荆芥饮片HPLC指纹图谱研究

目的 利用高效液相色谱法,建立荆芥饮片的指纹图谱.方法 色谱条件为Agillen Extend C18柱(4.6 mm×250mm,5 μm);流动相A0.5‰三氟乙酸-B乙腈;洗脱方法为0～40 min,A为95%～60%;40 min～60 min,A为60%～40%,60～61 min,A为40%～95%,保持4 min;体积流量为1.0 mL/min;柱温为30℃;检测波长270 nm;进样量20μL.结果 对10批荆芥饮片进行测定,标定共有峰,采用<中药色谱指纹图谱相识度评价系统2004A版>软件计算出其相似度范围在0.971～0.992,并得出了荆芥饮片的对照指纹图谱.结论 该法准确,重现性好,可作为荆芥饮片质量控制方法.     

茜草饮片HPLC指纹图谱研究

目的:利用高效液相色谱法,建立茜草饮片的指纹图谱.方法:色谱条件,Hanbon Kromasil C18柱(4.6 mm× 250mm,5 μm);流动相A为乙腈,B为0.1％三氟乙酸;洗脱方法(0～ 30 min,10％～25％A;30 ～ 35 min,25％ ～50％A;35～55min,50％～65％A;55 ～ 70 min,65％ ～95％ A;70 ～75 min,95％ ～ 10％A).体积流量1.0 mL·min-1;柱温30℃;检测波长240nm;进样量10μL.结果:对10批茜草饮片进行测定,标定出15个共有峰,采用《中药色谱指纹图谱相识度评价系统2004A版》软件计算出其相似度范围在0.824 ～0.989,并得出了茜草饮片的对照指纹图谱.结论:该法准确,重复性好,可作为茜草饮片质量控制方法.     

回心草药材HPLC指纹图谱研究

目的 建立回心草药材的指纹图谱.方法 采用反相高效液相色谱,色谱条件为:Dikma Platisil ODS C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相A:0.5%醋酸乙腈,B:0.5%醋酸水溶液;洗脱方法:0～50 min,A为20%～55%;50～60 min,A为55%～95%,60～85 min,A为95%～100%,保持5 min;体积流量1.0 mL/min,波长360nm.柱温:30℃,运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004版(国家药典委员会)进行分析.结果 构建了回心草药材的指纹图谱.结论 该法准确.重现性好,可作为回心草药材的质控方法.     

基于谱效关系的太白楤木质量评价研究

采用HPLC指纹图谱与体外抗氧化活性相关联,建立谱效关系,旨在完善太白楤木质量评价体系。采集12批次样品的指纹图谱,通过相似度评价、热图分析和主成分分析对指纹图谱数据进行化学计量研究。结合灰色关联度分析,明确指纹图谱共有峰对抗氧化活性的贡献程度,确定反映药效的重要特征峰。结果表明12批次太白楤木样品确认了17个共有峰,并指认了其中6个峰,均为皂苷类成分。相似度分析、热图分析和主成分分析将太白楤木药材大致分为2类,S1～S10和S12为一类,S11则单独聚为一类。12批次样品均具有不同程度的抗氧化活性,并呈剂量依赖性。其中,S9抗氧化活性最强,S11抗氧化能力最弱,与综合得分结果基本一致。灰色关联度分析结果显示,17个共有峰清除DPPH自由基的关联序为X_3X_(17)X_4X_8X_7X_(13)X_2X_6X_(11)X_(10)X_(16)X_(12)X_9X_5X_(14)X_1X_(15),清除ABTS自由基的关联序为X_4X_3X_7X_8X_2X_(17)X_(13)X_6X_(16)X_(11)X_5X_(12)X_(10)X_9X_(14)X_1X_(15)。其中,X_3、X_4、X_7(楤木皂苷C)、X_8和X_(17)是反映其药效的重要特征峰,与主成分1中所包含重要峰信息基本一致。该研究通过太白楤木12批次HPLC指纹图谱与抗氧化活性之间的相关性研究,可为太白楤木质量标志物筛选以及质量控制提供参考。     

经典名方泻白散物质基准HPLC指纹图谱的建立及3种指标成分含量测定

目的建立经典名方泻白散物质基准HPLC指纹图谱以及3种指标成分桑皮苷A、甘草苷、甘草酸含量测定方法。方法指纹图谱色谱条件:检测波长254 nm/325 nm,柱温35℃;体积流量0.8 mL/min;进样量25μL;流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈,二元梯度洗脱:0～20 min,5%～10%乙腈;20～33 min,10%～15%乙腈;33～50 min,15%～20%乙腈;50～95 min,20%～58%乙腈。采集10批次泻白散物质基准指纹图谱,采用中国药典委员会"中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012版"软件对其进行评价。含量测定色谱条件:检测波长237 nm,柱温30℃;体积流量1.0 mL/min;进样量5μL;流动相为0.1%磷酸水溶液-乙腈,二元梯度洗脱:0～10 min,5%～20%乙腈;10～18 min,20%～60%乙腈;18～26 min,60%～100%乙腈;26～38 min,100%乙腈;38～41 min,100%～5%乙腈;41～45 min,5%乙腈。结果根据匹配结果,在254 nm波长下确定了55个共有峰,在325 nm波长下确定了57个共有峰。在共有峰中共指认桑皮苷A(S)、甘草苷、甘草酸铵3种物质。经过方法学研究,其精密度、稳定性、重现性良好。对10批次泻白散物质基准指纹图谱进行评价,结果与对照指纹图谱之间相似度均大于0.9。桑皮苷A、甘草苷、甘草酸铵含量测定方法的平均加样回收率分别为97.82%、97.40%、105.81%,RSD分别为4.41%、2.51%、1.19%,均满足《中国药典》2015年版要求,3种成分分别在25.25～2525、25～2 500、8.5～850 ng线性关系良好,精密度、稳定性、重复性良好。对10批次泻白散物质基准进行含量测定,其中桑皮苷A质量分数为11.6～35.5 mg/g,甘草苷质量分数为0.1～1.6 mg/g,甘草酸质量分数为0.3～2.5 mg/g,3种成分含量差异较大,说明不同产地的桑白皮、甘草药材质量差异较大。结论建立经典名方泻白散物质基准HPLC指纹图谱及多指标成分含量测定的方法,为泻白散物质基准质量标准研究提供依据。     

紫红参的HPLC指纹图谱研究

目的:采用高效液相色谱法(HPLC)建立紫红参的指纹图谱。方法:色谱柱:Aglient Zorbax SB-Aq(5μm,250 mm×4.6 mm);流动相:乙腈(A)-水(B),梯度洗脱0～25 min 20%～60%A;25～40 min 60%～90%A;检测波长203 nm;柱温:35℃;流速:1.0 mL/min;进样体积:10μL。结果:在选定的色谱条件下,通过相似度分析软件确定了紫红参指纹图谱有12个共有峰。10批紫红参样品整体相似度较高,相似度为0.885～1.000。结论:实验中所建立的方法稳定、可靠,为紫红参的质量评价与控制提供了依据。     

元胡止痛片HPLC指纹图谱研究

目的建立元胡止痛片HPLC指纹图谱。方法采用Extent C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.1%磷酸溶液(三乙胺调pH 6.5,A)-甲醇(B),梯度洗脱程序为:0～45 min,88%～40%A;45～70 min,40%～20%A;70～75 min,20%～10%A;75～80 min,10%～5%A;80～85 min,5%A;检测波长280 nm,柱温35℃,体积流量1.0 mL/min。结果在HPLC色谱指纹图谱中,确定了16个共有峰,建立了元胡止痛片的共有模式,在14批元胡止痛片样品中有10批样品的指纹图谱相似度在0.9以上。结论本法结果准确、重现性好,为元胡止痛片HPLC指纹图谱质量控制提供了参考。     

麻仁丸高效液相特征指纹图谱研究

目的:建立麻仁丸的HPLC特征指纹图谱分析方法,为全面评价产品质量提供依据。方法:采用HPLC法,色谱柱为Agilent ZORBAX SB C18(4.6×250 mm,5μm);流动相:甲醇水溶液为流动相,梯度洗脱:A相为水相,B相为甲醇相。0～3 min,A相95%;3～15 min,A相95%～75%;15～30 min,A相75%～65%;30～38 min,A相65%;38～60min,A相65%～47%;60～75 min,A相47%～10%;75～85 min,A相10%。流速:1 mL/min;检测波长:230 nm;柱温:30℃;进样量:5μL。结果:采用《中药色谱特征图谱相似度评价系统》进行分析,建立了麻仁丸HPLC特征指纹图谱的共有模式,对苦杏仁、大黄、枳实的特征色谱峰进行了归属。结论:该方法简单、快速、重复性好,对麻仁丸的整体质量提出了更高的要求,为质量控制和评价标准提供了充分的依据。     

广西不同产区两面针HPLC指纹图谱研究

目的 采用高效液相色谱法建立两面针的HPLC色谱指纹图谱分析方法,为其品质控制提供可靠依据.方法 采用HPLC-UV分析两面针的指纹图谱.色谱柱:UltimateTMXB C8柱(250 nn×4.6 mm,5μm);流动相为水(0.2％磷酸+0.2％三乙胺)(A)-乙腈(B),梯度洗脱;0～5 min,8％～12％ B; 5～7 main,12％～15％B;7～14 main,15％～21％ B; 14～35min,21％～25％B; 35～40min,25％～36％B; 40～60min,36％～52％B; 60～80min,52％～100％B; 80～95min,100％B;体积流量1.0 mL/min柱温35℃;检测波长250 nm,测定24批两面针指纹图谱,应用相似度分析、系统聚类分析,对两面针进行分类研究.结果 在色谱指纹图谱中,确定了22个共有峰,根据相似度分析、系统聚类分析的结果,将24批药材分为2类.结论 该指纹图谱检测方法方便,重现性好,可用于两面针质量控制.     

五灵脂药材的HPLC指纹图谱分析

目的:建立五灵脂药材的HPLC指纹图谱.方法:采用HPLC法,色谱柱Diamonsil ODS C18 (4.6 mm ×250 mm,5 μm);流动相乙腈(A)-0.5％冰醋酸水溶液(B);梯度洗脱(0～ 15 min,85％ ～ 65％B,15～35 min,65％ ～ 40％B,35 ～ 40min,40％～25％B,40～ 60 min,25％ ～ 10％B,60 ～65 min,10％～0％B;检测波长265 nm;流速0.8 mL· min-1;柱温室温.结果:建立了五灵脂药材的HPLC指纹图谱,标定了14个共有峰,并用对照品指认了其中3个峰,10批样品的相似度均大于0.90.方法的精密度、稳定性和重复性良好.结论:建立的五灵脂药材指纹图谱特征性及专属性强,可为其质量控制和药效物质基础研究提供参考.     

小金丸脂溶性和水溶性部位的HPLC指纹图谱分析

目的:建立小金丸脂溶性部位、水溶性部位的高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱并进行指纹图谱相似度评价,探讨小金丸的质量一致性。方法:采用Welch Ultimate AQ-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相选择0.1%磷酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱(脂溶性部分:0～5 min,40%B;5～10 min,40%～50%B;10～20 min,50%～60%B;20～30 min,60%～65%B;30～40 min,65%～70%B;40～50 min,70%～80%B;50～60 min,80%～90%B;60～65 min,90%～95%B;65～75 min,95%～100%B;75～80 min,100%B。水溶性部分:0～20 min,2%～5%B;20～30 min,5%～10%B;30～37 min,10%～20%B;37～45 min,20%～30%B;45～50 min,30%～40%B;50～58 min,40%B),流速1 mL·min~(-1),柱温30℃,脂溶性部位和水溶性部位的检测波长分别设定为202,250 nm,进样量依次为10,20μL。对5个厂家共30批市售小金丸进行HPLC检测,使用主成分分析(PCA)对各部位色谱峰进行分析,并对色谱峰进行指认。结果:指纹图谱共检测出55个色谱峰,30批小金丸指纹图谱相似度差异较大。小金丸脂溶性部位、水溶性部位的指纹图谱相似度RSD分别为21.5%和32.8%,厂家间与厂家内样品质量差异较大,且脂溶性部位成分主导小金丸化学一致性评价结果,其中,来自枫香脂的成分是影响该制剂化学差异的主要原因。结论:市售小金丸质量一致性较差。双部位指纹图谱的建立为小金丸整体质量评控提供了新思路,可为传统丸剂的质量一致性评价提供参考。     

基于谱-效关系的辽东楤木叶质量评价研究

目的 建立辽东楤木Aralia elata叶指纹图谱,并寻找能够反映辽东楤木叶抗肿瘤活性能力的质量评价方法。方法采用70%乙醇和水饱和的正丁醇提取各批次辽东楤木叶总皂苷,运用HPLC-ELSD测试分析皂苷并建立指纹图谱,MTT法测试楤木叶总皂苷和单体皂苷对人肺腺癌A549细胞、人肝癌SMMC-7221细胞、人结肠癌HT-29细胞的抑制作用,用灰色关联法分析指纹图谱峰与抗肿瘤作用之间的关系。结果 建立了含有28个共有峰的辽东楤木叶HPLC-ELSD指纹图谱,各批次图谱与共有模式图谱间相似度在0.850以上,指认并归属其中5个峰成分。各批次楤木叶总皂苷抗肿瘤作用的半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC₅₀)为7.39～79.13 mg/L,其中,黑龙江凤凰山7月的样品抗肿瘤效果最佳。谱-效相关性表明28个共有峰成分与抗肿瘤活性的关联度为0.469 2～0.810 3,其中10个成分与抗肿瘤活性间的关联度大于0.70,8个成分与抗肿瘤活性间的关联度小于0.60。图谱中有2个峰成分在各批次药材中含量都相当大,但谱-效关联度却很小。5...     

黔产钩藤药材茎枝和叶的HPLC指纹图谱比较

目的:比较黔产钩藤带钩茎枝和叶的HPLC指纹图谱,分析二者化学成分的差异,为钩藤叶的后续研究提供实验依据。方法:采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》2004A版计算钩藤带钩茎枝和叶各10批样品的HPLC指纹图谱的相似度,以钩藤碱和异钩藤碱为指标成分进行指纹图谱比较,色谱条件为Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇(A)-0.02%氨水(B)梯度洗脱(0~45 min,30%~60%A;45~75 min,60%~64%A;75~90 min,64%~70%A;90~95 min,70%~70%A),流速1.0 mL·min-1,柱温30℃,检测波长245 nm,进样量10μL。结果:确定了16个共有峰构成10批钩藤茎枝药材的特征指纹图谱,各批样品的相似度均>0.87;16个共有峰构成10批钩藤叶特征指纹图谱,各批样品的相似度均>0.80。结论:钩藤叶中异钩藤碱含量高于钩藤茎枝,但二者含有的钩藤碱含量相差不大。建立的指纹图谱条件能用于比对钩藤茎枝和叶中主要化学成分,为钩藤叶的药用研究提供参考。     

基于灰色关联度分析和聚类分析的3种滇产重楼抗肝癌作用谱效关系探索

目的:研究长柱重楼、滇重楼和南重楼的HPLC指纹图谱与其抗肝癌作用的谱效关系,为明确重楼抗肝癌作用的物质基础提供实验依据。方法:采用HPLC建立3种重楼提取物的指纹图谱,流动相乙腈(A)-水(B)梯度洗脱(0～10 min,20%A; 10～20 min,20%～25%A; 20～30 min,25%～30%A; 30～40 min,30%～35%A; 40～50 min,35%～40%A; 50～60 min,40%A; 60～75 min,40%～45%A; 75～80 min,45%～60%A),流速0. 9 m L·min~(-1),检测波长203 nm;利用噻唑蓝(MTT)比色法测定3种重楼提取物对肝癌HepG2细胞的增殖抑制作用,计算半数抑制浓度(IC_(50));运用聚类分析(HCA)和灰色关联度分析(GRA)研究3种重楼指纹图谱和抗肝癌作用的关系,找出对抗肝癌作用贡献较大的成分。结果:在3种重楼的HPLC指纹图谱中,确定其中11个色谱峰为共有峰。作用时间72 h时长柱重楼、滇重楼、南重楼的IC_(50)分别为148. 33,178. 87,208. 09 mg·L~(-1),其中长柱重楼的抗肝癌活性最强。灰色关联度结果显示,滇重楼共有峰中关联度较高的为1～10号峰,长柱重楼共有峰关联度较高的为1～7号峰,南重楼共有峰中关联度较高的为1～4,6～10,N1号峰,与IC_(50)关联度均0. 7。各重楼变量的聚类分析结果显示,可与IC_(50)聚为一类的色谱峰的关联度均 0. 7。结论:建立了3种重楼的HPLC指纹图谱,重复性良好。3种重楼中的1～4,6和7号色谱峰对抗肝癌药效贡献最大。     

基于指纹图谱结合多模式化学计量学方法评价补骨脂药材质量

目的采用指纹图谱并结合多种化学计量方法,筛选特征化学成分,区分不同来源的药材,综合评价中药的质量。方法采用HPLC法建立补骨脂药材指纹图谱,相似性分析(similarity analysis,SA)、聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)化学计量方法进行分析。色谱柱为Waters X Select HSS T3 xp(150mm×2.1 mm,2.5μm),流动相为乙腈(A)-水(B),梯度洗脱,0~10 min,5%~10%A;10~15 min,10%~35%A;15~25 min,35%~60%A;25~35 min,60%~85%A;35~50 min,85%~95%A;体积流量0.3 mL/min,检测波长为246nm,柱温为30℃,进样量为1μL。以补骨脂素为参照,绘制11批样品的HPLC图谱,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2012年版)》进行相似性评价分析,确定共有峰,并采用SIMCA 13.0、SPSS 22.0软件进行HCA和PCA。结果 11批补骨脂样品的HPLC图谱有12个共有峰,根据相似度均在是否大于0.95,可将11批次药材分为2类;采用HCA的2种计算方法,分类结果基本一致,说明样品的一致性良好;3个主成分因子的累积方差贡献率为94.524%,以S8样品的主成分因子综合得分最高、整体质量最好。结论所建HPLC指纹图谱的相似度分析及聚类分析和主成分分析方法结果可为补骨脂药材的质量控制提供参考。     

经典名方苓桂术甘汤HPLC指纹图谱的建立及3种成分含量测定

目的建立经典名方苓桂术甘汤HPLC指纹图谱及3种成分含量测定方法,为经典名方苓桂术甘汤物质基准的研究提供参考。方法色谱柱为CNW Athena C18(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0～10 min,5%～10%A;10～20 min,10%～15%A;20～50 min,15%～30%A;50～75 min,30%～40%A;75～95 min,40%～50%A;95～111 min,50%～95%A),体积流量为1.0 mL/min,进样量为10μL,柱温30℃。指纹图谱及甘草苷、甘草酸铵含量测定的检测波长为230 nm,桂皮醛为290 nm。采用国家药典委员会出版的"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2012年版),建立10批苓桂术甘汤指纹图谱,并使用HPLC法同时测定3种指标成分含量。结果对10批苓桂术甘汤进行研究,其指纹图谱相似度均大于0.9,标定了24个共有峰,各峰分离度较好。含量测定结果表明其甘草苷、甘草酸铵含量较高。经方法学考察,3种成分在一定浓度范围内呈良好的线性关系;精密度RSD值均小于1.0%;甘草苷、桂皮醛、甘草酸铵的平均加样回收率分别为98.35%、101.51%、102.59%,RSD均小于2.5%;样品在48 h内稳定;方法的重复性良好。结论建立的经典名方苓桂术甘汤指纹图谱及3个成分的含量测定方法简便、稳定、准确可靠,可用于苓桂术甘汤物质基准的质量控制。     

宫血宁胶囊HPLC指纹图谱研究

目的 本研究建立宫血宁胶囊(重楼)的HPLC指纹图谱分析方法,为宫血宁胶囊内在质量评价积累数据.方法 采用RP-HPLC方法,以Agilent Series SB-AQ C1s色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相为乙腈(A)-水(B),梯度洗脱程序为5～50 min,20％～42％A;50～70 min,42％～44％A;70～100 min,44％～80％A;100～120 min,80％～95％A;洗脱时间为120 min;检测波长203 nm;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;进样量10μL,进行指纹图谱研究.结果 建立宫血宁胶囊指纹图谱,以重楼皂苷H色谱峰为参照峰,确定12个共有峰,测定了60批样品,样品指纹图谱相似度均大于0.99.结论 本法操作简便、分离效果好、稳定性高、重现性好,可应用于宫血宁胶囊的质量控制及真伪品鉴别.     

淫羊藿黄酮类成分指纹图谱研究

目的建立淫羊藿中黄酮类成分HPLC指纹图谱。方法采用Agilent ZORBAX Eclispse SB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以乙腈(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱(0～8 min,15%→25%A;8～25 min,25%A;25～32 min,25%→33%A,32～48 min,33%→38%A;48～60 min,38%→60%A;60～70 min,60%→85%A;70～75min,15%A),流速1.0m L/min,柱温30℃,检测波长为270nm,进样量10μL。对11批淫羊藿指纹图谱进行相似度分析及方法学考察。结果 11批淫羊藿药材有21个共有峰,相似度为0.845～0.952,对5个色谱峰进行了归属;方法学考察结果表明,建立的分析方法重复性、精密度、稳定性良好;相似度分析将11批淫羊藿分为4大类,与淫羊藿物种鉴定结果一致。结论不同产地淫羊藿有一定的相似性,HPLC指纹图谱能够为淫羊藿的物种鉴定及内在质量评价提供依据。     

辽东楤木叶红外光谱指纹图谱分析

目的:对辽东楤木叶药材50%乙醇提取物进行红外光谱分析,建立红外光谱指纹图谱,并分析不同地区不同采收期辽东楤木叶的差别。方法:采用傅里叶红外光谱法对辽东楤木叶提取物干燥品进行红外光谱测试,生成红外指纹图谱共有模式,进行二阶导数分析,并采用SPSS19.0软件对不同批次红外光谱进行相似度分析和聚类分析。结果:建立了东北地区辽东楤木叶指纹图谱,得到18个共有特征峰。确定5、6月份辽东楤木叶成分少、且某些成分含量低,7～9月份的辽东楤木叶相似度大。结论:简单、快捷的辽东楤木叶红外指纹图谱可辅助用于辽东楤木叶质量评价。从红外光谱指纹图谱来看,7、8、9月采收的辽东楤木叶符合药用标准。     

夏枯草HPLC指纹图谱的研究

目的 建立夏枯草HPLC指纹图谱分析方法.方法 采用高效液相色谱法,色谱柱为Betasil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)柱,以乙腈-0.1%磷酸梯度洗脱,0～50 min时乙腈10%→25%,50～60 min时乙腈25%→32%;体积流量为0.7 mL/min;检测波长为210 am,柱温25℃.结果 建立了夏枯草的指纹图谱,确定了16个共有峰,各夏枯草样品指纹图谱与对照指纹图谱相似度均在0.95以上,可以用于夏枯草药材的定性鉴别.结论 此方法简单、准确、重现性好,为夏枯草的质量控制标准提供了有效的方法.