黑芥子苷通过p38/JNK MAPK信号通路对阿霉素心脏毒性的保护作用

目的:探讨黑芥子苷对阿霉素诱导的心脏毒性的作用及机制。方法:10周龄雄性C57/BL6小鼠随机分为对照组、黑芥子苷组、阿霉素组和黑芥子苷+阿霉素组。阿霉素组和黑芥子苷+阿霉素组给予单次腹腔注射阿霉素(15 mg/kg),对照组和黑芥子苷组给予单次腹腔注射生理盐水(15 mg/kg),黑芥子苷组和黑芥子苷+阿霉素组小鼠同时用黑芥子苷5 mg/kg灌胃,每2天1次,共3次。7 d后超声心动图检测心脏功能,Western blot检测心肌中凋亡相关蛋白和MAPK信号通路相关蛋白的表达水平。结果:黑芥子苷组与对照组小鼠超声心动图各指标、凋亡相关蛋白表达水平和MAPK相关蛋白表达水平的差异无统计学意义。与对照组相比,阿霉素组小鼠LVEDD、LVESD均明显增大,LVEF和LVFS均明显减小,Bax表达水平、p38和JNK的磷酸化水平明显升高,Bcl-2表达水平明显降低(P均<0.05)。与阿霉素组相比,黑芥子苷+阿霉素组小鼠LVEDD、LVESD均明显减小,LVEF和LVFS均明显增大,Bax表达水平、p38和JNK的磷酸化水平均明显降低,Bcl-2表达水平明显升高(P均<0.05)。结论:黑芥子苷通过p38/JNK MAPK信号通路减少心肌细胞凋亡,减轻阿毒素诱导的心脏毒性。     

硫化氢通过调控p38丝裂原活化蛋白激酶抑制阿霉素引起的心肌细胞损伤

目的 研究硫化氢(H2S)是否通过调控p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路保护H9c2心肌细胞对抗阿霉素(DOX)引起的损伤.方法 应用DOX处理心肌细胞建立心肌细胞损伤模型.为观察H2S的保护作用,在DOX处理心肌细胞前,应用400 μmol/L硫氢化钠(NaHS,为H2S的供体)预处理细胞30 min.Western blot法测定p38MAPK蛋白的表达水平;应用细胞计数试剂盒8(CCK-8)比色法测定细胞存活率;Hoechst 33258核染色法观察细胞凋亡的形态学改变;双氯荧光素(DCFH-DA)染色荧光显微镜照相测定细胞内活性氧(ROS)水平.结果 在15 ～60min的时间范围内,5μmol/L DOX呈时间依赖性地上调心肌细胞磷酸化p38MAPK的表达水平;在DOX作用心肌细胞前,400 μmol/L NaHS预处理30 min能明显地抑制DOX对p-p38MAPK表达的上调作用,并能显著地阻断DOX引起的心肌细胞损伤,使细胞存活率升高、凋亡细胞数量和ROS生成均减少;与NaHS的保护作用相似,p38MAPK的抑制剂SB203580(3 μmol/L)预处理60 min能保护H9c2心肌细胞对抗DOX引起的损伤.结论 p38MAPK通路参与DOX对心肌细胞的损伤作用;H2S可通过抑制p38MAPK通路保护心肌细胞对抗DOX诱导的损伤.     

恩格列净通过抑制细胞焦亡改善糖尿病小鼠肾脏损伤

目的:研究恩格列净(empagliflozin)对db/db小鼠肾脏损伤的保护作用及其潜在作用机制。方法:db/db小鼠随机分为糖尿病肾病组(db/db组)和恩格列净治疗组(Empa组,恩格列净10 mg·kg -1·d -1灌胃),C57BL/6J小鼠作为正常对照组。干预3个月,检测血清生化、...     

川芎嗪通过激活Akt/eNOS通路预防阿霉素致小鼠心脏毒性

目的研究川芎嗪对阿霉素诱导的小鼠心脏毒性的预防作用及其机制。方法建立阿霉素诱导的心脏毒性小鼠模型,将小鼠随机分为3组:对照组、阿霉素组(阿霉素15 mg/kg)、川芎嗪组[川芎嗪60 mg/(kg·d)+阿霉素15 mg/kg],心脏超声检测川芎嗪干预后阿霉素对小鼠心脏功能的影响,HE染色及Masson三色染色检测小鼠心脏组织学及胶原蛋白的变化,TUNEL染色检测小鼠心肌细胞凋亡情况,Western blot检测p-Akt、Akt、p-eNOS、eNOS及cleaved Caspase-3蛋白的表达。结果与阿霉素组相比,川芎嗪组左心室短轴缩短率(FS)和左心室射血分数(EF)显著升高(P0.01);川芎嗪显著降低小鼠心肌细胞凋亡(P0.01),明显抑制小鼠心肌纤维化和炎症细胞浸润(P0.01);与阿霉素组相比,川芎嗪组显著上调p-Akt和p-eNOS的表达(P0.05),显著下调cleaved Caspase-3的表达(P0.01)。结论川芎嗪通过激活Akt/eNOS通路抑制心肌细胞凋亡保护阿霉素诱导损伤心肌可能是川芎嗪预防阿霉素致心脏毒性的一个潜在机制。     

组织蛋白酶B通过铁死亡途径加重糖尿病心肌病小鼠心肌损伤

目的 探讨组织蛋白酶B对糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy, DCM)小鼠心肌损伤的作用及机制。方法 选择8周龄SPF级C57BL/6雄性小鼠20只,随机分为野生型组、野生型DCM组,每组10只;8周龄SPF级组织蛋白酶B基因敲除的雄性小鼠20只,随机分为基因敲除组、基因敲除DCM组,每组10只。采用苏木精-伊红染色光镜下观察心肌组织形态变化,普鲁士蓝检测组织铁沉积水平,4-羟基壬烯酸(4-HNE)免疫组织化学染色检测组织脂质过氧化水平,蛋白免疫印迹法检测血红素氧合酶1(HO-1)、超氧化物歧化酶2(SOD2)、核因子E2相关因子2(Nrf2)表达,RT-PCR检测NRF-2、HO-1、磷脂过氧化氢谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)。结果 与野生型DCM组比较,基因敲除DCM组心脏组织细胞排列改善,炎性细胞浸润明显减少。与野生型DCM组比较,基因敲除DCM组心脏组织铁沉积明显减少。与野生型组比较,野生型DCM组心脏组织4-HNE表达明显增加;与野生型DCM组比较,基因敲除DCM组心脏组织4-HNE表达明显减少。与野生型DCM组比较,基因敲除DCM组心脏组织Nrf...     

柚皮苷通过调控p38MAPK通路保护H9c2心肌细胞对抗多柔比星引起的炎症反应

目的 探讨柚皮苷（naringin,NRG）能否通过调控p38丝裂原激活蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）通路保护H9c2心肌细胞对抗多柔比星（doxorubicin,DOX）引起的炎症反应.方法 应用5μmol·L-1 DOX处理H9c2心肌细胞建立DOX心肌毒性损伤模型.CCK-8比色法检测细胞存活率;Westem blot法测定p38MAPK蛋白表达水平;酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）和白细胞介素-6（IL-6）浓度.结果 在5μmol·L-1 DOX处理H9c2心肌细胞前,应用1μmol·L-1 NRG预处理150 min能明显抑制DOX引起的心肌细胞毒性,使细胞存活率升高,并能抑制5μmol·L-1 DOX对磷酸化（p）p38MAPK表达的上调作用;5μmol· L-1 DOX能引起H9c2心肌细胞产生炎症反应,表现为肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β和白细胞介素-6水平明显升高;1μmol· L-1 NRG预处理150 min或3μmol·L-1 SB203580（为p38MAPK抑制剂）预处理60 min均能抑制DOX对肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β和白细胞介素-6水平的升高作用及抑制DOX诱发的心肌细胞毒性.结论 NRG通过抑制p38MAPK通路保护H9c2心肌细胞对抗DOX引起的炎症反应及细胞毒性.     

人参皂苷Rg2对阿霉素诱导的心脏毒性模型小鼠心肌的保护作用机制研究

目的:探讨人参皂苷Rg2对阿霉素(DOX)诱导的心脏毒性模型小鼠心肌的保护机制。方法:将6～8周龄C57BL/6雄性小鼠60只随机分为对照组、模型组、右美托咪定组、Rg2-L组、Rg2-M组、Rg2-H组和Rg2-H+LY294002组。对照组仅给予无菌生理盐水腹腔注射,模型组、右美托咪定组、Rg2-L组、Rg2-M组、Rg2-H组、Rg2-H+LY294002组小鼠通过腹腔注射20 mg/kg阿霉素建立心脏毒性模型。在模型建立前30 min,右美托咪定组给予50μg/kg右美托咪定腹腔注射,Rg2-L组、Rg2-M组和Rg2-H组分别给予5、10、20 mg/kg人参皂苷Rg2腹腔注射,Rg2-H+LY294002组给予10 mg/kg LY294002、20 mg/kg人参皂苷Rg2腹腔注射,之后每日注射1次,连续干预5 d后处死小鼠。经胸超声心动图检测小鼠左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)、左室射血分数(LVEF)和左室短轴缩短率(LVFS)。苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色评估心肌组织学病理变化。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清心肌肌...     

益气养阴、活血化瘀方对实验性病毒性扩张型心肌病小鼠心肌细胞凋亡的影响

目的观察益气养阴、活血化瘀方对实验性病毒性扩张型心肌病小鼠心肌细胞凋亡的影响,探讨其防治病毒性扩张型心肌病的作用机制。方法采用多次腹腔注射柯萨奇B3m病毒的方式,建立重复感染的早期病毒性扩张型心肌病动物模型。将BALB/c小鼠210只随机分为4组,空白组30只,模型组、中药高剂量组、中药低剂量组各60只。中药高剂量组、中药低剂量组用益气养阴、活血化瘀方治疗4周后,采用原位末端标记法（TUNEL）,观察益气养阴、活血化瘀方对实验性病毒性扩张型心肌病小鼠心肌细胞凋亡的影响。结果中药高、低剂量组与模型组相比,可改善小鼠心肌组织病理形态学及超微结构的变化,抑制心肌细胞凋亡。结论益气养阴、活血化瘀方能够减轻病毒性扩张型心肌病小鼠的病理损伤,抑制心肌细胞肥大,抑制心肌细胞凋亡,从而对病毒性扩张型心肌病起到一定的防治作用。     

乳酸和依达拉奉联用后适应通过p38/应激活化蛋白激酶途径减轻心肌细胞凋亡的研究

目的探讨乳酸和低剂量依达拉奉能否模拟后适应通过p38/应激活化蛋白激酶(JNK)途径减轻心肌细胞凋亡。方法 108只雄性老年大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组(I/R组)、后适应组、乳酸组、低剂量依达拉奉组(Eda组)、乳酸+Eda组,每组18只。建立急性心肌梗死再灌注模型,测定再灌注10min后右心房血浆pH值,不同时间点处死大鼠,分别测定磷酸化p38/JNK、TNF-α、Caspase-8的表达以及心肌细胞凋亡。结果与I/R组比较,乳酸+Eda组血浆pH值、超氧化物歧化酶、细胞凋亡指数、磷酸化p38、磷酸化JNK、TNF-α、Caspase-8明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),丙二醛明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与后适应组比较,乳酸+Eda组上述各项指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论联合注射乳酸和低剂量依达拉奉可较好模拟机械后适应,通过p38/JNK途径减轻心肌细胞凋亡。     

阿托伐他汀抑制同型半胱氨酸诱导的内皮细胞凋亡涉及NADPH氧化酶及p38MAPK途径

目的观察阿托伐他汀对同型半胱氨酸（Hcy）诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡及活性氧的影响,并探讨其作用机制。方法Hcy单独或联合阿托伐他汀、N-乙酰半胱氨酸（NAC）、还原型辅酶Ⅱ（NADPH）氧化酶抑制剂（DPI）或p38促细胞分裂剂激活性蛋白激酶（p38MAPK）阻断剂（SB203580）处理人脐静脉内皮细胞后,检测细胞凋亡率,活性氧水平,NADPH氧化酶活性,caspase-3 mRNA的表达和p-p38MAPK的表达。结果阿托伐他汀明显抑制Hcy诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡及活性氧的产生,并能拮抗Hcy诱导的NADPH氧化酶的激活,p38MAPK蛋白的磷酸化及caspase-3 mRNA表达的增加。NAC、DPI、SB203580可产生相同的作用。结论阿托伐他汀可能通过抑制NADPH氧化酶的激活,p38MAPK磷酸化途径抑制Hcy诱导的人脐静脉内皮细胞活性氧的产生和细胞凋亡。     

丹皮酚通过抑制p38 MAPK/N-SMase2通路减少脂多糖诱导的THP-1细胞外泌体分泌

目的探讨丹皮酚抑制脂多糖诱导后THP-1细胞分泌外泌体的作用及机制。方法超速离心法提取外泌体,透射电镜(TEM)观察外泌体形态,Western blot检测标志蛋白Alix、TSG101、CD9和CD63,动态光散射检测外泌体粒径。CCK-8检测细胞存活率,BCA法检测外泌体蛋白量,Western blot检测N-SMase2、p-p38 MAPK蛋白水平。结果超速离心法获得的微囊泡结构物具有完整清晰茶托样膜,直径众数为130 nm,含标志性蛋白Alix、TSG101、CD9和CD63,鉴定为外泌体。丹皮酚(120、60及30μmol/L)可降低脂多糖(1 mg/L)诱导的THP-1细胞分泌外泌体,减少N-SMase2蛋白表达,抑制p38 MAPK磷酸化。结论丹皮酚抑制THP-1细胞外泌体分泌,该作用与抑制p38 MAPK/N-SMase2通路有关。     

p38 MAPK信号转导通路与脑缺血

p38丝裂原活化蛋白激酶（mitogen．activatedproteinkinase，MAPK）是一类重要的细胞内信号转导通路，其主要作用是参与炎症调节和细胞凋亡。脑缺血时，p38 MAPK被激活，其表达水平以及上游和下游蛋白磷酸化水平均发生改变。缺血预处理可能通过p38 MAPK信号转导通路介导脑缺血后神经细胞的存亡。     

p38MAPK信号转导通路与脑缺血

p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)是一类重要的细胞内信号转导通路,其主要作用是参与炎症调节和细胞凋亡.脑缺血时,p38 MAPK被激活,其表达水平以及上游和下游蛋白磷酸化水平均发生改变.缺血预处理可能通过p38 MAPK信号转导通路介导脑缺血后神经细胞的存亡.     

MicroRNAs participate in the cardioprotective activity of dexrazoxane against doxorubicin-induced cardiotoxicity

Background The co-administration of dexrazoxane(DEX)with each dose of doxorubicin(Dox)is an efficient strategy to relieve Dox-induced cardiotoxicity,however,the mechanisms underlying the cardioprotective effect of DEX have not been well elucidated.MicroRNAs(miRNAs)are endogenous,small non-coding RNAs that negatively regulate gene expression in diverse biological and pathological processes.The aim of the present study was to investigate whether the certain cardiac miRNAs were involved in DOX-induced cardiotoxicity.Methods Male SD rats were randomized into five groups,including the 4-week(cumulative dose16 mg / kg)and the 8-week(cumulative dose32 mg / kg)Dox-treated groups,and the corresponding 4-week and 8-week Dox plus DEX-treated groups and the normal control group.Heart functions of the animals were detected by echocardiography.Quantitative real-time PCR was used to determine the expression of cardiac remodeling,apoptosis-related genes and mature micoRNAs of interest.Results The echocardiography detection showed that cardiac remodeling and impaired heart function were observed after 4-week and 8-week Dox treatment,and the cardiac remodeling and decreased ejection fraction(EF%)and fractional shortening(FS%)were efficiently rescued in the corresponding 4-week and 8-week Dox plus DEX-treated groups.The myocardial expression of Anp and CTGF mRNA was significantly upregulated by Dox treatment,but the upregulation of Anp and CTGF mRNA was blocked in the Dox plus DEX-treated groups.IGF-1 mRNA was significantly up-regulated in rat myocardium in Dox plus DEX-treated groups,with no significant changes of Bcl-2 and BAX mRNA expression.Mature miRNAs determination demonstrated that the myocardial miR-1 and -30e were significantly downregulated and miR-21 and -208b were significantly up-regulated in Dox treatment groups,but the above miRNA dysregulation could be efficiently reversed after DEX treatment.Conclusions DEX could tune the microRNAs dysregulation in Dox-treated rat myocardium,miRNAs participated in the cardioprotective activity of DEX against Dox-induced cardiotoxicity.     

蒽环类抗肿瘤药诱发心肌病1例及文献复习

回顾性分析1例病情特殊的扩张性心肌病患者,65岁女性,之前无心脏病史。主要表现为胸闷、气短,相关检查提示扩张性心肌病,既往因乳腺癌接受蒽环类抗肿瘤药治疗。回顾之前发表的其他病例数据,总结蒽环类抗肿瘤药诱导心肌病的相关诊治经验,采用规范化、个体化治疗后患者症状缓解。因此,应用蒽环类抗肿瘤药治疗时应监测、防治由化疗药物导致的心脏毒性。若病变发展为慢性心脏毒性表现,则尽早应用改善心肌预后的药物。     

p38MAPK inhibition prevents disease in pemphigus vulgaris mice

Pemphigus vulgaris (PV) is a life-threatening autoimmune blistering skin disease characterized by detachment of keratinocytes (acantholysis). It has been proposed that PV IgG might trigger signaling and that this process may lead to acantholysis. Indeed, we recently identified a rapid and dose-dependent phosphorylation of p38 mitogen-activated protein kinase (p38MAPK) and heat shock protein (HSP) 27 after binding of PV antibodies to cultured keratinocytes. In human keratinocyte cultures, inhibitors of p38MAPK prevented PV IgG-induced phosphorylation of HSP27 and, more importantly, prevented the early cytoskeletal changes associated with loss of cell-cell adhesion. This study was undertaken to (i) determine whether p38MAPK and HSP25, the murine HSP27 homolog, were similarly phosphorylated in an in vivo model of PV and (ii) investigate the potential therapeutic use of p38MAPK inhibition to block blister formation in an animal model of PV. We now report that p38MAPK inhibitors prevented PV blistering disease in vivo. Targeting the end-organ by inhibiting keratinocyte desmosome signaling may be effective for treating desmosome autoimmune blistering disorders.     

p38MAPK信号通路与肝缺血再灌注损伤的关系研究

p38MAPK通路参与诸如细胞氧化应激、细胞凋亡和炎症等多种生理和病理过程并在其中起着重要作用。肝缺血再灌注损伤(HIRI)是肝脏外科手术面临的一大难题,由于HIRI发病机制复杂,临床上尚未发现更好的应对HIRI的防治策略。本文就p38MAPK信号通路的主要功能及其在HIRI中的相关作用作一综述,以便为防治HIRI提供一个新的思路。