骨磨片标本双重封固改进法

骨磨片标本双重封固改进法王建新关键词：骨磨片，双重封固以往常规方法是稀树胶或浓树胶封固，如标本存放长久，可出现染料扩散，使骨小管模糊，清晰度减低。有人用油漆封固盖片四周，但油漆容易老化使盖片脱落，这种方法也比较费工。有人用１％火棉胶液做第一道封固剂，...     

环保试剂在病理切片封片中的应用

<正>手术标本、活检组织、纤维镜钳取组织等离体标本均送病理科进行检查和诊断,其过程包括取材、固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色、封片、镜下诊断等多个技术环节,其中封片是将染色好的切片用封固剂封固起来,封固剂的溶剂为二甲苯。近一年来,我们改用环保试剂做溶剂的中性树胶封片,经过观察对比,获得了满意的效果,现介绍如下。1试剂与方法1.1中性树胶封固剂:为上海标本模型厂生产,市售为浓液成品,是一种天然树脂,经提炼与中和后溶解在二甲苯中,折     

中性树胶封固保存血液与骨髓染色涂片

中性树胶封存剂通常只在病理切片技术的封固中应用，但对血液与骨髓(以及其他各种细胞学)染色涂片标本的长期保存，采用中性树胶封固，效果也很好,介绍如下。     

高尔基法银浸的脑组织振荡切片机切片法

常规取大脑 ,按高尔基法固定、浸铬、镀银 ,酒精梯度中快速脱水。用双面刀片进行切片 ,振幅在 4～ 5之间 ,速度在 3～ 4之间 ,贮槽中加 90 %酒精 ,切片厚 80～ 10 0 μm。将切片移入培养皿中 ,经酒精脱水后移至载玻片上 ,再在切片上滴加 1%火棉胶 1～ 2滴 ,稍凉干并加压 ,使切片牢固粘附于载玻片 ,经石炭酸二甲苯、二甲苯透明 ,最后中性树胶封片 (不用盖片 )自然凉干。此法具有简单、省时、经济、易于操作等优点 ,凡是整块染色需用火棉胶包埋切片的实质性器官 ,如肾、肝、肺等皆可用振荡切片机切片     

甘油明胶作为封固剂配方的改良

免疫组化染色AEC，BCIP／NBT和AP-Red等显色剂显色及复染后的封固，不能使用中性树胶，因中性树胶内含有二甲苯溶液，可使阳性终产物褪色，本科自开展免疫组化以来，一直使用AEC作为显色剂，故需使用甘油明胶封固，封固剂都是本科自行配制，经过多年的摸索、实践，现已将甘油明胶的配方改良，具体配制方法如下。     

指甲油在病理技术中的应用体会

在病理组织切片制作过程中，需要合用不同的封片剂封裱盖玻片，常用的封片剂包括油溶性和水溶性两种等，油溶性常用中性树胶，水溶性有甘油明胶等。水溶性封片剂不能长期保存、盖玻片容易脱落，而用中性树胶封裱后需较长时间才能干燥封固。指甲油的应用不但可以解决上述问题，甚至可以在更多病理技术中得以应用。下面将指甲油在病理实验室中应用体会进行介绍。     

病理大体标本封固环节的改进

病理大体标本是教学、医疗、科研工作的重要档案材料。它除了供教学使用外,还起着记录医学病案的作用。例如我们标本室里存放的标本,在20世纪50年代前都是常见病,而现在有的已在我国绝迹或成了常见病[1]。因此,病理大体标本的收集、制作和保存非常重要,能否很好地保存病理大体标本,封固标本缸是关键。多年来我们一直在摸索改进,现在认为中性树胶封口、切片石蜡补封是较为理想的方法。1方法与步骤1.1中性树胶封口标本封口前要选择适当的标本缸,玻璃标本缸是标本存放的最好材料,与有机玻璃标本缸相比,玻璃玻璃标本缸透明度好,不会变形变色。无…     

术中快速冰冻切片环保封片剂封片效果的探讨

目的探讨术中快速冰冻切片制作中Mounting Medium环保封片剂的封片效果。方法分别于12杯5 m L中性树胶中依次滴加0.1~1.2 m L(以0.1 m L/杯递增)二甲苯,配制成不同浓度的封片液,对快速冰冻切片进行封固试验,对比观察不同浓度封片液间气泡数量的变化情况,得出最佳二甲苯中性树胶封片液浓度,再以最佳封片浓度的二甲苯中性树胶封片液与环保封片剂效果进行对比,从而判断后者的封片效果。试验于2019年6月18日完成。结果 (1)中性树胶与二甲苯最佳的配比度为12.5:1(5 m L:0.4 m L),此时封片产生的气泡量最少、效果最佳;(2)在封片时气泡产生量的影响方面,环保封片剂与0.4 m L二甲苯中性树胶封片液之间的差异无统计学意义(P0.05)。结论 Mounting Medium环保封片剂可以作为传统二甲苯中性树胶封片液的良好替代品,是一种值得推广的术中快速冰冻切片环保封片剂。     

介绍一种双重封固法(摘要)

笔者采用一种双重封固法,对显微镜玻片中标本的制作保存,获得理想的效果,现介绍如下;对脂肪染色或显示某些酶反应而不能用中性树胶封固的标本,在完成染色和经蒸馏水洗后,用洁净纱布把切片周围水份抹干,滴上一小滴甘油明胶(要预先把甘油明胶瓶放在热水锅或温箱内使熔化)。滴胶时不要过多,盖片后以不溢出盖玻片外为宜。在冬季如室温低,滴胶和盖片后可把玻片放在一暖板上数秒钟,使明胶不会凝结而利于均匀     

用松香配制切片封固剂

教学和科研用的切片有的需要反复观察和长期保存,故要求所用封固剂是近于中性、无色或微有颜色的,其折光率与所用的载玻片、盖玻片、透明剂等的折光率相近。因折光率与透明度成正比,与未着色的组织识别力成反比,若封固剂的折光率高于组织,则透明度较佳,但识别力较差;反之,若折光率低于组织,则透明不良,但未染色部的识别较为清楚。一般实验室多用进口的加拿大树胶或山达脂等作为封固剂。我们从1956年起试用国产松香作封固剂代替加拿大树胶和山达脂,得到满意的结果。现介绍如下:     

用石蜡切片法制作全眼球标本

<正> 在制作眼球教学切片标本中,传统的方法是用火棉胶切片法,以保证眼球切片的完整,此法步骤多,时间长,成本高,切片厚,很难适应教学的需要。用石蜡切片法制作全眼球标本虽已有报道,但只能作病理诊断用切片,不适合制作大批量的教学切片标本。为了提高眼球切片标本制片的数量和质量,我们采用石蜡切片法制作全眼球标本,经过数次试验,制出了比较完整,而又适合教学的眼球切片标本。与火棉胶切片法相比,在时间上由原来的两个月缩短到5天,在染色上由原来的一天染50张左右,增加到一天染150张左右,而且步骤少,操作简单,切片薄,成本低,取得了满     

运动终板封片方法的改进

氯化金镀金法是显示骨骼肌运动终板的传统方法，其存在标本褪色、封片烦琐等问题。封片通常使用甘油和磁漆，用甘油封片的运动终板极易褪色，不易长期保存，较易溢出盖玻片外，用磁漆封片容易脱落。为此，我们对传统的封片方法进行了改进，获得了比较满意的结果。用常用的中性树胶封片，不容易褪色，用双盖片封固方法封片，切片保存的时间较长。本研究对兔肌肉内的运动终板的封片方法进行了比较观察，现报道如下。     

色泽异常切片的重染

色泽异常切片主要是指褪色的陈旧切片和着色不适当的新染切片。色泽异常切片不仅影响显微镜下观察,甚或造成漏诊或误诊。因此对色泽异常切片的重染,特别是对急待作出诊断的,或标本来源困难的,或教学、科研等数量较多的那些色泽异常切片的重染,不但有利于工作,而且可节省人力和物力。现将重染方法介绍如下: 一、启封盖玻片并充分洗涤病理组织片: 1.将已封固的切片置酒精灯火焰上略微加热,待树胶熔化时揭去盖玻片。 2.将载玻片连同病理组织片投入松节油(或汽油)中洗涤,以除去树胶。 3.再投入正丁醇(或丙酮)中充分洗涤,以除去     

颈部大块组织火棉胶包埋连续切片法

火棉胶包埋技术用于颈廓清大块标本制作,该方面尚未见详细报道。我科自１９８８年以来,采用火棉胶包埋连续切片技术,成功地进行了３００多例颈部大块组织上万张大切片的制作,取得了满意的效果,现介绍如下。１材料与方法１．１标本处理和切片准备１．１．１按解剖位置...     

骨磨片常见的四种制作方法比较

观察骨磨片是医学生了解、巩固和掌握骨的组织结构必不可少的手段 ,同时在临床上判断骨的病理变化也有极广泛的用途。骨磨片常见的制作方法有四种 :空气封固法、大力紫染色法、酸性复红染色法及镀银染色法。四种制作方法的前半步是一样的 ,只是后面使骨小管在镜下显色的机制不一样。笔者根据多年实践现将四种方法作一比较。1　材料与方法1.1　人工合成的粗细油石 ,大力紫 ,酸性复红 ,销酸银 ,中性树胶 (上海标本厂出品 ) ,火棉胶 ,氰基丙烯酸脂胶 (北京市安定化工长出品 )。1.2　骨标本处理　新鲜骨晾干及成人陈旧管状骨按常规方法 [1 ]处理…     

"TO"透明剂在病理活检中的应用

在病理活检技术工作中，组织的透明、脱蜡、封固常用的中性树胶配制均要用到二甲苯。由于二甲苯易挥发、有一定的毒性，长期吸入危害人体健康。因此，我科改用TO型生物制片剂对活检组织进行透明、脱蜡、中性树胶配制，替代二甲苯试剂，取得了良好的效果。     

火棉胶包埋法在海绵窦断层解剖研究中的应用

目的：建立一套以火棉胶包埋技术制备大体断层切片的方法并制作出海绵窦断层切片,为海绵窦的影像诊断学提供解剖学依据。方法：采用火棉胶包埋技术将标本制成连续切片,观察海绵窦在各个数面上的位置、形态、大小和内部结构。结果：火棉胶包埋法制备大体断层切片具有切片薄、无锯耗、无结构变形移位、切片标本易于观察和保存等优点。不同层面海绵窦的大小形态内部结构及毗邻关系明显不同,但同一层面海绵窦内部结构的位置关系基本恒定。冠状位切片观察海绵窦的结构优于横轴位。结论：火棉胶包埋技术是一种较好的大体断层标本制作技术。海绵窦断层解剖研究有助于影像诊断学对海绵窦病变的评价。     

用石蜡包埋制作眼球标本切片

眼球外形近似圆球形，外层巩膜是致密结缔组织，内层视网膜柔软、易剥离脱落，球内有较硬的晶状体和透明胶状物构成的玻璃体。鉴于这种解剖学和组织学上的结构特点，又因用石蜡包埋切片，常使眼球结构变硬变脆，因此制作眼球标本组织切片，传统多用火棉胶包埋，即火棉胶切...     

冷冻切片制片技术的改进

目的探讨快速优质的冷冻切片制片技术。方法取一金属标本托头涂少量胶水,组织标本平整置于其上后速冻,然后将金属标本托头置于切片机夹座上,修切组织到最大切面,将切片机厚度调至6μm,放下防卷板,关闭观察窗,转动手轮切片,将切片迅速贴附于载玻片上,立即将其置于甲醇溶液中固定10～20s,迅速水洗,Harris苏木素浸染,2%盐酸乙醇分化,梯度乙醇脱水,中性树胶封片。结果切片完整,厚薄均匀无皱折。镜下组织细胞形态清晰,细胞核及细胞质染色效果好。结论组织冷冻时的温度和时间是冷冻切片制片技术的关键。     

Cannon氏中性非特异性酯酶染色法

此法对确定组织细胞与组织细胞型淋巴瘤效果较好。我们根据Cannon报道的方法加以改良,其步骤如下: 1.取新鲜组织甲醛——蔗糖固定液和Holt氏液处理(各20—24小时),水洗,经冷丙酮(Ⅰ、Ⅱ)脱水各1小时,经冷2甲苯(Ⅰ、Ⅱ)透明各30分钟,浸蜡1—2小时后包埋。 2.常规切片脱蜡至水(从二甲苯→无水丙酮→稀丙酮至水)。 3.入孵育液(不加Melaola蓝)37℃1—3小时。 4.蒸馏水洗时间稍久,以免组织切片上沉积染料影响观察。 5.核固红染液复染1—2分钟。 6.蒸馏水洗→无水酒精脱水烤干→中性树胶封固。结果:良性和肿瘤性组织细胞胞浆内的中性非特异性酯酶呈蓝黑色弥漫阳性,背景和胞核均呈红色。