附子无胆炮制品的生物碱与可溶性多糖含量检定

目的分析测定采用无胆炮制新工艺后附子炮制品生物碱与可溶性多糖含量,并按国家药典要求进行检定。方法采用HPLC,Waters SunFire-C18色谱柱测定生物碱含量;采用蒽酮硫酸法测定可溶性多糖含量。结果采用无胆工艺与传统工艺的4种附子炮制品中所含6种生物碱和可溶性多糖的含量差异很大。总单酯型生物碱(MAs)成分含量从低到高的顺序依次为:炒附片(无胆附片)、蒸附片(无胆附片)、白附片(有胆附片)、黑顺片(有胆附片)。可溶性多糖含量从低到高的顺序依次为:蒸附片、白附片、炒附片、黑顺片。总双酯型生物碱(DAs)成分含量有胆附片明显高于无胆附片。结论无胆附片生物碱指标符合药典规定。     

附子不同炮制品对风湿寒痹类风湿关节炎大鼠的急性毒性试验研究

目的:比较附子不同炮制品对风湿寒痹类风湿关节炎(RA)大鼠的急性毒性。方法:通过高效液相色谱法测定各炮制品水提物中6种酯型生物碱的含量;采用完全弗氏佐剂结合风寒湿因素建立风湿寒痹RA大鼠模型,单次灌胃盐附子水提物(生药量5.81、7.00、8.43、10.16、12.24、14.75 g/kg),通过改良Bliss法计算半数致死量(LD_(50));单次灌胃炮天雄、刨附片、白附片、黑顺片水提物,分别测定最大给药量(MFD),通过观察给药后体重、摄食量、饮水量的变化,计算主要脏器系数,观察HE染色组织病理学变化,检测血生化、血常规指标进行急性毒性评价。结果:黑顺片、盐附子水提物所含双酯型生物碱含量相对较高,炮天雄水提物中单酯型生物碱含量较高。盐附子水提物灌胃RA大鼠的LD_(50)为生药量8.134 g/kg,炮天雄、刨附片、白附片、黑顺片水提物灌胃RA大鼠的MFD分别为生药量28.8 g/kg、46.2 g/kg、46.8 g/kg、63.4 g/kg。与模型对照组比较,8.43 g/kg盐附子组血小板(PLT)含量显著升高(P<0.01);黑顺片63.4 g/kg组总蛋白(TP)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平和淋巴细胞百分比(LY)明显降低,碱性磷酸酶(AKP)水平、中性粒细胞百分比(GR)、单核细胞百分比(MO)明显升高(P<0.05或P<0.01);刨附片46.2 g/kg组AKP水平明显升高(P<0.05)。结论:盐附子水提物对风湿寒痹RA大鼠的毒性较大,炮天雄、刨附片、白附片、黑顺片水提物对风湿寒痹RA大鼠无明显毒性。     

岭南炮天雄的炮制工艺优选

目的:优化并规范岭南炮天雄的炮制工艺,为提高该产品的生产效率及质量提供参考。方法:以炮天雄中3种单酯型生物碱(苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱)和3种双酯型生物碱(新乌头碱、次乌头碱、乌头碱)质量分数为评价指标,在单因素试验基础上,通过正交试验考察浸漂时间、高压蒸制时间和砂炒温度对岭南炮天雄炮制工艺的影响。结果:最佳炮制工艺条件为浸漂时间5 d,高压蒸制时间1.5 h,砂炒温度210~230℃,姜汁比例8%。炮天雄的单、双酯型生物碱质量分数分别为0.120 5,0.031 1 mg·g-1。结论:优选的岭南炮天雄炮制工艺稳定可行,能进一步规范相关指标,提高生产效率和产品质量,为该药材的大规模生产提供参考。     

基于张仲景学术思想的炮附子4 种炮制方法的比较研究

目的：采用综合评分法比较基于张仲景炮制思想的4种炮附子饮片质量,为炮附子的现代炮制方法提供依据。方法：利用CM-5分光测色计、TMS-Pro质构仪等客观量化检测仪器,以颜色、质地、3种单酯型生物碱含量、麻舌感结合3种双酯型生物碱含量、7种水溶性生物碱含量以及操作简便性为指标,以药典法炮附片为参照,采用综合评分法从古代干热法、现代烘烤法、清炒法和砂烫法中筛选质量较优的炮附子饮片。结果：各指标综合评分结果为：现代烘烤法≈砂烫法>清炒法>古代干热法>药典法。现代烘烤法和砂烫法所制备的炮附 子均可达到内外皆黄、质地酥脆的传统质量要求。与生附片比较,3种双酯型生物碱含量降低88.9%~90.5%,3种单酯型生物碱含量增加255.2%~385.6%;与药典炮附片比较,3种单酯型生物碱和7种水溶性生物碱含量均显著增加。结论：现代烘烤法和砂烫法炮附子毒性成分含量低,有效成分含量高,且无胆巴液浸泡工序、操作简便易行、生产周期短。做为秉承张仲景学术思想且便于现代操作的炮附子炮制方法,值得挖掘与传承。     

附子不同炮制品对四逆汤质效影响的研究

目的:研究不同附子炮制品对四逆汤药效、毒性成分控制及药效学的影响,揭示国家药品标准中使用淡附片炮制品的科学性。方法:取生附片、淡附片、白附片、黑顺片、炮附片分别制备成四逆汤1、2、3、4、5,采用HPLC法测定不同四逆汤中单酯型生物碱、双酯型生物碱、甘草酸、甘草苷和6-姜辣素的含量;采用小鼠急性抗脑缺氧模型,以喘气次数和喘息时间为药效指标,对比不同四逆汤的药效学差异。结果:不同附子炮制品制备的四逆汤中,单酯型生物碱的总含量排列顺序为四逆汤4四逆汤2四逆汤1四逆汤5四逆汤3;双酯型生物碱的总含量排列顺序为四逆汤5四逆汤1四逆汤3四逆汤4四逆汤2;甘草酸和甘草苷的总含量排列顺序为四逆汤3四逆汤5四逆汤1四逆汤4四逆汤2;6-姜辣素的含量排列顺序为四逆汤1四逆汤4四逆汤3四逆汤5四逆汤2;且不同附子炮制品制备的四逆汤中,只有四逆汤2(淡附片)对喘气次数和喘息时间的影响均具有显著差异,有明显的脑缺氧保护作用。结论:从化学成分和药理作用两个方面综合分析,初步揭示了《中国药典》2015年版明确规定四逆汤方中使用淡附片炮制品的合理性和科学性。     

炮附片HPLC特征图谱及炮制前后比较研究＊

目的 建立炮附片HPLC特征图谱，分析炮附片炮制前后物质基础差异。方法 AgilentExtend-C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)；乙腈（A）-40 mM乙酸铵缓冲液(氨水调PH为10.5)（B），梯度洗脱，检测波长为240 nm，柱温为30℃，进样量为20 μL。结果 建立了炮附片HPLC特征图谱。生附子经炮制成为黑顺片后，11个峰的峰面积显著减小，3种单酯型生物碱含量降低，3种双酯型生物碱基本检测不到。黑顺片经砂炒制成炮附片后，3种单酯型生物碱含量进一步降低，且无新成分峰出现。结论 生附子经炮制成为炮附片后，可使生附子的成分发生量变和质变。炮附片与黑顺片特征图谱基本一致，含量略有差别。     

胆巴炮制对附子生物碱类成分的影响研究

目的比较有胆附片与无胆附片的成分异同,探讨胆巴炮制与无胆炮制对附子生物碱类成分的影响。方法采用酸性染料比色法及高效液相色谱法对5种附子炮制品(生附片、黑顺片、熟附片、蒸附片、炒附片)的生物碱类成分进行分析。结果江油产生附片质量最优,去皮可以提高附子中有效成分的相对含量;有胆炮制黑顺片、熟附片均能显著降低毒性成分双酯型生物碱的含量,但同时有效成分单酯型生物碱及总生物碱流失严重;无胆蒸制或炒制附片能有效去除毒性成分并保留有效成分,"去毒存性"能力较好。结论不同炮制方法能不同程度地降低附子毒性成分双酯型生物碱含量,增加有效成分单酯型生物碱含量,达到增效减毒的目的;但有胆炮制附片存在炮制过度之嫌,无胆炮制工艺简便易行,不易引入无机杂质,具有推广和应用价值。     

附子不同炮制品对麻黄细辛附子汤煎剂质量的影响

目的:比较不同附子炮制品制备所得麻黄细辛附子汤(MXF)的质量差异,探析经方中炮制品规格选用的科学性。方法:采用临床常用的5种附子炮制品规格分别制备MXF煎剂,选取MXF中具有效毒二重性的化学成分为评价指标,考察不同附子炮制品对MXF煎剂中效毒成分含量的影响。结果:建立了MXF中13种指标成分的含量测定方法。采用多元统计分析筛选出区别附子不同炮制品制备所得煎剂的指标性成分有卡枯醇、甲基丁香酚、细辛脂素、新乌头碱、次乌头碱和乌头碱。与附子的其他炮制品规格相比,炒附片制备所得煎剂中,双酯型生物碱类成分的含量较低但其单酯型生物碱类成分的含量最高。结论:附子不同炮制品制备所得MXF煎剂中效毒成分的含量存在较大差异,可为经方的古为今用提供参考。     

砂烫生附片与炮附片制备前后6种生物碱的变化

目的研究砂烫生附片代替炮附片(砂烫黑顺片)的可能性。方法泥附子切片制成生附片后砂烫,并观察其外观性状。HPLC法测定单酯型(苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱)和双酯型(新乌头碱、乌头碱、次乌头碱)生物碱总含有量。结果两种炮制品外观性状均无明显差异。砂烫生附片制备前双酯型生物碱总含有量为0.067 5%,制备后降为0.001 5%;炮附片制备前后均检测不到。砂烫生附片制备前单酯型生物碱总含有量为0.014 1%,制备后增至0.038 2%;炮附片制备前为0.019 5%,制备后降为0.011 4%。两者均符合《中国药典》要求(双酯型生物碱总含有量不得超过0.020%)。结论砂烫生附片(仲景制法)具有低毒高效的特点,值得深入研究。     

附子不同炮制方法比较分析△

目的:采用高效液相色谱法分析附子不同炮制品中6个生物碱的含量,研究《中国药典》炮制法、蒸制法、炒制法之间的差异。方法:采用《中国药典》2010年版附子含量测定项下方法检测;运用SPSS17.0统计分析软件进行数据处理。结果:各成分分离良好;蒸附片、炒附片、黑顺片、白附片、淡附片、炮附片中双酯型生物碱的量都得到有效降低,但蒸附片和炒附片中单酯型生物碱的含量明显增加。结论:蒸制法、炒制法与《中国药典》炮制法一样,具有相同的炮制减毒能力,但蒸制法和炒制法又能增加毒性小、疗效好的单酯型生物碱类的量,优于《中国药典》炮制法。     

不同附子炮制品四逆汤化学成分及毒性差异分析

目的 比较生附片、淡附片、阴附片、阳附片4种附子炮制品入方四逆汤化学成分以及毒性差异,为临床安全用药提供科学的依据。方法 分别以阴附片、阳附片、生附片、淡附片制备单味药以及四逆汤汤剂,经UPLC法检测汤剂中乌头碱、新乌头碱、次乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、甘草苷、甘草酸、6-姜酚含量,通过系统聚类分析（hierarchical cluster analysis,HCA）、主成分分析（pricipal component analysis,PCA）和正交偏最小二乘-判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA）对4种四逆汤进行分类分析,再经急性毒性试验和长期毒性试验比较4种附子炮制品四逆汤毒性差异。结果 4种四逆汤中成分含量以及毒性大小存在显著性差异。双酯型生物碱：乌头碱、新乌头碱、次乌头碱含量及其总量高低排序为生附片四逆汤>阴附片四逆汤>阳附片四逆汤>淡附片四逆汤;单酯型生物碱：苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱含量及其总量高低排序为...     

炮制对乌头母根、子根中生物碱类成分的影响与其自身含量差异的比较研究

目的：比较炮制对乌头各部位中生物碱类成分的影响与其自身含量差异。方法：以滴定法测定总生物碱的含量,高效液相色谱法测定三种双酯型生物碱和三种单酯型生物碱的含量。结果：生川乌、生附子中总生物碱的平均含量分别为1．09％,1．33％。生川乌、生附子中三种双酯型生物碱含量总和分别为0．74％,0．96％;生川乌、生附子中三种单酯型生物碱的含量分别为0．032％,0．001％。生川乌炮制后的总生物碱含量为0．55％,三种单酯型生物碱含量为0．125％;附子的两个炮制品,白附片和黑顺片总生物碱含量降低,其含量分别为0．07％和0．05％,白附片、黑顺片中三种单酯型生物碱略有升高,其含量均为0．012％。炮制品中三种双酯型生物碱均未检测到。三种炮制品中总生物碱含量比为,制川乌：白附片：黑顺片＝11∶1．4∶1,三种单酯型生物碱含量比为,制川乌：白附片：黑顺片＝10．5∶1∶1。结论：乌头不同部位中生物碱的含量差异较小,炮制后生物碱类成分含量变化较大。炮制对乌头不同部位中生物碱类成分的影响要大于其自身含量差异。     

附片质量标准研究

目的:研究提高附片的质量标准。方法:按照2010年版《中国药典》方法测定附片中总灰分和酸不溶性灰分;采用RP-HPLC法测定附片中双酯型生物碱和单酯型生物碱的含量。色谱条件为Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相0.1 mol.L-1醋酸铵溶液(每1 000 mL加0.5 mL冰醋酸)为A相,乙腈-四氢呋喃(25∶15)为B相,梯度洗脱,检测波长235 nm。结果:附片中总灰分、酸不溶性灰分含量差异很大;单酯型生物碱总量较为稳定,而双酯型生物碱总量相差较大,提示应制定附片中双酯型生物碱的含量幅度范围。结论:本法操作简便、可行,结果稳定,为附片质量控制提供参考方法。     

附子炮制品水煎液对比格犬心脏急性毒性研究

目的:比较附子不同炮制品(刨附片、炮天雄、黑顺片)对比格犬的心脏急性毒性的影响。方法:比格犬16只,随机分为空白对照组、刨附片组、炮天雄组、黑顺片组,按照4g生药/kg灌胃比格犬浓缩液,检测灌胃前和灌胃后1h,1d、3d、7d和14d后比格犬体重、体温变化和心电图心率变化,并测定血液中乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)的含量。结果:给药后1h内黑顺片组犬出现呕吐,其余组未观察到症状;给药后14d内比格犬体重、体温正常,给药组乳酸脱氢酶和肌酸激酶同工酶含量,心电图心率与空白组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:刨附片,炮天雄,黑顺片水煎液按照4g生药/kg给犬灌胃,没有明显心脏毒性。     

附子保健品刨附片及炮天雄的急性毒性研究

目的:测定灌胃炮天雄和刨附片对小鼠的急性毒性。方法:待禁食不禁水12h后,各组24h内一次性给药,其中刨附片、炮天雄组均分别灌胃刨附片水煎液25.2g生药/kg或炮天雄水煎液27.2g生药/kg,正常对照组灌胃蒸馏水,给药体积均为40ml/kg,给药后观察并记录小鼠一般行为活动、体重、饮食及死亡等情况,连续观察14d。结果:刨附片组小鼠和炮天雄组小鼠无死亡,一般状态正常,无明显异常行为或变化,体重和摄食量逐日增长,与正常对照组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:刨附片、炮天雄水煎液灌胃小鼠均无明显急性毒性,最大给药量分别为25.2、27.2g生药/kg,若按附子临床人用量为15g/日算,均大于人用量的100倍。     

微波炮附子炮制工艺影响因素研究

目的探究微波炮附子炮制过程的主要工艺影响因素,为工业化开发奠定基础。方法通过水分比、干燥速率及耗能研究微波炮附子的干燥过程,并以微波炮附子形态以及双酯型生物碱、单酯型生物碱、醇胺型生物碱含量为指标,考察生附片切片厚度、含水量、微波功率、炮制时间对微波炮附子工艺的影响。结果生附片厚度、复水率、微波功率、炮制时间对微波炮附子炮制过程及生物碱含量均有影响。厚度为5 mm,干燥时间短,干燥速率快,耗能小,但是双酯型生物碱含量高,总生物碱含量损失较大。生附片复水率为60%时,干燥时间最短,平均干燥速率为复水率100%复水率60%复水率80%复水率40%;双酯型生物碱含量为复水率60%复水率100%复水率80%复水率40%;总生物碱含量为复水率60%复水率80%≈复水率100%复水率40%;复水率对耗能影响不明显。炮制时间相同时,在微波功率为550 W条件下,微波炮附子干燥时间最短,干燥速率快,双酯型乌头碱含量低,总生物碱含量高,但是随着炮制时间的增加,高功率条件下的附子更容易被炮焦。结论适宜的附片厚度、复水率、微波功率以及炮制时间有助于附子充分减毒,提升微波炮附子产品质量。生附片切片厚度宜选择3 mm,复水率为60%～80%,炮制时间根据微波功率增加,适当减小。     

附子不同炮制品灌胃Beagle犬的急性毒性研究

目的：探讨附子不同炮制品灌胃Beagle犬的急性毒性。方法：取健康、合格Beagle犬16只,按体质量随机分为空白组、刨附片组、炮天雄组和黑顺片组。以4 g生药/kg灌胃给药,实验前及给药后1 h、24 h和第3、7、14天测定体质量、耗食量、肛温、心电图及血常规、血生化。结果：3个实验组Beagle犬在给药后均精神萎靡,血液电解质有显著性差异,其中黑顺片组最明显;刨附片组犬的红细胞、血糖和甘油三酯有显著性差异;炮天雄组犬的淋巴细胞和血糖有显著性差异,而黑顺片给药后犬的淋巴细胞显著降低。结论：3个炮制品毒性大小依次为黑顺片>刨附片>炮天雄。     

不同炮制工艺对附子生物碱类成分的影响

目的研究不同炮制工艺对附子生物碱类成分的影响。方法采用酸性染料比色法及高效液相色谱法对附子不同炮制品的生物碱类成分进行分析。结果江油产的生附片质量最优;去皮可以提高附子中有效成分的相对含有量;与传统白附片有胆巴的炮制工艺相比,采用无胆巴炮制工艺得到的白附片,总生物碱、单酯型生物碱、双酯型生物碱含有量均较高,保存药效的同时,去毒能力不足;熟附片的蒸制时间较长,生物碱类成分的含有量低于白附片,可能蒸制时间较长会造成生物碱类成分流失;经对市售的有胆附片与无胆附片检测分析,无胆蒸制或炒制附片去毒存性效果较好,且工艺简单、不易引入无机杂质。结论不同炮制工艺均能不同程度的降低附子的毒性成分双酯型生物碱含有量,增加有效成分单酯型生物碱含有量,达到增效减毒的目的。     

中药天雄炮制品的生物碱含量及其急性毒性(LD_(50))变化的初步研究

本文对香港地区中医常用中药天雄生品炮制品生物碱含量和急性毒性变化进行初步研究,发现炮天雄剧毒双脂类生物碱含量未超过中毒限量,LD_(50)数据亦表明炮天雄几乎没有毒性。     

中药炮天雄质量标准提升与完善研究

目的:提升和完善中药炮天雄的质量标准。方法:采用经验鉴别对炮天雄性状进行描述;增加显微鉴别观察炮天雄粉末显微特征;采用薄层色谱法,分别以苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头碱、次乌头碱进行定性鉴别;检查项包括水分、总灰分和酸不溶性灰分;增加了浸出物项;含量测定采用高效液相色谱法,HPLC条件为以乙腈为流动相A,以0.4mol/L醋酸铵溶液(调pH=8±0.1)为流动相B,进行梯度洗脱(0~45min,30%~45%A),检测波长为235nm,柱温为25℃,流速为0.8mL/min。结果:炮天雄性状、粉末显微鉴别、薄层鉴别方法具有较好的专属性,水分含量为7.95%~13.67%,总灰分含量为0.81%~1.13%,酸不溶性灰分含量为0.012%~0.270%,水溶性浸出物含量为15.71%~64.14%,醇溶性浸出物含量为5.31%~24.58%。含量测定中苯甲酰新乌头原碱含量为0.008 8%~0.039 1%,苯甲酰乌头原碱含量为0.0001%~0.0018%,苯甲酰次乌头原碱含量为0.0011%~0.0068%,新乌头碱含量为0~0.0026%,次乌头碱含量为0~0.0053%,乌头碱含量为0~0.0075%。结论:本实验制定的炮天雄定性定量检测方法可靠,结果准确科学,确定了苯甲酰新乌头原碱、单酯型生物碱和双酯型生物碱含量限度,进一步完善了炮天雄质量标准。