氨基酸直接分析法原理及应用

本文介绍一种新型氨基酸分析方法-离子交换色谱-积分脉冲安培法（HPIC-IPAD）,详细讨论方法的原理和应用,该方法与传统方法比较,无须进行柱后或柱前衍生反应,对氨基酸可以直接进行分析,灵敏度高,大多数氨基酸的最小检测限均小于1pmol,线性范围可以达到3个数量级以上。     

氨基酸分析的新方法—积分脉冲安培检测—高效阴离子交换色谱法

介绍一种新型氨基酸分析方法--采用积分脉中安培检测的高效阴离子交换色谱法(HPIC-IPAD).对氨基酸的阴离子交换色谱分离和积分脉中安培检测进行了较详细的讨论,对方法的应用做了简要介绍.该方法与其它方法比较,无须进行柱后或柱前衍生反应,对氨基酸可以直接进行分析,灵敏度较高,大多数氨基酸的检测限小于1 pmol,线性范围可以达到3个数量级以上.     

氨基酸的直接分析方法——离子交换色谱－积分脉冲安培法

介绍了一种新的氨基酸分析方法———离子交换色谱 -积分脉冲安培法 (HPIC -IPAD)。此法快速、灵敏、简便 ,可以对氨基酸直接进行分析 ,无须柱后或柱前衍生 ,并具有很高的灵敏度 ,对大多数氨基酸的最小检测限均小于 1pmol,对大多数常见氨基酸的线性范围可以达到 3个数量级以上     

氨基酸的直接分析方法—离子交换色谱—积分脉冲安培法

介绍了一种新的氨基酸分析方法-离子交换色谱-积分脉冲安培法（HPIC-IPAD）,此法快速、灵敏、简便、可以对氨基酸直接进行分析,无须柱后或柱前衍生,并具有很高的灵敏度,对大多数氨基酸的最小检测限均小于1pmol,对大多数常见氨基酸的线性范围可以达到3个数量级以上。     

大黄中氨基酸的DNFB柱前衍生化高效液相色谱测定

通过升高色谱柱温度,结合线性梯度洗脱的分离模式调整分离选择性,发展了一种氨基酸的2,4-二硝基氟苯柱前衍生化高效液相色谱分析方法,也将该方法用于大黄中氨基酸含量的测定.所发展的方法采用Kromasil C18,(250mm×4.6mm I.D.5μm)色谱柱,44℃柱温,以3段线性梯度可以在30分钟内基线分离17种基本氨基酸,方法具有普适性好、稳定性高等特点.     

17种氨基酸的RSLC分析方法

<正>在蛋白质组学和食品质量检测中,氨基酸分析(AAA)常被用作测定样品中氨基酸(AA)准确组成的工具。为及时分析样品,需要分析周期短;为测定有限量的样品需要高灵敏度的方法。本文运用Dionex RSLC和2.2μm填料色谱柱对17种氨基酸进行分析,用时短、分离度、重现性均较好。采用快速方法(1)整个分析过程最高压力500bar,在耐压可以达到600bar普通液相上可以应用,从而可以实现氨基酸在普通液相上的快速分析。     

阴离子交换色谱中色谱柱温度对氨基酸保留的影响

摘要研究了阴离子交换色谱中色谱柱温度对氨基酸保留的影响。实验采用氧氧化钠和醋酸钠作为淋洗液在DionexAminoPac PA10阴离子交换柱上分离氨基酸,色谱柱温度为20-40℃。氨基酸的保留表现为吸热行为（随温度升高,保留增强）或放热行为（随温度升高,保留减弱）。温度对弱保留氨基酸的保留有明显影响。利用温度对弱保留氨基酸保留影响上的差异,通过改变柱温可以改善两种相近洗脱氨基酸之间的分离状况。温度对强保留氨基酸的保留无明显影响。弱保留氨基酸的范特霍夫曲线（Ink与1/F关系曲线）具有良好的线性关系。     

柱后衍生阳离子交换色谱法同时测定大蒜中18种水解氨基酸

目的:建立一种柱后衍生阳离子交换色谱法同时测定大蒜中18种氨基酸含量的方法。方法:采用线性梯度洗脱,进样量为50μL,于440nm(脯氨酸)和570nm(其余氨基酸)波长下进行柱后衍生化检测分析,根据色谱分离效果选定最佳检测方法,对比并计算大蒜中18种水解氨基酸与游离氨基酸的含量。结果:在一定的浓度范围内,各种氨基酸的线性关系良好,相关系数r均大于0.9977,其中谷氨酸的含量最高,胱氨酸的含量最低。结论:水解氨基酸色谱分离情况优于游离氨基酸,方法准确度和灵敏度高,具有良好的重复性和回收率,可选用该法对大蒜中多种氨基酸进行同时测定。     

高效液相色谱仪柱后反应分析氨基酸

蛋白质、肽和氨基酸的分析在研究蛋白质或肽的结构与功能中是不可缺少的重要环节和必要的化学基础。HPLC 柱后反应技术开发为蛋白质化学、酶化学和氨基酸化学的研究开辟了引人注目的前景,其中HPLC 柱后自动反应分析氨基酸的组装仪器已有商售品[1][2]。自70年代末商售氨基酸自动分析仪问世以来,氨基酸的分析可获较满意的结果,但仪器昂贵,又因专一性限制了对其它物质的分析,因而一些色谱研究家致力于应用HPLC 离子交换法和反相法分析氨基酸,研究指出,除色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸外,其他氨基酸不具天然萤光而且形紫外区吸收很弱。示差折射又由于灵敏度差,也难应用于实践。为了解决这一问题,通常对氨基酸进行柱前或柱后反应以进行定性及定量测定[2][3][4][5][6][7][8]。本文拟比较这两种反应方式并重点介绍HPLC 柱后反应。柱前反应:氨基酸在进入色谱柱之前与试剂进行反应产生衍生物称之。如生成PTH 氨基酸,用紫外检测器鉴定;与丹磺酰氯和邻一苯二甲醛(OPA)等试剂反应后产生萤光衍生物,用萤光检测器鉴定。其优点是柱前反应很少受反应条件限制,即溶剂、PH和时间等条件。缺点是比较难于自动化,柱前反应衍生物要求高效柱和选择性高的流动相。又由于柱     

直接分析氨基酸的两种方法

介绍了两种无需衍生就可直接进行氨基酸分析的新型检测技术 ,并与柱前、柱后衍生氨基酸分析方法作了比较     

电喷雾萃取电离质谱直接测定啤酒中多种氨基酸

A novel method was developed for directly detection of amino acids in beer by using extractive electrospray ionization mass spectrometry (EESI-MS) without any sample pretreatment. Taking the advantage of multiple-stage tandem MS capability of an ion trap mass analyzer, all the signals detected from beer samples were quickly identified using their characteristic fragments, resulting in confident validation of the analytical results. The average time for a single sample analysis was less than 0.5 min, and the relative standard deviations of the method were in the range of 5.0%-10.0%. The limit of determination of this method was found to be 10^－10 g•mL^－1 for most amino acids.     

采用计算化学方法确定氨基酸的极化率

本文采用计算化学软件Gaussian03搭建了二十种氨基酸优化结构。采用Gaussian03计算出氨基酸及其离子的能量,并应用二级微扰理论计算了氨基酸的极化率。用简单纯计算方法得到人体必需的、半必需的以及非必需的氨基酸极化率,将它们与实验方法得到的极化率比较,多数符合较好,证明计算方法有一定可取性。此外,研究了极化率与必需和非必需氨基酸的关系。     

氨基酸-离子色谱双用型分析仪在农产品品质和环境检测中的应用

新开发的A200型氨基酸．离子色谱分析仪既是一种专用型氨基酸分析仪，也能作为离子色谱仪，适用于农产品品质检测和产地环境检测。。作为氨基酸分析仪时，是根据阳离子交换原理，采用淋洗液浓度梯度和柱温梯度的联合双梯度的分离模式实现分离、以柱后茚三酮衍生光度法进行检测。已为21种蛋白水解氨基酸和43种游离氨基酸的测定提供了标准方法。本文以国家计量部门认证的一系列关键技术数据，诸如峰保留时间和峰面积的重现性、检测限、分离度和仪器线性等，来说明仪器的可靠性和稳定性。作为离子色谱仪时，是在A200的主体硬件结构的基础上，配置多用性分离柱和电导、光度等多种检测器来实现的。其控制软件符合GLP规范，首次实现了每分钟自动记录分析全过程的参数和状态，为故障诊断和远程服务提供了方便。其新型数据处理软件备有氨基酸词库和中英文版本。     

Polarographic Reduction Wave of Hemoglobin and its Application to Micro‐Determination

Abstract

An adsorptive reduction wave of hemoglobin at about ?1.43 V (vs. SCE), in phosphate buffer solution, pH 6.8, was found by using single sweep polarography. Based on this wave, a simple, rapid, and reliable polarographic method for hemoglobin determination was developed. The wave height is linearly proportional to the concentration of hemoglobin in the range of 1.0–28 mg/L (correlation coefficient 0.997). The detection limit is 0.5 mg/L. Serum albumin, common amino acids, and metal ions present no interference with the hemoglobin determination.

The proposed method was applied to the determination of hemoglobin in human blood samples with satisfactory results. The polarographic wave is attributed to the direct reduction of hemoglobin at the dropping mercury electrode. The new method could be useful in biochemical, clinical, and pharmaceutical analysis.     

气相色谱-燃烧-同位素比值质谱法测定鳀鱼肌肉组织中单体氨基酸的碳稳定同位素组成

The stable carbon isotope compositions of individual amino acids in muscle tissues of the anchovy, Engraulis japonicus, a key species of animal in the Yellow and the East China Sea ecosystem, were determined by the gas chromatography-combustion-isotope ratio mass spectrometry (GC-C-IRMS). Eleven amino acid compounds were identified and their δ(13C) values were successfully measured. The new ability to measure stable carbon isotope compositions of individual amino acids offers a potential method for understanding digest, absorption and metabolism of anchovy, Engraulis japonicus, pathway of carbon transfer through food web and evaluating trophic quality of diet.     

A Dual Ionization Source with Laser Desorption Sample Introduction in a Time-of-Flight Mass Spectrometer

Abstract

A new mass spectrometric detection system has been developed for the analysis of non-volatile chemical species such as biochemicals. This system involves the use of a novel dual ionization source, consisting of laser-induced electron ionization (EI) and multiphoton ionization (MPI), to provide versatile ionization for a wide range of chemicals in a time-of-flight mass spectrometer. Laser desorption is incorporated into the system for sample vaporization.

The experimental design of this system is described. It is demonstrated that two ionization modes can be interchanged very readily by simply adjusting the position and focus of the laser beam. EI and MPI mass spectra of a number of amino acids and small peptides are shown to illustrate the detection capability of the system. For chemicals amenable to both ionization methods, EI and MPI can provide sensitive detection with different fragmentation patterns. Thus, the operation in a dual ionization mode provides enhanced structural information. In addition, laser-induced EI is shown to be a more general ionization method while MPI provides selective ionization with controlled fragmentation. The combination of these unique properties is demonstrated in the study of laser desorption process of an organic salt.     

地理标志产品山西老陈醋中氨基酸研究

本研究通过氨基酸自动分析仪对地理标志产品山西老陈醋的氨基酸种类和含量进行测定分析,共检出16种氨基酸。通过与非地理标志醋进行比较分析表明,山西老陈醋的氨基酸普遍含量高于非地理标志醋,且其主要的氨基酸种类丙氨酸、亮氨酸、谷氨酸、缬氨酸、脯氨酸和天冬氨酸,与其独特的风味有密不可分的关系,同时山西老陈醋的陈酿年份对其氨基酸含量有复杂的影响。     

FMOC-C1为柱前衍生化试剂对氨基酸的RP-HPLC定量分析方法的研究

采用二元流动相程序洗脱高效液相色谱分离了蛋白质水解液中常见的18种氨基酸。除FMOC-ARG的色谱峰拖尾较为严重,分离效果不佳外,其它各种FMOC-氨基酸衍生产物均获得了较好的分离效果。应用FMOC-Cl为柱前衍生化试剂,对氨基酸的高效液相色谱定量分析方法进行了研究。FMOC-Cl与氨基酸的衍生反应速度快、重现性好、衍生产物稳定,在介质PH=8.5～9.5范围内衍生反应完全,符合绝对分析法对衍生反应的要求。因此,FMOC-Cl是一种较为理想的应用绝对分析法对氨基酸定量分析的柱前衍生化试剂。