PCR检测HBV—DNA对HBsAg无症状携带者传染性的监测

用多聚酶链反应和斑点杂交技术检测了５０例ＨＢｓＡｇ无症状携带者血清中ＨＢＶＤＮＡ，检出率分别为５０％和５８％。抗－ＨＢｃ、抗－ＨＢｅ和ＨＢｅＡｇ阳性者ＨＢＶＤＮＡ的检出率高于阴性者．单项ＨＢｓＡｇ阳性无症携带者ＨＢＶＤＮＡ在血中呈不同程度地波动，其排毒情况无明显规律可循。     

乙型肝炎血清学指标阳性母亲母乳HBV—DNA检测

随机取５０例乙肝血清学指标阳性母亲产后２－３ｄ人的初乳，采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测初乳中ＨＢＶ－ＤＮＡ。结果：抗原阳性组乙肝病毒（ＨＢＶ－ＤＮＡ）的检出率为５０％，抗体阳性组ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率为７．７％。抗原阳性组中，ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ及抗－ＨＢｃ３项阳性乾和ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ２基阳性者乳汁中ＨＢＶ－－ＤＮＡ检出率为１００％，说明该类乳汁具有极强传染性，抗体阳性组中单纯抗－ＨＢｓ     

HBVe系统衍变的临床意义——附465例临床检验结果分析

对３９３例慢性乙肝，７２例乙肝病毒携带者进行乙肝两对半和ＨＢＶ－ＤＮＡ检测，结果为①ＨＢｅＡｇ（＋），ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率８５．８％；②ＨＢｅＡｂ（＋），ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率２５．９％；③ｅ系统均（－），ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率２９．０％。①与②、①与③比较有极显著性差异（Ｐ＜０．０１），②与③比较无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。说明ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶ－ＤＮＡ密切相关，都是ＨＢＶ复制活跃，具有传染性的指标。部分ＨＢｅＡｇ（－）／ＨＢｅＡｂ（＋）、ＨＢＶ－ＤＮＡ（＋）可能与乙肝病毒基因变异有关     

应用聚合酶链反应检测HBV—DNA的临床价值

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和ＥＬＩＳＡ法对５３０例乙肝患者（含１１８例病毒携带者）血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ和乙肝病毒标志物进行检测，ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率分别为１）ＨＢｓＡｇ“＋”、ＨＢｅＡｇ“＋”和抗－ＨＢｃ“＋”组为９６．８５％；２）ＨＢｓＡｇ“＋”、抗－ＨＢｅ“＋”和抗－ＨＢｃ“＋”组为４４．１２％；３）ＨＢｓＡｇ“＋”和抗－ＨＢｃ“＋”组为３５．８９％；４）ＨＢＶ标志物均阴性为１３．１１％；５）     

PCR法检测HBVDNA及其与乙肝病毒标志物关系探讨

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）法检测２５６例乙型肝炎患者血清中乙肝病毒ＤＮＡ （ＨＢ－ＶＤＮＡ），同时用ＥＬＩＳＡ法检测乙肝病毒标志物，即ＨＢｓＡｇ，抗－ＨＢｓ，ＨＢｅＡｇ，抗－ＨＢｅ，结果表明ＨＢＶＤＮＡ的检出率与肝病临床类型无明显关系，而与乙肝病毒标志物的存在状态有关。乙肝五项病毒标志物不同组合状态，血清ＨＢＶＤＮＡ检出率不同，以ＨＢｓＡｇ（＋），抗－ＨＢｃ（＋），ＨＢｅＡｇ（＋）的组合形式检出率     

不同背景抗－HBs，抗－HBc血清中HBVDNA的PCR研究

为探讨ＨＢＶ感染后不同背景抗－ＨＢｓ，抗－ＨＢｃ的意义，用多聚酶链式反应（ＰＣＲ）检测ＨＢＶ感染者血清中ＨＢＶＤＮＡ。抗－ＨＢｓ（＋）病例的ＨＢＶＤＮＡ检出率显著性低于抗－ＨＢｓ（－）病例的检出率，支持抗－ＨＢｓ对机体的保护作用；１７．７％单项抗－ＨＢｓ（＋）的既往感染者有ＨＢＶＤＮＡ的存在，说明抗－ＨＢｓ对ＨＢＶ的清除受其它因素的影响；单项抗－ＨＢｃ，抗－ＨＢｃ／抗－ＨＢｓ，抗－ＨＢｃ／ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ阳性的病例有不同的ＨＢＶＤＮＡ检出率，说明不同血清学背景的抗－ＨＢｃ有不同的ＨＢＶ复制情况。不同类型的肝炎ＨＢＶＤＮＡ检出率无显著性差异。     

晚期原发性肝癌患者血清PCR－HBV DNA的意义

目的：为进一步研究ＨＢＶ感染与原发性肝细胞癌的关系．方法：ＥＬＩＳＡ法检测血清中ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ，抗－ＨＢｅ，抗－ＨＢｃ和抗－ＨＢｓ；ＰＣＲ检测血清ＨＢＶＤＮＡ．结果：３７例晚期原发性肝癌患者血清ＨＢ－ｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ，抗－ＨＢｅ和抗－ＨＢｃ阳性者分别为１７例（４５．９５％），４例（１０．８１％），１６例（４３．２４％）和９例（２４．３２％），而抗－ＨＢｓ全部阴性．聚合酶链式反应检测ＨＢＶＤＮＡ，１８例（４８．６９％）阳性，非常显著地高于ＨＢｅＡｇ检出率（Ｐ＜０．０１）．抗－ＨＢｅ阳性中有７例ＰＣＲ－ＨＢＶＤＮＡ阳性．ＨＢＶ总感染率８９．１９％．结论：提示原发性肝癌发生与ＨＢＶ感染有关．     

生物素探针分子杂交试验检测乙型肝炎患者血清HBV－DNA的意义

用生物素探针分子杂交试验检测６１７例临床各类型乙型肝炎患者血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ，总阳性率为３５．６６％（２２０／６１７），各临床类型间无差异性。ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率：在ＨＢｅＡｇ阳性患者中为６７．０２％（１８７／２７９），而ＨＢｅＡｇ阴性患者中为９．７６％（３３／３３８）；在ＨＢｓＡｇ阳性患者中为３９．１５％（２１１／５３９），而ＨＢｓＡｇ阴性患者中为１１．５４％（９／７８）；抗－ＨＢｅ阳性者为８．１７％（１７／２０８）；抗－ＨＢｓ阳性者为１２．５％（５／４０）。２３例非乙型肝炎患者均未检出血清ＨＢＶ－ＤＮＡ。检测结果表明本方法是一种快速、简便、特异、敏感、无同位素污染的方法。     

350例病毒性肝炎患者检测HBV-DNA与HBV血清学标志物相关性研究

采用ＰＣＲ技术对３５０例各型病毒性肝炎进行检测，旨在研究血清ＨＢＶ－ＤＮＡ与血清ＨＢＶ－Ｍ之间的相关性，以确定ＰＣＲ法检测ＨＢＶ－ＤＮＡ的临床意义。并以ＨＢＶ－ＤＮＡ为依据进一步考察ＨＢＶ－Ｍ的临床价值。结果显示：在ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｇ（＋）、抗－ＨＢｃ（＋）病例中ＨＢＶ－ＤＮＡ（＋）者１０２例（９０．２７％），说明ＨＢｅＡｇ基本可反应病毒处于复制状态；在１３７例ＨＢｅＡｇ（－）／抗－ＨＢｅ（＋）中，ＨＢＶ－ＤＮＡ（＋）为６８例（４９．６３％），表明病毒活动并未终止；在抗－ＨＢｓ（＋）１４例中，ＨＢＶ－ＤＮＡ（＋）２例（１４．２９％），说明抗－ＨＢｓ出现后仍然可有ＨＢＶ复制；在ＨＢＶ－Ｍ均阴性的８５例中，ＨＢＶ－ＤＮＡ（＋）２３例（２７．０６％），说明不能单纯依靠ＨＢＶ－Ｍ检测来诊断乙肝，需定期查ＨＢＶ－ＤＮＡ或肝活体组织检查ＨＢＶ－ＤＮＡ、ＨＢｓＡｇ及ＨＢｃＡｇ。     

生物素探针分子杂交试验检测乙型肝炎患者血清HBV—DNA的意义

用生物素探针分子杂交试验检测６１７临床各类乙型肝炎患者血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ，总阳性率为３５．６５％（２２０／６１７），各临床类型间无差异性。ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率：在ＨＢｅＡｇ阳性患者中为６７．０２％（１８７／２７９），而ＨＢｅＡｇ阴性性患者中为９．７６％（３３／３３８）；在ＨＢｓＡｇ阳性患者中为３９．１５％（２１１／５３９），而ＨＢｓＡｇ阴性患者中为１１．５４％（９／７８）；抗－ＨＢｅ阳性者为８．     

HBV DNA检测在血清HBsAg与HBsAb共存模式中的临床价值

目的检测HBsAg与HBsAb共存模式血清中HBV DNA的拷贝数,探讨其在相应患者临床诊疗中的应用价值。方法用ELISA法检测乙肝两对半,统计HBsAg与HbsAb双阳性的血清学模式分布;荧光定量PCR检测HBsAg与HBsAb共存模式标本的HBV DNA病毒载量;在96例共存模式中,按S/CO比值高低将其分为A、B、C、D 4组,计算各组的HBV DNA阳性率。结果在所有HBsAg与HBsAb共存模式中,HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBcAb阳性模式比例最高,为53.1%(51/96);HBsAg、HB-sAb、HBeAb、HBcAb阳性模式所占比例为35.4%(34/96)。HBeAg阳性组的HBV DNA阳性率为86%;HBeAg阴性组HBV DNA阳性率为53.1%,两组差异显著(P<0.05)。HBV DNA阳性样本中,HBeAg阳性组的平均病毒载量对数值高于HBeAg阴性组(5.08±1.12/ml vs 4.43±1.15/ml,P<0.05)。在共存模式中,以C组(HBsAg≥2,HBsAb 1.0～1.9)HBV DNA阳性率最高,达61.5%(59/96),显著高于其他各组(P<0.05)。结论对于HBsAg与HBsAb共存模式的血清样品,可用荧光定量PCR技术检测HBV DNA来确定体内病毒是否处于复制状态和载量高低,以提高临床诊断的准确性和改进治疗方法。     

乙型肝炎病毒DNA与血清免疫标志物的关系分析

目的 探讨乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA)与血清免疫标志物的关系.方法 荧光定量聚合酶链反应法 (FQ-PCR) 检测血清样本中HBV DNA含量;酶联免疫吸附法(ELISA)检测HBV血清标志物.结果 A组(HBsAg和HBeAg阳性)、B组(大三阳)、C组(HBsAg 、HBcAb阳性)和D组(小三阳)的HBV DNA阳性率分别为96.7%、87.6%、52.2%和38.2%,各组之间均有显著性差异(P＜0.05); A组中阳性样本的HBV DNA量显著高于其它组别(P＜0.05); 315份HBV DNA阳性标本全部携带有HBsAg;HBsAg( )HBeAg( )和HBsAg( )HBeAg(-)中HBV DNA阳性率分别为89.1%和44.0%,有显著性差异(P＜0.05).结论 HBsAg是HBV感染灵敏的血清标志物;FQ-PCR定量检测HBV DNA作为血清学方法的补充对乙肝的临床诊断具有重要意义.     

用荧光探针定量多聚酶链反应技术检测乙肝病毒宫内传播的研究

目的探讨孕妇血中乙肝病毒(HBV)DNA数量与宫内传播的关系.方法用荧光探针定量多聚酶链反应(FQ-PCR)方法,检测76例乙肝病毒表面抗原(HBsAg)阳性孕妇血清中HBV DNA数量.26例HBV DNA阳性者肌注乙肝免疫球蛋白,新生儿出生后24h内取末梢静脉血检测HBV DNA.结果孕妇血中HBV DNA阳性者其宫内感染率为33.3%,宫内感染与孕妇血中HBV DNA数量有关,HBV DNA数量高易导致胎儿宫内感染,乙肝免疫球蛋白免疫注射后可降低HBV宫内感染率.结论孕妇血中HBV DNA数量高易导致胎儿宫内感染,孕期应用乙肝免疫球蛋白可减少宫内传播.     

HBV-经胎盘感染胎儿的机理研究

目的 研究HBV经胎盘感染胎儿机理。方法 应用PCR技术检测59例HBsAg( )孕妇血清、胎盘及新生儿脐血清中HBV DNA。采用免疫组化ABC染色法检测胎盘中HBsAg及HBcAg。结果 新生儿宫内感染率为45．8％(27／59)；胎盘HBV DNA( )者宫内感染率达78．8％(26／33)，均显著高于其HBV DNA(-)者。免疫组化染色HBsAg阳性率为81．4％(48／59)，HBcAg阳性率达61．6％(36／59)。HBsAg及HBcAg在胎盘中分布由蜕膜细胞、滋养层细胞、绒毛间质细胞，绒毛毛细血管内皮细胞依次递减，羊膜上皮细胞中可检出HBsAg及HBcAg。结论 HBV经胎盘感染胎儿机理可能是HBV经母血和／或细胞直接蔓延感染胎儿，或HBV经母血和／或细胞蔓延至羊膜，经羊水感染胎儿。     

无症状乙型肝炎病毒表面抗原携带者血清HBV复制指标的检测

对96例无症状HBsAg携带者(ASC)的血清乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)、DNA多聚酶(DNA P)、乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)和e系统作了检测,80例献血员作为正常对照。结果发现,ASC组HBV DNA阳性者22例(22.9％),其中e抗原阳性者HBV DNA检出率为45.8％(11/24),HBeAg阴性者为15.5％(11/71)。DNAP阳性率39.5％(38例)。HBcAg的阳性率最高达81.3％(78例),且与HBeAg、HBV DNA、DNA P活力间有显著的正相关性。表明血清HBV DNA与HBeAg关系密切。提示血清HBcAg的检测,可作为判断HBV复制、ASC传染性的可靠指标。     

被动免疫对HBV携带孕妇母婴传播及乳汁中HBVM的影响

目的探讨高效价乙肝免疫球蛋白（HBIG）被动免疫对乙肝病毒（HBV）母婴传播及HBV携带孕妇初乳中HBV感染性标志物（HBVM）的影响。方法将326例HBV携带而肝功能正常的孕妇按知情自愿原则分成2组，其中实验组210例，于孕晚期注射HBIG共3次；对照组116例，孕妇不接受HBIG注射。前瞻性追踪所有孕妇的新生儿外周血HBVM情况及产妇初乳中HBVM及HBV-DNA情况。结果试验组新生儿HBV宫内感染率为10．48％（22／210），对照组新生儿HBV宫内感染率为27．59％（32／116），二者比较差异有统计学意义（P：0．0000）。HBsAg单阳性的220例孕妇中，试验组和对照组新生儿HBV宫内感染率分别为7．64％和26．32％，二者比较差异有统计学意义（P=0．0000）。HBsAg和HBeAg均阳性的106例孕妇中，试验组和对照组新生儿HBV宫内感染率分别为22．73％和32．50％，二者比较差异无统计学意义（P〉0．05）。试验组产妇初乳中HBsAg阳性率、HBeAg阳性率和HBV．DNA滴度比对照组均低，但二者分别比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论孕晚期HBIG被动免疫仅可降低HBsAg单阳孕妇HBV宫内传播率，而对HBsAg和HBeAg阳性孕妇并无明显阻断作用；HBIG被动免疫对HBV携带产妇初乳中HBVM及HBV-DNA无明显影响。     

乙型肝炎病毒DNA聚合酶活力测定及临床意义

采用特异性免疫沉淀法检测血清中HBV DNAP活力216例,结果:HBeAg和抗-HBcIgM阳性组的HBV DNAP检出率和活力水平明显高于阴性组(P<0.01);且随HBsAg的滴度升高而升高。在各类乙型肝炎病人中DNAP检出率依次为;重症肝炎和急性肝炎>肝硬化和慢性潘动性肝炎>慢性迁延性肝炎和携带者。抗-HBe阳性组和HBeAg、抗-HBe均阴性组各有25％、54.71％可测到DNAP活力。证明HBV DNAP活力测定是乙型肝炎早期诊断、病毒在体内复制及是否具有传染性的灵敏指标。     

PCR与ELISA在检测乙型肝炎病毒标志物中的应用比较

目的：观察ＰＣＲ与ＥＬＩＳＡ法在检测乙肝病毒标志物中的差异。方法：用ＰＣＲ和ＥＬＩＳＡ法对８０３例疑似乙肝者做了ＨＢＶＤＮＡ和乙肝五项指标检查，并进行比较。结果：在ＨＢｓＡｇ（＋）的７３６例中ＨＢＶＤＮＡ阳性率５８．７７％。ＨＢｅＡｇ（＋）的３５３例中ＨＢＤＮＡ阳性率为９６．３％。ＨＢｅＡｇ（－）的４０８例中ＨＢＶＤＮＡ阳性率为２３．０％。ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ均（－）的２５例中ＨＢＶＤＮＡ阳性率     

Detection of HBsAg and HBV DNA in sweat of HBsAg carriers

HBsAg and HBV DNA in the sweat of HBsAg carriers were detected.Thepositivity rates were 26.1%(12/46)by RIA and 17.4%(8/45)by dot blot hybridization.No HBsAg and HBV DNA were found in 6 persons with negative serum HBsAg.Viralparticles were observed in the sweat by means of immunoelectronic microscope.When se-rum HBeAg or HBV DNA were positive,the positivity rates of HBsAg and HBV DNAin sweat were higher than those with negative serum HBeAg and HBV DNA,and the dif-ference was significant.The results suggested that HBV may be excreted out ofbody through the sweat glands of serum HBsAg carriers,and contaminate environmentalobjects,which may play a role in contact transmission of hepatitis B.No relationshipswere found between anti-HBc,anti-HBe,titer of serum HBsAg and positivity rates ofHBsAg and HBV DNA in sweat.     

HBV 感染者胃十二指肠粘膜HBV DNA地高辛原位分子杂交研究

目的：探讨HBV在胃十二指肠粘膜的分布,复制,表达及其意义。方法：应用地高辛原位分子杂交法检测62例HBV感染者胃十二指肠粘膜HBVDNA的分布状态,并与血清HBVM,胃十二指肠粘膜HBsAg,HBcAg,肝炎病情程度进行相关分析。结果：62例HBV感染者,27例（43．55％）胃肠粘膜检出HBV DNA,检出率与肝炎病情程度,血清HBsAg,HBeAg无明显相关,与血清HBVDNA,胃肠粘膜HBsAg,HBcAg密切相关,胃肠粘膜HBVDNA的表达表现为4种模式。结论：HBVDNA可在胃肠组织原位复制,其不同的表达模式反映了病毒复制或整合的状态。