血管内皮生长因子在胶质瘤中的表达

目的：研究人脑胶质瘤组织中血管内皮生长因子mRNA的表达，同时分析肿瘤间质血管增生的情况，并探讨两者之间的关系。方法：采用半定量逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）方法，对49例人脑胶质瘤手术切除标本，U251等3株胶质瘤细胞以及12例脑外伤内减压术中得到的正常脑组织检测了VEGF mRNA表达水平水平。另外，用免疫组化SP法对组织中的微血管密度（MVD）进行了分析。结果：胶质瘤组织中的VEGF mRNA表达水平达65．3％，随着病理分级的提高其表达水平有升高趋势，HUVEC及3株胶质瘤细胞亦表达水平较高，而正常脑组织表达水平及表达率较低，胶质瘤中的微血管密度（MVD）与胶质瘤级别之间有等级相关性，VEGF mRNA表达同MVD呈正相关。结论：VEGF、MVD对胶质瘤的恶性质瘤的恶性生物学行为的评估有重要意义，VEGF的高表达导致肿瘤组织血管增生，在胶质瘤侵袭过程中发挥重要作用。     

鼻咽癌survivin基因和血管内皮生长因子表达的临床意义

目的研究鼻咽癌survivin基因表达和血管内皮生长因子（VEGF）的表达及其临床意义。方法运用逆转录聚合酶链反应技术（RT—PCR）检测鼻咽癌组织中survivin、VEGF mRNA的表达情况。结果35例鼻咽癌组织中23例survivin表达阳性（65．7％），22例VEGF表达阳性（62．9％）；14例鼻咽黏膜慢性炎症组织中2例survivin表达阳性（14．3％），3例VEGF表达阳性（21．4％）。癌组织与炎症组织相比，survivin、VEGF两者均有表达，但具有显著性差别（P〈0．05）。鼻咽癌组织中survivin的表达与肿瘤的细胞分化及TNM分期有关，高分化者的表达率明显低于中低分化者（P〈0．05），Ⅰ～Ⅱ期的阳性表达率（47．4％）较Ⅲ～Ⅳ期（87．5％）低（P〈0．05）。鼻咽癌组织中VEGF的表达与颈淋巴结转移及TNM分期有关，有颈淋巴结转移者其阳性表达率较高，Ⅰ～Ⅱ期的阳性表达率（42．1％）较Ⅲ～Ⅳ期（87．5％）低（P〈0．01）。鼻咽癌组织中survivin、VEGF的表达呈正相关性。结论鼻咽癌组织中存在survivin、VEGF的过表达现象。survivin、VEGF基因的异常表达与鼻咽癌的发生发展存在一定的关系。survivin的异常表达可能在鼻咽癌的血管生成中发挥一定的作用。     

大肠癌组织中血管内皮生长因子的表达及其临床意义

目的探讨大肠癌患者血管内皮生长因子(VEGF)与组织学分级和Dukes分期的关系.方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法,检测了68例大肠癌患者肿瘤组织中VEGF表达水平.结果肿瘤组织中VEGF表达水平在不同组织学分级之间比较,无显著性差异;Dukes C、D期组显著高于Dukes A、B期.结论检测大肠癌患者VEGF的表达,可作为判断大肠癌分期、预测淋巴结转移和远处转移的1个指标.     

食管癌血管内皮生长因子mRNA表达的检测及意义初探

目的　探讨食管癌血管内皮生长因子 (VEGF)mRNA表达及其临床意义。方法　通过食管镜活检 2 5例食管癌新鲜组织 ,运用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)及免疫组织化学技术 ,检测VEGFmRNA和VEGF蛋白的表达 ,分析其与食管癌侵袭和淋巴结转移的相关关系。结果　食管癌VEGFmRNA和蛋白的表达与性别、年龄、病灶部位、T分期、N分期、静脉侵犯、神经侵犯和组织学分级无显著相关性。淋巴结阳性患者 ,VEGFmRNA和蛋白表达较高 ,提示VEGF可能与肿瘤淋巴道转移相关 ,但相关性未达到显著水平。VEGFmRNA阳性表达率为 4 4 % ,异构体形式为VEGF12 1和VEGF16 5。结论　运用RT PCR技术能检测少量食管癌活检组织的VEGFmRNA ;初步研究未发现食管癌VEGFmRNA和蛋白表达与食管癌进展存在明显相关 ,但有必要扩大样本量进一步研究 ;食管癌VEGFmRNA的异构体形式及其生物学行为值得深入研究。     

非霍奇金淋巴瘤患者血管内皮生长因子表达与预后的关系

目的探讨非霍奇金淋巴瘤患者血管内皮生长因子（VEGF）表达与预后的关系。方法选择62例非霍奇金淋巴瘤患者为观察组,选择同期门诊体检的50例健康者为对照组,比较两组VEGF和微血管密度（MVD）的差别及其与观察组患者预后的关系。结果观察组患者VEGF和MVD水平均显著高于对照组,差异有统计学意义（P=0．000）;观察组患者VEGF阳性者3年生存率（41．9％）显著低于VEGF阴性者（89．5％）,差异有统计学意义（P=0．001）;观察组Ⅲ、Ⅳ期患者的VEGF和MVD水平显著高于Ⅰ、Ⅱ期患者,差异有统计学意义（P=0．000）;侵袭性患者的VEGF和MVD水平显著高于惰性者,差异有统计学意义（P=0．000）;随着国际预后指数（IPI）危险级别的升高,患者的VEGF和MVD水平逐渐升高,差异有统计学意义（P=0．000）;化疗疗效稳定和进展患者的VEGF和MVD水平显著高于完全缓解和部分缓解患者,差异有统计学意义（P=0．000）。结论非霍奇金淋巴瘤患者的VEGF高表达与临床分期和病理分型相关,且对化疗疗效有一定预测价值。     

血管内皮生长因子部分多肽抗血管生成的研究

目的：观察血管内皮生长因子（VEGF）部分多肽（3－4外显子）抗血管生成的作用。方法：抽提LoVo细胞总RNA,进行RT－PCR,克隆VEGF部分多肽cDNA,构建VEGF部分多肽原核表达载体,用限制性酶切和DNA测序进行鉴定,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS－PAGE）分析表达产物,表达产物经亲和层析纯化后,以人脐静脉内皮细胞（HUVEC）和鸡胚尿囊膜（CAM）血管测定其生物学活性。结果：表达产物以可溶性分子形成存在于菌体中,具有良好的抗原性和特异性,并具有抑制HUVEC增殖及CAM血管形成的活性。结论：VEGF部分多肽具有竞争抑制血管生成的功能,在肿瘤生物靶向治疗中具有一定潜在的价值。     

大肠癌组织中血管内皮生长因子的表及其临床意义

目的：探讨大肠癌组织中血管内皮生长因子（VEGF）与组织学分级和Dukes分期的关系。方法：采用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）的方法,检测了68例大肠癌患者肿瘤组织中VEGF表达水平。结果：肿瘤组织VEGF表达表达水平在不同组织学分级之间比较,无显著性差异;DukesC、D期组显著高于DukesA、B期。结论：检测大肠癌患者VEGF的表达,可作为判断大肠癌分期、预测淋巴结转移和远处转移的1个指标。     

淋巴瘤患者血清血管内皮生长因子水平的检测及其临床意义

目的检测淋巴瘤患者血清血管内皮生长因子（VEGF）水平并探讨临床意义。方法采用ELISA方法检测淋巴瘤患者血清VEGF水平。结果淋巴瘤患者血清VEGF水平,初诊未治和未缓解组显著高于完全缓解组和正常对照组（P〈0．01）。而完全缓解组与正常对照组差异无统计学意义（P〉0．05）。早期组显著高于正常对照组（P〈0.01）。晚期组显著高于早期组和正常对照组（P〈0．01）。结论淋巴瘤患者血清VEGF水平可能在一定程度上反映淋巴瘤血管新生的程度和疾病状态。VEGF可以被看作是判断淋巴瘤预后的指标。     

三氧化二砷联合BSO对K562／ADM细胞P-糖蛋白的抑制作用研究

目的研究三氧化二砷（As2O3）联合γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶抑制剂丁硫氨酸亚砜胺（BSO）对肿瘤多药耐药细胞K562／ADM细胞中P-糖蛋白（P—gP）的抑制作用，比较单用As2O3与两药联合的作用效果。方法As2O3组（0．5μmol／L，2．0μmol／L，5．0μmol／L）单独及联合100μmol／LBSO作用于K562／ADM细胞后，分光光度法检测K562／ADM细胞内谷胱甘肽（GSH）含量变化；流式细胞术（FCM）检测P-gp蛋白水平表达变化；反转录一聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测mdr-1 mRNA的表达变化。结果As2O3临床剂量组（0．5μmol／L，2μmol／L）联合BSO24h内即可抑制P-gp和mdr-1mRNA的表达水平，在48h后，临床剂量联合组抑制mdr-1mRNA的作用效果要明显强于单用高剂量组，在72h后，临床剂量联合组抑制P—gP的作用效果要明显强于单用高剂量组。结论临床剂量As2O3联合BSO可有效抑制K562／ADM细胞P—gp及mdr-1 mRNA的表达。     

三氧化二砷对人肺腺癌A549细胞株生长及对Survivin基因表达的影响

目的:研究三氧化二砷(As2O3)对人肺腺癌细胞株A549的生长抑制作用和对Survivin基因表达的影响,探讨As2O3抑制肺癌细胞增殖的机制。方法:体外培养A549细胞,通过不同剂量的As2O3与A549细胞株共培养,以台盼兰染色后鉴定活细胞计数,计算细胞生长抑制率及存活率;进一步应用Western blot方法检测Survivin表达情况;分析三氧化二砷抑制Survivin的表达水平与A549细胞存活的相关性。结果:As2O3能明显抑制A549细胞株的生长,具有浓度和时间依赖性;As2O3能明显下调Survivin蛋白的表达水平,亦具有浓度和时间依赖性;且Survivin蛋白的表达下调与肿瘤细胞存活率成负相关。结论:As2O3在体外可以明显抑制A549细胞株的生长,并显著抑制Survivin基因的表达。     

氧化砷对MR2细胞耐药转运分子作用的研究

目的探讨三氧化二砷(As2O3)对肿瘤耐药转运分子的作用。方法以耐全反式维甲酸(ATRA)早幼粒白血病细胞株MR2为研究对象,以非耐药早幼粒白血病细胞株NB4为对照组,用免疫组化法观察P糖蛋白(Pgp)、多药耐药相关蛋白(MRP)和肺耐药相关蛋白(LRP)的表达。结果MR2细胞Pgp表达为30%～40%,NB4细胞为10%～20%,二者差异有极显著性(P<0.001)。MR2细胞MRP表达为56.9±3.4～21.2±1.1,NB4细胞为20.6±5.3～16.7±1.2,二者差异有极显著性(P<0.001)。0.5～2.0μmol/LAs2O3能显著降低MR2细胞中Pgp和MRP的表达,而对LRP的表达无影响。MR2细胞中Pgp和MRP表达的降低与As2O3作用浓度和作用时间呈负相关。结论MR2细胞耐药转运分子Pgp和MRP表达的下调,可能是As2O3克服耐药的敏感靶分子,而LRP则否。ATRA可能是Pgp和MRP的转运底物     

三氧化二砷抗肝癌作用的研究进展

 临床已证实三氧化二砷（As2O3）能有效治疗急性早幼粒细胞性白血病，在此基础上，有关As2O3抗肝癌作用的研究报告也越来越多，该文就As2O3抗肝癌作用的实验研究和临床应用作一综述。     

Ibrutinib联合三氧化二砷对套细胞淋巴瘤细胞系的作用

目的:探讨Ibrutinib联合三氧化二砷（arsenic trioxide,ATO）对套细胞淋巴瘤细胞系的影响,初步研究其可能机制。方法:应用CCK-8法检测Ibrutinib联合ATO对套细胞淋巴瘤细胞系增殖的影响;流式细胞术检测Ibrutinib、ATO单药及两药联合对套细胞淋巴瘤细胞系凋亡、周期的影响;Western Blot检测周期及凋亡相关蛋白表达水平变化。结果:CCK-8结果显示两药联合对套细胞淋巴瘤细胞系增殖的抑制作用较单药更明显,两药之间具有协同作用,最佳协同浓度为Ibrutinib 5 μmol/L和ATO 0.75 μmol/L（P<0.001);Annexin V-PE/7AAD双染流式细胞术分析结果表明未加药对照组、5 μmol/L Ibrutinib组、0.75 μmol/L ATO组、联合用药组24 h细胞凋亡率为（3.0±0.81）%、（3.5±0.91）%、（4.9±0.04）%和（20.4±0.93）%（P<0.000 1）,48 h细胞凋亡率为（2.5±0.75）%、（3.6±1.82）%、（26.2±2.76）%和（76.4±9.33）%(P=0.003);流式细胞术检测显示5 μmol/L Ibrutinib、0.75 μmol/L ATO单药及两药联合能将套细胞淋巴瘤细胞周期阻滞于S期;5 μmol/L Ibrutinib、0.75 μmol/L ATO单药及两药联合使Caspase-3、PARP、CyclinD1、Bcl-2表达水平下调,而Cleaved caspase-3、Cleaved PARP表达水平上调,且两药联合较单药更明显。结论:Ibrutinib、ATO单药及两药联合能有效抑制套细胞淋巴瘤细胞系增殖、诱导其凋亡和细胞周期阻滞,且在一定浓度范围内两药联合有协同作用。     

非霍奇金淋巴瘤血清VEGF水平与疗效及预后的相关性研究

目的 研究非霍奇金淋巴瘤（NHL）患者血管内皮生长因子（VEGF）的表达及其与化疗疗效和预后的相关性,探讨VEGF作为NHL疗效预测和预后评估标志物的可能性.方法 采用酶联免疫吸附技术检测60例NHL患者治疗前后血清VEGF水平,并观察VEGF水平与疗效和生存的关系,同时检测20例正常对照者血清VEGF水平.结果 NHL患者血清VEGF为（338.64±259.31） pg/ml,明显高于正常对照者的（72.57±26.16） pg/ml（t=7.829,P=0.000）.NHL患者血清VEGF水平与国际预后指数（IPI）及结外侵犯相关（t=-3.747,P=0.002;t=-3.000,P=0.005）,而与年龄、性别、分期、美国东部肿瘤协作组体力状态（ECOG PS）评分无明显相关性.治疗后部分和完全缓解（PR和CR）患者血清VEGF水平较治疗前明显降低（t=2.729,P=0.010）.血清VEGF水平与患者生存期无明显相关性（t=-0.563,P=0.577）.结论 初治NHL患者血清VEGF水平高于正常对照者,尤其与IPI和结外侵犯数量相关;血清VEGF水平变化与化疗疗效相关,但与生存期无明显相关性.     

三氧化二砷作用机制研究进展

砷化合物在我国作为药物应用已有2400多年的历史了。自从20世纪90年代,我国学者应用三氧化二砷（As2O3）治疗急性早幼粒细胞性白血病并获得成功以来,人们对砷化合物进行了深入的研究,发现As2O3不仅对各型白血病有效,对其他多种恶性肿瘤也有良好的治疗效果。As2O3主要是通过抑制肿瘤细胞生长和肿瘤新生血管形成、诱导肿瘤细胞部分分化和凋亡等发挥抗肿瘤作用的。本文不仅对上述问题进行总结,还展望了新发展起来的基因表达谱分析技术--基因芯片技术在研究As2O3作用机制方面的应用前景。     

三氧化二砷对人肝癌细胞选择性抑制作用的实验研究

目的:明确三氧化二砷(As_2O_3)对人类肝癌细胞株和正常肝细胞株的体外抑制作用.方法:采用活细胞观察法、台盘兰拒拖染法和MTT比色法观察了As_2O_3对体外人肝癌细胞株QGY-7701、QGY-7703和正常人肝细胞株L-02生长的影响及其形态学变化.结果:As_2O_3能显著抑制人肝癌细胞QGY-7701和QGY-7703的生长,而对正常人肝细胞L-02无明显作用.As_2O_3作用48小时,对QGY-7701和QGY-7703细胞的IC50分别为1.537μg/ml和1.301μg/ml.结论:As_2O_3对人肝癌细胞有显著选择性抑制作用,而对正常肝细胞无明显影响,值得进一步探究其机理和临床应用价值.     

三氧化二砷注射液治疗复发难治性恶性淋巴瘤的临床研究

目的:观察三氧化二砷注射液(亚砷酸,As2O3)治疗恶性淋巴瘤的有效性及安全性。方法:全组共23例,其中男性15例,女性8例;年龄15～71岁,中位年龄48岁;入组前病程为11～94月;非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)22例,霍奇金氏淋巴瘤(HD)1例,既往均曾接受过3种或以上方案联合化疗,入组后应用As2O3注射液10mg/m2,加入5%葡萄糖或0.9%氯化钠注射液500ml中,静脉缓慢滴注4小时,每天1次,连用14天,3周为1周期,如未出现病情进展或严重毒性反应,则继续应用本方案化疗。2周期后按WHO标准评价近期疗效和毒性反应。结果:全组共接受了74周期治疗,每例1～11周期,平均3.2周期。可评价疗效21例,获CR3例(14.3%),PR10例(47.6%),SD5例(23.8%),PD3例(14.3%),有效率(RR)为61.9%(13/21);疾病进展时间(TTP)为1～4个月,中位TTP3.1个月。常见毒性反应为骨髓抑制,1例Ⅳ度肾毒性死亡。结论:As2O3注射液治疗恶性淋巴瘤有较好的疗效,且毒性反应可以控制,值得临床推广使用。     

流式细胞术检测亚砷酸、硼替佐米对淋巴瘤细胞株细胞周期和凋亡率的影响

 目的　研究不同浓度的亚砷酸（As2O3）、硼替佐米（BOR）单用及联合应用对恶性淋巴瘤细胞株Raji细胞细胞周期的影响。方法　采用流式细胞术（FCM）检测不同浓度梯度As2O3、BOR单用及联合应用对Raji细胞作用后,不同时间（24、48、72 h）G1、S期占整个细胞周期的比例以及凋亡率。结果　FCM检测细胞周期显示：As2O3使Raji细胞细胞周期阻滞在G1期,使G1期细胞占细胞周期的比例明显增高,S期明显减少,呈现剂量、时间依赖效应（P＜0.0001）,并出现明显凋亡峰。BOR对Raji细胞G1、S期所占比例与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）。而两药联合组与单用As2O3组亦无明显差异（P＞0.05）。但两药联合组凋亡率由16.98 %提高到45.84 %。结论　As2O3阻抑细胞周期于G1期来对Raji细胞发挥作用,两药联合增加促凋亡作用。