油菜花粉脂溶性提取物对人前列腺癌细胞PC-3的体外生长抑制研究

目的探讨油菜花粉脂溶性提取物(BPE)对体外培养的人前列腺癌细胞PC-3的杀伤效应。方法光镜观察用药前后PC-3细胞形态,透射电镜观察细胞凋亡的形态变化;流式细胞术检测BPE对PC-3细胞凋亡的影响;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测bax/bcl-2基因表达。结果 BPE对PC-3细胞增殖有抑制作用,PC-3细胞随着BPE浓度的增高其活细胞数下降,呈负相关。透射电镜下可见:核结构破坏,染色质稀疏,有些凝聚成团。随着时间的延长,细胞凋亡率上升,BPE与多西他赛能一同促进PC-3细胞发生凋亡。BPE的作用效应不是通过bax/bcl-2基因。结论 BPE可抑制人前列腺癌细胞PC-3的增殖,诱导细胞的凋亡。     

石榴皮多酚对人前列腺癌PC-3细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨石榴皮多酚对前列腺癌PC-3细胞株增殖和凋亡的影响。方法采用MTT法测定不同质量浓度组石榴皮多酚作用不同时间对PC-3细胞生长的影响,应用流式细胞仪检测石榴皮多酚作用72h后PC-3细胞的周期时相变化及凋亡情况。结果石榴皮多酚明显抑制PC-3细胞的生长,抑制效应呈时间依赖型和浓度依赖型。流式细胞仪检测结果显示,石榴皮多酚可将PC-3细胞阻滞于G1期,并诱导PC-3细胞凋亡。结论石榴皮多酚在体外对前列腺癌PC-3细胞株有明显的生长抑制和诱导凋亡的作用。     

枸杞多糖对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响

目的研究枸杞多糖(LBP)对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响。方法体外培养的人前列腺癌PC-3细胞经枸(LBP)处理后,采用MTT法测定细胞的增殖情况,流式细胞仪分析LBP对PC-3细胞周期和凋亡的影响,TUNEL法观察PC-3细胞凋亡的变化,用免疫组化法检测其Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果LBP可明显抑制人前列腺癌PC-3细胞的生长,并能诱导PC-3细胞凋亡,凋亡率分别为8.5%、17.5%、29.5%、37.5%和41.5%,与对照组比较,差异有非常显著性(P<0.01);同时PC-3细胞Bcl-2/Bax蛋白比值显著下降,呈明显的剂量-效应关系。结论LBP对人前列腺癌PC-3细胞DNA具有损伤作用,能诱导PC-3细胞的凋亡,调节其相关基因的表达。     

葡萄汁对人前列腺癌PC-3细胞的凋亡作用

目的研究葡萄汁对人前列腺癌PC-3细胞的影响。方法将低、中、高剂量(分别为16、32和64μl/ml)的葡萄汁加入体外培养的人前列腺癌PC-3细胞,检测葡萄汁对PC-3细胞的毒性作用,用单细胞凝胶电泳测其对DNA损伤作用,流式细胞术测细胞凋亡,免疫组化法测凋亡相关基因Bax、Bcl-2的表达。结果3种剂量的葡萄汁能抑制人前列腺癌PC-3细胞增殖;DNA迁移长度与彗星细胞拖尾率逐渐增高,拖尾细胞率最高为71%;能诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡,细胞凋亡率分别是14.5%3、2.1%和40.5%,促凋亡基因Bax表达率分别是36.8%、50.4%和64.8%;抑凋亡基因Bcl-2表达率依次为39.1%、25.0%和12.4%。结论葡萄汁可抑制人前列腺癌PC-3细胞增长,诱导其细胞凋亡,能上调促凋亡基因Bax的表达,下调抑凋亡基因Bcl-2的表达。     

Zeylenone抑制人前列腺癌PC-3细胞增殖及诱导凋亡作用研究

目的研究(4R,5S,6S)-4-苯甲酰氧基-6-[(苯甲酰氧基)甲基]-5,6-二羟基-2-环己烯-1-酮Zeylenone(Zey)对人前列腺癌PC-3细胞的生长抑制和诱导凋亡作用。方法采用MTT法观察Zey对PC-3细胞和正常前列腺基质细胞WPMY-1的增殖抑制作用,应用平板克隆形成实验观察Zey对PC-3细胞克隆形成的作用,AO/EB荧光染色观察细胞形态、JC-1染色观察Zey对细胞内线粒体膜电位的影响,An-nexin V-FITC/PI双染检测凋亡细胞比率,Western blot检测凋亡相关蛋白Caspase-9、Caspase-8、Caspase-3、Caspase-7和PARP的激活及Bcl-2、Bax、Bid、Bcl-xL蛋白的表达。结果Zey可以明显抑制人前列腺癌PC-3细胞的增殖并诱导其凋亡,而对正常前列腺基质细胞WPMY-1的抑制作用显著低于PC-3细胞。Zey抑制PC-3细胞克隆形成并明显诱导其凋亡。线粒体膜电位检测结果显示Zey导致细胞内线粒体膜电位的明显降低,Western blot检测结果表明Caspase-8、Caspase-9、Caspase-7、Caspase-3被激活,PARP和Bid被剪切活化,Bcl-2、Bcl-xL表达下降,而Bax表达上调。结论 Zey可选择性抑制人非激素依赖性前列腺癌PC-3细胞的增殖并诱导其凋亡,作用机制与其对Bcl-2和Caspase家族蛋白的影响,从而诱导PC-3细胞发生内源性和外源性凋亡相关。Zey有望成为治疗前列腺癌的候选药物。     

姜黄素对前列腺癌PC-3细胞增殖的抑制作用

目的研究姜黄素对PC-3细胞增殖活性的影响。方法以不同浓度(10、20、40、60、80μmol/L)的姜黄素及顺铂作用于体外培养的PC-3细胞24h,以中效浓度(40μmol/L)的姜黄素及顺铂作用于体外培养的PC-3细胞4、12、24、48、72h,后用MTT法检测在不同浓度及时间作用下PC-3细胞的抑制率,应用流式细胞仪检测PC-3细胞周期的变化。结果姜黄素对PC-3细胞的增殖抑制作用与顺铂相似(P>0.05),具有剂量时间依赖性,并随着药物浓度及时间的增加,抑制率逐渐增高,流式细胞仪检测显示:姜黄素和顺铂组都能使PC-3细胞生长明显阻滞于G2/M期,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。各实验组与空白对照组比较均有显著性差异(P<0.05)。结论姜黄素可以明显抑制PC-3细胞的增殖,在临床治疗前列腺癌方面有着良好的应用前景。     

透骨草提取物对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响

目的观察透骨草提取物对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响,进一步探讨透骨草提取物对SMMC-7721细胞增殖抑制的分子机制。方法MTr法检测透骨草提取物对SMMC-7721细胞增殖的影响,免疫组化方法检测SMMC-7721细胞β-catenin和cyclinD1蛋白的表达。结果6．25—100μg／ml透骨草提取物处理的SMMC-7721细胞增殖抑制率与对照组相比显著增加（P〈0．05）,而且随透骨草浓度的增加,抑制率逐渐增加。透骨草提取物对SMMC-7721细胞的半数抑制浓度（IC50）为40．91ug/ml。40．91μg／m1透骨草提取物处理的SMMC-7721细胞β—catenin和cyclinD1的表达明显低于对照组（P〈0．05）。结论透骨草提取物对SMMC-7721细胞的增殖有抑制作用,其机制可能与下调β-catenin和cyclinD1的蛋白表达有关。     

蛇床子素体外对人前列腺癌DU145细胞增殖的抑制作用及机制

目的观察天然化合物蛇床子素对人前列腺癌DU145细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用,为临床应用提供实验基础。方法用不同浓度的蛇床子素作用于DU145细胞,用四甲基偶氮噻蓝(MTT)法检测细胞增殖;用流式细胞仪AnnexinV/PI双染法检测蛇床子素诱导DU145细胞凋亡;用荧光显微镜观察蛇床子素作用于DU145细胞后细胞核的形态变化。结果 MTT法显示,蛇床子素对DU145细胞的增殖有明显的抑制作用(P<0.05),并呈现明显的时间浓度依赖性;流式细胞仪法显示,蛇床子素可诱导DU145细胞凋亡,且呈浓度依赖性;荧光显微镜下观察到蛇床子素处理组可见核固缩、核碎裂等典型的凋亡改变。结论蛇床子素对人前列腺癌DU145细胞的增殖具有抑制作用,机制与其诱导细胞凋亡有关。     

蝎毒多肽提取物对非激素依赖性前列腺癌细胞增殖抑制作用的实验研究

目的观察蝎毒多肽提取物(PESV)对非激素依赖性前列腺癌细胞DU145和PC3的生长与增殖、细胞周期及cyclinE和p27蛋白表达的影响。方法采用噻唑蓝(MTT)法检测PESV对前列腺癌细胞PC3和DU145生长与增殖的影响,流式细胞术观察药物对细胞周期的影响,免疫组织化学法检测药物干预后,cyclinE和p27蛋白水平表达的变化。结果MTT结果显示,PBSV40～200mg·L-1时对前列腺癌细胞具有毒性作用,40mg·L-1时,DU145和PC3细胞抑制率(IR)分别为30.5%和33.1%,与阴性组比较细胞增殖抑制作用明显(P<0.05),随剂量加大作用增大,至200mg·L-1时,几乎100%抑制,呈明显剂量效应关系;流式细胞术显示,PESV干预后处于S期的细胞减少(DU145细胞和PC3细胞S期的比例分别为34.1%和17.1%,与阴性对照组相比,P<0.01),处于G0/G1和G2/M期的细胞增多;免疫组织化学检测显示,PBMV干预后,DU145和PC3细胞cyclinE蛋白阳性表达细胞数量减少,灰度值明显下调(P<0.01),p27蛋白阳性表达数量增加,灰度值明显上调(P<0.05)。结论PESV可阻止前列腺癌细胞由G0/G1和G2期进入S期,对前列腺癌细胞增殖具有明显抑制作用,在前列腺癌治疗中具有重要价值。     

蕃茄汁对人前列腺癌PC-3细胞增殖的影响

目的　研究番茄汁对人前列腺癌PC 3细胞增殖的影响及其可能的机制。方法　体外培养人前列腺癌PC 3细胞,分别加入不同浓度的番茄汁;用彗星试验测定经番茄汁处理的人前列腺癌PC 3细胞DNA链断裂情况,分析DNA的损伤作用;采用MTT法测定细胞的增殖情况。结果　番茄汁对人前列腺癌PC 3细胞的DNA具有损伤作用,可使DNA链断裂,DNA的迁移长度与彗星细胞拖尾率显著增高,与对照组相比,差异有非常显著性;能抑制PC 3细胞的增殖,与对照组相比,各实验组的吸光度逐渐降低,差异有非常显著性,且随着浓度的增加抑制作用逐渐加强。结论　番茄汁可诱导人前列腺癌PC 3细胞的DNA损伤,从而抑制其生长。     

瑞舒伐他汀对人胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨瑞舒伐他汀对人神经胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响。方法体外培养人神经胶质细胞瘤U251细胞,分别采用5、10、20μmol/L瑞舒伐他汀进行干预,培养24、48、72、96 h,采用MTT比色法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测U251细胞周期的变化。结果处理96 h后,570 nm处吸光度(A570 nm)值变化最明显,瑞舒伐他汀每个浓度组A570 nm值与对照组比较均显著下降(P0.01)。瑞舒伐他汀处理细胞48 h后,与对照组比较,G0/G1期细胞增多,S期和G2/M期细胞减少,且瑞舒伐他汀浓度越大,该作用越强。使用不同浓度瑞舒伐他汀处理48~72 h能诱导U25l细胞凋亡。随着瑞舒伐他汀浓度的增加、作用时间的延长,凋亡峰更加明显,并呈浓度–效应和浓度–时间相关性。结论瑞舒伐他汀对胶质瘤U251细胞增殖具有一定的抑制作用,可以诱导胶质瘤U251细胞凋亡。     

银杏叶提取物对胃癌SGC7901细胞增殖与凋亡的影响

目的:研究银杏叶提取物(GBE)对胃癌SGC7901细胞增殖与凋亡的影响。方法:0、5、10、20、50、100、200μg/ml GBE培养细胞48 h后,MTT法测定细胞活力并计算抑制率。0、10、50、200μg/ml GBE培养细胞48 h后,流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡率。结果:5、10、20、50、100、200μg/ml GBE培养细胞48 h后,对细胞生长有明显抑制作用,且呈剂量依赖关系。10、50、200μg/ml GBE培养细胞48 h后细胞凋亡率升高。结论:GBE可一定程度上抑制SGC7901细胞增殖,诱导其凋亡,以前者为主。     

番茄红素异构体对人卵巢癌HO-8910细胞增殖和凋亡的影响效果初探

目的研究番茄红素异构体对体外培养的人卵巢癌HO-8910细胞增殖和凋亡的影响。方法观察含不同比例的顺、反式异构体番茄红素对人卵巢癌HO-8910细胞的增殖抑制作用;采用PI流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果番茄红素异构体对人卵巢癌HO-8910细胞有一定程度的抑制增殖和诱导凋亡的作用,且呈浓度依赖性。结论对人卵巢癌HO-8910细胞,含较高比例顺式番茄红素的Ⅱ号药组抑制增殖与诱导凋亡的作用比全反式番茄红素的I号药组具更强的生物活性。     

黄芪多糖对前列腺癌PC3细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨黄芪多糖对前列腺癌细胞株PC3细胞增殖和凋亡的影响。方法分别用浓度为0.5、1、2.5、5、10 mg/ml的黄芪多糖(APS)干预PC3细胞12、24、36 h后,用甲基噻唑基四唑法检测不同浓度APS对PC3细胞增殖的量效和时效关系;台盼蓝染色法测定细胞生长曲线;APS干预24 h后流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 APS能抑制PC3细胞的增殖,呈时间与浓度依赖性,不同浓度APS组之间与不同作用时间组之间的差异均有统计学意义(P<0.05)。APS干预PC3细胞24 h后,对照组细胞凋亡率为5.01%,1 mg/ml和5 mg/ml的APS培养24 h细胞凋亡率分别为14.46%和27.71%,较对照组明显增加,且差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论APS能够抑制前列腺癌细胞株PC3细胞的增殖,并诱导其凋亡。     

原花青素对人冠状动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

目的研究原花青素对人冠状动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的影响。方法采用MTT实验检测原花青素对体外培养的人冠状动脉平滑肌细胞增殖的影响,运用流式细胞术、基因组DNA电泳观察凋亡特征性＂梯状＂条带检测细胞凋亡,采用Caspase活性定量检测试剂盒分析Caspase-9、Caspase-3的活性。结果原花青素对人冠状动脉平滑肌细胞具有明显的抑制作用,且其作用有剂量依赖性。流式细胞仪检测显示原花青素可以显著诱导人冠状动脉平滑肌细胞凋亡,DNA电泳显示原花青素作用于人冠状动脉平滑肌细胞后出现凋亡细胞特有的DNA阶梯状条带。原花青素作用后人冠状动脉平滑肌细胞Caspase-9、Caspase-3活性明显升高。结论原花青素可能通过线粒体信号通路抑制人冠状动脉平滑肌细胞的生长并诱导其凋亡。     

土木香乙酸乙酯提取物对人胰腺癌Capan-2细胞增殖的抑制作用及机制研究

目的:研究土木香乙酸乙酯提取物(IHE)对人胰腺癌Capan-2细胞增殖的抑制作用及机制。方法:采用MTT法测定0、0.5、1、2、4、8μg/mL的IHE作用48 h后细胞的增殖抑制率,克隆形成试验观察0、1、2μg/mL的IHE作用1周后对细胞克隆形成的影响,Hoechst 33342染色法观察0、2、4μg/mL的IHE作用48 h后细胞核形态的变化,流式细胞术检测0、4、8、16μg/mL的IHE作用48 h后细胞的凋亡率,JC-1染色法观察0、4、8、16μg/mL的IHE作用24 h后细胞线粒体膜电位变化,Western blot法检测0、4、8、16μg/mL的IHE作用48 h后细胞线粒体凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Mcl-1和p53上调凋亡因子(PUMA)、多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(PARP)蛋白的表达。结果:2、4、8μg/mL的IHE对细胞的增殖有明显抑制作用,且呈浓度依赖性,半数抑制浓度为6.6μg/mL;1、2μg/mL的IHE可明显抑制细胞的克隆形成;4μg/mL的IHE可明显造成细胞核固缩;8、16μg/mL的IHE可明显促进细胞凋亡,16μg/mL的IHE作用48 h后细胞凋亡率达到45.53%;16μg/mL的IHE作用24 h后可引起82.47%的细胞线粒体膜电位下降;8μg/mL的IHE可明显下调细胞中Bcl-2、Mcl-1、PUMA、PARP蛋白表达,16μg/mL的IHE可明显下调细胞中Mcl-1、PUMA表达。结论:IHE可能通过引起细胞线粒体膜电位的下降,下调细胞中PUMA、Mcl-1蛋白的表达,引起细胞的凋亡,从而发挥其抑制人胰腺癌Capan-2细胞增殖的作用。     

重楼活性单体PP-22对人结肠癌SW620细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨重楼活性单体PP-22对人结肠癌SW620细胞增殖和凋亡的影响及其联合5-氟尿嘧啶(5-FU)和洛铂的抗肿瘤效果。方法 采用噻唑蓝(MTT)法和克隆形成抑制实验观察不同浓度PP-22对人结肠癌SW620细胞增殖的抑制作用;分别观察PP-22联合5-FU和洛铂对人结肠癌SW620细胞增殖的抑制作用;碘化丙锭单染流式细胞术检测细胞周期变化及细胞凋亡水平;Western blot法检测PP-22作用后细胞凋亡相关蛋白的表达。结果 重楼单体PP-22能显著抑制SW620细胞的生长,作用呈剂量-效应关系;随着PP-22浓度的增加,细胞克隆形成逐渐减少,与细胞对照组和DMSO组相比有显著差异;PP-22联合不同浓度的5-FU和洛铂作用于SW620细胞48 h,可提高SW620细胞对5-FU和洛铂的敏感性;不同浓度PP-22作用于SW620细胞后,细胞周期阻滞于S期;PP-22作用后存在Caspase-3和Caspase-9蛋白的活化和降解,抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xL减少,促凋亡蛋白Bax的表达增加。结论 PP-22能显著抑制人结肠癌SW620细胞增殖,诱导细胞凋亡,提高SW620细胞对5-FU和洛铂的敏感性。     

银杏叶提取物对三氯乙烯诱导的人角质形成细胞凋亡的影响

目的研究体外培养条件下银杏叶提取物(ginkgo biloba leaf extracts,EGb)对三氯乙烯(trichloroethylene,TCE)诱导的正常人表皮角质形成细胞(normal human epidernis keratinocyte,NHEK)凋亡的影响。方法体外培养条件下,用中性红吸附试验(NRU)测定TCE对NHEK的中性红吸附减少50%的质量浓度(NR50值)和EGb的最低有效保护质量浓度。用透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)观察细胞凋亡形态学改变,流式细胞仪(flow cytometer,FCM)测定细胞DNA含量并计算凋亡发生率。结果TCE对NHEK的NR50值为4.53(3.92~5.13)mmol/L;用10、50、100、150和200 mg/L EGb预孵育NHEK 2 h时,由2.0 mmol/L TCE引起的细胞活力的下降随EGb剂量的增加逐渐恢复,且150 mg/L为最低有效保护剂量。TCE可引起NHEK的超微结构呈凋亡改变,凋亡发生率呈剂量依赖式增加。与0.125、0.5和2.0 mmol/LTCE暴露组相比,150 mg/L EGb预孵育组,细胞超微结构恢复到正常对照组水平,凋亡发生率明显减少。结论体外培养条件下,EGb可以抑制TCE诱导的NHEK的细胞凋亡。     

贯叶金丝桃提取物对人结肠癌HCT8细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究贯叶金丝桃提取物对人结肠癌HCT8细胞的增殖及凋亡的影响。方法:采用MTT法检测贯叶金丝桃提取物对HCT8细胞的生长抑制作用;流式细胞仪检测贯叶金丝桃提取物对HCT8细胞凋亡率的影响。结果:6.25～200μg/mL的贯叶金丝桃提取物对HCT8细胞生长具有一定的抑制作用,呈现作用时间和剂量的依赖关系;细胞凋亡率随药物浓度升高而逐渐递增。结论:体外实验表明贯叶金丝桃提取物对人结肠癌HCT8细胞具有一定的生长抑制作用,作用机制与诱导HCT8细胞凋亡有关。     

槲皮素联合喜树碱促进人前列腺癌PC-3细胞的凋亡

目的考察槲皮素联用喜树碱对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响。方法体外培养PC-3细胞,用CCK-8实验、细胞周期检测实验和Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测实验,考察槲皮素联用喜树碱对PC-3细胞增殖凋亡的影响;用Western-Blot实验检测凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、PARP1和Caspase-3)的表达。结果 CCK-8实验结果显示槲皮素和喜树碱都可以一定程度地抑制PC-3细胞增殖,诱导凋亡作用,其中槲皮素和喜树碱联用效果更优。药物作用48 h后其半数抑制浓度(IC₅₀)分别为38.76、2.25、1.88μmol·L^-1。细胞周期实验显示,药物联用组细胞周期处于S期的细胞比例明显高于单用组(P<0.05);细胞凋亡实验显示,药物联用组的细胞凋亡率显著高于单用组(P<0.05);Western-Blot结果显示,药物联用组对凋亡相关蛋白的影响更为明显,使Bcl-2蛋白表达下降为47%,分别使Bax、PARP1和Caspase-3依次增加1.17、0.77和0.69倍(P<0.05)。结论槲皮素联合喜树碱能够显著促进人前列腺癌PC-3细胞的凋亡。