nm23蛋白表达与人膀胱癌细胞生物学行为的关系探讨

[目的]探讨nm23蛋白表达对人膀胱癌细胞生物学行为的影响.[方法]对32例临床病理诊断为膀胱移行细胞癌标本、32例癌旁组织标本和32例正常膀胱粘膜标本,采用S-P免疫组化和图像分析技术检测细胞的nm23蛋白表达量,并对32例患者的临床疗效进行为期两年的随访.[结果]①nm23蛋白在膀胱癌不同组织中表达率不同,癌组织(75%)明显高于癌旁组织(31.25%)(P＜0.05);癌旁组织明显高于正常组织(6.25%)(P＜o.05);②膀胱癌不同分级之间nm23表达量无显著差异.但表浅膀胱肿瘤(Ta-T1)组表达量(0.198 3±0.004 5)明显高于浸润性膀胱癌(T2～T3)组(0.103 7±0.002 7),未复发组(0.170 3±0.0074)明显高于复发组(0.080 5±0.001 2)(P＜0.05).[结论]①膀胱癌组织nm23阳性表达率高于癌旁组织和正常粘膜组织,癌旁组织高于正常粘膜组织.②膀胱癌nm23表达量与其分化、浸润、复发等生物学行为有关.     

胃腺癌细胞Go蛋白α-亚单位的表达

目的 了解胃腺癌细胞中鸟苷酸结合蛋白(G蛋白)亚型Go蛋白α-亚单位的表达，探讨其在肿瘤发生、发展中所起的作用。方法 采用免疫组织化学SP方法，检测培养的胃腺癌细胞和正常胃粘膜上皮细胞中Go蛋白α-亚单位的表达。结果 与正常胃粘膜上皮细胞比较，胃腺癌细胞Go蛋白α-亚单位呈强阳性表达，定量分析显示其数值显著增高，数密度增大。结论 胃腺癌细胞内信息转导物质增多，转导过程增强，对肿瘤的发生、发展起一定的促进作用。     

甲状腺肿瘤侵袭转移与癌基因表达关系

目的 :探讨甲状腺瘤与腺癌细胞在生物学特征上的异同及其与侵袭转移的相关机制。方法 :收集有关的甲状腺肿瘤外科病理标本 71例并按其生物学行为分成腺癌未侵袭组 9例 ,侵袭组 17例 ,转移组 2 2例及腺瘤组 2 3例。以S P免疫组化法进行标记检测bc1 2 ,C erbB 2及CA 12 5癌蛋白的     

癌基因iASPP在急性白血病细胞中的表达及其临床意义

p5 3是一种重要的抑癌基因。癌蛋白iASPP (inhibitorymemberoftheASPPfamily)是新近发现的一个p5 3的重要抑制蛋白,在p5 3野生型的乳腺癌中iASPP高表达[1] 。为了探讨p5 3失活在急性白血病(AL)发病中的作用,我们采用半定量RT PCR方法检测iASPPmRNA在AL细胞中的表达水平并初步探讨其临床意义。病例和方法1　研究对象　本院门诊及住院的AL患者76例,初发AL6 5例,完全缓解(CR) 11例。初发AL中,男性36例,女性2 9例,年龄3～6 6岁,中位年龄2 3.0岁。其中急性淋巴细胞白血病(ALL) 2 1例,急性髓系白血病(AML) 4 2例,急性杂合性白血…     

癌基因C-myc在大肠癌中的表达及临床意义的研究

目的探讨癌基因Cmyc在大肠癌中的表达及临床意义。方法用免疫组织化学方法检测18例大肠癌组织及10例正常结肠粘膜组织中癌基因Cmyc的表达情况,并分析其与相关临床病理因素的关系。结果癌基因Cmyc蛋白表达阳性率在大肠癌组显著高于正常大肠粘膜组织。结论癌基因Cmyc蛋白在大肠癌组织中高度表达,但表达程度与癌症病理分级不相关。     

癌基因蛋白c—erbB—2及PCNA在乳腺浸润性导管癌中的表达

增殖细胞核抗原（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇｃｅｌｌｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉｇｅｎＰＣＮＡ）是一种分子量为３６ＫＤ的核蛋白,它主要在Ｓ期合成和表达,其表达状况和细胞增殖活性相关,肿瘤细胞增殖活性的强弱与乳腺癌浸润转移和复发有密切关系,是反映乳腺癌预后的重要参数。据文献报道乳腺癌中常有ｃｅｒｂＢ２基因扩增及蛋白产物的过度表达,并与肿瘤的发生发展相关。本文用增殖细胞核抗原ＰＣＮＡ和癌基因蛋白ｃｅｒｂＢ２对５０例根治性乳腺浸润性导管癌组织进行免疫组化检测,观察乳腺浸润性导管癌ＰＣＮＡ和ｃｅｒｂＢ…     

60例肺癌组织中癌基因erbB—2蛋白的检测

目的：探讨癌基因ｅｒｂＢ－２在肺癌组织中的表达及意义。方法：采用兔抗人ｅｒｂＢ－２蛋白多克隆抗体，应用免疫组织化学（组化）方法检测肺癌组织中癌基因ｅｒｂＢ－２的表达产物。结果：６０例肺癌中癌基因ｅｒｂＢ－２蛋白阳性率为６２％（３７／６０），其中腺癌６７％（１８／２７），鳞癌５２％（１４／２７），小细胞癌３／４、大细胞癌２／２。１１例正常肺组织未见表达（Ｐ〈０．０５），癌基因ｅｒｂＢ－２蛋白主要定位     

转铁蛋白受体在食道鳞癌细胞的表达

转铁蛋白受体是细胞膜上的一种糖蛋白,其主要生理功能是介导转铁蛋白转运铁进入细胞。近年来,文献报道:转铁蛋白受体(TFR)与细胞增殖程度密切相关。恶性肿瘤细胞增殖活性高,对铁需要量多,TFR表达就增加。有作者进行肝细胞癌TFR免疫组化研究,提示TFR可作为HCC的一种肿瘤抗原标记物:宫颈鳞癌细胞TFR则具有对癌细胞早期诊断的价值。关于食道鳞癌细胞TFR的表达研究,国内外尚未见报道,我们自1994年2月至1996年8月对食道鳞癌93例,不典型增生86例,对照组45例正常人食道粘膜组织进行TFR免疫组化研究,现报告如下。     

人组织因子基因表达载体的构建及其在人卵巢癌细胞系中的表达

本研究旨在克隆人组织因子 (TF)并研究其在稳定转染的人卵巢癌细胞系中的表达。采用分子克隆技术构建人TF真核表达载体 pcDNA3 TFcDNA ;应用脂质体介导的基因转移技术将其导入人卵巢癌细胞系A2 780内 ,采用G4 18筛选稳定表达的转染细胞 ,用流式细胞术和RT PCR进行TF表达水平的检测。结果显示 :①构建产物经基因测序证实为 pcDNA3 TFcDNA重组体 ;②稳定转染的A2 780细胞内TFmRNA水平显著增高 ,转染细胞为3.91± 0 .2 8,未转染细胞为 0 .97± 0 .2 3(P <0 .0 1) ;③转染细胞表面TF表达显著增高 ,转染细胞为 ( 4 8.5 6±9 5 3) % ,未转染细胞为 ( 2 .73± 1.15 ) % (P <0 .0 1)。结论 :成功地构建了TF真核表达载体并建立了稳定、高效表达TF的人卵巢癌细胞系A2 780 /TF ,为研究TF在肿瘤高凝状态、肿瘤生长与浸润转移中的作用及其机制 ,探索抑癌基因治疗新途径建立了实验基础。     

前列腺癌的抑癌基因研究

前列腺癌是男性最常见的恶性肿瘤之一，也是男性重要的癌症致死原因，其发病与基因表达异常有关。本文综述了前列腺癌的形成抑制基因和转移抑制基因的结构特点、抑制机理及基因表达异常对肿瘤的发生发展、瘤细胞的生长、浸润和转移的研究进展情况，并对抑癌基因的研究前景进行了展望。     

APC基因产物在大肠肿瘤的表达

采用免疫组织化学ＬＳＡＢ法检测４４例正常结肠粘膜，１９例腺瘤性息肉和５７例结直肠癌组织中ＡＰＣ基因蛋 物Ｐ３００ＡＰＣ的表达，结果，三者的阳性率分别为９５．４５％、９４．７３％、７１．９３％。差异有显著意义。     

悬浮微阵列技术检测乳腺癌细胞八种癌基因的评价

研究发现乳腺癌患者死亡与早期肿瘤转移密切相关。早期转移系直径〈2mm的恶性肿瘤转移灶，包括单个肿瘤细胞和组织中的微小转移。由于取材限制，目前研究主要集中在前哨淋巴结、血液、骨髓等方面。而外周血循环肿瘤细胞具有原发肿瘤的特征，乳腺癌循环肿瘤细胞检测对乳腺癌的早期诊断，复发转移诊断，以及指导术后治疗等意义重大。本研究采用悬浮微阵列技术同时检测乳腺癌细胞多个基因表达水平，以便为乳腺癌早期转移的多基因联合检测的临床应用研究奠定基础。     

Livin基因在人胆管癌组织及胆管癌细胞系中的表达和意义

目的：探讨Livin基因在人胆管癌组织及胆管癌细胞系中的表达情况及其与胆管癌发生发展之间的关系。方法：采用免疫组织化学技术（SP法）检测Livin基因蛋白在45例人胆管癌标本及及40例癌旁胆管组织、20例正常胆管组织标本中的表达;同时采用RT-PCR法及SP法检测了Livin基因mRNA和蛋白在人胆管癌细胞系QBC939及非肿瘤细胞系HT-1080中表达。结果：Livin在胆管癌组织中表达阳性率为57．8％,而癌旁胆管组织、非癌胆管组织中未能检测到Livin表达。Livin表达与性别、年龄、肿瘤大小及肿瘤分化程度无关。在有淋巴结转组中,Livin阳性表达率（70．4％）明显高于无淋巴结转移组（38．9％）。在人胆管癌细胞QBC939中,LivinmRNA及蛋白均特异性表达,而非肿瘤细胞系HT-1080未见Livin表达。结论：Livin基因在人类胆管癌组织和细胞系中选择性高表达,其可能与胆管癌发生、发展及预后密切相关。     

鼻咽癌细胞系候选癌基因的筛选

目的:利用SNP芯片和基因表达谱芯片数据筛选鼻咽癌细胞系CNE1、CNE2、HONE1中的候选癌基因.方法:SNP芯片检测DNA拷贝数,基因表达谱芯片检测3个鼻咽癌细胞系与人永生化鼻咽上皮细胞系NP69基因表达水平,Ensembl database将SNP数据、基因表达谱数据和人类基因组中已知的DNA拷贝数改变数据整合,筛选候选癌基因,生物信息学进一步分析功能.结果:筛选出候选癌基因102个,包含许多功能群,参与各种信号通路.结论:为癌基因的筛选提供了一种研究方法;筛选鼻咽癌细胞系中候选癌基因,对其的进一步研究有助于认识鼻咽癌的发病机制,为鼻咽癌的诊断和治疗提供理论基础.     

康莱特注射液对人胆管癌细胞 RBE 和 HCCC9810生长、凋亡、迁移的影响

目的:探讨康莱特注射液对人胆管癌细胞 RBE 和 HCCC9810 生长、凋亡、迁移的影响。 方法:使用康莱特注 射 液 处 理 人 胆 管 癌 细 胞 RBE 和 HCCC9810 , 运 用 CCK-8 法 检 测 康 莱 特 注 射 液 对 人 胆 管 癌 细 胞 RBE 和HCCC9810 的增殖情况,流式细胞仪检测两者的凋亡率, Transwell 实验检测两者的迁移能力,通过 Western%Blot 检测两者信号通路中关键蛋白 Caspase-3 、 Bcl-2 和 Bax 的表达情况。 结果:较之空白对照组,随着康莱特药物作用时间的延 长 ,两 者 细 胞 的 生 长 增 殖 程 度 逐 渐 受 到 抑 制 ( P <0.05 ),在 作 用 96%h 时 达 到 较 好 抑 制 状 态 ; Transwell 实 验 结 果 显示 , 人 胆 管 癌 细 胞 RBE 和 HCCC9810 经 康 莱 特 处 理 后 迁 移 数 量 减 少 ( P <0.05 ); 实 验 组 人 胆 管 癌 细 胞 RBE 和HCCC9810 凋 亡 率 明 显 增 加 ( P<0.05 ), 两 者 信 号 通 路 中 关 键 蛋 白 Caspase-3 、 Bax 蛋 白 表 达 明 显 上 调 ( P<0.05 ),Bcl-2 蛋白表达下调( P<0.05 )。 结论:康莱特注射液可以抑制人胆管癌细胞 RBE 和 HCCC9810 的生长和迁移能力,促进其凋亡,机制可能与其能上调凋亡信号通路关键蛋白 Caspase-3 、 Bax 和下调 Bcl-2 蛋白表达有关。     

PTEN蛋白在乳腺癌中表达的研究

目的:探讨PTEN蛋白在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学技术检测1998年1月—1999年12月间收治的120例乳腺癌组织标本中PTEN蛋白的表达。结果:在120例乳腺癌组织标本中有36例为阴性表达,正常乳腺组织、乳腺腺瘤组织均为阳性表达(P<0.01)。无论阳性面积抑或是强阳性面积,PTEN蛋白表达与乳腺癌患者年龄、肿瘤组织学分级和肿瘤大小之间无显著相关(P>0.05);而与乳腺癌腋窝淋巴结转移和远处转移间存在显著相关(P<0.01)。结论:PTEN抑癌基因的蛋白表达低下或丢失与乳腺癌变有关,可能是乳腺癌变过程中一种较晚发生的事件,是进展期乳腺癌的一种信号。     

人食管鳞状细胞癌组织中nm23和p53蛋白表达及意义

目的：探讨食管鳞状细胞癌（ＥＳＣ）组织中ｎｍ２３、ｐ５３蛋白表达及其意义。方法：应用免疫组织化学方法检测６３例ＥＳＣ癌组织中ｎｍ２３、ｐ５３蛋白表达,结果：ｎｍ２３蛋白表达与洒巴结转移呈负相关,与病理分级、病理分期无关。ｐ５３蛋白表达与病理分级、病理分期及淋巴结转移无关。两蛋白表达不存在相关性。ｎｍ２３阳性、ｐ５３阴性,生存期明显长于ｎｍ２３阴性、ｐ５３阳性或其它组合者。结论：ｎｍ２３低表达在ＥＳ     

重组人白细胞介素6和肿瘤坏死因子融合蛋白的构建和表达

本文利用ＰＣＲ技术和基因定位突变技术，将编码人白细胞介素６（ｈＩＬ－６）和肿瘤坏死因子αｈＴＮＦα）成熟肽的基因通过中间接头连接成编码单一蛋白的基因，构建了融合蛋白表达载体ＰＢＩＴ，并在大肠杆菌中得到了表达。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ的电泳胶薄层扫描显示，融合蛋白的表达量是菌体总蛋白量的２０％，其分子量约为３７ｋＤ。活性检测证实，融合蛋白既有ＩＬ－６活性，又有ＴＮＦ活性。     

叶酸在体外对人肝癌细胞生长的抑制作用

目的：体外采用叶酸对人肝癌细胞株SMMC-7721进行处理，分析叶酸抑制人肝癌细胞生长的作用。方法：实验于2003—09／2005—08在重庆医科大学完成。①人肝癌细胞SMMC-7721细胞株由四川大学华西校区分子生物学教研室提供；人胚肌腱细胞由四川大学华西校区分子生物学教研室提供。③细胞生长实验：常规培养细胞，待处于对数生长期时接种于24孔培养板内．每孔调整细胞数为1&;#215;10^4个，共分7组：加入叶酸，使各组叶酸的终浓度分别为15，75，375，750，1875nmol／L；加入顺铂，使顺铂组的终浓度为33nmol／L；以未加受试物、只单纯加入培养基为阴性对照组。通过绘制生长曲线计算各组细胞的增殖抑制率。③四唑盐比色实验：取对数生长期生长状态良好的SMMC-7721和人胚腱细胞，分别接种于96孔培养板，共分7组：加入叶酸，使各组叶酸的终浓度分别为15，75．375，750，1875nmol／L；加入顺铂，使顺铂组的终浓度为33nmol／L；以未加受试物、只单纯加入培养基为阴性对照组。继续培养24h后加入四唑盐（5g／L，20μL／孔）孵育。通过酶联免疫检测仪计算平均吸光度值和抑制率。④流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率。结果：①叶酸对人肝癌细胞株体外增殖的影响：叶酸浓度为75，375，750，1875nmol／L时可显著抑制SMMC-7721细胞的增殖（P〈0．05）：随时间的延长和剂量的增加，SMMC-7721细胞的抑制率呈上升趋势，其生长曲线较阴性对照下移。②叶酸对肝癌细胞、人胚肌腱细胞活性及功能状态的影响：叶酸对人胚肌腱细胞的活性和功能状态无影响，但对人肝癌细胞株有抑制作用。③叶酸对SMMC-7721细胞周期各时相分布及凋亡率的影响：与S期及G2／M期比较，G0／G1期细胞比例增大（P〈0．01或P〈0．05），使其受阻于G0／G1期，细胞生长停滞，细胞凋亡率随浓度的增加而明显上升。结论：叶酸对人胚肌腱细胞无抑制作用，表明叶酸对正常人体细胞无不良影响；但叶酸对癌细胞存在明显的抑制作用。     

cyclinE蛋白在人骨肉瘤中表达的研究

目的 :探讨cyclinE蛋白在人骨肉瘤中的表达及其与骨肉瘤发生、发展和病理分型的关系。方法 :采用免疫组化S P法检测 3 0例骨肉瘤和 10例骨软骨瘤中cyclinE蛋白的表达情况。结果 :cyclinE蛋白在骨肉瘤中阳性表达率为 93 3 3 %,在骨软骨瘤中阳性表达率为 3 0 %,其差异有显著性 (P <0 0 5 )。cyclinE蛋白在骨肉瘤高分化组阳性表达率为 85 71%,在骨肉瘤低分化组的阳性表达率为 95 65 %,其差异无显著性 (P >0 0 5 )。比较cyclinE蛋白在骨肉瘤各病理亚型染色结果的差异无显著性 ( P >0 0 5 )。结论 :cyclinE蛋白表达与骨肉瘤发生、发展密切相关 ,可作为骨肉瘤的辅助诊断指标之一。