黑曲霉产高酶活纤维素酶突变株ZM-8的筛选

对航空诱变的一株黑曲霉(Aspergillusniger)进行筛选,得到纤维素酶高产突变株ZM-8。以玉米秸秆粉为主要碳源,经固体发酵培养,测得其滤纸酶(FPA)酶活力为110.2U/g、纤维二糖水解酶(C1)酶活力为389.9U/g、葡聚糖内切酶(CMCase)酶活力为489.3U/g、β-葡葡糖苷酶(β-Glase)酶活力为1208.1U/g,比出发菌株各组分的酶活力分别高了2.1、3.5、1.7、1.8倍。经过5次继代固体发酵试验,证明该菌株具有较好的产酶稳定性,可作为以农作物秸秆为原料生产单细胞蛋白(SCP)饲料的优良菌株。     

纤维素酶产生菌黑曲霉0113L9株的选育

用马铃薯葡萄糖琼脂培养基和查别克氏培养基,从发霉秸秆和草底土中分离出纤维素酶产生菌—黑曲霉0113株和0158株;用亚硝基胍对分离株进行诱变,获得黑曲霉0113L9突变株;其滤纸崩溃时间、棉花酶活力、羧甲基纤维素钠酶活力分别比出发菌株提高4、6.4和8倍。     

黑曲霉ZM-8菌株产纤维素酶的固态培养基组分优化

本试验以玉米秸秆粉为主要原料,研究了麸皮添加量、氮源、含氮量、含水量和接种量等因素对一株经航天诱变筛选出的高产纤维素酶菌株黑曲霉ZM-8产纤维素酶的影响.并在确定了最佳氮源的基础上对其他各组分采用正交试验进行了优化.结果表明,其最佳固态培养基组分为:氮源为(NH4)3PO4,含氮量0.6%,含水量250%(m/m),玉米秸秆粉与麸皮质量比为4:1,接种量1:30.在优化后的培养基组分上测定的滤纸酶(FPU)酶活和内切β-1,4葡聚糖酶(CMC)酶活分别为3.32 U/g和12.48 U/g,比优化前分别提高了约50%和56%.     

饲用纤维素酶高产真菌的筛选

<正> 纤维素酶是降解纤维素的一组酶系的总称,它不是单种酶,而是起协同作用的多组分酶系。其中3种主要酶分别是:内切葡聚糖酶(Cx或CMC酶),外切葡聚糖酶(C1酶)和β-葡萄糖苷酶。3类酶在发挥作用时表现出协同效应,尤其是C1+Cx的组合表现出     

纤维素酶产生菌黑曲霉O113L9株的选育

用马铃薯葡萄糖琼脂培养基和查别克氏培养基，从发霉秸秆和草底土中分离出纤维毒酶产生菌一黑曲霉O113株和O158株；用亚硝基胍对分离株进行诱变，获得黑曲霉O113L9突变株；其滤纸崩溃时间，棉花酶活力，羧甲基纤维素钠酶活力分别比出发菌株提高4，6．4和8倍。     

纤维素酶高产菌的分离筛选与培养基优化

以纤维素粉为惟一碳源,从取自某木材公司木材堆放处的土样中筛选出92株能够分解纤维素的菌株,采用刚果红鉴别培养基进行鉴定,选取透明圈较大的菌株10株进行液体培养,并测定它们的酶活,获得一株酶活高的里氏木霉FYFJ928,其发酵水平为8.3 IU/mL.进一步研究培养基组分及培养条件对里氏木霉FYFJ928摇瓶发酵产纤维素酶的影响,在培养温度28 ℃,转速为200 r/min条件下进行培养,其最佳培养基组成:0.5%酵母粉,0.06%硫酸镁,0.5%磷酸二氢钠,2%葡萄糖,2%玉米浆,0.5%硫酸铵和8%纤维素粉,培养6 d后,其发酵水平可达到15.6 IU/mL,比优化前提高了近1倍.     

黑曲霉发酵玉米秸秆产纤维素酶的研究

通过单因素试验和L9(34)正交试验对黑曲霉3.3148固态发酵玉米秸秆产纤维素酶的工艺条件进行研究。结果表明,最佳发酵温度31℃,接种量15,装瓶量186g/瓶,发酵时间8.5d。其发酵玉米秸秆产品中CMCase和FPase酶活力达29.94和13.56IU/g;粗蛋白含量为11.26,比发酵前提高79.29;粗纤维和中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维分别为24.45、45.24和37.04,分别比发酵前降低29.01、12.90和19.29。发酵出来的产物具有芳香气味,适口性较发酵前有较大的改观。     

产纤维素酶真菌的筛选与鉴定

为从秸秆中分离出能够降解纤维的菌株,试验采取秸秆样品接种马铃薯琼脂培养基,在室温环境下培养,取分离菌接种纤维素刚果红琼脂培养基,筛选能形成较大降解圈的细菌,并进行形态学和分子生物学鉴定,测定其纤维素酶性质。结果表明,经分子生物学鉴定,筛选菌为黑曲霉菌,该菌在室温环境能够生长,菌株降解圈直径(H)与菌落直径(C)的比值(H/C)为7.64。筛选菌在20 ℃环境下培养5 d酶活达到最高值,为42.18 U/mL。纤维素酶最适pH为7.0,最适反应温度为20 ℃,在20~40 ℃或pH 6.0~8.0环境下作用1 h,相对酶活力仍保持在90%以上。综上所述,本试验分离的黑曲霉菌株是低温产纤维素酶菌株,产酶能力较强,具有潜在的开发价值。     

一株纤维素酶产生菌SWU6菌株的筛选鉴定

为寻找高效纤维素降解菌,用于蚕沙及桑树废弃枝条等的加工处理,本研究以羧甲基纤维素钠(CMC-Na)为唯一碳源,从西南大学校园土壤中分离纤维素降解菌。结合测定菌株在羧甲基纤维素钠平板上形成水解圈直径与其菌落直径的比值,及胞外酶活测定法(DNS法)筛选获得一株纤维素酶高产菌株SWU6。该菌株24h发酵液上清液经DNS法检测纤维素酶活力达到136.24U/mL。菌种鉴定结果表明SWU6菌株为革兰氏阳性芽孢杆菌;过氧化氢酶、硝酸盐还原呈阳性;能水解淀粉、液化明胶。基于16SrDNA的系统发育分析结果表明SWU6菌株与登录号为NR 116240的甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)处于进化树的同一最小分支。综合菌体及菌落形态特征、生理生化实验结果以及基于16SrDNA的系统发育分析,将SWU6菌株鉴定为甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)。     

航天诱变菌株黑曲霉ZM-8降解小麦秸秆产纤维素酶条件的优化

在确定了影响航天诱变黑曲霉ZM-8菌株在小麦秸秆为主要原料产纤维素酶的各单因素基础上,采用正交试验分别对其培养基组分和培养条件进行优化。试验结果表明:含氮量和加水量是影响产酶的最主要因素,其产酶培养基组分的最优组合为:最佳氮源为碳酸铵、含氮量1.4%、料水比为1∶2、小麦秸秆粉与麸皮之比为4∶1;培养时间和培养温度是影响产酶的最主要环境因子,其产酶的最佳培养条件为:培养温度为28℃、培养时间为96 h、pH值为6.5、接种量为4%;在优化的培养基配方和培养条件下,其FPU和CMC的酶活分别为6.57 U/g和22.38 U/g。     

培养条件对黑曲霉产酶的影响

在玉米秸秆粉和麸皮组成的培养基上对黑曲霉进行固体培养,研究不同秸秆粉∶麸皮配比及不同营养液和不同培养时间对黑曲霉产纤维素酶和木聚糖酶的影响。结果表明,不同培养条件对黑曲霉产滤纸酶和木聚糖酶都有影响,黑曲霉产滤纸酶的最优培养条件组合为麸皮∶秸秆粉1∶4、Mandel营养液、培养96h,所得酶活力为15.136U/g,比实验最低组的酶活提高了4.32倍;产木聚糖酶的最优培养条件组合为麸皮∶秸秆粉3∶1、NaNO3、培养96h,所得酶活为282.702U/g,比实验最低组的酶活提高了34.2%。     

纤维素酶产生菌黑曲霉X-15的选育及其产酶条件

突变型黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｒｓ ｎｉｇｅｒ）Ｍ００１分别经紫外线（ＵＶ）、亚消基胍（ＮＴＧ）、ＴＤＰ辐射仪及空间微重力辐射（ＳＣ）等因素的多级循环处理，得到１株形态发生改变的变异菌株Ｘ－１５。其固体培养纤维素酶的滤纸分解酶活力（ＦＰＡ）为１９Ｕ／g，羟甲基纤维素酶（ＣＭＣａｓｅ）活力为４５３Ｕ／g，β－葡萄糖苷酶（β－ｇｌｕａｓｅ）活力为１５４Ｕ／g，与出发菌株Ｍ００１相比，分别为其２．８倍、     

黑曲霉发酵酱油渣的研究

试验研究了黑曲霉的耐盐能力,试验结果表明:NaCl浓度在0-120 g/l以内,黑曲霉生长速率随NaCl浓度的增加先增加后减小,当NaCl浓度为40 g/l时黑曲霉生长速率达到最大值,为2.08 cm/d;并且以酱油渣为试验材料,研究了黑曲霉对酱油渣中粗纤维成分的降解能力,试验结果表明,黑曲霉能高效降解酱渣中半纤维素,30 d降解率达到了84.28%;同时对纤维素和木质素也有一定程度降解,30 d时降解率分别为23.86%和9.43%。本研究结果为酱油渣的饲料化利用提供了必要的数据支持。     

黑曲霉降解水解单宁培养条件的研究

本实验研究了培养时间、温度、培养液初始pH、装液量、单宁浓度等条件对菌株降解单宁的影响。结果表明,黑曲霉降解水解单宁的适宜降解条件为28～30℃、pH 7.0、250 mL三角瓶中装入50～75 mL培养液,180 r/min连续培养3 d。随着单宁浓度的提高,降解率逐步降低。     

黑曲霉发酵对黄柏中游离态小檗碱含量的影响

中药材黄柏经黑曲霉菌液发酵15 d后,将发酵后药材烘干、氨醇水浸泡、索式提取等方法处理,与未发酵原药材比较小檗碱含量变化。检测结果表明,经黑曲霉菌液发酵过的黄柏中游离态小檗碱含量较高。该结论可为进一步开发中药发酵饲料添加剂提供依据。     

白腐菌及黑曲霉对玉米秸秆生物降解的研究

利用白腐菌5.776和黑曲霉3.3148对玉米秸秆木质纤维素进行降解,以提高反刍动物对玉米秸秆的消化利用。先对白腐菌和黑曲霉降解玉米秸秆木质纤维素的能力进行了研究,在此基础上,采用正交试验,探索白腐菌和黑曲霉混合后对玉米秸秆的降解效果。结果表明,接种比例、黑曲霉接入时间,接种比例与黑曲霉接入时间的交互作用以及发酵时间对混菌发酵降解玉米秸秆都有显著影响(P<0.05)。最佳方案为:白腐菌液体菌种和黑曲霉孢子悬浮液的接种比例为5:1,白腐菌接种2 d后再接入黑曲霉孢子悬浮液,发酵10 d,所得产物中性洗涤纤维的含量为52.07%,真蛋白为7.89%,干物质损失率为18.75%。     

底物和酶液稀释对黑曲霉纤维素酶活性测定的影响

本文采用DNS法测定黑曲霉纤维素酶活性,研究了底物羧甲基纤维素钠(CMC-Na)来源、浓度、纤维素酶浓度和酶液稀释效应对纤维素酶活性测定的影响。结果表明:以Signna产C5678为底物,纤维素酶活性测定值明显高于上海产的CMC,且C5678浓度≥3％后,其浓度对纤维素酶活性测定值无显著影响;纤维素酶浓度控制在吸光度0．1-0．4,反应进程曲线的线性较好,过高使得曲线下斜;另外,按传统公式计算纤维素酶活性,稀释倍数F越大,酶活性值也越高,使得测定值间缺乏可比性。研究发现将稀释倍数F校正为F0.82后,计算得出的纤维素酶活性值几乎不受稀释倍数影响。