激活Raji细胞EB病毒早期抗原植物的研究

以前材料证明Raji细胞EB病毒早期抗原对于诊断鼻咽癌有很高的特异性。我们研究了1693种植物,试验发现52种植物具有激活EB病毒作用。本文报道了这些植物并讨论它们与鼻咽癌关系。     

EB病毒相关胃癌中病毒分型的研究

收集236例胃癌组织标本及135份健康人群咽漱液(throat washings,TWs)标本,采用原位杂交、PCR-Southern blot筛选出17例EB病毒相关胃癌(EBVaGC)(7.2%)和33例EBV阳性的TWs标本(24.4%);应用PCR-RFLP、巢式PCR及DNA测序等方法,检测EBV阳性标本病毒1/2分型、F/f分型、I/i分型及LMP1XhoI(+)/(-)等四种基因变异。EBVaGC及健康对照均为F型变异,未检测到f型变异。EBVaGC中1/2型、I/i型及LMP1XhoI(+)/(-)型的例数及比例分别为:17(100%)/0(0)、1(5.9%)/16(94.1%)及0(0)/15(88.2%);而TWs中上述分型的相应数据为25(75.8%)/8(24.2%)、11(33.3%)/19(57.6%)及12(36.4%)/18(54.5%),各位点两种基因型在EBVaGC和健康人中的分布不同(1/2:P=0.047;I/i:P=0.048;XhoI(+)/(-):P=0.012)。综合分析表明在3种基因多态性均能确定的标本中,EBVaGC均为1/i/XhoI(-)亚型(15/1...     

健康人口腔中EB病毒排出情况的研究

本研究对30名血清EB病毒抗体阳性健康人从口腔排出EB病毒的情况,作了15个月的反复观察。发现28人有病毒排出,其中每次检查均为阳性者6人,间断阳性者22人,有2人多次检查均为阴性。这一结果提示,EB病毒可能是通过它在口咽部某些特定细胞内的慢性复制而在活体内持续存在的。     

EB病毒与促癌物协同作用诱发人鼻咽恶性淋巴瘤和未分化癌的研究

将ＥＢ病毒感染的人胎儿鼻咽粘膜移植于２２只Ｂａｌｂ／ｃ裸鼠皮下,每周一次皮下注射丁酸和佛波醇二酯（ＴＰＡ）,约１０天后肿物逐渐增大,１５周内行病理学检查,诊断为恶性淋巴瘤４例（其中Ｔ淋巴细胞型３例）,未分化癌３例,ＰＣＲ和原位杂交显示,两种肿瘤组织和细胞中均含有ＥＢ病毒ＬＭＰ１基因,核苷酸序列分析表明,与Ｂ９５－８细胞ＬＭＰ１基因相应序列的同源性约为９６％和９９％,说明ＥＢ病毒感染人胎儿新鲜鼻咽上     

EB病毒胸苷激酶基因的定向克隆

采用异硫氰酸胍（ＧｕＳＣＮ）和硅藻从Ｂ９５－８细胞中快速抽摸板ＤＮＡ。根据ＥＢ病毒（ＥＢＶ）Ｂ９５－８株ＤＮＡ全序列及编码ＥＢＶ胸苷激酶（ＴＫ）的开放读框ＢＸＬＦ１的结构,设计合成一对引物,并在引物的５′一端分别引入ＥｃｏＲＩ和ＰｓｔＩ切点,用ＰＣＲ技术扩增出一含完整的ＥＢＶＴＫ基因的１．８４３ＫｂＤＮＡ片段,ＮｃｏＩ酶切分析鉴定,ＥｃｏＲＩ／ＰｓｔＩ双酶切ＰＣＲ产物和载体,使目的基因定向克隆至选     

EB病毒致瘤的分子机制

ＥＢ病毒是一种ＤＮＡ肿瘤病毒,感染人类可引起鼻咽癌、Ｂｕｒｋｉｔｔ淋巴瘤和移植后平滑肌肿瘤,也与胃癌、乳腺癌、宫颈癌、肺癌的发生有一定关系。近年来对ＥＢ病毒感染与肿瘤发生之间的关系报道颇多,本文着重介绍ＥＢ病毒感染与肿瘤发生的分子机制。     

用重组痘苗病毒感染动物细胞表达的Epstein-Barr病毒膜抗原检查IgA/MA抗体

用EB病毒膜抗原基因重组的痘苗病毒感染动物细胞,其细胞表面可表达EB病毒膜抗原,以此膜抗原作为诊断抗原检测血清中IgA/MA抗体,明显优于常用的B95-8细胞表面膜抗原,从而为研究人群血清抗体反应与鼻咽癌的关系,为鼻咽癌的诊断和普查开辟了新的途径。     

Epstein—Barr病毒基因组在鼻咽癌组织中转录的特征

对ＥＢ病毒基因在鼻咽癌活检组织细胞内的转录进行了较系统的探测。实验结果表明,ＥＢ病毒基因组在鼻咽癌活检组织中以附加体（Ｅｐｉｓｏｍｅ）形式存在,而其基因转录有如下特征：（１）ＥＢ病毒在所有鼻咽癌组织细胞中都表达ＥＢＮＡ－１,并且此基因转录产物由一个在ＢａｍＨＩ－Ｆ区的启动子（Ｆｐ）驱动;（２）潜伏感染膜蛋白（Ｌａｔｅｎｔ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｐｒｏｔｅｉｎ,ＬＭＰ）和末端蛋白（Ｔｅｒｍｉｎａｌ ｐｒ     

应用蛋白印迹法检测鼻咽癌病人血清中抗Epstein—Barr病毒IgA/EA抗体

曾毅等建立了一系列检测EB病毒IgA/VCA和IgA/EA抗体的鼻咽癌早期诊断方法,取得了满意的结果。为了进一步提高对鼻咽癌诊断更为特异的IgA/EA抗体的检出率,我们建立了检测EB病毒IgA/EA抗体的蛋白印迹法。方法敏感特异,结果令人满意。 本法中所用的两个质粒系由本实验室与西德Pettenkofer研究所Wolf教授的实验室合作构建。pUCARG1140和pUC9MBcE3.2质粒均为表达质粒,前者携带着来源于EB病毒Bam     

检查Epstein-Barr病毒IgA/EA抗体的ELISA法

建立了检查鼻咽癌病人血清中IgA/EA抗体的、改进的ELISA法,用巴豆油,正丁酸钠和阿糖胞苷激活并处理HRIK细胞株,使之表达EA抗原,提取抗原时加蛋白酶抑制剂,以增加产量和稳定性;用鼠抗人IgA单克隆抗体和兔抗鼠IgG抗血清的三层夹心法。提高了敏感性,使阳性检出率达到97％,而免疫酶法的阳性率仅60％,所用抗体工作浓度的几何平均稀释度为免疫酶法的8倍,两法抗体滴度的分布呈平行关系,本法适用于大规模现场普查和鼻咽癌的早期诊断,具有快速、特异和敏感等优点。     

人精液对RAJI细胞中EPSTEIN-BARR病毒早期抗原的诱导

在大戟科、瑞香科、豆科和其它科植物中,发现有些植物含有能诱导人伯基特淋巴瘤细胞——Raji细胞中EB病毒早期抗原的物质,并已证明其中有的是很强的促癌物质,如12-0-十四烷酰巴豆醇-13乙酸酯(TPA)、桐油提纯的HHPA、芫花和黄芫花等。某些人的精液也含有能激活EB病毒的物质。本文报告中国人的精液,以及人精液与从宫颈癌病人分离的细菌培养液,对EB病毒早期抗原的诱导作用和协同诱导作用。     

鼻咽癌患者血清中抗Epstein-Barr病毒早期和晚期膜抗原抗体的检测

对Epstein-Barr(EB)病毒抗原的研究,发现有淋巴细胞确定的膜抗原(Lydma)、早期抗原(EA)、壳抗原(VCA)、核抗原(EBNA)、早期膜抗原(EMA)和晚期膜抗原(LMA)。除了Lydma抗原外,鼻咽癌患者对上述抗原均产生相应的IgG和IgA抗体。因而研究这些抗体,对阐明EB病毒与鼻咽癌的关系及鼻咽癌的早期诊断都十分有价值。     

EPSTEIN-BARR病毒血清抗体阳性健康人外周血体外培养“自发性”转化的研究

对35名Epstein-Barr病毒血清抗体阳性健康人的外周血淋巴细胞进行了体外培养,观察B淋巴细胞感染了EB病毒后所导致“自发性”转化的情况。由于在培养基中加入了免疫抑制剂环胞菌素A,使“自发性”转化的发生率由26.7％提高到74.3％,说明了在血清抗体阳性健康人的外周血液中,EB病毒感染的B淋巴细胞的数量远比既往文献报道的高。     

抗人IgA多克隆抗体ELISA法的建立和应用

用马抗人IgA抗体ELISA法,结合血清预处理,检测鼻咽癌(NPC)患者,其他肿瘤病人和正常人血清中的IgA/EA抗体结果表明,95.1％NPC病人阳性(抗体几何平均滴度为294.1),而健康对照组仅2.4～4.5％,ELISA与免疫酶染色(IE)法测得的血清抗体滴度之间有一定的相关性。但前者比后者测得的几何平均滴度(GMT)高9倍,本法敏感、特异、快速、简便,适用于现场大规模普查。     

应用基因重组Epstein-Barr病毒早期抗原P83蛋白检测鼻咽癌患者血清中的IgA/EA抗体

将pUCB质粒表达的P83蛋白应用于免疫印迹法(IB)和ELISA中,检测了85例鼻咽癌(NPC)患者和100例健康人血清,同时与免疫酶法(IE)作比较。结果表明,免疫印迹法对NPC患者血清阳性检出率为94％;ELISA法阳性检出率为88％;而IE法阳性率为64％。三种方法检测健康人血清出现低水平IgA/EA抗体的阳性率分别为4％、3％及2％。用IE法检测IgA/EA抗体为阴性的NPC患者血清,用IB法检测的阳性率达87％,ELISA法阳性检出率为77％。IB法与ELISA法之间具有较好的正相关(r=0.67,P<0.01)。     

Epstein-Barr病毒基因工程活疫苗人体免疫的初步研究

Epstein-Barr(EB)病毒的原发感染发生在儿童时期,在我国3～5岁儿童的感染率为70％～90％。感染后终生带毒,并经唾液不断排出病毒。我国南方是鼻咽癌高发区,其发病率和死亡率均占恶性肿瘤的第一位。早期诊断方法的改进和早期治疗,使鼻咽癌治疗后的5年生存率明显增加,但不能降低发病率。EB病毒疫苗有可能成为控制该病的有效手段之一。 Epstein等人从淋巴母细胞株(B95-8细胞)细胞表面提取EB病毒膜抗原(MA),用于免疫棉顶猴能产生中和抗体。免疫动物能抵抗EB病毒攻击后所诱发的恶性淋巴瘤。该中和抗体在体外能中和EB病毒的转化活性。EB病毒的主要膜抗原(MA)是由分子量220kD和