桦褐孔菌多糖的分离纯化及其抗氧化活性测定

以桦褐孔菌为原料,测定其化学组分,并采用水提醇沉法提取桦褐孔菌粗多糖（IOP）。将获取的桦褐孔菌粗多糖进行脱蛋白、脱色素的初步纯化,然后利用DEAE-52纤维素层析柱及Sephadex-100凝胶柱对多糖提取液进行分离纯化,通过抗氧化活性筛选出活性较高的多糖组分,并通过高效液相色谱分析多糖组分的纯度。实验结果表明,桦褐孔菌子实体的化学成分组成丰富,其中多糖13.10%±0.31%、还原糖4.21%±0.40%、蛋白质2.70%±0.71%、灰分9.60%±0.31%。通过对桦褐孔菌粗多糖脱蛋白、脱色素的试验方法进行筛选,得到聚酰胺层析法为最佳的脱除方法。蛋白质的脱除率为93.1%、脱色率为75.8%,多糖的保留率为90.3%。IOP经过DEAE-52纤维素柱层析后得到四个单糖组分:IOP-1、IOP-2、IOP-3、IOP-4。对四个多糖组分进行抗氧化实验发现,IOP-2对DPPH自由基的清除率最高,清除率为81.9%。IOP-2经过Sephadex-100层析柱后获得两个多糖组分:IOP-2a、IOP-2b。对比其抗氧化活性,筛选出活性较高的多糖组分为IOP-2a。采用高效液相色谱法鉴定多糖组分IOP-2a,只检查出一个对称峰,说明IOP-2a为均一性多糖。     

桦褐孔菌多糖的分离纯化及体外抗氧化活性研究

目的 分离纯化桦褐孔菌多糖(Inonotus obliquus polysaccharide, IOP),分析其结构并对其抗氧化活性进行评价。方法 以桦褐孔菌为原材料,采用水提醇沉工艺,经大孔树脂吸附法除杂脱色得到IOP;通过DEAE-52纤维素柱对IOP进行分离纯化,得到4个多糖组分:IOP-1、IOP-2、IOP-3和IOP-4,通过Sephadex G-100凝胶柱纯化得率较高的组分IOP-1,得到均一多糖IOP-1a。对IOP-1a进行结构鉴定,并考察其体外抗氧化能力。结果 IOP-1a相对分子质量为12040Da;由7种单糖组成:葡萄糖、半乳糖、木糖、甘露糖、鼠李糖、阿拉伯糖和岩藻糖(0.341:0.246:0.150:0.102:0.842:0.559:0.213),红外光谱显示IOP-1a含有β型糖苷键、羰基、羟基等官能团。体外抗氧化实验表明,IOP和IOP-1a均有较好的抗氧化能力。结论 从IOP中分离纯化得到的中性组分IOP-1a具有较好的抗氧化活性。     

桦褐孔菌多糖IOP3a的分离纯化及其体外抗肿瘤活性研究

采用水浴浸提,Sevage 法去除蛋白分离得到粗多糖,DEAE-SepharoseCL-6B 离子交换柱、SepharoseCL-6B和Sephadex G-200 凝胶柱层析得到桦褐孔菌均一纯多糖IOP3a,用MTT 法研究IOP3a 对Jurkat、Daudi 肿瘤细胞体外抑制作用。结果表明：IOP3a 对肿瘤细胞Jurkat 和Daudi 的增殖具有明显的体外抑制作用(P ＜ 0.01),并且具有量效依赖性,其最大抑制率分别达到71.84% 和75.14%。     

桦褐孔菌多糖的研究进展

桦褐孔菌多糖是桦褐孔菌的主要活性成分,在抗氧化、抗肿瘤等方面起到重要作用,是一种潜在的保健成分。文章阐述了桦褐孔菌多糖的提取、分离纯化、生物活性以及结构等方面的研究进展,并展望桦褐孔菌多糖进一步研究以及活性开发应用的趋势。     

桦褐孔菌多糖研究现状与展望

桦褐孔菌（Inonotus obliquus）富含多糖、萜类、多酚等多种活性成分,具有抗癌、抗衰老、降血糖等多种药理作用。多糖作为桦褐孔菌最主要的活性物质,近年来成为食品和医药领域的研究热点。该文从桦褐孔菌多糖诱导发酵、提取工艺、分离纯化及作用功效等方面,综述近年来桦褐孔菌多糖研究的概况,并对存在的问题及其应用前景进行展望,旨在为桦褐孔菌多糖深入研究和开发应用提供参考。     

大孔吸附树脂分离纯化桦褐孔菌三萜工艺研究

为研究大孔吸附树脂纯化桦褐孔菌三萜的工艺,筛选了适宜的大孔吸附树脂,并以吸附率和解析率为指标,利用最适的树脂进行对桦褐孔菌的静态吸附和解析的条件优化,研究了上样液体积、吸附时间、样液pH值、解析时间、解析液种类和解析液浓度的影响,确定纯化工艺参数。结果表明:在供试的5种大孔吸附树脂中,AB-8型大孔吸附树脂适合分离桦褐孔菌三萜。最佳分离条件为:样液在自然pH值条件下,按10mL/g树脂进行吸附12h后利用蒸馏水除去未吸附的样液后选择30%乙醇及70%乙醇进行依次解析12h,此时三萜的吸附率和解析率分别可达93%和80%以上。表明AB-8型大孔吸附树脂纯化桦褐孔菌三萜的效果较佳。     

桦褐孔菌多糖的抗肿瘤活性研究

研究桦褐孔菌多糖对肿瘤细胞增殖的抑制和对荷瘤裸鼠的体内抑瘤作用。采用MTT法检测桦褐孔菌多糖对Jurkat和Daudi细胞增殖的影响,建立Jurkat荷瘤裸鼠模型,研究给药后对荷瘤裸鼠的抗肿瘤作用。表明桦褐孔菌多糖在体外具有直接杀死Jurkat和Daudi肿瘤细胞的作用,最高抑制率分别为62.29%和66.42%,具有良好的剂量-效应关系,同时具有显著的体内抗肿瘤活性,大小剂量对Jurkat荷瘤的抑制率分别为43.52%和57.48%,并且能显著提高裸鼠的脾脏指数,表明桦褐孔菌多糖具有显著的抗肿瘤活性和增强免疫功能。     

大孔树脂纯化桦褐孔菌多酚及其成分分析

采用大孔吸附树脂对桦褐孔菌多酚进行纯化,并采用高效液相色谱-电喷雾-质谱（high performance liquidchromatography-electrosprary ionization-mass spectrometry,HPLC-ESI-MS）技术对桦褐孔菌多酚纯化物进行分离鉴定分析。实验结果表明,D101树脂不仅静态吸附量、吸附率最大,且解吸性能优良,适合分离纯化桦褐孔菌多酚。最佳纯化工艺条件为上样质量浓度1.0 mg/mL、上样流速1.0 mL/min、洗脱液乙醇溶液体积分数70%、洗脱流速1.0 mL/min,在此条件下,其纯度由16.52%提高到了49.77%;根据HPLC-ESI-MS检测分析结果推测桦褐孔菌多酚中含有9 种物质,分别为无色花色素、花旗松素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷、仙茅苷、像黄素-3-O-己糖苷、7-木糖苷儿茶酚、雪胆素乙、桔皮素、儿茶素、芦丁。     

两种基质桦褐孔菌菌丝多糖免疫功能研究

培养桦褐孔菌菌丝体和药质菌丝体,采用超声波方式提取两种粗多糖,再将粗多糖分别作用于小白鼠,研究小白鼠的碳廓清实验和对小白鼠免疫器官质量的影响。结果表明:桦褐孔菌菌丝体粗多糖和桦褐孔菌药质菌丝体粗多糖都可以提高小白鼠的非特异性免疫功能;多糖种类和灌胃剂量对小白鼠非特异性免疫的影响不同,药质粗多糖比粗多糖对小白鼠的非特异性免疫功能的影响大,效果好。     

桦褐孔菌菌粉多糖提取工艺的优化

根据Box-Benhnken的中心组合实验设计原理,在单因素试验的基础上采用三因素三水平的响应面分析法,以多糖提取率为响应值作响应面,并进行回归分析。结果表明,桦褐孔菌菌粉多糖提取的理想工艺条件为:温度为83℃,提取时间为2.2 h,液料比为33.3∶1时,桦褐孔菌菌粉多糖的提取率达到24.578%。气相色谱分析该工艺条件下提取的桦褐孔菌菌粉多糖,各主要单糖组成及质量分数分别为:阿拉伯单糖0.53%,甘露糖0.48%,葡萄糖10.75%,半乳糖2.44%。红外光谱分析结果显示,多糖产品中含有酸性多糖,糖苷键主要是α型。     

超声波辅助提取桦褐孔菌子实体中多糖的工艺优化

研究了优化超声提取桦褐孔菌中多糖的工艺.以蒸馏水为提取剂,用超声波辅助提取桦褐孔菌多糖类物质,以不同处理条件、超声功率、超声次数、超声处理时间为试验因素,以多糖的提取率为考察指标进行单因素试验确定最佳提取工艺.超声辅助技术提取桦褐孔菌子实体中多糖类的最佳工艺条件为:超声功率400W,超声20次,超声10min,在此条件下,多糖得率最高,为11.62％.     

超声波辅助提取桦褐孔菌子实体中多糖和三萜

研究了优化超声辅助提取桦褐孔菌中多糖和三萜类物质的工艺。以蒸馏水和异丙醇为提取剂,用超声波辅助提取桦褐孔菌多糖和三萜类物质,以不同处理条件、超声功率、超声次数、超声处理时间为试验因素,以多糖和三萜的提取率为考察指标进行单因素实验确定最佳提取工艺。超声辅助技术提取桦褐孔菌子实体中多糖类和三萜类物质的最佳工艺条件为:超声功率400 W、超声20次、超声10 min,在此条件下多糖得率最高,为11.62%,总三萜类物质得率在2%,使得多糖和三萜类物质二者共提取得率达到13.57%。     

辐照处理对桦褐孔菌多糖抗疲劳作用的影响

目的:研究经过辐照处理的桦褐孔菌多糖对小鼠的抗疲劳作用.方法:用60Co-γ射线进行辐照,得到5、10、20、30 kGy辐照剂量和未辐照的桦褐孔菌菌粉制得多糖.分为对照组、辐照高中低剂量组和未辐照高剂量组,对雄性昆明种小鼠进行四周连续灌胃,测定小鼠爬杆、力竭游泳时间,肝糖原(LG)、肌糖原(MG)、全血乳酸(BLA)...     

桦褐孔菌多酚抑菌活性分析研究

为减少辅料糠壳给酒体带来的邪杂味,研究箭竹作为辅料酿造小曲酒的工艺。分别考察箭竹的粉碎大小、加量、小曲种类、入窖温度对箭竹小曲酒的影响。结果表明,约7.0 mm长、3.0 mm宽的箭竹适合作小曲固态酿酒辅料,箭竹使用前清蒸1 h,加量为7%,选用泸州某小曲,入窖温度为24 ℃。通过理化分析及感官评定表明在该优化条件下,出酒率为47%以上,总酸含量为685.3 mg/L,总酯含量为1 071.5 mg/L,达到优级白酒标准;小曲酒酒体清香纯正,柔和谐调、醇甜爽净,除具有乙酸乙酯为主体的复合香气外,还带有箭竹独有的清香味。     

基于响应面法的闪式提取桦褐孔菌多糖工艺优化

利用响应面法优化桦褐孔菌多糖的闪式提取工艺。在单因素实验的基础上,以桦褐孔菌多糖的提取率为响应值,以料液比、提取时间、提取电压为主要考察因素,采用响应面法优化闪式提取桦褐孔菌多糖的最佳工艺参数。结果表明,经响应面优化得到料液比为1∶23,提取时间为86 s,提取电压为150 V时,桦褐孔菌多糖的提取率最高,可达到8.52%。结论:闪式提取法适用于桦褐孔菌多糖的提取,该工艺具有方便、快速和高效的优点。且经响应面法优化所得的最佳提取条件准确可靠,具有一定的实用价值。      

桦褐孔菌纯化多糖体外降血糖活性研究

采用水提醇沉法得到桦褐孔菌发酵粗多糖,将粗多糖过DEAE-52纤维素柱分离纯化得到两种多糖(EIOP1、EIOP2),本文以α-葡萄糖苷酶抑制活性、正常HepG2细胞及胰岛素抵抗HepG2细胞的单位细胞葡萄糖消耗量为主要指标,探究桦褐孔菌两种纯化多糖不同浓度(10、20、40、80、160和320 μg/mL)的降血糖活性,其中α-葡萄糖苷酶抑制活性以阿卡波糖作为阳性对照,葡萄糖消耗实验以二甲双胍作为阳性对照。结果表明,EIOP1、EIOP2的α-葡萄糖苷酶抑制活性均高于阳性对照组阿卡波糖与粗多糖,IC₅₀值分别为39.18、29.87 μg/mL。EIOP1在浓度为80 μg/mL时,对HepG2细胞的葡萄糖消耗量极显著高于对照组,促进效果最好,比对照组提高了30.62%(P<0.01);EIOP2在浓度在40 μg/mL时,葡萄糖消耗量极显著高于对照组,比对照提高了75.99%(P<0.01);对胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗实验发现EIOP1在浓度为40 μg/mL时,促进效果最好,比胰岛素抵抗组提高了30.00%,EIOP2在浓度为80 μg/mL时,促进效果最好,比胰岛素抵抗组提高了90.49%,高于Met组(P<0.01)。因此,桦褐孔菌纯化多糖对正常HepG2细胞和胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗均具有促进作用,对α-葡萄糖苷酶的抑制活性显著高于粗多糖。