卡那霉素B的酶—化学修饰

用酶—化学修饰的方法,对卡那霉素B的C_3~′位进行化学结构改造。利用耐药菌E.coliK.12 ML1629产生的钝化酶选择性地使卡那霉素B的C_3~′位羟基磷酸化,再用化学方法,将卡那霉素B-3~′—磷酸酯转化为3′—氯代—3′—去氧卡那霉素B,进而合成3′去氧卡那霉素B,即妥布拉霉素。     

HPLC-CAD法同时测定硫酸卡那霉素注射液中卡那霉素和卡那霉素B的含量

摘 要 目的：建立HPLC CAD法测定硫酸卡那霉素注射液中卡那霉素和卡那霉素B含量的方法。方法: 采用Boston Green ODS C18（250 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱,以0.2 mol·L-1三氟醋酸溶液 甲醇（95 ∶〖KG-*2〗5）作为流动相,流速:1.0 ml·min^-1,柱温:30℃,喷雾温度:55℃,喷雾压力:56.4 psi。结果:卡那霉素在0.385~38.500 μg·ml^-1之间呈现良好的线性关系（r=0.999 9）,检出限为0.075μg·ml^-1,定量限为0.154 μg·ml^-1,回收率为100.97%（n=9）。卡那霉素B在0.374~37.400 μg·ml^-1之间呈现良好的线性关系（r=1.000 0）,检出限为0.075 μg·ml^-1,定量限为0.150 μg·ml^-1,回收率为100.44%（n=9）。结论:建立的HPLC CAD测定卡那霉素和卡那霉素B含量的方法检出限低,操作简单准确,可以有效控制硫酸卡那霉素注射液的质量。     

硫酸卡那霉素中卡那霉素B检查法的探讨

硫酸卡那霉素中卡那霉素B的检查。中国药典1995版为薄层色谱法，但实验条件复杂，色谱图上斑点不够集中，有时出现施尾现象，本文参照英国药典1993年版，用卡波姆制备薄层板，7％磷酸二氢钾溶液为展开剂，以自身对照法（对照品为供试品的2％的浓度）得到满意结果。1仪器与试剂玻璃板（10×20cm2）；微量注射器（上海医用激光仪器厂）；层板缸；硅胶H，氢氧化钠，磷酸二氢钾，茚三酮，氯化亚锡，乙醇均为分析纯。单硫酸卡那霉素原料粉由福建省福兴医药有限公司提供。批号9609192，9609193，9609194。2实验方法卡波姆溶液制备取卡波姆（上海…     

卡那霉素中卡那霉素B检查方法的探讨

卡那霉素中卡那霉素Ｂ检查方法的探讨江苏省药品检验所（２１０００８）殷璐《中国药典》（１９９０年版）第一增补本收载的卡那霉素中卡那霉素Ｂ的检查是采用薄层色谱法，实验发现该法展开时间较长，一般需２．５小时以上，且斑点拖尾，另外温度控制十分严格，否则分离不...     

重组L-门冬酰胺酶的聚乙二醇化学修饰及修饰后酶的稳定性研究

目的单甲氧基聚乙二醇 (mPEG)化学修饰大肠杆菌重组L 门冬酰胺酶 (L ASP) ,考察经过修饰的酶的稳定性。方法N 羟基琥珀酰亚胺 (NHS)活化酯法活化mPEG ,生成的单甲氧基聚乙二醇琥珀酰琥珀酸亚胺酯 (SS mPEG)按不同摩尔比例与L ASP偶联 ,确定适合的反应时间和反应pH值。通过聚乙二醇化学修饰后的酶 (L ASP PEG) ,酶活力和纯度通过奈氏法和丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)检测 ,高效液相色谱检测L ASP PEG相对分子质量并考察了L ASP PEG体外稳定性等。结果SDS PAGE显示mPEG已经偶联到L ASP分子上 ,以两者摩尔比 1 0∶1为最佳 ,反应pH条件为 8.5 ,获得的L ASP PEG平均比活单位为 6 4 .8IU/mg ,相对分子质量为 30 1 80 0 ,体外稳定性高于L ASP。结论此实验确定了mPEG化学修饰L ASP最佳反应条件为 2 5℃反应 30min ,两者投料摩尔比为 1 0∶1 ,获得的L ASP PEG比L ASP稳定性高     

从卡那霉素结晶母液中分离卡那霉素B

卡那霉素B系卡那霉素链霉菌(Str.Kanamyceticus)在发酵培养过程中产生的主要成份之一,它对革兰氏阳性、阴性菌均有很强的抗菌作用,特别是对青霉素、链霉素、红霉素等产生耐药的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、痢疾杆菌对本品亦敏感。对金黄色葡萄球菌作用,本品>头孢菌素Ⅰ>四环素>羧苄青霉素,比卡那霉素大五倍。它的抗菌能力很大,但毒性亦稍高,主要对第八对脑神经听觉系统产生障碍和肾脏毒性,但停药后一周即消失。 卡那霉素结晶母液中存在着一定量的卡那霉素B,本文报导从卡那霉素母液中分离卡那霉素B并制成针剂,用在猪哮喘病治疗上,取得很好效果。     

卡那霉素中卡那霉素B生物效价测定方法的研究

卡那霉素产生菌在发酵过程中产生卡那霉素A及卡那霉素B,我们在参照中国药典1977年版“卡那霉素中卡那霉素B的检查法”测试卡那霉素B生产工艺研究中间体样品时遇到困难,特别是在B含量较高,杂质含量高,成份较复杂的发酵液样品时,B含量偏高,常超过100％现象,而且重演性很差。 1977年版药典中卡那霉素B计算公式:     

硫酸卡那霉素B检查法的改进

硫酸卡那霉素Ｂ检查法的改进裘晓华，赵霞芬（江苏省药品检验所，南京２１０００８）ＴｈｅｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔｏｆｔｈｅｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｋａｎａｍｙｃｉｎＢｓｕｌｐｈａｔｅ￥ＱｉｕＸｉａｏｈｕａａｎｄＺｈａｏＸｉａｆｅｎ（ＪｉａｎｇｓｕＩｎｓｔ...     

分光光度法测定发酵液中卡那霉素A和B

本文报道复杂组分中卡那霉素A和B的单组分的分光光度测定法。样品中的卡那霉素A和B用硅胶H薄层层析分离,以茚三酮-醋酸镉溶液系统显迹和显色。分离和测定过程很简单,容易操作。可供发酵液中卡那霉素A和B单组份的含量测定,并得到满意的结果.     

肝素的化学修饰及其修饰产物生物活性的研究进展

综述了肝素的化学修饰方法及其修饰产物生物活性的研究。肝素的修饰包括脱硫酸化、化学降解、酯化、超硫酸化、烷基化、与其他物质结合等     

蚯蚓纤溶酶化学修饰的研究

以三聚氰氯为活化剂，采用活化聚乙二醇(PEG)对环毛蚯蚓纤溶酶进行化学修饰，优化了修饰条件，得到了PEG-EFE的加合物(修饰酶)，并研究了PEG-EFE的部分酶学性质。修饰酶的活力为天然酶的85％，结果表明酶的活性中心基本保持不变。对修饰酶的残留氨基测定表明，70％的可滴定氨基参加了反应，且EFE的活性改变较小，可以推测PEG是连接在蛋白质表面上的。     

单甲氧聚乙二醇化学修饰药物酶的研究进展

用单甲氧基聚乙二醉(1)化学修饰药物酶是生化药物研究开发的重要手段之一。本文综述了1化学修饰药物酶的一般方法及修饰后酶在生物和理化性质方面的变化，同时对1研究前景进行展望，并指出了尚待解决的问题。     

蚯蚓纤溶酶的药用淀粉化学修饰

用活化的药用淀粉对蚯蚓纤溶酶进行化学修饰 ,并筛选优化了化学修饰条件。其中以 1mg/ml的淀粉二醛对相同体积的酶液 (酶的比活力为 390U/mg蛋白质 ;底物为酪蛋白 )进行修饰 ,于4℃反应 2h ,制备的修饰酶效果最佳。实验结果表明 ,修饰酶的Kmapp(底物为碱性氨基酸的酯 )为 8.6 9× 10 5mg/ml,较原酶降低了近 2倍 ,修饰酶的反应最适 pH值为 8.6 ,原酶为 7.2 ;原酶和修饰酶的反应最适温度均为5 5℃。     

发酵液中卡那霉素B生物效价测定方法

迄今为止,国内外文献报道生物法测定发酵液中卡那霉素B的含量方法的共同点是将卡那霉素B作为杂质品加以控制,均以百分含量来表示,而卡那霉素B的含量在规定     

复方卡那霉素眼药水中卡那霉素和地塞米松的含量测定

目的:解决复方卡那霉素眼药水中卡那霉素和地塞米松的含量测定问题。方法:在复方卡那霉素眼药水中加入衍生试剂,使卡那霉素形成二氢吡啶衍生物,利用其在紫外有吸收的特点进行测定。地塞米松的测定因受到对羟基苯甲酸乙酯的干扰,所以采用双波长分光光度法进行测定。结果:卡那霉素在8～20μg/ml范围内呈线性r=0.9998,地塞米松在12～20 μg/ml范围内呈线性r=0.9998,卡那霉素和地塞米松的平均回收率分别为 X=99.92% (RSD为0.40% )和 X=99.52% (RSD为0.42%)。结论:方法快速,简便、准确。     

复方卡那霉素眼药水中卡那霉素和地塞米松的含量测定

目的：解决复方卡那霉素眼药水中卡那霉素和地塞米松的含量测定问题。方法：在复方卡那霉素眼药水中加入衍生试剂,使卡那霉素形成二氢吡啶衍生物,利用其在紫外有吸收的特点进行测定。地塞米松的测定因受到对羟基苯甲酸乙酯的干扰,所以采用双波长分光光度法进行测定。结果：卡那霉素在８～２０μｍ／ｍｌ范围内呈线性ｒ＝０．９９９８,地塞米松在１２～２０μｇ／ｍｌ范围内呈线性ｒ＝０．９９９８,卡那霉素和地塞米松的平均回收     

发酵液中卡那霉素A、B的分离鉴别

卡那霉素产生菌发酵过程中,除产生卡那霉素A之外,还产生不同量的卡那霉素B。B对革兰氏阳性菌和阴性菌有强的抗菌作用,对金黄色葡萄球菌的作用比A约大5倍,但B毒性较A大,成品中B含量增高,对病人的毒性也将随之增高。为此,我国药典1977年版规定卡那霉素A中卡那霉素B含量不得超过5％,并规定了卡那霉素B在浓盐酸中回流水解后的生物测定方法。我们为了能快速检测发酵液中卡那霉素组份,采用了薄层层离卡那霉素A、B组份,N.B.D.氯化物萤光显迹的方法。本文介绍薄层层离溶剂系统的选择和卡那霉素A、B用N.B.D.氯化物萤光显迹的灵敏度。     

抗生素的细菌耐药性：酶降解和修饰

抗生素耐药性通过三种机制而起作用:阻止药物与靶标相互作用;从细胞中排出抗生素;对抗生素的直接破坏和修饰。本文主要讨论抗生素的直接破坏和修饰而失活,这包括:水解、基团转移和氧化还原机制。而水解对于临床非常重要,特别是β-内酰胺类抗生素应用以后。而基团转移有多种途径,包括乙酰基转移修饰、磷酸化、糖基化、核苷酸化、核糖基化和巯基转移。酶对抗生素修饰的唯一特点是,这些机制单独起作用降低了药物在局部环境中的浓度,因而,药物研发者和临床医生面临的挑战是针对这种机制找到抗感染治疗的新方法。本文将概括目前有关抗生素耐药性的一些研究成果,并讨论耐药性酶的分子机制、三维结构及进化,从而克服抗生素的耐药性。     

卡那霉素乙酰转移酶在卡那霉素生物合成中的作用和调节机制

许多链霉菌种都有氨基糖甙修饰酶(Aminoglycoside-modifying enzymes),这些酶参与氨基糖甙类抗菌素的生物合成。链霉素—(链霉胍)—激酶已知是作用于链霉素生物合成中间体 O—磷酸化链霉胺的修复合成的。我们曾报告用卡那霉菌生产卡那霉素时,形成卡那霉素乙酰转移酶同时形成 N-乙酰-卡那霉素氨基水解酶。卡那霉素乙酸盐可作为卡那霉素的前体。也发现了核盘菌素(Sclerin)能促进这些酶和卡那霉素的形成。核盘菌素的作用与供给乙酰辅酶 A 维持细胞能量负荷的糖代谢有密切的关系。卡那霉素乙