老年人牙周炎牙龈组织内抗原提呈细胞的免疫组织化学研究

利用抗T6及HLA-DR二种单克隆抗体对12例老年9例成人牙周炎患者牙龈组织内Langerhan's细胞及巨噬细胞进行免疫组化染色观察。发现Langerhan's细胞位于上皮棘细胞及基底胞层,而巨噬细胞位于结缔组织靠近上皮处。老年人与成人牙周炎之间的Langerhan's细胞和巨噬细胞数差异显著。作者认为:巨噬细胞在老年人牙周炎免疫调节中起重要作用。     

舌鳞癌预后与细胞增殖和凋亡的关系

目的：探讨舌鳞癌预后与细胞增殖和凋亡的关系。方法：采用TUNEL法和免疫组织化学法检测52例舌鳞癌细胞中自发性凋亡水平及Bax、Bcl-2、增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclea antigen,PCNA)的表达，及其与预后的关系。结果：舌鳞癌中凋亡指数（apoptosis index,AI)、Bcl-2、Bax和PCNA表达的阳性率分别为55．8％、65．4％、73．1％和100．0％。单因素生存分析显示：舌癌患者生存率降低与Bax低表达（P＝0．0020）、PCNA高表达（P＝0．0179）、Bcl-2/Bax比值＞1（P＝0．0072）和高TNM分期（P＝0．0351）有关，但与Bcl-2表达和凋亡指数无关（P＝0．885，P＝0．3536）。结论：Bax、PCNA、Bcl-2/Bax比值和TNM分期一样具有预后价值，综合分析这些指标有助于识别舌癌的生物学特性并准确判断患者的预后。     

SUZ12在舌鳞癌中的表达及临床意义

目的　研究多梳蛋白家族成员SUZ12在舌鳞状细胞癌（以下简称舌鳞癌）中的表达及其与多种临床病理参数之间的关系,探讨其在舌鳞癌预后判断中的意义。方法 采用免疫组织化学染色半定量的方法检测72例术前未接受放、化疗或其他特殊治疗的原发性舌鳞癌患者标本及15例正常舌黏膜中SUZ12的表达情况,结合临床资料,对其与舌鳞癌临床病理特征和预后的相 关性进行统计学分析。结果 SUZ12在舌鳞癌组中的表达明显高于正常舌黏膜。舌鳞癌组织中SUZ12的表达与患者年龄、性别、抽烟、饮酒、肿瘤大小、病理分级、临床分期之间在统计学上无显著性差异,与颈部淋巴结转移（P=0.0325）、总体生存率（P=0.0225）及无瘤生存率（P=0.0179）相关。结论 SUZ12在舌鳞癌组织中过表达与颈淋巴结转移及低生存率相关,可能作为舌鳞癌诊断和预后判断的指标。     

舌鳞癌无临床颈部淋巴结转移的处理

目的 通过分析无临床淋巴结转移舌癌患者的隐匿性淋巴结转移在颈部各区的分布,显示舌活动部癌的淋巴结转移并指导无临床淋巴结转移的舌癌的选择性颈淋巴管清扫的区域。方法 回顾分析２８例舌部癌颈部无临床淋巴结转移而选择性全颈淋巴结清扫和挽救性淋巴 结清扫术的病例,分析手术后病理阳性淋巴结在颈部各区的分布。结果 病理证实单个淋巴结转移１３例,其中颌下及颏下区转移２例,颈内静脉淋巴结上组８例、颈内静脉淋巴结中组     

口腔鳞癌细胞增殖核抗原和P53免疫组化的比较研究

本文运用ＡＢＣ免疫组化结合图象分析，定量分析了ＰＣＮＡ（细胞增殖核抗原）和Ｐ５３在口腔鳞癌中的表达。探讨了两者在口腔鳞癌的临床病理、肿瘤侵龚和转移等方面的异同点。结果表明：ＰＣＮＡ的表达强度和阳性率与肿瘤的病理分级有关，与肿瘤细胞的侵龚转换无关。而Ｐ５３和肿瘤细胞的侵龚有关密切的关系（Ｐ〈０．０５）。Ｐ５３阳性者，淋巴结转移率较高（８０％）。结果表明在口腔鳞癌的临床行为恶性，预后等方面定量分析上述     

放射诱导启动子介导双自杀基因治疗舌鳞癌的实验研究

目的探讨放射诱导启动子介导双融合自杀基因CDglyTK靶向治疗人舌鳞癌裸鼠移植瘤的疗效。方法构建人舌鳞癌裸鼠移植瘤模型．以脂质体为载体介导携放射诱导启动子调控双融合自杀基因的真核表达质粒pcDNA3．1（＋）／E-CDglyTK瘤内转染,辅以3Gy放疗,腹腔注射5-氟胞嘧啶和丙氧鸟苷．描绘肿瘤生长曲线,RT—PCR检测CDglyTK的mRNA水平．免疫组化检测细胞核增殖抗原的表达．原位末端标记法检测肿瘤细胞凋亡。结果放射诱导启动子介导的CDglyTK对肿瘤生长有明显抑制作用．RT—PCR可检测到转染后肿瘤细胞CDglyTK的mRNA表达,诱导放疗增强了其表达水平．电泳条带灰度值从0．213±0．023上调至0．279±0．038（P〈0．01）;诱导放疗显著提高疗效,凋亡指数从21．52％上升为32．23％（P〈0．01）,增殖指数由28．36％下降至20．07％fP〈0．01）。结论放射诱导启动子可作为基因治疗分子开关调节CDglyTK基因在人舌鳞癌裸鼠移植瘤中靶向表达．低剂量放射性照射可显著提高其疗效。     

细胞周期蛋白B1在舌鳞癌中的表达及意义

目的研究舌鳞癌组织中细胞周期蛋白(cyclin)B1的表达,探讨其表达与舌鳞癌临床病理特征的关系。方法随机收集舌鳞癌标本[含正常舌组织和(或)癌旁组织]60例。采用免疫组化SP法显示cyclin B1蛋白的表达,并结合舌鳞癌的临床病理特征进行分析。结果舌癌组织中可见cyclin B1过表达,主要定位于细胞质中,显棕色;正常和癌旁上皮组织中少见其表达。癌组织、正常组织和(或)癌旁组织中cyclin B1蛋白的表达差异有非常显著性。cyclin B1的表达在舌鳞癌不同临床分期、组织分级中有显著性差异。结论cyclin B1在舌鳞癌中有过表达现象;其可作为评价舌鳞癌临床分期和组织分级的参考指标之一。     

CNO舌鳞癌颈部淋巴结隐匿性微转移与预后的研究

目的:研究CNO舌鳞癌病例中颈淋巴结隐匿性转移(PN1)、隐匿性微转移(简称微转移,PNm+)病例与确无淋巴结转移(PNO)的病例三者问预后的关系,以确定PNm+叶病例是否如PN1病例一样需在术后补充放射治疗.方法:①.搜集福建省肿瘤医院自1993.8～2002.11间的CNO舌鳞癌病例54例.②.对PNO病例用免疫组化染色(IHC)法结合连续切片查找PNm+病例.③.分别统计PN1、PNm+、PNO组的死亡率及生存期.④.对采集的数据用SPSS 10.0软件进行统计学处理.结果:至研究结束时止,所有复发病例均已死亡,PN1组与PNm+组间的死亡率没有显著性差异:PN1组与PNO组间以及PNm+组与PNO组间存在显著性差异.PN1组与PNm+组的生存期没有显著性差异;PN1组与PNO组以及PNm+组与PNO组间生存期存在显著性差异.结论:PN1组与PNm+组病例的预后相似,均较PNO组预后差,从而证明了PNm+病例和PN1病例一样,需要在手术后进行辅助放疗.     

转移抑制基因Kiss-1在舌鳞癌原发灶和淋巴结转移灶的表达

目的：探讨肿瘤转移抑制基因Kiss-1在舌鳞癌原发灶和淋巴结转移灶的表达。方法：采用免疫组织化学SP法检测59例舌鳞癌标本原发灶癌组织和其中21例发生淋巴结转移的转移灶中Kiss-1蛋白的表达,并分析其与临床病理参数的关系。结果：59例原发灶标本中Kiss-1蛋白的表达率：无淋巴结转移组为97．37％（37／38）,有淋巴结转移组为90．47％（19／21）,两组相比差异无统计学意义（p〉0．05）;但有淋巴结转移组的表达强度低于无淋巴结转移组,两组差异有统计学意义（p〈0．05）。在21例发生淋巴结转移的病例中,淋巴结转移灶表达率为28．57％（6／21）,明显低于原发灶的90．47％（19／21）,两组差异有统计学意义（p〈0．01）。Kiss-1蛋白表达与患者的年龄、性别、临床分期、组织学分级、嗜烟酒等因素无关（p〉0．05）。结论：舌鳞癌中Kiss-1蛋白表达减弱或丢失可能是导致舌鳞癌转移能力增强的因素之一。     

放疗对舌鳞癌Tca 8113细胞多药耐药蛋白及耐药性的影响

目的：探讨放疗对舌鳞癌Tca 8113细胞和耐药的Tca 8113／CBDEA细胞耐药性的影响。方法：应用免疫组化SP法检测放疗对P-糖蛋白（P-glycoprotein,P—gP）、多药耐药相关蛋白1（muhidrug resistance associate protein 1,MRP1）和谷胱甘肽硫-转移酶π（glutathione S—tranferase π,GST-π）表达的影响和检测放疗对细胞内阿霉素浓度的影响。结果：Tca 8113／CBDEA细胞在放疗后4hP—gP,MRP1,GST-π耐药蛋白表达无明显上升,24h耐药蛋白的表达明显升高（P〈0．01）,Tca8113细胞的耐药蛋白表达在4h和24h时均有明显上升（P〈0．01）。放疗以后肿瘤细胞内阿霉素（ADM）浓度有明显下降。结论：放疗可引起舌鳞癌细胞的耐药。提醒我们对舌癌患者进行放疗和化疗的方案设计时应考虑此点。     

肿瘤-睾丸抗原NY-ESO-1在舌鳞状细胞癌中的表达及意义

目的：检测NY-ESO-1蛋白在舌鳞癌（tongue squamous cell carcinoma,TSCC）中的表达情况,分析其与肿瘤临床病理参数的关系,并探讨其作为TSCC免疫治疗靶标的可能性。方法：采用免疫组织化学EnVision法检测53例TSCC标本及10例正常舌黏膜中NY-ESO-1蛋白的表达,SPSS统计软件分析所得数据。结果：53例TSCC标本中13例NY-ESO-l阳性表达（24.5%）,定位于细胞浆,而10例正常舌黏膜无表达。NY-ESO-1蛋白的表达与肿瘤大小及临床病理分级有关（P〈0.05）,但与肿瘤浸润深度及有无淋巴结转移无关。结论：NY-ESO-1蛋白在中高分化TSCC组织中的表达较高,可以进一步研究其作为TSCC免疫治疗靶点的可行性。     

肿瘤相关成纤维细胞促进舌鳞癌细胞上皮间质转化

目的：检测舌鳞癌组织中肿瘤相关成纤维细胞是否诱导舌癌细胞的上皮间质转化。方法：通过体外原代培养舌鳞癌组织肿瘤相关成纤维细胞的培养上清作用于舌鳞癌细胞系Tca8113,通过检测细胞形态确认肿瘤细胞是否发生上皮间质转化。利用实时定量PCR及免疫印迹检测舌鳞癌细胞上皮标志及间质标志物表达。利用TGF-β/Smad信号通路阻断剂探究TGF-β在此过程的作用。结果：肿瘤相关成纤维细胞促进Tca8113的上皮间质转化。利用实时定量PCR检测及免疫印迹发现肿瘤相关成纤维细胞可以明显促进Tca8113细胞的Vimentin的表达。SB431542,TGF-β/Smad信号通路特异性阻断剂可明显阻断肿瘤相关成纤维细胞条件培养基对Tca8113上皮间质转化的诱导作用。结论：舌鳞癌组织中的肿瘤成纤维细胞可通过诱导舌鳞癌细胞的上皮间质转化促进舌鳞癌细胞的迁移及侵袭,可能在肿瘤发展过程发挥重要作用。     

HMGB 1在舌鳞状上皮癌中的表达及临床意义

目的:探讨舌鳞癌中高迁移率族蛋白1(HMGB1)的表达及其对淋巴结转移和疾病转归的关系。方法:收集51例有完整临床及随访资料的舌鳞癌石蜡标本,采用免疫组织化学染色法观察HMGB1在不同分类的口腔鳞癌组织中的表达,并分析HMGB1与肿瘤分化程度、淋巴结转移及患者预后之间的关系。结果:HMGB1在舌鳞癌组织中呈高表达,阳性率92.2%;HMGB1表达与肿瘤分化程度在统计学上无显著相关性;有淋巴结转移的高表达率为81.2% ,无淋巴结转移的高表达率为32.6%,其差异具有统计学意义(P＜0.05)。高表达HMGB1的舌鳞癌患者较低表达者转归差,其生存率较低(P＜0.05)。结论:舌鳞癌组织中HMGB1与淋巴结转移及转归密切相关; HMG1的表达在一定程度上可用作反映舌鳞癌预后的重要生物学指标。     

3种方式处理下颌骨对舌鳞癌患者手术预后的影响

目的：探讨舌癌病人下颌骨的不同处理方法与手术远期预后的关系,为舌癌患者的手术选择提供参考。方法：随访71例接受手术治疗的舌癌患者5年,分析术后影响预后因素,评价3种不同的下颌骨处理方式与患者预后的关系。结果：下颌骨处理方式对于舌鳞癌患者生存率有直接影响,其中未处理下颌骨患者5年总体生存率56.3%,边缘性去骨截骨患者的5年总体生存率为53.6%,而节段性截骨患者的仅为51.7%。结论：舌癌的预后不完全由下颌骨的切除方式决定的,而是由其侵袭性决定的,因此对于舌癌患者要根据不同情况选择不同方式处理下颌骨,在提高患者生存率的情况下,尽量保存下颌骨的完整性。     

舌鳞状细胞癌血管生成的定量测定及其应用价值

目的 :探讨舌鳞状细胞癌血管生成密度与淋巴结转移的关系,确立淋巴结转移可能性的域值 ,并对其可靠性进一步测试。方法 :通过免疫组化染色法,应用单克隆抗体第 Ⅷ 因子相关抗原特异性使内皮细胞染色 ,在显微图像分析仪下定量测定肿瘤组织的血管生成密度。结果 :舌鳞状细胞癌新生血管生成密度明显高于正常舌体组织 ;有淋巴结转移组其血管生成密度为56.67±5.16条/mm2 ,无淋巴结转移组为35.37±4.81条/mm2 ,两组间比较差异有显著性 ;以 45条/mm2为淋巴结转移的诊断域值 ,其阳性预测率为95.45%。结论:舌鳞状细胞癌血管生成密度与淋巴结转移具有显著性相关 ,指示性强 ,淋巴结转移的诊断域值为45条/mm2,具有较高的预测价值。     

二维及三维培养对人舌鳞状细胞癌TCA8113细胞株生物学特性的影响

目的: 比较二维及三维方式培养的人舌鳞状细胞癌(简称鳞癌)TCA8113细胞株对细胞的增殖、组织形态及乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性的影响,为体外舌鳞癌的研究提供培养方法。方法: 倒置显微镜和苏木精-伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色观察二维及三维培养的人舌鳞癌TCA8113细胞的形态;噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法观察两种培养体系中细胞的增殖;酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测两种培养体系中LDH活性的改变。结果: 倒置显微镜和HE染色观察到三维培养体系中TCA8113细胞成团生长;与二维培养体系比较,三维培养体系中细胞较长时间保持良好的增殖状态,LDH的活性较二维培养的细胞活性显著增高。结论: TCA8113细胞藻酸盐凝胶三维培养体系较二维培养体系能更好地体现细胞的生物学特性。     

舌鳞状细胞癌淋巴结转移与长链非编码RNA HOTAIR的关系探讨

目的:研究HOTAIR在舌鳞状细胞癌中的表达,并探究HOTAIR与舌鳞状细胞癌淋巴结转移的关系。方法:对19例舌鳞状细胞癌患者的癌组织以及其对应的19例癌旁组织进行实时荧光定量PCR检测,检测HOTAIR在癌组织、癌旁组织的相对表达量,把结果与患者的TNM分期进行关联比较,并进一步通过构建沉默HOTAIR表达的CAL27、SCC9细胞系,检测肿瘤细胞侵袭、迁移能力的改变。结果:19对舌鳞状细胞癌组织中,26.3%显示出HOTAI的高表达(P=0.016 9<0.05),且高表达者均为具有淋巴结转移的患者,而在无淋巴结转移的癌组织中HOTAIR呈现低表达(P<0.001),通过RNA干扰技术降低HOTAIR在CAL27及SCC9细胞系中的表达水平,结果发现细胞侵袭(P<0.001)和迁移能力(P<0.001)受到了抑制。结论:长链非编码RNA HOTAIR在舌鳞状细胞癌淋巴结转移过程中可能发挥促进因子的作用。     

大鼠舌鳞癌诱变过程中基质金属蛋白酶13表达变化的研究

目的探讨基质金属蛋白酶13（matrix metalloproteinases 13,MMP-13）在大鼠舌鳞癌诱变过程中转录水平表达变化及其临床意义。方法 50只SD大鼠随机抽取10只作为正常对照组,给予正常饮食。另40只每天喂养0.002%4-硝基喹啉-1-氧化物,于16周时处死20只,选取处于上皮异常增生的8个标本为上皮异常增生组;24周时处死另外20只,选取发生舌鳞癌的8个标本为鳞癌组。各组利用定量逆转录聚合酶链反应检测MMP-13在不同病变时期舌组织中转录水平的表达变化。结果大鼠诱癌16周时重度上皮异常增生发生率为75.0%（15/20）,大鼠诱癌24周时舌鳞癌发生率为94.8%（18/19）。转录水平的检测显示MMP-13上皮异常增生组的表达较正常组上调,但差异无统计学意义（t=-1.759,P=0.129）;舌鳞癌组与正常组（t=-6.579,P=0.001）和上皮异常增生组（t=-6.376,P=0.001）比较MMP-13的表达均有统计学意义的上调。结论 MMP-13随癌变的发生表达显著,可能在舌鳞癌的发生过程中起着重要作用。     

抑癌基因Lkb1超表达载体构建及其在人舌鳞癌细胞SCC-15中的生物活性分析

目的:了解抑癌基因LKB1对人舌鳞癌细胞的影响,初步探讨其相关通路机制。方法:构建LKB1真核表达载体,通过脂质体转染人舌鳞癌细胞系(SCC-15),利用RT-PCR、Western blot 和流式细胞术来检测SCC-15中基因表达和细胞周期凋亡的变化。结果:LKB1在SCC-15细胞中mRNA水平上成功过表达约300倍,蛋白表达水平也显著上调;同时发现LKB1超表达对细胞周期起阻滞作用,并可上调p53、PTEN和TGF-β,同时下调VEGF的表达,差异均有统计学意义。结论:成功构建了LKB1真核表达载体,该基因在SCC-15细胞中超表达对细胞周期起阻滞作用,调控p53、PTEN、TGF-β和VEGF基因表达,可能参与调控p53和TGF-β等多种信号通路,为进一步研究 LKB1 基因在恶性舌鳞癌发病的机制和临床治疗的作用提供了重要实验依据。