针刺对脑缺血再灌注损伤大鼠海马组织miR-29a-3p、miR-29b-3p表达的影响

目的 观察针刺干预72 h后脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠缺血侧海马区miR-29a-3p、miR-29b-3p的表达,探讨针刺促CIRI修复的机制。方法 30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和针刺组,每组10只,造模组大鼠使用线栓法制备CIRI模型,假手术组只剥离血管不插入线栓;假手术组和模型组只捆绑不针刺,针刺组捆绑后针刺“大椎”“百会”“水沟”穴,一天治疗两次,共治疗7次。采用Garcia评分法对神经功能进行评定,TTC染色法检测脑梗死面积比,qRT-PCR法检测缺血侧海马区miR-29a-3p、miR-29b-3p的表达。结果 干预前与假手术组比较,造模组Garcia评分显著降低(P<0.01),脑梗死面积比显著增加(P<0.01),患侧海马区miR-29a-3p、miR-29b-3p表达量降低(P<0.05,P<0.01);干预72h后与模型组比较,针刺组Garcia评分明显上升(P<0.01),脑梗死面积比显著下降(P<0.01),患侧海马组织miR-29a-3p、miR-29b-3p的表达量明显增加(P<0.01)。结论 针刺...     

扶正化瘀胶囊对心肌梗死后心肌纤维化大鼠细胞外基质代谢的影响

目的探讨扶正化瘀胶囊治疗心肌梗死后心肌纤维化的可能作用机制。方法 24只大鼠随机分为模型组、扶正化瘀组、卡托普利组、假手术组,每组6只。除假手术组外,其余各组采用左冠状动脉前降支结扎术制备大鼠心肌梗死模型。造模后扶正化瘀组给予扶正化瘀胶囊0.4 g/(kg·d)灌胃,卡托普利组给予卡托普利2.25 mg/(kg·d)灌胃,假手术组和模型组均给予等体积的去离子水灌胃,各组均每日1次,连续8周。采用天狼星红染色检测心肌胶原分数(CVF),免疫组化、实时荧光定量PCR法分别检测Ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)、基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)蛋白及mRNA表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠CVF、MMP-2/TIMP-2及Ⅰ型胶原、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2蛋白及mRNA表达均升高(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,扶正化瘀胶囊组、卡托普利组CVF、MMP-2/TIMP-2及Ⅰ型胶原、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2蛋白及mRNA表达降低(P<0.05或P<0.01)。与卡托普利组比较,扶正化瘀组CVF、TIMP-1蛋白表达升高,TIMP-1 mRNA表达降低(P<0.05或P<0.01)。结论扶正化瘀胶囊能改善大鼠心肌梗死后心肌纤维化,其机制可能与调控MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2蛋白和mRNA表达及MMP-2/TIMP-2、MMP-9/TIMP-1有关。     

扶正化瘀胶囊对心肌梗死大鼠Rock1、Rock2表达的影响

目的观察扶正化瘀胶囊对心肌梗死大鼠Rho A/Rock信号转导通路主要成员Rock1、Rock2表达的影响,探讨其改善心室重构心肌纤维化的可能机制。方法采用冠状动脉左前降支结扎术制备急性心肌梗死模型,成模大鼠随机分为模型组、扶正化瘀胶囊组和盐酸法舒地尔组,另设假手术组只穿线不结扎作为对照,每组8只。造模后第2日开始给予相应药物干预,连续4周。免疫组化检测心肌组织Rock1、Rock2蛋白表达,实时荧光定量PCR检测Rock1、Rock2 mRNA表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠心肌组织Rock1、Rock2蛋白表达明显升高(P0.05);与模型组比较,盐酸法舒地尔组和扶正化瘀胶囊组大鼠心肌组织Rock1、Rock2蛋白表达明显降低(P0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠心肌组织Rock1 mRNA表达明显升高(P0.05);与模型组比较,盐酸法舒地尔组大鼠心肌组织Rock1 mRNA表达明显降低(P0.05),盐酸法舒地尔组和扶正化瘀方组大鼠心肌组织Rock2 mRNA表达明显降低(P0.05)。结论扶正化瘀胶囊通过降低心肌梗死大鼠梗死边缘区心肌组织Rock1、Rock2的表达,发挥其抗心室重构心肌纤维化的作用。     

丹参酮IIA通过抑制miR-376b-5p降低急性心肌梗死大鼠致炎细胞因子分泌并减轻心肌损伤研究

目的 研究丹参酮Ⅱ_A改善大鼠急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)作用机制。方法 将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、丹参酮Ⅱ_A(5 mL/kg)组、miR-376b-5p mimics+丹参酮Ⅱ_A组和miR-376b-5p inhibitor+丹参酮Ⅱ_A组,每组10只。除假手术组外,其他各组采用大鼠冠状动脉前降支结扎法建立AMI模型,给予药物干预12周后,qRTPCR检测大鼠心肌组织中miR-376b-5p基因表达;采用苏木素-伊红(HE)和Masson染色观察心肌组织病理变化和纤维化程度;ELISA检测血清炎症因子水平;免疫组化检测心肌组织中I型胶原蛋白(collagen type I,Col1)、Ⅲ型胶原蛋白(collagen type Ⅲ,Col3)和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达;Western blotting检测心肌组织中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β...     

益气活血药对心肌梗死大鼠心脏蛋白激酶C表达的影响

目的探讨益气活血中药(生脉注射液联合血塞通注射液)对心肌梗死大鼠心脏蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)表达的影响。方法 SD大鼠随机分为模型组、假手术组、卡托普利组和益气活血组。结扎大鼠心脏左冠状动脉前降支建立心肌梗死模型(假手术组只穿线,不结扎)。模型组和假手术组给予生理盐水;卡托普利组给予卡托普利片4.39 mg/(kg·d)溶解灌胃;益气活血组给予生脉注射液3.51 m L/(kg·d)联合血塞通注射液17.54 mg/(kg·d)腹腔注射。治疗4周后取材,称重计算心脏质量指数;RT-PCR法检测左心室心肌组织PKC mRNA的表达;Western blot法检测PKC蛋白的表达。结果与假手术组比较,模型组心脏质量指数显著增加(P0.01),PKC的mRNA和蛋白表达亦显著增加(P0.05或P0.01);与模型组比较,益气活血组和卡托普利组心脏质量指数显著降低(P0.05),同时PKC的mRNA和蛋白表达也显著降低(P0.05或P0.01)。结论益气活血药(生脉注射液联合血塞通注射液)可以改善心脏重构,其机制与抑制心肌梗死后心肌组织PKC的高表达有关。     

针刺介导miR-34c-5p调控脑缺血再灌注损伤大鼠海马神经细胞自噬的研究

目的:观察针刺对脑缺血再灌注损伤(CI/RI)大鼠缺血侧海马组织miR-34c-5p、自噬相关蛋白表达及凋亡率的影响,探讨针刺通过miR-34c-5p调控CI/RI大鼠海马神经细胞自噬的机制。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、药物组及针刺组,每组20只。采用线栓法制作大脑中动脉阻塞再灌注大鼠模型。假手术组只剥离血管,不插入线栓。针刺组针刺“大椎”“百会”“水沟”,每15 min行针1次,留针30 min;药物组腹腔注射依达拉奉(5 mg/kg);均1次/12 h,共7次。用改良Garcia评分法评估神经功能损伤程度,TTC法测定脑梗死面积百分比,透射电镜观察缺血侧海马区神经细胞超微结构,实时荧光定量PCR法检测海马miR-34c-5p的表达量,Western blot法检测海马Beclin-1、LC3B、p62的表达,TUNEL法检测缺血侧脑组织细胞凋亡率。结果:与假手术组比较,模型组Garcia评分明显降低(P<0.01),脑梗死面积百分比、细胞凋亡率明显升高(P<0.01),海马miR-34c-5p、Beclin-1、p62表达及LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ均降低(...     

芪丹利心丸对心肌梗死大鼠左心室心肌组织miR-133a/TGF-β1/CTGF信号通路的影响

目的探讨芪丹利心丸防治心肌梗死后心肌纤维化的可能作用机制。方法采用左冠状动脉结扎术建立心肌梗死大鼠模型,随机分为模型组、卡托普利组和芪丹利心丸组,另设假手术组只穿线不结扎,每组10只。术后第2天,芪丹利心丸组给予芪丹利心丸2.43 g/(kg·d)灌胃,卡托普利组给予卡托普利片2.25 mg/(kg·d)灌胃,假手术组和模型组给予去离子水10 ml/(kg·d)灌胃。4周后检测各组心脏血流动力学指标[包括心率(HR)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)、左心室内压最大上升速率(+dp/dt max)、左心室内压最大下降速率(-dp/dt max)],称取左心室重量(LVM)并计算左心室质量指数(LVMI),HE染色进行病理学观察,Masson染色计算胶原容积分数(CVF),检测左心室心肌组织miR-133a、转化生长因子β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)mRNA及TGF-β1、CTGF蛋白表达情况。结果与假手术组比较,模型组LVSP、+dp/dt max,-dp/dt max下降,LVEDP升高,LVMI、CVF增大,miR-133a下调,TGF-β1和CTGF蛋白及mRNA表达增多(P0.01)。与模型组比较,芪丹利心丸组LVSP、+dp/dt max,-dp/dt max上升,LVEDP降低,LVMI、CVF减小,miR-133a上调,TGF-β1和CTGF蛋白及mRNA表达减少(P0.05或P0.01)。HE染色显示,模型组见梗死边缘区残存的心肌纤维混乱、部分断裂,肌间隙增宽明显,而卡托普利组和芪丹利心丸组心肌梗死边缘区心肌纤维走形相对规整,多数胞膜基本完整。结论芪丹利心丸可防治心肌梗死大鼠心肌纤维化,其机制可能与miR-133a/TGF-β1/CTGF信号通路有关。     

扶正化瘀胶囊对心肌梗死大鼠心脏结构和功能的影响1）

目的 探讨扶正化瘀胶囊对心肌梗死（MI）大鼠心脏结构和功能的影响.方法 大鼠随机分为模型组、扶正化瘀胶囊组、盐酸法舒地尔组和假手术组,每组8只.结扎左冠状动脉前降支制作MI大鼠模型,假手术组只穿线,不结扎.术后给予相应药物治疗4周,假手术组和模型组给予去离子水.治疗4周后采用超声心动图检查评价大鼠心脏结构和功能的变化.结果 模型组左室射血分数（LVEF）、左室短轴缩短分数（LVFS）、室间隔收缩末期厚度（IVSTs）低于假手术组,左心室舒张末期内径（LVDd）、左心室收缩末期内径（LVDs）高于假手术组（P＜0.01）;盐酸法舒地尔组LVDs低于模型组,LVEF、LVFS均高于模型组,两组比较具有统计学意义（P〈0.05）;扶正化瘀胶囊组IVSTs、LVEF、LVFS均高于模型组,LVDd、LVDs低于模型组（P＜0.05）.结论 抗纤维化中药扶正化瘀胶囊可改善MI大鼠左室重构并能提高心功能.     

活血解毒方对糖尿病大鼠视网膜组织中microRNA表达的影响

目的观察活血解毒方对糖尿病大鼠视网膜组织中microRNA-125a-3p、microRNA-212-3p、microRNA-290、microRNA-129-5p、microRNA-30c-5p、microRNA-153-3p和microRNA-423-5p表达的影响,探讨其改善糖尿病视网膜病变的机制。方法选取SPF级雄性SD大鼠15只。一次性腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病模型大鼠10只,随机分为模型组和活血解毒方组,另设5只为正常对照组。造模成功后第20周开始给药,给药12周后摘取眼球,提取视网膜组织中的总RNA。采用Real-time PCR技术检测microRNA-125a-3p、microRNA-212-3p、microRNA-290、microRNA-129-5p、microRNA-30c-5p、microRNA-153-3p和microRNA-423-5p的表达。结果与正常对照组相比,模型组microRNA-125a-3p、microRNA-212-3p、microRNA-290、microRNA-129-5p和microRNA-30c-5p表达降低(P0.05,P0.01,P0.05,P0.05,P0.05),microRNA-153-3p和microRNA-423-5p表达升高(P0.01,P0.05);与模型组相比,活血解毒方组microRNA-125a-3p、microRNA-212-3p、microRNA-290、microRNA-129-5p和microRNA-30c-5p表达升高(P0.05,P0.05,P0.05,P0.01,P0.05),microRNA-153-3p和microRNA-423-5p表达降低(P0.01,P0.01)。结论推测活血解毒方是通过上调糖尿病大鼠视网膜组织中microRNA-125a-3p、microRNA-212-3p、microRNA-290、microRNA-129-5p和microRNA-30c-5p的表达,下调microRNA-153-3p和microRNA-423-5p的表达来起到延缓糖尿病视网膜病变的发生和发展进程的作用。     

丹皮酚对急性心肌梗死大鼠Smad2, Smad3, Smad7 mRNA含量表达的影响

目的:研究丹皮酚对急性心肌梗死(AMI)大鼠进行性心室重构的保护作用及其对转化生长因子-β(TGF-β)/Smads信号通路上Smad2,Smad3,Smad7 mRNA含量表达的影响。并探讨其延缓甚至逆转心室重构的分子机制。方法:采用左冠状前降支(LAD)结扎法制作在体大鼠急性心肌梗死模型,在心电图评价的基础上,将造模成功的大鼠随机分为模型组、丹皮酚低、中、高剂量组、卡托普利组,另有只穿线不结扎的假手术组,每组10只,共6组。丹皮酚低、中、高剂量组分别给予ip8,12,16 mg·kg-1剂量的丹皮酚注射液,假手术组与模型组每天ip等体积生理盐水,卡托普利组用蒸馏水稀释其片剂碾成的药粉,给予ig 10 mg·kg-1,所有干预均1次/d;4周后分别取材,测定各组大鼠心脏质量指数及梗死面积,采用实时荧光定量RTq PCR技术检测各组心肌组织Smad2,Smad3,Smad7 mRNA的表达水平。结果:与模型组比较,丹皮酚低、中、高剂量组、卡托普利组大鼠心肌梗死面积明显减少(P0.05),心脏质量指数降低(P0.05);模型组Smad2,Smad3 mRNA的表达水平均明显高于假手术组(P0.01),Smad7的表达低于假手术组(P0.01);丹皮酚各剂量干预组Smad2,Smad3 mRNA的表达明显低于模型组(P0.01),Smad7 mRNA的表达则明显强于模型组(P0.01)。结论:丹皮酚有抗AMI大鼠心肌纤维化的作用,其机制与上调TGF-β1抑制性信号蛋白Smad7的mRNA表达及下调TGF-β受体调控信号蛋白Smad2,Smad3的mRNA表达有关。即其作用机制可能与干预TGF-β/Smads信号转导有关。     

肾阳虚大鼠肾组织中microRNA差异性表达与信号通路分析

目的:采用基因芯片检测腺嘌呤造模诱导肾阳虚证大鼠肾组织中显著差异表达的小分子核糖核酸(miRNA),并用生物信息学方法分析其意义。方法:模型组大鼠灌胃150 mg·kg-1腺嘌呤诱导肾阳虚肾损伤模型,正常组灌服等量生理盐水。麻醉处死后取部分肾组织病理切片做苏木素-伊红(HE)染色并检测血液中血尿素氮(BUN),血肌酐(SCr)的含量,尿液中24 h尿蛋白(24U-TP)含量; trizol法提取肾脏组织中RNA,RNA经检测质量合格后用于后续芯片分析。μParaflo微流体芯片分析肾组织中差异表达的miRNA;通过实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)进一步验证芯片结果;利用生物信息学网站分析差异表达miRNA的靶基因及其功能。结果:基因芯片结果显示造模后共有50个miRNA差异表达,与正常组比较,模型组只有9个miRNA在肾组织中高表达且具有显著性差异,其中,与正常组比较,模型组中rno-miR-21-5p,rno-let-7i-5p,rno-miR-146b-5p和rno-miR-15b-5p表达明显升高(P0.05,P0.01); rno-miR-6215,rno-miR-192-5p,rno-miR-378b,rno-miR-378a-3p和rno-miR-194-5p表达明显降低(P0.05)。经PCR验证表明,与正常组比较,rno-miR-21-5p,rno-miR-146b-5p表达显著上升(P0.01); rno-miR-192-5p,rno-miR-378b,rno-miR-378a-3p,rno-miR-194-5p表达显著下降(P0.01)。其中,miR-192,miR-21,miR-378与上皮细胞-间充质转化/间充质-上皮细胞转化(EMT/MET)平衡相关,miR-192和miR-378可作为抗纤维化因子保护肾脏,而miR-21可作为促纤维化因子诱导肾脏损伤。miR-194可通过靶向调控脑Ras同源蛋白(Rheb)拮抗缺氧再灌注诱导的人肾近端肾小管上皮细胞HK-2损伤。这些差异miRNA的靶基因主要富集在Wnt和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路上。这两条信号通路与EMT/MET平衡密切相关。结论:通过基因芯片表达谱,发现4个参与肾间质纤维化(RIF)作用调节和2个未知功能miRNA表达。为进一步深入分析肾阳虚的调控网络提供了一个新的线索。     

扶正化瘀胶囊调节特异性蛋白1相关通路抗心肌纤维化作用机制研究

目的:观察扶正化瘀胶囊对心梗大鼠特异性蛋白1相关通路的影响,探讨其防治心肌纤维化的可能作用机制。方法:结扎左冠脉前降支建立大鼠急性心梗模型,分为模型组和扶正化瘀组。假手术组只穿线不结扎。扶正化瘀组按0.4 g/(kg·d)灌胃,模型组和假手术组给予等体积去离子水,共8周。HE和Masson染色检测病理学变化;Western blot和实时荧光定量PCR法分别检测特异性蛋白1(Sp1)、Gata4、转化生长因子(TGF)-β1、Ⅰ型胶原(ColⅠ)、血小板反应蛋白1(Tsp1)及其mRNA表达。结果:与假手术组比较,模型大鼠心肌细胞破碎,纤维结缔组织大量增生,胶原容积分数(CVF)增加(P<0.01),TGF-β1、ColⅠ、Tsp1 mRNA及Sp1、Gata4、TGF-β1、ColⅠ蛋白表达明显升高(P<0.05或P<0.01),Tsp1蛋白表达降低(P<0.01);与模型组比较,扶正化瘀组细胞膜相对完整,胶原相对减少,CVF下降(P<0.01),Sp1、Gata4、TGF-β1、ColⅠ、Tsp1 mRNA及Gata4、ColⅠ蛋白表达明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:扶正化瘀胶囊在一定程度上改善心梗后心肌纤维化的作用机制可能与Sp1-Gata4-ColⅠ-Tsp1轴有关。     

葱白提取物对大鼠心梗后室性心律失常疗效评价及miRs表达的影响

目的:探讨葱白提取物对心肌梗死大鼠室性心律失常的疗效及对miRNA表达的影响。方法:将60只大鼠随机分为4组,每组15只,分为假手术组、空白模型组、葱白提取物组和胺碘酮片组。后3组结扎前降支建立心梗模型,随机选取10对葱白提取物组和非葱白提取物治疗,治疗4周后评价疗效,随后处死大鼠,分离心肌细胞,用miRNA芯片筛选出上调最明显的miR-21及下调最明显的miR-15b-5p样本作为后续验证对象,QRT-PCR进一步验证上述可逆性差异性表达的miRNAs。结果:与空白模型比较,葱白提取物组和胺碘酮片组均可延长室性心律失常发生时间,减少持续时间和发生率(P 0. 01),miRNAs芯片筛选出葱白提取物处理组大鼠心肌细胞中可逆性恢复的67个具有显著表达差异的miRNAs(FC 1. 5,P 0. 05)。在qRT-PCR对15组样本的验证中,与未使用葱白提取物的对照组相比,葱白提取物组大鼠心肌细胞中miR-15b-5p表达均显著减少(p 0. 05),miR-21表达均显著增加(p 0. 05)。结论:葱白提取物可通过影响大鼠模型心梗后室性心律失常的发生类型、发生及持续时间、发生率和ST段抬高程度进而改善心梗后室性心律失常的发生发展,作用机制主要与调节miR-15b-5p及miR-21的表达有关。     

桑白皮提取物桦木酸对TGF-β1诱导的人肺泡上皮细胞HPAEpiC上皮间质转化的抑制作用

目的探讨桑白皮提取物桦木酸对生长转化因子(TGF-β1)诱导的人肺泡上皮细胞HPAEpiC上皮间质转化的抑制作用及其可能机制。方法以HPAEpiC细胞为研究对象,采用0.5 ng·mL(-1) TGF-β1诱导的上皮间质转化模型进行实验。设置空白对照组、模型组、桦木酸给药组。MTT法检测桦木酸对HPAEpiC细胞存活率的影响;Real-time PCR分析桦木酸对诱导后的HPAEpiC细胞内miR-200b-5p、miR-200c-5p表达水平及上皮间质转化标志物(Coll、E-cad、α-SMA mRNA)表达水平的影响。酶联免疫吸附法(ELISA)检测桦木酸对诱导后HPAEpiC细胞内羟脯氨酸(HYP)分泌水平的影响。结果桦木酸对HPAEpiC细胞增殖活性呈单向抑制趋势,且增殖抑制率与药物浓度呈依赖关系。与模型组比较,桦木酸可有效抑制诱导后细胞内miR-200b-5p(P0.05)、miR-200c-5p(P0.01,P0.05)表达,同时降低细胞内ColⅠ(P0.01)、α-SMA mRNA(P0.05)表达,促进E-cadherin mRNA表达(P0.01,P0.05),降低细胞内HYP含量(P0.01,P0.05)。结论桑白皮提取物桦木酸对TGF-β1诱导的人肺泡上皮细胞HPAEpiC上皮间质转化有一定的抑制作用,为特发性肺纤维化潜在的治疗药物,其可能的作用机制为抑制miR-200b-5p、miR-200c-5p表达;下调ColⅠ和α-SMA mRNA,上调E-cad mRNA。     

清肝益肾祛风方防治高血压心肌损伤的效应机制研究

目的探讨清肝益肾祛风方(QingganYishen Qufeng formula,QYQ)在高血压及高血压致心肌损伤双重病理条件下的干预效应及可能的作用机制。方法将自发性高血压大鼠随机分为模型组(SHR)、清肝益肾祛风方组(QYQ)、坎地沙坦组(Can),以8只同周龄雄性WKY大鼠作为正常对照组(WKY)。所有实验动物于6周龄起进行药物干预,共干预14周。各组大鼠均每隔2周通过尾压法测量收缩压及舒张压水平,以评价QYQ降压作用;20周龄时取心脏组织,石蜡包埋切片,HE染色计算心肌细胞横截面面积以评价QYQ对高血压心肌损伤的预防作用;同时进一步检测心脏组织中miR-125a-5p及其靶基因IL-6R、STAT3以及IL-6 mRNA的差异性表达。结果与模型组(SHR)比较,QYQ可显著降低SHR大鼠收缩压及舒张压水平(P0.05),减少心肌细胞横截面面积(P0.05),显著上调心脏组织中miR-125a-5p的表达,显著下调其直接靶基因IL-6R mRNA、STAT3 mRNA的表达,显著下调心脏组织中IL-6 mRNA的表达(P0.05)。结论 QYQ不仅具有显著的降压作用,且对高血压心肌损伤具有显著的预防作用;QYQ对miR-125a-5p/IL-6R/STAT3介导作用通路的调节作用可能是其防治高血压心肌损伤潜在的分子机制之一。     

芪参益气滴丸对心梗后大鼠心功能及心肌纤维化相关蛋白表达的影响

目的:观察芪参益气滴丸对心肌梗死后大鼠心功能,Ⅰ型胶原(ColⅠ),Ⅲ型胶原(ColⅢ),基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及增殖细胞核抗原(PCNA),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),波形蛋白(Vimentin)表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠50只随机分为5组:假手术组,模型组,芪参益气滴丸低、高(135,270 mg·kg-1·d-1)剂量组(QSYQ-N,QSYQ-H),卡托普利组,每组10只。假手术组开胸穿线不结扎,其余各组结扎左冠状动脉前降支制作心肌梗死模型,灌胃4周。4周后生理记录仪记录血流动力学状态,免疫组织化学法检测大鼠心肌ColⅠ,ColⅢ及PCNA,α-SMA,Vimentin表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清中MMP-9浓度。结果:与假手术组相比,模型组左心室内压最大上升速率(+dp/dtmax),左心室内压最大下降速率(-dp/dtmax),左心室收缩压(LVSP)均明显降低,左心室舒张末期压(LVEDP)明显升高(P0.01);心肌ColⅠ,ColⅢ及PCNA,α-SMA,Vimentin表达上调,血清MMP-9浓度升高(P0.01);与模型组相比,QSYQ-N,QSYQ-H组,卡托普利组+dp/dtmax,-dp/dtmax,LVSP提高(P0.05,P0.01);QSYQ-H组、卡托普利组LVEDP降低(P0.05,P0.01);QSYQ-N,QSYQ-H及卡托普利组大鼠心肌ColⅠ,ColⅢ及PCNA,α-SMA,Vimentin表达下调,MMP-9浓度降低(P0.05,P0.01)。结论:芪参益气滴丸能够改善心肌梗死后大鼠心脏收缩与舒张功能,其机制与抑制胶原沉积、基质蛋白的降解及心脏成纤维细胞、肌成纤维细胞增殖、分化有关。     

天麻钩藤饮对肾性高血压大鼠TGF-β1和IGF-1表达的影响

目的 探讨天麻钩藤饮对肾血管性高血压大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)和胰岛素样生长因子1(IGF-1)的影响.方法 取雄性SD大鼠48只,随机分为假手术组、模型组、卡托普利组和天麻钩藤饮组,每组12只.造模后第5周开始给药,连续治疗8周,检测各组大鼠血压、左室重量(LVW)、左室重量指数(LVI=LVW/BW)和心肌组织胶原浓度(Coll),观察天麻钩藤饮抑制心肌纤维化的作用.同时,观察各组大鼠心肌组织转化生长因子β1和胰岛素样生长因子1的表达.结果 造模12周后,模型组大鼠的LVW、LVI和Coll均明显高于假手术组(P＜0.01),说明模型组大鼠出现了明显的左室肥厚和心肌纤维化现象,卡托普利组和天麻钩藤饮组大鼠的上述指标均有显著降低(P＜0.01),说明两药对左室肥厚和心肌纤维化均有明显的抑制作用,而两药之间没有显著性差异(P＞0.05).模型组大鼠心肌组织的TGF-β1水平较假手术组有明显的升高(P＜0.01),天麻钩藤饮对TGF-β1有显著的抑制作用(P＜0.05),而卡托普利组的TGF-β1水平虽然有所下降,但无统计学意义(P＞0.05).各组间大鼠心肌组织IGF-1水平无显著性差异(P＞0.05).结论 天麻钩藤饮能够缓解和逆转心肌纤维化,可能同抑制心肌组织TGF-β1的表达有关.     

针刺预处理对心梗后心衰大鼠心肌纤维化影响的实验研究

目的:探讨针刺预处理对心梗后心衰大鼠的心肌保护作用及其抗纤维化作用的相关机制。方法:45只雄性Wistar大鼠随机分为3组:假手术对照组、心梗后心衰模型组、针灸预处理组,建立大鼠心肌梗死后心衰模型,针刺预处理组于心梗后连续4周电针双侧肢体内关穴处理,4周后,超声心动图评价各组大鼠心功能;HE染色及天狼猩红染色测定左心室心腔大小及心肌纤维化情况;实时荧光定量PCR测定心肌组织微小RNA29a(miR29a)表达情况;蛋白免疫印迹法测定心肌纤维蛋白III型胶原蛋白(COL3A)表达情况。结果:心功能检测结果显示针刺预处理能够有效改善心梗后心衰大鼠左心室的舒张功能与收缩功能;HE染色及天狼猩红染色示:针刺预处理有效减小左心室心腔大小,且心室梗死区边缘纤维化面积比值较模型组小(P0.01);qPCR示:相较于模型组,针刺预处理显著提升了miR-29a的表达量(P0.05);Westernblot结果显示,针灸预处理显著降低心梗后心衰的胶原纤维蛋白COL3A的表达量(P0.05)。结论:针刺预处理对心梗后心衰具有保护作用,其机制可能与抗心肌纤维化相关。     

基于TGF-β1/Smads通路的鹿红方对心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响

目的观察鹿红方对心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响,从TGF-β1/Smads通路探讨其作用机制。方法采用左冠状动脉结扎法制备心肌梗死后心力衰竭大鼠模型。60只Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、培哚普利组和鹿红方低、中、高剂量组,鹿红方低、中、高剂量组分别予鹿红方0.625、1.25、2.5 g/kg灌胃,培哚普利组予培哚普利2 mg/kg灌胃,模型组及假手术组予等体积生理盐水,每日1次。灌胃8周后,超声心动图检测大鼠左室射血分数(LVEF)和缩短分数(FS);HE和Masson染色检测心脏组织病理变化,计算心肌胶原容积分数(CVF);PCR和Western blot分别检测心肌组织TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7m RNA和蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠LVEF、FS明显降低(P0.01),心肌组织局部出现细胞消失,结缔组织内部有大量淋巴细胞浸润,细胞发生肿胀,呈纤维化改变,CVF明显升高(P0.01),心肌组织TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA和蛋白表达升高,Smad7 mRNA和蛋白表达明显降低(P0.01);与模型组比较,鹿红方低、中、高剂量组及培哚普利组大鼠LVEF、FS明显升高(P0.01),结缔组织增生、淋巴细胞浸润减少,心肌纤维化改善,CVF明显降低(P0.05,P0.01),鹿红方中、高剂量组及培哚普利组大鼠心肌组织TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA和蛋白表达明显降低,Smad7 mRNA和蛋白表达明显升高(P0.01)。结论鹿红方对心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌纤维化有良好的抑制作用,其机制可能与调节TGF-β1/Smads通路有关。     

中西医联合治疗对晚期NSCLC miRNA表达谱的影响

目的对中西医联合治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)获益血清miRNA表达谱进行初步研究,探讨晚期NSCLC疗效监测和预测分子标记物。方法选取5例接受中西医联合治疗且疗效获益的晚期NSCLC患者(简称治疗组)和3例晚期NSCLC初治患者(简称肺癌组)及3名健康体检者(简称对照组),采集血清标本并用Trizol法提取总RNA,运用Exiqon公司microRNA PCR ARRAY芯片技术筛选检测肺癌组血清与对照组血清中差异miRNA表达谱、治疗组血清与肺癌组血清差异miRNA表达谱,基于聚类分析及对比分析,进一步得到中西医联合治疗晚期NSCLC获益miRNA表达谱。结果经microRNA PCR ARRAY检测和数据分析处理后,肺癌组与对照组共筛选出42个差异在2倍以上的miRNAs,其中29个为上调的miRNAs,13个为下调的miRNAs;且miR-10b-5p、miR-21-5p、miR-182-5p、miR-361-3p、miR-382-5p差异有统计学意义(P0.05)。治疗组与肺癌组筛选出45个差异在2倍以上的miRNAs,其中12个上调的miRNAs,33个下调的miRNAs;miR-137-3p、miR-182-5p、miR-376a-3p、miR-382-5p、miR-409-3p、miR-10a-5p、miR-21-5p、miR-29a-3p、miR-141-3p、miR-150-5p、miR-200c-3p、miR-342-3p、miR-365a-3p、miR-375、miR-502-3p 15个miRNAs差异有统计学意义(P0.05)。治疗组与肺癌组差异倍数2倍,与对照组差异倍数≤2倍的血清miRNA共筛选出22个,其中7个为上调miRNAs,15个为下调miRNAs;miR-127-3p、miR-182-5p、miR-382-5p、miR-409-3p、miR-10a-5p、miR-21-5p、miR-141-3p、miR-342-3p 8个miRNAs差异有统计学意义(P0.05)。结论包括miR-21-5p、miR-182-5p、miR-382-5p在内的差异miRNAs有望成为中西医联合治疗晚期NSCLC疗效监测和预测分子标记物;为中西医联合治疗晚期NSCLC个体化治疗提供参考。