大鼠海洛因中毒性脑损害病理与MRI的实验研究

目的通过动物实验探讨海洛因中毒性脑损害的病理特征及其MRI诊断价值。方法Wistar大鼠共40只,数字法随机分为海洛因注药组(简称注药组,共32只)及盐水对照组(简称对照组,共8只)。海洛因剂量逐日依次递增05mg/kg的整数倍,3次/d,腹腔注射,建立海洛因依赖大鼠模型和海洛因中毒性脑损害大鼠模型。同样方式注射不含海洛因的生理盐水建立对照组。注射纳洛酮后应用改进的柳田知司评分标准判断成瘾强度。2组大鼠在6个不同时期(累加剂量分别为918、1580、2686、3064、4336及4336mg/kg戒断2周)分别进行脑部的MR、光学显微镜(简称光镜)及电子显微镜(简称电镜)检查。结果第15天注药组和对照组大鼠戒断评分为(230±44)分和(14±05)分,统计学处理表明两组间差异具有统计学意义(t=9737,P<001),标志海洛因依赖大鼠模型建立成功。从累加剂量1580mg/kg开始至最高累加剂量4336mg/kg(第80天),注药组大鼠大、小脑均可见神经细胞变性坏死,表明海洛因中毒性脑损害大鼠模型建立成功。大鼠海洛因中毒性脑损害具体表现(1)大脑皮质神经细胞变性坏死和数量减少,呈典型“红色神经元”。光镜下,单因素方差分析表明,海洛因累加剂量4336mg/kg组与1580mg/kg组或对照组之间,大脑皮质神经细胞变性坏死数的差异具有统计学意义(P=0024及P=0032)     

大鼠实验性脑震荡的病变规律和神经细胞凋亡研究

采用Wistar大鼠复制脑震荡动物模型，于伤后1，3，7，14及30天活杀取脑组织，经光镜，电镜和原位末端标记等技术研究脑震荡的病变规律及神经细胞凋亡情况。结果显示，100g砝码于1m处撞击大鼠头部可复制大鼠脑震荡的模型，其基本病变为脑血管扩张，淤血，出血，脑组织水肿，神经元变性，凋亡和坏死，尼氏体减少甚至消失。伤后1－3天，脑组织呈点状坏死，周围组织疏松，单核及泡沫样细胞增多，神经元变性，凋亡和坏死。7天脑水肿达高，海马锥体细胞减少，呈极度缺血性改变，14－30天内仍见血管扩张，淤血，可见出血，水肿好转。原位末端标记显示，伤后1天见凋亡细胞增多，3天数量达高峰，伤后30天凋亡的神经元持续存在。结果显示，脑震荡以血液循环障碍和实质细胞变性，凋亡和坏死为主要病理改变；神经细胞凋亡是脑震荡神经元迟发性损害的主要形式之一。     

弥漫性脑损伤后脑缺血的实验研究

目的　运用大鼠弥漫性脑损伤 (DBI)模型研究脑外伤后脑缺血缺氧的形态学改变。　方法　采用Marmarou的DBI模型 ,光镜下观察微血管改变并测量顶叶皮质内微血管的截面积及微血管周的水肿面积 ;电镜下观察血脑屏障结构的形态学改变并半定量测定毛细血管周围的水肿范围。　结果　光镜下可见外伤后 2 ,6 ,2 4h微血管管径变窄 ,平均微血管截面积分别为 (41.77± 2 7.37) μm2 、(45 .0 9± 2 4 .75 ) μm2 、(49.38± 2 5 .13) μm2 ,均小于对照组 [(6 2 .0 7± 2 8.4 5 ) μm2 ](P <0 .0 5 )。伤后 6 ,2 4h微血管周围存在明显水肿。电镜下 2 ,6 ,2 4h血脑屏障结构有明显损害 ;微血管有痉挛、受压变窄及淤血三种改变。　结论　弥漫性脑损伤后存在明显的脑缺血缺氧的病理形态学改变。     

nNOS 基因在大鼠实验性脑震荡中的表达研究

目的 :探讨nNOS在大鼠实验性脑震荡中的表达及意义。方法 :采用Wistar雄性二级大鼠复制脑震荡动物模型 ,于伤后 1,3,7,14及 30d活杀取脑组织 ,经免疫组化和原位杂交等技术 ,研究nNOS在脑震荡中的变化规律。结果 :10 0g(致脑震荡砝码 )组见典型脑震荡的临床表现 ,其病理改变为脑血管扩张 ,脑组织淤血、水肿 ,神经元变性、坏死 ,尼氏体减少甚至消失。nNOS蛋白和mRNA于伤后 3d表达增强 ,7d达高峰 ,14d后开始减少 ,30d仍呈阳性表达。阳性部位见于大脑皮层、海马、丘脑和小脑神经元胞浆内。结论 :脑震荡以血液循环障碍和实质细胞变性、坏死为主要病理改变 ;nNOS基因表达参与脑震荡发生时脑组织损伤的病理过程 ,可能对神经细胞变性、坏死起重要调节作用。     

大鼠冷冻性脑损伤模型的建立

目的 建立稳定的大鼠冷冻性脑损伤动物模型.方法 将大鼠用盛有液氮的冷冻杯行硬脑膜外冷冻,监测伤后的颅内压变化,测定伤后不同时期的行走、平衡等行为功能,并行病理检查.结果 冷冻伤后出现颅内压力上升,于4小时达到高峰(14.56±2.31)mmHg;伤后的行走和平衡功能障碍明显;冷冻性脑损伤后,神经细胞周围出现水肿,同时伴有脑皮质冻伤灶神经元变性、坏死,神经细胞和神经胶质细胞的空泡样变.结论 大鼠的冷冻性脑损伤模型是一种稳定可靠的脑损伤模型.     

大鼠肝细胞凋亡和坏死动物模型的建立及评价

目的:通过大鼠肝右叶血供干预分别建立肝细胞凋亡和坏死动物模型,为进一步的磁共振成像实验奠定基础。方法:选取体重为250-300克的SD大鼠90只,随机分为A、B、C三组,每组30只,分别行肝右叶门静脉和肝动脉结扎术、门静脉结扎术及假手术,各组在术后3 h及1、3、7和14 d分别处死6只大鼠,取肝脏标本送病理及电镜检查。结果: A组30只大鼠肝右叶发生凝固性坏死,光镜及电镜下均呈典型的坏死改变,TUNEL染色呈阴性;B组30只大鼠肝右叶发生小灶性凋亡,光镜下可见肝细胞核固缩改变,电镜下见肝组织核边集和凋亡小体,TUNEL染色呈阳性改变。术后3 h 即可见凋亡细胞,24 h时凋亡细胞数最多,7 d后肝组织开始发生小灶性坏死;C组30只大鼠肝右叶未发生凋亡和坏死的病理改变。结论:大鼠肝右叶门静脉和肝动脉双结扎可建立胆脏凝固性坏死模型,单纯肝右叶门静脉结扎能构建肝细胞小灶性凋亡模型。     

过度训练大鼠大脑微血管超微结构和三维构筑变化

目的通过观察过度训练后大鼠大脑皮质的超微结构及大脑微血管的三维构筑变化,探讨其与运动性中枢疲劳发生的关系。方法24只SD大鼠随机均分为对照组和过度训练组。过度训练组大鼠进行为期五周的递增负荷游泳训练。实验后采用电镜观察大鼠大脑微血管超微结构。采用体外心脏穿刺法,活体注射FITC dextran荧光追踪剂,取大鼠大脑皮质,并应用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)对大鼠脑微血管进行三维重建,观察微血管空间构型的变化。结果与结论过度训练大鼠大脑微血管的三维构筑和大脑皮质超微结构较对照组发生了明显改变,这些改变可能导致大脑神经元功能障碍,进而引起运动性中枢疲劳发生。     

高压氧对急性CO中毒大鼠迟发型脑损伤的影响

目的探讨一氧化碳（CO）中毒迟发性脑损伤的病理机制，及高压氧治疗对迟发性脑损伤的作用，为临床治疗提供实验依据。方法参照Ischiropoulos的方法制备急性CO中毒动物模型。采用组织病理学、免疫组织化学等方法检测大鼠染毒后1、3、5、7、14、21d等各时间点脑组织病理改变的特点并与高压氧治疗组比较，以此评价高压氧的治疗作用。通过原位末端转移酶标记（TUNEL）技术方法进行细胞凋亡的检测，观察急性CO中毒及高压氧治疗后神经元凋亡的发生情况。结果急性CO中毒大鼠脑内发生广泛的病理损伤，中毒组大鼠脑皮质、海马和纹状体等部位神经元出现变性坏死，其中大脑皮质、海马等部位损伤较重。TUNEL染色表明，CO中毒大鼠海马神经元发生凋亡，凋亡神经元从染毒后第3天开始显著增加，第7天达到高峰（P〈0．01），以后逐渐减少。CO中毒动物，高压氧治疗组与非治疗组比，脑内神经元变性坏死明显较轻，各时间点海马区损伤均较轻；凋亡神经元数目较少，尤以CO中毒后第5天和第7天明显（P〈0．01）。高压氧促进CO中毒大鼠海马区Bcl-2蛋白表达，尤以CO暴露后第3、5天明显（P〈0．01）。结论急性CO中毒大鼠出现广泛的迟发性神经元损伤，表现为迟发的神经元坏死和凋亡。高压氧治疗可以有效减少神经元变性坏死，促进凋亡抑制基因Bcl-2表达，从而抑制神经元坏死和凋亡。     

高能电子线皮肤辐射损伤动物模型的超微病理学研究

目的 通过动物模型研究高能电子线皮肤辐射损伤产生延迟性坏死和溃疡难以愈合的病理改变和机理,为进一步临床研究打下基础。方法 本实验以ＳＤ大鼠作为实验对象,以直线加速器产生的４ＭｅＶ的电子线照射臀部皮肤制作皮肤放射损伤模型。实验动物分５Ｇｙ、１５Ｇｙ、３０Ｇｙ、４５Ｇｙ４个剂量组,一次性照射后２个月作病理学肉眼、光镜、电镜观察。结果 ５Ｇｙ组光镜形态改变不明显,电镜下可见棘细胞肿胀,基底细胞核固缩,核膜下染色质边集,血管内皮细胞肿胀,部分细胞核固缩,管腔狭小,皮下胶原纤维断裂水肿：１５Ｇ６ｙ组棘细胞和基底细胞肿胀明显,基底细胞胞浆内张力微丝、桥粒、半桥粒显著减少,血管内皮和毛囊上皮细胞变性;３０Ｇｙ组电镜下棘细胞、基底细胞核固缩、水肿明显。ｙ组３周时可见皮肤溃疡形成,电镜见基底细胞层有凋亡细胞和凋亡小体形成,基底膜     

高原昏迷12例的临床病理学研究

报道12例高原昏迷的病理组织学和超微结构变化,总结了本病的临床病理学特点并探讨其发病机理.脑重量1260～1730克,平均1448克。光镜观察脑组织疏松水肿,4例脑出血,6例小血管水肿并微血栓形成。神经细胞呈缺血缺氧性改变。电镜观察神经原纤维溶解,突触肿胀,髓鞘变性或解离,核蛋白体减少.本病基本原因为高原急性缺氧造成神经组织损伤和功能障碍,临床早诊断早治疗尤为重要.     

Role of red blood cell deformation in toxicity of contrast media in cerebral angiography

The authors investigated the effect on the brain of red blood cells that had been modified by contrast media. Rat blood was mixed with an equivolume of contrast media, and up to 200 microL of the mixture was infused to the internal carotid artery of the rat. Evans blue was administered intravenously to assess the integrity of the blood-brain barrier (BBB). Immediately after the death of the animal, or 2.5 hours after the infusion, the brain was removed for evaluation of the degree of BBB destruction and edema. Extensive destruction of the BBB, cerebral edema, and death of the animals were induced by infusion of blood mixed with an ionic contrast medium, such as diatrizoate and iothalamate, which deformed red blood cells. Microscopic observation showed atrophy and necrosis of nerve cells and decomposition of nerve fibers in the affected area of the brain. Cerebral damage was not observed in rats injected with blood mixed with a nonionic contrast medium such as iopamidol, iopromide, or metrizamide, which had less effect on red blood cells. Cerebral damage also was observed in the rats injected with blood mixed with a hyperosmotic solution of mannitol, as well as washed red blood cells mixed with an ionic contrast medium. This study's results indicate that hyperosmotic ionic contrast media affect red blood cells and cause disturbance in cerebral circulation.     

GABAergic mechanisms of heroin-induced brain activation assessed with functional MRI.

Heroin has been hypothesized to activate opiate receptors and inhibit gamma-aminobutyric acid (GABA) release from inhibitory GABAergic interneurons which, in turn, activates dopamine projection cells. Since the distal sites and consequences of this disinhibition are not well understood on a systems level, heroin-induced brain activity was measured using functional MRI (fMRI) in rats. A significant blood oxygen level-dependent (BOLD) signal increase was seen in cortical regions, including prefrontal cortex, cingulate, and olfactory cortex following acute heroin administration. In contrast, a significant signal decrease was seen in several subcortical areas, including the caudate and putamen, nucleus accumbens, thalamus, and hypothalamus. Pretreatment of gamma-vinyl GABA (GVG), an irreversible GABA transaminase inhibitor, significantly attenuated the heroin-induced BOLD signal changes. Pretreatment of naloxone, an opiate mu receptor antagonist, eliminated the heroin-induced BOLD signal changes and posttreatment of naloxone reversed the heroin-induced BOLD signal changes. It is suggested that the heroin-induced negative and positive BOLD changes are due to direct inhibitory and indirect disinhibitory mechanisms of GABAergic activities. Administration of GVG altered these mechanisms and further suggested that involvement of the opiate's pharmacological actions can, at least in part, be mediated by inhibiting brain GABA release.     

中毒性脑病的CT与MRI表现

目的:分析各种中毒性脑病的CT与MRI表现.材料和方法:分析23例中毒性脑病患者的CT和MRI表现,其中7例海洛因烫吸中毒,8例CO中毒,2例工业有机溶剂中毒,6例代谢性中毒,总结其CT和MRI的诊断要点.结果:CT表现为脑白质及神经核团的对称性低密度,MRI表现为相应的长T1、长T2信号.其中基底节区发生改变的有19例,小脑齿状核的有5例,脑干有3例,丘脑有6例,发生广泛白质改变的有10例.小脑齿状核发生改变的仅限于海洛因烫吸中毒患者.结论:CT和MRI能发现脑白质及神经核团的变性和坏死改变,但各种中毒性脑病的这些改变大都不具有特异性,只是小脑齿状核的改变仅见于海洛因烫吸中毒患者.正确的诊断需认真分析影像表现,密切结合临床病史.     

人参皂甙的抗鼠脑缺氧损伤作用

目的　用离体海马脑片缺氧实验 ,结合电生理学和超微结构两方面的变化 ,研究人参皂甙的抗脑缺氧作用。方法　 (1)观察大鼠离体海马脑片缺氧条件下顺向群峰电位 (orthodromic populationspikes,OPS)的变化及人参茎叶总甙对它的影响 ;(2 )同时观察缺氧后海马脑片 CA1区锥体细胞层超微结构变化及人参茎叶总甙对它的影响。结果　 (1)在对照组海马脑片 ,缺氧时缺氧损伤电位出现率为 71.4% ,缺氧后 OPS恢复率为 14.2 % ,恢复程度为 (2 4.8± 31.9) % ;而使用人参皂甙的海马脑片在缺氧前即见OPS减小 ,缺氧时未出现缺氧损伤电位 (hypoxic injury potential,HIP) ,缺氧后 OPS恢复率和恢复程度分别为 10 0 %及 (10 9.5± 37.3) %。与对照组比较均有显著性差异。 (2 )电镜观察显示 ,缺氧组海马脑片的神经细胞呈变性至坏死等不同程度的损伤 ,而人参皂甙组脑片神经细胞与正常细胞相似 ,损伤较轻 ,突触结构清晰 ,兴奋性神经递质小泡无明显耗竭。结论　 (1)人参皂甙有明显的抗缺氧脑损伤作用 ;(2 )人参皂甙抗脑缺氧作用机制可能是 :降低神经元兴奋性 ,减少能耗 ,并保护线粒体 ,以维持胞内 ATP水平 ;抑制兴奋性神经递质释放 ,减轻其兴奋毒性。     

嗅杀灵中毒的头部CT诊断

目的 探讨嗅杀灵中毒的头部CT表现。资料与方法回顾性分析误服嗅杀灵中毒31例的CT、MRI资料。结果 轻度中毒者，CT无明显异常改变；中度中毒者，脑白质密度均匀减低，灰白质界限清楚；重度或死亡者脑白质密度明显减低，灰白质界限更加清楚，脑沟、脑池消失，脑室变小；MRI异常改变为脑白质T1WI呈等或低信号，T2WI呈略高或均匀高信号。病理示脑白质有空泡及海绵样变。结论 CT可作为诊断嗅杀灵中毒的有效手段，并可估计中毒的程度。     

锥体束华勒氏变性的MRI诊断

目的:探讨颅内病变继发锥体束Wallerian变性的磁共振表现,以提高对该继发改变的认识和诊断。方法:收集颅内病变继发锥体束Wallerian变性的患者23例,对原发病变及Wallerian变性的MRI表现进行分析。结果:所有原发病变均位于幕上,单侧发病22例,双侧发病1例,病变侧均出现锥体束信号异常,其中9例伴有同侧脑干体积缩小。结论:MRI诊断Wallerian变性有独特的优势和价值。     

高+Gx过载后恒河猴脑组织损伤的病理学研究

目的 研究实验动物恒河猴在经受抛物线型高 Gx过载后,大脑顶叶皮层和海马区在光镜和电镜下的病理形态学变化,以期深入了解不同高 Gx与脑组织的病理性损伤程度的关系。方法 实验选用健康恒河猴于清醒状态下,在动物离心机上经受相应峰值(实验组： 15Gx／200S、 18Gx／165S、 21Gx／140S和对照组 1Gx／200S)的抛物线型过载作用后,取材、进行病理形态学研究。结果 1)在光镜下,可见大脑顶叶皮层和海马区锥体细胞均表现为不同程度的缺血性萎缩,而星形胶质细胞核周出现空晕,这种病变随着 Gx值的增加而逐渐加重,此外,海马区较大脑顶叶皮层的病变表现的更为明显;2)电镜下随着 Gx值的增加,可见锥体细胞核染色质聚集形成团块状、染色质边集,核膜皱缩,最后形成凋亡小体;胞浆内线粒体由肿胀、嵴模糊不清最后到空泡化;内质网池逐渐扩张。结论 15～ 21G的高 Gx值可以导致恒河猴脑组织出现急性损伤性病理变化,而且损伤的程度随 Gx的增加而加重。     

高剂量照射兔骨骼肌放射损伤的超微病理研究

目的 建立新西兰兔骨骼肌高剂量照射放射损伤模型,研究病理改变.方法 采用随机数字表法将28只新西兰兔分为照射组和对照组.照射组给予9 MeV电子线一次性照射单侧臀部80 Gy,分别于照射后1个月及6个月时取照射区骨骼肌组织,应用光镜和透射电镜观察其病理变化.结果 照射后1个月:光镜下肌细胞变性及坏死,肌间出血明显;电镜下肌细胞内见变性的肌原原纤维肿胀,明暗带结构不清,坏死区呈电子密度深浅不一的无定形区,线粒体肿胀、空泡变性.照射后6个月:光镜下肌细胞变性及坏死较1个月时明显,坏死区可见核碎裂,部分肌间血管管壁增厚、管腔闭塞,神经纤维退行性变,肌间纤维组织增生;电镜下变性区肌丝大量丢失,肌节萎缩,无定形坏死区范围增大,核内染色质减少、边集,胶原原纤维增生明显,线粒体异常增生.结论 9 MeV电子线一次性照射80 Gy照射兔骨骼肌后,骨骼肌细胞线粒体损伤、肌间血管及神经损伤可能是促进肌细胞及变性坏死的重要因素.     

5Hz和20Hz磁场刺激对大鼠脑缺血影响的比较研究

目的 观察5Hz和20Hz磁场对脑缺血损害的影响。方法 采用左侧颈总动脉阻断致大鼠急性脑缺血,缺血后给予5Hz和20Hz的磁场刺激3h或5h。观察脑细胞的缺血性病理变化。结果 锥体细胞和星形胶质细胞表现出不同的缺血性病理变化;对锥体细胞的缺血性损害5Hz组轻于对照组和20Hz组,而对星形胶质细胞则表现为5Hz组的缺血性损害程度重于对照组和20Hz组;20Hz组的缺血性损害程度与对照组相似。结论 不同频率的磁场对大鼠脑急性缺血性损害有不同的影响,磁场的频率效应可能与磁场作用机制及细胞的不同特性有关。