶体系的影响

目的：探讨硫化氢（H₂S）对热性惊厥（FS）大鼠一氧化氮（NO）/一氧化氮合酶（NOS）体系表达的影响。方法:大鼠随机分为对照组、FS组、FS+NaHS组、FS+HA（hydroxylamine）组。采用热水浴诱导大鼠FS，隔日诱导1次，共10次。采用分光光度计法测定大鼠血浆中H₂S和NO含量；用原位杂交观察nNOS mRNA表达情况；用免疫组化方法观察NOS蛋白表达情况。结果:FS+NaHS组NO含量低于FS组，同时NOS表达也低于FS组；而FS+HA组NO含量高于FS组，同时NOS表达也强于FS组。结论:用H₂S外源性供体NaHS和胱硫醚-β-合成酶抑制剂HA的干预研究表明，反复热性惊厥过程中，H₂S的改变可影响NO/NOS体系的表达。     

外用重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子凝胶对烧伤创面的疗效观察

创面愈合是一个复杂而有序的生物学过程,愈合的各个阶段不是独立的,而是相互交叉、相互重叠的,并有多种炎性细胞、修复细胞、炎性介质、生长因子和细胞外基质等成分的共同参与。创面愈合过程在机体的调控下呈现高度的有序性、完整性和网络性。     

异体真皮基质对烧伤创面微循环的影响

目的观察异体真皮基质移植后再血管化，微循环建立的情况以及植皮后有效改善皮片质量和植皮部位功能。方法在实验室由健康的新鲜的异体皮经处理后制备成真皮基质．在创面上移植异体真皮基质后，分一期和二期植上自体中厚皮片。结果在异体真皮基质移植后一周，见基质血循环已建立，在镜下观察见有微小血管已生人基质内；植上中厚皮片后皮片成活良好。结论异体真皮基质移植后可有效地改善植皮质量，起到真皮的作用从而有效地恢复植皮部位的功能。     

外源性硫化氢对大鼠血管钙化的影响

目的观察外源性给予硫化氢(H2S)对血管钙化的影响。方法用肌注维生素D3和灌胃尼古丁诱导大鼠血管钙化,运用Von Kossa染色、原子吸收测定钙含量4、5Ca2 沉积及碱性磷酸酶(ALP)活性测定判断血管钙化程度,半定量RT-PCR方法测定骨桥蛋白(OPN)mRNA水平。结果钙化组大鼠血管Von Kossa染色见平滑肌细胞内和细胞间基质有大量黑色颗粒聚集;主动脉钙含量、45Ca2 沉积及ALP活性分别较对照高6.8倍、1.4倍和1.9倍(P<0.01),OPN mRNA表达明显上调;低、高剂量NaHS组均明显缓解上述指标的变化(P<0.01)。结论补充H2S可减轻钙化血管的钙化程度。