新型棉酚衍生物ApoG2对人前列腺癌PC-3移植瘤生长的抑制

目的:探讨棉酚衍生物ApoG2对前列腺癌的抑制作用,并了解其作用机理.方法:建立人前列腺癌细胞的裸鼠皮下移植瘤模型,在ApoG2作用下观察其对皮下移植瘤生长的抑制作用,通过免疫组化方法检测肿瘤组织中bcl-2、PCNA及caspase-3、-8的表达.结果: ApoG2可明显抑制前列腺癌皮下移植瘤生长速度,肿瘤体积明显减小,ApoG2能增加肿瘤组织中caspase-3、8的表达,减少PCNA表达.结论: ApoG2对人前列腺癌有显著的生长抑制作用.     

左旋棉酚对裸鼠人前列腺癌PC-3细胞皮下移植瘤的生长抑制作用

目的:探讨左旋棉酚对裸鼠人前列腺癌PC-3细胞皮下移植瘤的生长抑制作用及其机制.方法:建立裸鼠人前列腺癌PC-3细胞皮下移植瘤模型,将移植瘤裸鼠80只随机分成4组,每组20只,分别为10.0mg/kg、5.0mg/kg、2.5ng/kg左旋棉酚治疗组和对照组,进行疗效分析与组织病理形态学观察,同时检测肿瘤组织内PCNA、bcl-2、caspase-3和caspase-8的表达.结果:左旋棉酚可使人前列腺癌PC-3细胞荷瘤裸鼠存活率提高,肿瘤体积缩小,肿瘤组织坏死明显,PCNA与bcl-2表达减少,caspase-3和caspase-8表达增加,但高剂量左旋棉酚对PC-3荷瘤裸鼠肝脏和肠道有一定毒性.结论:当治疗剂量大于5.0mg/kg时,左旋棉酚可通过增殖抑制和诱导凋亡,明显抑制裸鼠人前列腺癌PC-3细胞皮下移植瘤的生长.     

Apogossypolone对人前列腺癌LNCaP移植瘤的生长抑制作用

目的:探讨apogossypolone(ApoG2)对前列腺癌LNCaP细胞系裸鼠皮下移植瘤的生长抑制作用及可能的机制.方法:建立人前列腺癌LNCaP细胞系的裸鼠移植瘤模型,观察ApoG2对皮下移植瘤的生长抑制作用,通过免疫组化方法检测肿瘤组织中PCNA、Bcl-2 、CD31 、caspase-3及caspase-8的表达,并进行平均微血管密度(MVD)计数.结果:ApoG2可以有效抑制LNCaP移植瘤的生长,ApoG2降低肿瘤组织内PCNA和CD31的表达,增强了caspase- 3,8的表达.结论:ApoG2可有效抑制LNCaP移植瘤的生长.     

新型左旋棉酚纳米微球的制备及在体外抑制人前列腺癌PC-3细胞生长的研究

目的：研究负载左旋棉酚的单甲氧基聚乙二醇-马来酰亚胺（mPEG-mal）纳米微球的体外抗肿瘤活性,并对其机理进行探讨。方法：采用乳化-挥发法制备负载左旋棉酚的纳米微球,在人前列腺癌PC-3细胞及人前列腺细胞RWPE-1细胞株上分析空白微球的毒性,以MTT法、AO染色、透射电镜及半定量RT-PCR检测Bcl-2及Bak mRNA的表达等方法评价其在体外对前列腺癌细胞株PC-3的抗肿瘤活性,并与左旋棉酚裸药进行比较。结果：左旋棉酚载药微球对体外培养的前列腺癌细胞生长的抑制与裸药相似,并呈剂量-时间依赖性,纳米微球可以诱导PC-3细胞发生典型的凋亡形态学改变,使Bcl-2 mRNA表达水平降低,Bak mRNA表达水平升高,空白微球在高浓度时,对于肿瘤细胞系及人前列腺RWPE-1细胞株均无明显毒性。结论：左旋棉酚纳米微球具有良好的抗肿瘤活性,载体无毒,具有良好的生物相容性,能诱导前列腺癌细胞的体外凋亡,是一种具有潜力的抗肿瘤纳米药物。     

浅蓝菌素对前列腺癌细胞株PC-3生长抑制的研究

目的:探讨脂肪酸合成酶(FAS)的抑制剂浅蓝菌素对前列腺癌细胞株PC-3的生长抑制作用。方法:采用人前列腺癌细胞株PC-3在体外实验中用MTT法观察浅蓝菌素对细胞株的生长抑制作用;流式细胞术(FCM)对细胞株的凋亡及细胞周期的变化进行检测;蛋白免疫印迹(W estern b lotting)法检测浅蓝菌素对PC-3细胞中FAS蛋白水平表达的影响。结果:PC-3细胞在浅蓝菌素的作用下,细胞增殖被明显阻遏,并呈现剂量效应关系,在浓度为2.5mg/L、5.0mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L的浅蓝菌素作用下,PC-3细胞24h的抑制率分别为(34.78±2.47)%、(46.76±3.18)%、(58.13±3.55)%、(65.31±2.81)%,与对照组比较有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪显示,细胞经浅蓝菌素作用后,细胞凋亡增多,PC-3细胞在浅蓝菌素浓度5.0mg/L三个时间组(24h,48h,72h)的细胞凋亡率分别为(28.29±1.88)%、(44.73±2.69)%、(61.25±1.43)%;且G0/G1期细胞比例增加,S期和G2/M期细胞比例减少。蛋白免疫印迹实验中,随着浅蓝菌素作用时间的延长,PC-3细胞中的FAS蛋白水平表达量明显减少,药物作用时间与细胞中蛋白水平表达量呈负相关。结论:浅蓝菌素能抑制PC-3细胞生长,且其呈现时间和浓度依赖性。     

浅蓝菌素对前列腺癌细胞株PC-3生长抑制的研究

目的：探讨脂肪酸合成酶（FAS）的抑制剂浅蓝菌素对前列腺癌细胞株PC-3的生长抑制作用。方法：采用人前列腺癌细胞株PC-3在体外实验中用MTT法观察浅蓝菌素对细胞株的生长抑制作用;流式细胞术（FCM）对细胞株的凋亡及细胞周期的变化进行检测;蛋白免疫印迹（W estern b lotting）法检测浅蓝菌素对PC-3细胞中FAS蛋白水平表达的影响。结果：PC-3细胞在浅蓝菌素的作用下,细胞增殖被明显阻遏,并呈现剂量效应关系,在浓度为2.5mg/L、5.0mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L的浅蓝菌素作用下,PC-3细胞24h的抑制率分别为（34.78±2.47）%、（46.76±3.18）%、（58.13±3.55）%、（65.31±2.81）%,与对照组比较有统计学意义（P〈0.05）。流式细胞仪显示,细胞经浅蓝菌素作用后,细胞凋亡增多,PC-3细胞在浅蓝菌素浓度5.0mg/L三个时间组（24h,48h,72h）的细胞凋亡率分别为（28.29±1.88）%、（44.73±2.69）%、（61.25±1.43）%;且G0/G1期细胞比例增加,S期和G2/M期细胞比例减少。蛋白免疫印迹实验中,随着浅蓝菌素作用时间的延长,PC-3细胞中的FAS蛋白水平表达量明显减少,药物作用时间与细胞中蛋白水平表达量呈负相关。结论：浅蓝菌素能抑制PC-3细胞生长,且其呈现时间和浓度依赖性。     

雷公藤甲素对人前列腺癌PC-3细胞裸鼠移植瘤模型的作用

目的:探讨雷公藤甲素对前列腺癌PC-3细胞裸鼠移植瘤模型的作用。方法:构建前列腺癌PC-3细胞裸鼠皮下移植瘤模型,分为实验组和对照组,实验组给予雷公藤甲素治疗,0.4mg/(kg.d),皮下注射,连用15天,对照组仅给予含有等量DMSO的生理盐水,检测药物处理后肿瘤的变化,并通过免疫荧光染色的方法检测SUMO特异蛋白酶SENP1的表达。结果:雷公藤甲素能够显著抑制移植瘤的增长,并能抑制SENP1的表达水平。结论:雷公藤甲素可以显著抑制PC-3细胞裸鼠移植瘤的增长,并降低SENP1的表达水平。     

左旋棉酚体外诱导人前列腺PC-3细胞凋亡的研究

目的:研究左旋棉酚对人前列腺癌PC-3细胞体外增殖和凋亡的影响。方法:MTT法检测左旋棉酚对PC-3细胞增殖的影响,透射电镜观察细胞超微结构的改变,TUNEL染色观察细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期的改变,半定量RT-PCR检测Bcl-2及Bak mRNA的表达水平。结果:左旋棉酚能显著抑制PC-3细胞的体外增殖,并呈浓度-时间依赖性。左旋棉酚可以诱导PC-3细胞发生典型的凋亡形态学改变和G0/G1期阻滞,RT-PCR显示Bcl-2 mRNA表达水平降低,Bak mRNA表达水平升高。结论:左旋棉酚能诱导前列腺癌细胞的体外凋亡,主要可能与Bak mRNA的表达升高及Bcl-2 mRNA的表达下调有关。     

左旋棉酚体外诱导人前列腺PC-3细胞凋亡的研究

目的：研究左旋棉酚对人前列腺癌Pc-3细胞体外增殖和凋亡的影响。方法：MTT法检测左旋棉酚对Pc-3细胞增殖的影响,透射电镜观察细胞超微结构的改变,TUNEL染色观察细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期的改变,半定量RT—PCR检测Bcl-2及BakmRNA的表达水平。结果：左旋棉酚能显著抑制Pc-3细胞的体外增殖,并呈浓度一时间依赖性。左旋棉酚可以诱导Pc-3细胞发生典型的凋亡形态学改变和G0／G1期阻滞,RT—PCR显示Bcl-2mRNA表达水平降低,BakmRNA表达水平升高。结论：左旋棉酚能诱导前列腺癌细胞的体外凋亡,主要可能与BakmRNA的表达升高及Bcl-2mRNA的表达下调有关。     

TRAIL抑制人前列腺癌细胞PC-3M体外生长的实验研究

 目的　观察TRAIL对前列腺癌细胞PC 3M的生长抑制作用。方法　采用MTT法检测不同浓度TRAIL对人非激素依赖性前列腺癌细胞株PC 3M的生长抑制率 ,原位末端酶标记技术检测细胞凋亡。免疫组化法观察bcl 2的表达。结果　TRAIL可有效地抑制PC 3M细胞生长 ,具有时间、浓度依赖性特点。经药物作用后 ,前列腺癌细胞凋亡明显增多 ,凋亡率随作用时间的延长而增高 ,PC 3M细胞中的bcl 2基因表达无显著变化。结论　TRAIL蛋白可显著抑制前列腺癌细胞PC 3M生长 ,其诱导细胞凋亡不依赖bcl 2基因表达     

新型棉酚衍生物对体外前列腺癌LNCaP细胞自噬影响的研究

目的:研究新型棉酚衍生物Apogossypolone(ApoG2)在体外对前列腺癌LNCaP细胞的自噬作用.方法:采用MTT、AO染色、透射电镜、流式细胞术和免疫组化方法,研究ApoG2对前列腺癌LNCaP细胞的生长抑制及诱导自噬的作用.结果:当ApoG2浓度＞2.5,μg/mL时,对前列腺癌LNCaP细胞有明显的增殖抑制,且有时间与剂量依赖性,ApoG2作用LNCaP细胞72 h时的IC50值为4.43 μg/mL.AO染色观察LNCaP细胞有自噬特征;透射电镜观察细胞内有自噬泡形成;流式细胞术检测细胞内出现大量酸性液泡细胞器(AVOs);免疫组化结果显示,ApoG2作用于LNCaP细胞后可以使细胞内Beclin 1的表达增高.结论:ApoG2在体外可以诱导前列腺癌LNCaP细胞的自噬,抑制前列腺癌LNCaP细胞的生长.     

硒酸钠对人前列腺癌细胞PC-3细胞株活力和增殖的影响

目的：研究硒酸钠(一种主要的无机含硒化合物)对人前列腺癌细胞系PC-3生长和增殖的影响。方法：用硒酸钠对体外培养的人前列腺癌细胞PC-3进行药物处理，然后用MTT法测定细胞的活力，用^3H-TdR掺入法测定细胞的增殖情况。结果：24小时作用时，硒酸钠中剂量组A值显著低于对照组，高剂量组A值与对照组有极显著差异。48小时作用时，硒酸钠低剂量组A值显著低于对照组，中剂量和高剂量组A值与对照组有极显著差异；48小时的硒酸钠处理抑制PC-3细胞的增殖，中剂量组与对照组相比有显著差异，高剂量组与对照组有极显著差异。结论：硒酸钠可抑制PC-3细胞的活力，抑制细胞增殖，并且这两种作用都呈剂量依赖效应。     

Apogossypolone诱导前列腺癌PC-3细胞在体外的自噬

目的研究ApoG2对前列腺癌PC-3细胞在体外的作用,了解其杀伤肿瘤细胞的机制。方法采用MTT法、吖啶橙染色、透射电镜、流式细胞技术、Western blot、免疫组织化学等方法观察了ApoG2对PC-3细胞的自噬与凋亡的诱导作用。结果ApoG2可明显抑制PC-3细胞增殖;ApoG2作用于PC-3细胞72小时可诱导细胞自噬;加入自噬抑制剂3-MA可增强ApoG2诱导凋亡作用;ApoG2可以增强细胞内LC-3Ⅱ及Beclin-Ⅰ的表达,降低Bcl-2的表达水平。结论ApoG2主要以诱导PC-3细胞发生自噬为主,抑制自噬可以促进凋亡的发生。     

人前列腺癌细胞PC-3M亚系u-PAR基因表达的分析

目的 为研究与人前列腺癌细胞(PC-3M)侵袭能力相关的靶分子。方法 采用有限稀释法分离单克隆细胞株，并应用单层细胞侵袭等实验鉴定各亚系的体外侵袭能力；借助RT-PCR和免疫组化的方法，分别在转录和翻译水平检测5株侵袭能力不同的PC-3M亚系尿激酶型纤溶酶原激活物受体(u-PAR)的表达。结果 高侵袭亚系u-PAR基因mRNA的表达和蛋白质水平均明显高于低侵袭亚系。结论 PC-3M亚系u-PAR的高表达与其较强的侵袭能力密切相关，而u-PAR可能是抑制高侵袭亚系侵袭效应的一个重要靶分子。     

BAY 11-7082对人前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨BAY 11-7082对人前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的影响.方法:选择PC-3细胞分别加入不同浓度(2.5μmol/L、5μmol/L)的Bay 11-7082培养2h(实验1组与实验2组),同时选择空白对照组,检测三组细胞增殖、凋亡与细胞周期变化情况.结果:实验1组与实验2组的细胞存活率分别为(65.14±13.26)%和(55.81±14.55)%,明显低于空白对照组(85.45±12.33)%(P<0.05).空白对照组、实验1组与实验2组的细胞凋亡率分别为(0.56±0.11)%、(10.12±2.37)%和(17.23±2.46)%,对比差异都有统计学意义(P<0.05).实验组的G 0/G1期细胞数目较对照组明显增加(P<0.05),同时实验组的S、G 2/M期细胞数目较对照组明显减少(P<0.05),实验1组与实验2组之间对比差异也有统计学意义(P<0.05).结论:BAY 11-7082能明显抑制人前列腺癌PC-3细胞的增殖,诱导细胞发生凋亡,其部分机制可能是通过调节细胞周期实现的.     

新生霉素诱导前列腺癌PC-3细胞自噬的研究

目的:通过体外细胞实验,观察新生霉素是否抑制了前列腺癌PC-3细胞的增殖,并在分子水平和形态学上证实新生霉素通过细胞自噬抑制了前列腺癌PC-3细胞的增殖.为新生霉素应用于去势抵抗性前列腺癌(castration-resistant prostate cancer,CRPC)的临床治疗提供理论和实验依据.方法:设置对照组和不同浓度的新生霉素实验组,作用前列腺癌PC-3细胞24小时后,利用MTT法测定对照组和不同浓度实验组的增殖率,并计算出新生霉素的半抑制率.透射电镜观察对照组及实验组细胞内的自噬体.利用免疫荧光技术,在荧光显微镜下观察对照组和不同浓度实验组发生细胞自噬时的自噬标志性蛋白LC-3Ⅱ和自噬底物蛋白p62的不同.利用RT-PCR在mRNA水平上检测对照组和不同浓度实验组的自噬相关基因LC-3Ⅱ、Beclin-1的表达.结果:MTT结果示新生霉素能使PC-3细胞的增殖明显受到抑制(F=569.26,P=0.000),其抑制率随着药物浓度的增加而增加,根据公式计算出其IC50=1.52mmol/L.透射电镜观察可见实验组PC-3细胞质内自噬体和自噬溶酶体数量较对照组多,且随着浓度的增加自噬体数量增加.自噬体在细胞中的分布通过绿色荧光FITC标记的自噬特异性蛋白LC-3Ⅱ在荧光显微镜下清晰显示,在细胞膜附近有绿色荧光呈散点状分布,随着实验组新生霉素浓度的增加荧光强度增加.而绿色荧光FITC标记的自噬底物蛋白p62在荧光显微镜下的强度随着药物浓度的增加而降低.RT-PCR在mRNA水平上检测到随着药物浓度的增加自噬相关基因LC-3Ⅱ、Beclin-1的表达量升高.结论:在体外细胞实验中,新生霉素能够在一定浓度范围内呈浓度依赖性的抑制PC-3细胞增殖.新生霉素能在mRNA水平上增强Beclin-1、LC-3Ⅱ的表达.新生霉素可能是通过诱导细胞自噬性死亡来抑制前列癌PC-3细胞的增殖.     

Ad-ING4对人前列腺癌细胞PC-3体内外抑癌效应的研究

背景与目的：腺病毒作为载体已被广泛用于肿瘤的基因治疗。ING4是生长抑制因子家族中的一个成员,是一种潜在的抑癌基因。本研究旨在探讨腺病毒介导的人ING4基因（Ad-ING4）对人前列腺癌细胞PC-3的体内外抑癌效应及其分子机制。方法：将扩增的Ad-ING4重组腺病毒感染PC-3细胞,用RT-PCR法检测ING4在PC-3细胞中的转录;MTT法检测ING4基因对PC-3细胞增殖的影响：流式细胞术和Hoechst33258染色法检测细胞凋亡的变化;半定量RT-PCR法检测ING4基因的表达对PC．3细胞中的bcl-2、bax、p53和caspase-3凋亡相关基因表达的影响。用Ad-ING4重组腺病毒在裸鼠PC-3移植瘤的瘤体内注射治疗,观察肿瘤生长变化,15d后处死裸鼠,摘除瘤体,称瘤重;用免疫组化法检测瘤组织中Bcl-2、Bax、Caspase-3和CD34蛋白的表达。结果：腺病毒介导的人ING4基因在PC-3细胞中成功转录,明显抑制PC-3细胞增殖,上调p53、bax、caspase．3基因表达和下调bcI-2基因表达,并诱导细胞凋亡。Ad-ING4重组腺病毒能显著抑制裸鼠PC-3移植瘤的生长,瘤重的抑制率达37％,与空病毒载体Ad-GFP组和细胞对照PBS组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;免疫组化结果显示Ad-ING4重组腺病毒能明显上调Bax和Caspase-3蛋白的表达水平,下调Bcl-2和CD34蛋白的表达水平。结论：腺病毒介导的ING4基因在体内外均可明显抑制人前列腺癌细胞PC-3的生长,诱导其凋亡,其机制可能是上调P53、Bax、Caspase-3蛋白和下调Bcl-2蛋白表达水平。     

重组分泌型人PSP94对前列腺癌细胞株PC-3抑制作用的研究

目的：探讨重组分泌型人PSP94（rsHPSP94）对雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC3生长的作用和作用机制。方法：采用噻唑蓝（MTT）法检测rsHPSP94对PC－3的抑制率。流式细胞仪检测细胞周期分布的变化。结果：rsHPSP94以剂量和时间依赖性抑制PC－3的增殖，流式细胞仪分析表明细胞增殖阻滞在G1期，并出现凋亡。结论：本实验结果表明rsHPSP94通过使细胞阻滞在G1期抑制PC－3细胞的增殖。     

依维莫司对前列腺癌PC-3细胞的抑制和凋亡的影响

摘 要：［目的］ 探讨依维莫司对前列腺癌PC-3细胞凋亡及caspase-3表达的影响。［方法］ 体外培养前列腺癌细胞PC-3,使用不同浓度依维莫司(0mol/L、10-9mol/L和10-8mol/L)干预细胞,四氮唑蓝比色法(MTT)和原位细胞凋亡检测法(TUNEL)检测依维莫司对前列腺癌细胞PC-3生长抑制和诱导细胞凋亡的作用,流式细胞术检测其对caspase-3活化的情况。［结果］ 与对照组比较,依维莫司对前列腺癌PC-3细胞抑制和诱导凋亡作用明显(P<0.05),明显增加caspase-3的表达(P<0.05)。［结论］ 依维莫司抑制前列腺癌细胞PC-3增殖,可能通过诱导caspase-3表达活化增强,最终导致细胞凋亡。     

多西他赛联合基质金属蛋白酶抑制剂SB-3CT对前列腺癌移植瘤生长的影响

目的 探讨多西他赛联合基质金属蛋白酶抑制剂（SB-3CT）对前列腺癌移植瘤生长的影响及其可能的作用机制。方法 用前列腺癌PC-3细胞建立裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为SB-3CT组（注射SB-3CT溶液25 mg/kg）,联合用药组（SB-3CT 25 mg/kg+静脉注射多西他赛溶液 10 mg/kg）和空白对照组（注射等量生理盐水）,每组5只。测量肿瘤体积和质量并绘制生长曲线。免疫组化检测移植瘤组织中PDK1和PFKFB4的表达。结果 联合用药组、空白对照组和SB-3CT组平均瘤体质量比较差异有统计学意义（F=29.556,P=0.001）,且联合用药组的肿瘤生长速度明显较空白对照组和SB-3CT组慢。免疫组化结果显示,PDK1在联合用药组、空白对照组和SB-3CT组的染色评分分别为（2.33±0.47） 分、（6.00±0.81） 分和（4.33±0.48） 分,组间比较差异有统计学意义（F=18.200,P=0.003）,且联合用药组评分低于SB-3CT组（P=0.017）;PFKFB4在3组的染色评分分别为（5.33±0.49） 分、（11.33±0.47） 分和（9.00±1.41） 分,组间比较差异有统计学意义（F=17.643,P=0.003）,且联合用药组评分低于SB-3CT组（P=0.011）。结论 多西他赛联合基质金属蛋白酶抑制剂SB-3CT对前列腺癌移植瘤生长具有抑制作用,糖代谢相关酶PDK1和PFKFB4表达下调可能是潜在的分子机制。