猪源产志贺毒素大肠埃希菌耐药性及超广谱β内酰胺酶基因型分析

目的了解我国猪源产志贺毒素大肠埃希菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)产超广谱β内酰胺酶(Extended-spectrumβ-lactamases,ESBLs)情况及其基因型。方法对22株分离自重庆地区2个规模化养殖场健康猪粪的STEC菌株进行药物敏感性检测、ESBLs表型确证及7种类型(blaSHV,blaLEN,blaOKP,blaTEM,blaCTX-M,blaGES及blaKPC)ESBLs基因型PCR检测和测序分析。结果 22株携带stx2e的STEC菌株中2株对所有23种测试抗生素敏感,其余菌株除对亚胺培南和美罗培南敏感外,对其他抗生素均存在不同程度耐药。10株STEC菌株(占45.45%)产ESBLs酶。PCR检测其中1株为blaCTX-M-1基因型,其余9株为blaCTX-M-9+blaTEM-1基因型。结论重庆地区猪源STEC中存在较高比例的产ESBLs菌株。在加强人和动物STEC感染检测与监测的同时,应进行细菌耐药性监测。     

大肠埃希菌超广谱β内酰胺酶的检测结果比较

近年研究发现耐药性增加与多重耐药现象产生质粒编码的超广谱 β内酰胺酶 ( ESBL)有关。本文对 2 16株大肠埃希菌进行了测定 ,以正确指导临床选择用药。临床资料 :1菌株来源 :1998年 4月至 2 0 0 0年 8月临床送检标本痰、尿、脓汁、分泌物、前列腺液等经培养分离鉴定大肠埃希菌 2 16株。采用单、双纸片扩散法 ,部分酶联免疫吸附试验法确认。结果 :1大肠埃希菌在临床标本中的分布 :痰 85株、尿 78株、脓汁 3 6株、分泌物 2 4株、前列腺液 2 3株、其他 45株 ,共计2 91株。 2大肠埃希菌 2 91株的药敏结果见表 1。 3初筛实验结果 :2 91株大肠…     

尿路感染患者产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的耐药性分析

目的了解尿路感染患者中产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrumβ-lactamase,ESBLs)大肠埃希菌的耐药现状,指导临床合理用药。方法从我院2015年1月—2016年1月间尿路感染患者的尿液中分离出大肠埃希菌株。所有菌株采用法国梅里埃公司VITEK2 Compact分析仪进行细菌鉴定,纸片扩散法检测大肠埃希菌产ESBLs的产生情况及耐药特点。结果从尿路感染患者中共检出大肠埃希菌432株,其中有226株产ESBLs,检出率为52.31%,药物敏感性试验结果显示产ESBLs菌株对亚胺培南耐药率仅为0.88%;其次为呋喃妥因,耐药率为19.91%;耐药率最高的为氨苄西林,为98.23%;对含酶抑制剂的药物其耐药率也明显增加。与非产ESBLs菌株耐药性相比,产ESBLs株的耐药率显著增高。结论尿路感染患者中分离得到产ESBLs大肠埃希菌的比例较高,积极检测和监测产ESBLs大肠埃希菌及其耐药情况对于临床合理用药、院内感染控制及流行病学调查极为重要。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌院内感染调查

目的 分析我院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌院内感染情况。方法 调查我院2002年1月～2003年10月产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌感染情况，分析其院内感染的特点及相关因素。结果 49例感染产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌患者中社区获得性感染8例占16％，院内获得性感染42例占84％，院内感染科室有9个，主要是呼吸科、神经外科、消化科；院内感染部位主要是：呼吸道、泌尿道。院内感染患者100％前期应用抗菌素。结论 社区获得性感染产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌患者入院，介入性操作，不合理应用抗菌素与我院产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌院内感染有关，为控制其传播，应采取相应的消毒隔离措施，合理使用抗菌素，防止院内感染的暴发和流行。     

非O157产志贺毒素大肠埃希菌研究进展

产志贺毒素大肠埃希菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)是一类能产生一种或一种以上志贺毒素的大肠埃希菌的总称,包括400余种血清型,其中以O157∶H7血清型为主。近年来,非O157STEC在世界范围内引起散发感染和暴发的报道明显增加,但由于非O157STEC血清型多样,菌株间表型差异较大,目前尚无一种有效的能用于所有非O157STEC菌株分离的方法,因此非O157STEC的流行情况可能被低估。本文就非O157STEC的病原学、致病机制、流行病学特征、实验室诊断、治疗和预防等方面的研究进展做一简要综述。     

浙江省产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌流行情况及耐药性

目的 调查浙江省产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs)的大肠埃希菌（E.coli）和肺炎克雷伯菌（K.pneumoniae）的流行情况及耐药性。方法 收集各地区临床分离的E.coli和K.pneumoniae共362株,经抑制剂增强的肉汤稀释法筛选出产ESBLs细菌,并用浓度梯度法（E-test）检测其对9种抗菌药物的耐药性。结果 浙江省E.coli和K.pneumoniae中ESBLs检出率分别为37.9%和41.2%,总检出率为39.2%。产ESBLs细菌对头孢他啶（CAZ）、头孢噻肟（CTX）、头孢西丁（FOX）、头孢吡肟（FEP）、头孢哌酮/舒巴坦（CFP/SUL）、哌拉西林/他唑巴坦（PZP/TAE）、阿米卡星（AMC）、环丙沙星（CIP）的耐药率比不产酶株都有不同程度地增加,所有菌株对亚胺培南（IMP）都敏感。结论 浙江各地区ESBLs在E.coli和K.pneumoniae中的检出率高。产ESBLs菌对所测试的8种抗菌药物的耐药程度比不产酶株为高,但所有菌株对亚胺培南均敏感。     

产超广谱3-内酰胺酶大肠埃希菌临床和药物敏感性分析

目的 了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的耐药情况及产ESBLs感染的临床特点.方法 对126例大肠埃希菌感染患者(其中产ESBLs菌者70例为阳性组,非产ESBLs菌者56例为阴性组)耐药情况进行分析,通过病例对照分析产ESBLs大肠埃希菌感染的临床特点.结果 产ESBLs大肠埃希菌耐药率明显高于非产ESBLs菌,产ESBLs大肠埃希菌感染者较非产ESBLs者住院时间长、三/四代头孢和喹诺酮类药物的使用率、留置尿管和胃管率高,治愈好转率低.结论 产ESBLs大肠埃希菌株表现出较高的耐药性,临床上应合理使用抗生素,以减少耐药菌株的传播流行.     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和克雷伯菌感染临床调查

产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肠杆菌科细菌的耐药问题是当前全球最重要的医院内耐药问题之一，本文分析我院各临床科室产ESBLs大肠埃希菌和克雷伯菌感染分布情况，为临床采取针对性的消毒隔离措施，提供理论上的依据。     

老年下呼吸道院内感染产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的监测及耐药性分析

目前,医院感染的病原菌仍以革兰阴性(G-)杆菌为主[1,2],其中最常见的是大肠埃希菌.老年患者由于基础疾病多、病程长、免疫力低下等原因是G-杆菌的易感人群.     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶基因型及耐药性研究

超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）是革兰阴性细菌对新型广谱β-内酰胺类抗生素耐药最重要的机制，主要由大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌等肠杆菌科细菌产生。随着第三代头孢菌素在临床上的大量应用，产ESBLs的细菌种类不断增加，ESBLs基因表型也不断增加，成为细菌耐药机制研究的热点。     

牦牛携带的产志贺毒素大肠杆菌分离株的多位点序列分型研究

目的 对牦牛携带的产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)进行多位点序列分型(Multilocus sequence typing,MLST)分析,了解菌株的遗传进化关系及致病潜力。方法 根据E. coli MLST数据库(http://mlst.ucc.ie/mlst/dbs/Ecoli)提供的MLST方案,对青海玉树牦牛中分离的54株STEC分离株的7个管家基因进行PCR扩增并测序,通过序列比对确定其等位基因及菌株序列型(Sequence type,ST),并使用BioNumerics软件构建最小生成树(Minimum spanning tree,MST),分析牦牛ST型与HUSEC及人源主要流行血清群STEC菌株ST型间的进化关系。结果 54株牦牛STEC菌株呈现高度遗传多态性,可分为31个ST型别,其中包括7个新的等位基因型和17个新的ST型,并存在与HUSEC及主要流行血清群STEC亲缘关系相同或相近的ST型别。结论 青藏高原牦牛携带的STEC具有遗传多样性及一定的特异性,部分菌株具有对人致病的潜力。     

1 831株宋内志贺菌耐药性调查及其产ESBLs的研究

目的了解分离自腹泻患者的1831株宋内志贺菌的流行趋势及耐药情况,探讨宋内志贺菌多重耐药机制。方法采用志贺菌及沙门菌琼脂培养基培养及K—B法检测14种抗生素的耐药率。多重耐药菌用纸片确认试验检测产超广谱β内酰胺酶（extended-spectrum β-laetamases,ESBLs）,改良三维试验检测ESBLs和AmpC β内酰胺酶（AmpC β-lactamase,AmIpC酶）。结果1831株宋内志贺菌感染腹泻患者中,男女比例为1．25：1。高发季节为7～9月。1～20岁发病人数占总发病人数的71．0％。宋内志贺菌对复方磺胺甲嗯唑、氨苄西林和头孢曲松的耐药率较高,分别达87．7％、23．0％和9．5％,且增高趋势明显;对氟喹诺酮类,头孢吡肟、头孢美唑、氯霉素、磷霉素和庆大霉素的耐药率较低,明显低于头孢曲松、头孢噻肟（P〈0．05）。43株多重耐药菌均为ESBLs阳性株,未发现产AmpC酶株。结论在北京地区,宋内志贺菌感染腹泻患者发病年龄以青少年为主。其存志贺菌属感染的比例中有增高的趋势,对头孢曲松、头孢噻肟、复方磺胺甲嗯唑、氨苄西林的耐药率较高且有上升趋势。宋内志贺菌耐头孢菌素者以产ESBLs为主。     

自发性细菌性腹膜炎病原菌大肠埃希菌74株药敏分析

目的分析肝病患者自发性细菌性腹膜炎病原菌大肠埃希菌的药敏检测,以供临床治疗参考。方法回顾性分析74例肝病患者经腹水培养筛选出的74株大肠埃希菌,按照院内感染和非院内感染检测超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）阳性菌株,采用Kirby—Bauer法检测药物敏感性。结果74株大肠埃希菌中,36株为院内感染,38株为非院内感染,两组患者年龄、性别、病情严重程度比较无显著性差异,ESBLs阳性株分别为21株（58．3％）和18株（47．4％）,两组比较无显著性差异（P=0．3450）。大肠埃希菌产ESBLs率高,产酶大肠埃希菌呈多重耐药,对氟喹诺酮类药物、三代和四代头孢菌素耐药率高,对亚胺培南、阿米卡星、头孢美唑敏感率高。除复方新诺明外,院内感染和非院内感染的大肠埃希菌对常用抗菌素耐药率间无显著性差异。结论无论院内感染还是非院内感染,引起重型肝病患者自发性细菌性腹膜炎的常见病原菌大肠埃希菌对常用抗菌素的耐药性明显较高,氟喹诺酮类药物、三代和四代头孢菌素耐药率高,加用β-内酰胺酶抑制剂的复合制剂敏感率可提高,头孢美唑、亚胺培南可作为首选抗菌素。     

老年患者医院感染前五位常见革兰阴性杆菌ESBLs和AmpCβ-内酰胺酶分析

目的了解华东医院老年患者前5位常见革兰阴性杆菌产酶类型,为指导临床合理选用抗菌药物提供依据。方法收集2011年9月-2012年8月分离自老年医院感染患者的前5位常见的耐头孢西丁的革兰阴性杆菌,用改良的三维试验检测并分析革兰阴性杆菌的产酶类型。结果前5位常见的革兰阴性杆菌分别为鲍曼不动杆菌（88株）、铜绿假单胞菌（61株）、阴沟肠杆菌（42株）、产气肠杆菌（21株）和肺炎克雷伯菌（15株）,共计227个菌株;AmpCβ-内酰胺酶（简称AmpC酶）阳性率9．25％（21株）,ESBLs阳性率14．10％（32株）,同时产AmpC酶和ESBLs酶（简称SSBLs）的阳性率12．78％（29株）,其他水解酶阳性率28．19％（64株）。结论老年医院感染患者前5位常见细菌的产酶率高,耐药现象严重,应加强耐药性监测和控制。     

猪源肠出血性大肠杆菌的分离、鉴定及特性研究

目的探讨猪源肠出血性大肠埃希菌病原学特征。方法对所分离的菌株进行生化鉴定、药敏试验,并使用聚合酶链反应(PCR)技术检测毒力基因、耐药基因,同时对致病性的菌株进行外膜蛋白分型、REP-PCR和ERIC-PCR分析。结果从315株大肠杆菌中筛选到山梨醇阴性的EHEC21株,其中含有stx1基因的菌株有4株,含有stx2基因3株,含有eae基因的17株,外膜蛋白分型属于三个型,其中OMP-1型最多,有15株,OMP-2型3株,OMP-3型3株,REP-PCR和ERIC-PCR结果显示这些致病性菌株带型差异性较大,分属于不同的亚群。结论华中地区是养殖业比较发达的地区,而且人均消费猪肉比例也较高,EHEC的存在对人是一种潜在的威胁,应加强监测力度,防止该菌在人群中感染和流行。     

猪源大肠杆菌同一质粒中检测到qnrA和aac（6′）-Ib—CF耐药基因

The prevalence of plasmid-mediated quinolone resistance （PMQR） determinants was determined in 198 E. coli isolates, which separated from pigs during 1998-2007 from China. Four isolates were found to be positive for qnrA gene. One isolate from Liaoning Province in 2004 was positive for qnrA1 ＋aac（6＇）-Ib-cr and the other three isolates, which derived on the same pig farm in 2005 in Jiangsu Province, were positive for qnrA3＋aac（6＇）-Ib-cr. The qnrA and aac（6＇）-Ib-cr genes were located on the same plasmid. The cotransfer of the two genes led to the minimum inhibitory concentration （MIC） to ciprofloxacin increasing 32- to 128- fold. The qnrA1 and qnrA3 in combination with aac（6＇）-Ib-cr in E. coli strains from pigs in China were reported.     

福建省非典型肠致病性大肠杆菌（aEPEC）的发现及某些分子特征的研究

目的2010年10月从一名死婴粪便标本中分离到非典型肠致病性大肠杆菌（aEPEC）,为福建省首次鉴定该病原菌。本研究的目的是了解该病原菌的特征,为进一步开展aEPEC的研究工作提供基础数据。方法包括常规的系统生化鉴定、血清学鉴定、药敏试验、PCR检测毒力基因分布、eaeA基因的测序分析。结果该菌株生化表现符合大肠埃希氏菌特征;现有的典型的EPEC血清型不能凝集;药敏实验结果提示对大部分的药物均敏感;毒力基因检测为eaeA+、bfp-、stx1-、stx2-、ehxA-、paa-;eaeA序列在NCBI上比对的结果均提示为大肠埃希氏菌（EHEC/EPEC）紧密素（intimin）的eaeA基因。结论根据常规实验、分子诊断及测序结果证实该病原菌为福建省首次鉴定的非典型肠致病性大肠杆菌（aEPEC）,同时我们需要进一步检测其它的毒力相关基因,探讨这些基因和该菌株致病力的关系。     

多重抗药大肠杆菌中Ⅰ型整合子的分布与抗药关系

目的检测多重抗药大肠杆菌中检测Ⅰ型整合子的携带率及其对细菌抗药性的影响。方法用大肠杆菌显色．培养基分离奶牛场、猪场和肉鸡场的565株大肠杆菌,测定其对15种抗生素的MIC;用PCR扩增其中91株多重抗药性（最少耐3种抗生素）菌株的Ⅰ型整合酶基因及抗药基因盒。结果565株大肠杆菌仅对头孢噻呋、阿米卡星和硫酸粘菌素的抗药率低于50％,其余药物均表现出较高抗药率,且几乎所有细菌都对3种以上抗生素具有抗性。91株多重抗药大肠杆菌Ⅰ型整合子的平均检出率为83．52％,大多数整合aadA基因和dhfr基因,抗药性基因携带率为43．42％。结论Ⅰ型整合子对细菌多重抗药性的产生和传播起着重要作用,是临床细菌多重抗药性监测在基因水平的重要指标。     

肠出血性大肠埃希菌O157:H7Ⅱ型志贺毒素的纯化及功能鉴定

目的 亲和层析纯化肠出血性大肠埃希菌(EHEC)O157:H7Ⅱ型志贺毒素,并鉴定其生物学功能.方法 用抗-Ⅱ型志贺毒素分子A亚单位的抗体S1D8耦联至柱填料Sepharose 4B,制备亲和层析柱.纯化EHEC O157:H7菌体分泌的毒素分子,分别用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)和Western印迹法鉴定毒素分子纯度和特异度,将纯化毒素倍比稀释,观察其对Vero细胞和小鼠的毒性作用,计算其对细胞半数致死量(CD50)和对小鼠的全数致死量(LD100);观察抗毒素血清对小鼠进行毒素攻击的保护作用.结果 通过亲和层析从EHEC O157:H7培养物中成功纯化Ⅱ型志贺毒素.SDS-PAGE显示,其A、B亚单位的相对分子质量分别为32 000和7 500,纯化的毒素分子可分别与Ⅱ型志贺毒素A、B亚单位特异性的单抗结合;对Vero细胞和小鼠均存在致死作用,其CD50和LD100分别为20 ng/L和5 ng,小鼠体内抗毒素血清对毒素可有效中和.结论 成功纯化Ⅱ型志贺毒素,并证实其在细胞和动物模型中的毒性作用.