全基因测序分析耐甲氧西林金黄色葡萄球菌利奈唑胺耐药相关变异位点

目的通过全基因组测序研究利奈唑胺(LZD)敏感株和诱导耐药耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)之间基因变异位点差异,了解LZD耐药基因变异位点。方法采用不同浓度梯度的LZD对遗传背景清晰的MRSA-MS4母株进行诱导,获得LZD耐药菌株MRSA-MS4-LZD100,测定最低抑菌浓度(MIC),采用普通聚合酶链反应(PCR)扩增MRSA-MS4-LZD100 23S rRNA V区及核糖体蛋白L3/L4基因,测序后与野生株比较,获得相应的突变位点;采用Illumina HiSeq 2000测序技术对样品DNA进行paired-end(PE)测序,构建Illumina PE文库,利用生物信息学完成该菌株的全基因组测序。结果经过32代诱导,获得MRSA-MS4-LZD100菌株,其LZD MIC为96μg/mL。PCR测序分析提示其V区多拷贝基因均存在G2447T突变,L3蛋白存在Gly113Val突变;全基因组包含2 744 315 bp碱基对,注释后共有2 509个基因,11个tRNA编码基因,以及2个完整的rRNA基因编码操纵子,获得PubMed全基因序列号(JXMJ00000000);共找出101个SNP和6个Small indel突变,发生于外显子的SNP占16个,SNP后导致氨基酸序列改变的蛋白质包括IstB ATP结合区域包含蛋白、凝集因子A及转座子IS1272等,而发生于外显子的Small indel占3个,Small indel突变后导致氨基酸序列改变的蛋白质包括假设蛋白、30S核糖体蛋白S1、凝集因子A。结论经LZD诱导获得LZD耐药MRSA-MS4-LZD100菌株,测序分析提示该菌株存在除23S rRNA V区及L3蛋白基因以外的突变位点,为进一步研究隐性LZD耐药机制指明了方向。     

耐利奈唑胺头状葡萄球菌耐药性及患者临床特征

目的了解耐利奈唑胺头状葡萄球菌的耐药机制以及临床特征。方法收集某院分离的耐利奈唑胺头状葡萄球菌,采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株的同源性,PCR方法扩增23S rRNA基因、编码核糖体蛋白L3和L4的基因(rplC、rplD),以及耐药基因CFR,并测序。结果 5例患者标本分离7株耐利奈唑胺头状葡萄球菌,其对苯唑西林、左氧氟沙星、庆大霉素等常用抗菌药物耐药,仅对糖肽类、利福平、四环素,奎奴普丁/达福普汀敏感。7株耐药菌23S rRNA均存在突变,均不携带CFR基因。PFGE显示,7株临床株属同一谱型。5例患者均有严重的基础疾病,分离出耐药菌的住院时间92 d～10个月,其中3例患者深静脉置管,1例同时深静脉、透析置管,3例曾接受利奈唑胺治疗。结论7株头状葡萄球菌对利奈唑胺耐药是由于23S rRNA第V区G2576T和C2104T突变导致;利奈唑胺耐药头状葡萄球菌呈多重耐药表型,患有基础疾病、长期住院、长疗程使用利奈唑胺和深静脉置管可能是患者感染此类耐药菌的危险因素。     

金黄色葡萄球菌异质性耐药机制及实验室检测技术

 异质性耐药是一种特殊的细菌耐药类型,常表现为同一克隆来源的不同细菌亚群对某种抗菌药物表现出不一致的耐药特征,大多数亚群对某种抗菌药物敏感,而少部分亚群对其耐药或高度耐药。异质性耐药分离株常会导致特定抗菌药物抗感染治疗失败。针对异质性耐药菌较为深入的研究主要集中于革兰阴性菌,革兰阳性球菌的相关报道较少。近年有研究报道万古霉素、利奈唑胺、苯唑西林等多种类型抗菌药物异质性耐药金黄色葡萄球菌分离株出现,但其实际临床意义尚待进一步评估。此文对金黄色葡萄球菌异质性耐药机制和检测技术最新进展进行综述,为细菌异质性耐药机制研究和新型检测技术研发提供新的思路。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染的耐药性分析及利奈唑胺治疗效果的研究

目的 通过对重症监护病房(ICU)耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)感染的分析,探讨其耐药性;并观察利奈唑胺在MRSA感染中的治疗效果.方法 收集ICU 2006年3月-2009年3月入住ICU患者的痰、血、尿、脑脊液、中心静脉穿刺针顶端及局部引流物进行细菌学培养及药物敏感性试验,其中15例MRSA感染患者应用利奈唑胺治疗.结果 ICU 3年共发生MRSA感染72例,绝大多数为耐药菌;万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺对MRSA感染的敏感率高,均为100%,ICU近3年MRSA有逐年升高的趋势,利奈唑胺组的有效率和痊愈率分别为73.3%和33.3%,均高于万古霉素组(66.7%和28.6%)(P<0.05).结论 ICU中MRSA的感染率较高,必须引起重视,利奈唑胺是MRSA感染的有效药物,且不良反应较少.     

耐苯唑西林金黄色葡萄球菌的测定及耐药性分析

目的 了解医院产β-内酰胺酶耐苯唑西林金黄色葡萄球菌的阳性率及耐药性.方法 菌株鉴定采用法国生物梅里埃公司的VITEK 60分析仪,药敏试验采用K-B法,纸片扩散确证试验检测MRSA.结果 175株金黄色葡萄球菌中,产β-内酰胺酶的菌株占94.3%,耐苯唑西林的菌株占28.6%,主要分离于脓液/创面占52.0%,其次是痰液/咽拭子占32.0%.结论 β-内酰胺晦阴性的菌株宜首选青霉素;β-内酰胺酶阳性、苯唑西林敏感菌株宜首选一代头孢;β-内酰胺酶阳性、耐苯唑西林菌株宜首选呋哺妥因和利奈唑胺;未发现万古霉素耐药株,应慎用.     

异质性万古霉素中介的金黄色葡萄球菌耐药机制及临床意义

金黄色葡萄球菌是社区和医院感染常见的病原菌之一,它可引起肺炎、脑膜炎、皮肤蜂窝组织炎、关节炎、骨髓炎和心内膜炎等,严重的可以引起中毒性休克综合征.部分金黄色葡萄球菌对多种抗菌药物产生抗性,具有多药耐药特点,造成治疗困难.自1961年首次发现耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)至最近的几十年,MRSA感染几乎遍布全球,且感染率呈逐年增加的趋势,因此MRSA感染已经成为一个世界范围内的临床问题.     

金黄色葡萄球菌对万古霉素耐药现状及耐药机制

万古霉素是治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistant staphylococcus aureus,MRSA)的首选药物,然而金黄色葡萄球菌对万古霉素耐药情况却与日俱增,引起医学界的普遍关注。本文就金黄色葡萄球菌对万古霉素耐药现状及耐药机制进行综述。     

金黄色葡萄球菌298株的耐菌性分析

目的分析金黄色葡萄球菌（SA）及其耐苯唑西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的耐药性。方法筛选2005-2006年分离的298株SA，采用生物梅里埃VITEK32鉴定药敏复合板进行鉴定和药敏试验，按美国临床实验室标准化委员会（NC—CLS）标准对19种抗生素进行耐药性监测及分析。结果2年间SA的检出分别为135株和163株，其中2005年的MRSA检出率为87．8％（118／135），2006年的MRSA检出率为95．1％（155／163），高于2005年的MRSA检出率。MRSA中，利福平、复方新诺明和四环素的耐药率2006年比2005年明显升高；而在苯唑西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA），四环素的耐药率显著增高，喹诺酮类药物有耐药率升高趋势。MRSA呈多重耐药性，MSSA除对青霉素、氨苄西林的耐药率为90％以上外，其余抗菌药物较敏感。结论 临床治疗SA应根据药敏试验结果，合理使用抗生素，减少多重耐药的MRSA产生。     

利奈唑胺治疗金黄色葡萄球菌心内膜炎合并脑脓肿的疗效

利奈唑胺用于治疗心内膜炎合并脑脓肿的有效性,尚需积累临床经验.笔者分析3例利奈唑胺治疗金黄葡萄球菌心内膜炎合并脑脓肿患者的效果.1 病例1.1 病例1 男35岁,发热5d,皮肤巩膜黄染2d入院.查体:体温39℃,全身皮肤巩膜黄染,心脏未及杂音,双手小指及双足拇指可见瘀斑.查血常规:白细胞12.7×109/L,中性细胞87.5％,C-反应蛋白174.0mg/L.血生化示:总胆红素234.0 μmol/L,直接胆红素173 μmol/L,谷丙转氨酶741U/L.即予血培养及手指瘀斑穿刺液培养,万古霉素加美罗培南抗感染.治疗3d,患者体温38.7℃,双肺CT示:右下肺感染;头颅MRI示脑内多发小脓肿形成;心脏超声示:主动脉瓣赘生物形成.血培养为金黄色葡萄球菌,停万古霉素,改利奈唑胺600 mg静脉滴注,1次/12 h,48 h后体温降至正常,继续用药4周,复查患者二尖瓣出现赘生物,且出现腹部疼痛,考虑栓塞,心胸外科会诊急诊行双瓣置换术,术后继续用利奈唑胺2周,至出院时复查双肺CT头颅MRI未见明显异常,血常规、肝功能恢复正常.     

金黄色葡萄球菌感染耐药情况分析

目的监测金黄色葡萄球菌的药敏情况,为金黄色葡萄球菌感染提供选药依据.方法使用阳性复合板PC20法药敏试验,对从患者标本中分离出的148株金黄色葡萄球菌结合临床相关资料进行分析;采用头孢西丁纸片法做耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)测定.结果金黄色葡萄球菌对18种常用抗菌药物的总耐药率依次为青霉素95.9%,氨苄西林94.1%,氯霉素90.0%,红霉素76.0%,头孢噻吩69.1%,苯唑西林64.1%.不同部位分离的金黄色葡萄球菌对同一抗菌药物的耐药率差异有显著性.结论临床医生在治疗金黄色葡萄球菌引起感染的过程中,应根据不同感染部位参考耐药性监测,选用适宜的抗菌药物,并在治疗中注意减少耐药菌株的产生.     

2006-2010年耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的测定与耐药性变迁

目的 了解2006-2010年医院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出率与耐药性变迁.方法 采用VITEK-60全自动微生物分析仪对菌株进行鉴定及药敏检测,药敏结果使用WHONET软件进行分析.结果 共检出金黄色葡萄球菌867株,45.4％来自于脓液/创面,其次是呼吸道标本占22.6％;2006-2010年MRSA检出率分别为28.7％、31.5％、39.2％、53.6％、44.6％;MRSA对利奈唑胺、万古霉素的敏感率为100.0％.结论 临床医师在治疗由MRSA引起的感染时首选利奈唑胺、万古霉素,严格要求医护人员在为患者治疗前后手卫生,一旦检测到MRSA应加强隔离预防,控制在医院内的扩散.     

金黄色葡萄球菌临床分离株的耐药谱变迁

目的调查2006年1月-2011年9月金黄色葡萄球菌耐药谱的变迁,为临床合理选用抗菌药物提供依据。方法收集临床标本中分离的金黄色葡萄球菌,利用全自动微生物分析仪对金黄色葡萄球菌进行菌种鉴定和药敏试验。结果金黄色葡萄球菌对多种抗菌药物呈普遍耐药,对青霉素和氨苄西林的耐药率>90.0%;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)对β-内酰胺类、喹诺酮类、氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类、克林霉素类及利福平的耐药率显著高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA),差异有统计学意义(P<0.05);所有分离株对万古霉素和呋喃妥因均敏感,对替考拉宁、夫西地酸和喹奴普汀/达福普汀的耐药率均<10.0%;MRSA分离率呈下降趋势;大部分测试药物在6年内耐药率变化不大,但少数抗菌药物的敏感性所有增加,如利福平、红霉素等。结论 6年内金黄色葡萄球菌的耐药率保持在较高水平,但MRSA的分离率有下降趋势;MRSA呈多药耐药,但对万古霉素、呋喃妥因、替考拉宁、夫西地酸及喹奴普汀/达福普汀仍保持较高敏感性。     

金黄色葡萄球菌的耐药性调查分析

目的调查医院金黄色葡萄球菌(SAU)临床株的耐药现状,为临床医师合理使用抗菌药物提供科学依据。方法对医院感染性标本中培养分离的209株SAU的临床资料进行回顾性调查分析,SAU鉴定严格按《全国临床检验操作规程》进行;药敏试验采用K-B法,结果按美国临床实验室标准化研究所(CLSI)标准判定。结果耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分离率达33.5%;药敏试验结果显示,SAU对多种抗菌药物均产生了不同程度的耐药性,对万古霉素和替考拉宁敏感率为100.0%。结论医院细菌室应提高检测水平,及时、准确地发出病原学检查和耐药性报告,为临床医师提供抗感染治疗的依据。     

痰标本中分离鉴定金黄色葡萄球菌的临床实验研究

目的 回顾性分析从感染患者痰液中分离鉴定金黄色葡萄球菌(SAU)及耐药性的临床实验,为合理应用抗菌药物提供参考.方法 用全自动细菌培养鉴定仪对236份痰标本进行SAU分离鉴定,选择15种临床中常用抗菌药物对其耐药性进行药敏试验.结果 共分离出SAU 367 株,其中甲氧西林耐药334株(91.0％),甲氧西林敏感33 ...     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌不同监测时间的对比分析

目的 通过不同监测时间比较耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)感染的分布及耐药性,探讨最佳监测时间.方法 采用美国Microscan Autoscan-4微生物分析仪对细菌做鉴定及药敏试验,应用WHONET 5.4软件对数据进行回顾性分析.结果 2011年共分离出金黄色葡萄球菌283株,其中MRSA100株,占35.3％,以季度、半年及年度为监测时间MRSA的检出率波动在28.1％～40.6％,差异无统计学意义；耐药性监测结果亦类似,MRSA对红霉素、环丙沙星、左氧氟沙星、利福平、庆大霉素耐药率均＞50.0％,对磺胺甲噁唑/甲氧苄啶的耐药率也＞20.0％,耐药率较低的有呋喃妥因、喹奴普汀/达福普汀,尚未见耐万古霉素和利奈唑胺的MRSA.结论 MRSA的检出率及耐药性均较高,以季度、半年及全年度监测时间结果类似,应及时监测以提高MRSA的治愈率,减少MRSA的医院感染和病死率.     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的感染和治疗

作者分析了２４３例全身和局部的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（ＭＲＳＡ）感染情况。结果表明，本组ＭＲＳＡ占同期金黄色葡萄球菌感染的８０．５％。其中血液中分离的ＭＲＳＡ比例可高达９５．２％。多数ＭＲＳＡ对常用的第一、三代头孢类抗生素和某些新型喳诺酮类抗菌药物耐药，仅对万古霉素敏感。全身性ＭＲＳＡ感染仍以万古霉素最为有效。溶葡萄球菌酶作为外用药能有效地控制局部ＭＲＳＡ感染。     

98株金黄色葡萄球菌分布及耐药性分析

目的分析近两年本院患者中分离的金黄色葡萄球菌的耐药情况,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法用湖南天地人公司TDR-200B微生物分析系统进行鉴定和药敏试验,WHONET5.3软件统计分析结果。结果 98株金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄菌（MRSA）65株（66.3%）,主要来源于痰、伤口分泌物、脓等。检出的MRSA除对万古霉素和替考拉宁敏感,对米诺环素和氯霉素耐药率较小（24.6%和27.7%）,对利福平的耐药率为52.3%外,对其他抗菌药物耐药率均大于80.0%,且耐药率均高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌。结论临床分离的金黄色葡萄球菌,MRSA对多种抗菌药物耐药率较高,许多MRSA菌株为多重耐药菌,实验室应加强对MRSA的耐药监测,以便合理使用抗菌药物。     

儿童社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染现状与耐药性监测分析

目的调查儿童社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(CA-MRSA)感染现状及耐药谱,为临床合理使用抗生素提供试验依据。方法对本院2011年1月-2012年10月间儿科临床标本中检出的金黄色葡萄球菌鉴定和药敏试验结果进行回顾性分析。结果 60株金黄色葡萄球菌中检出CA-MRSA 23株,CA-MRSA检出率为38.3%。CA-MRSA耐药率高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(CA-MSSA),未检出对万古霉素、替考拉宁及呋喃妥因耐药菌株。结论 CA-MRSA不仅对β-内酰胺类耐药,而且对氨基糖苷类、大环内酯类等抗菌素也有较高的耐药率。应加大对CA-MRSA耐药性监测力度,合理使用抗菌素,减缓CA-MRSA产生。     

58株食品中金黄色葡萄球菌的耐药性分析研究

目的研究58株金黄色葡萄球菌的耐药性,为临床和养殖业合理使用抗生素提供依据。方法按照《国家食源性致病菌操作手册》对样品进行金黄色葡萄球菌分离鉴定,再用全自动微生物鉴定及药敏分析系统VITEK2Compact,进行药敏实验。结果58株金黄色葡萄球菌有55株口一内酰胺酶阳性,阳性率为94．83％;对莫西沙星、奎奴普汀／达福普丁、利奈唑胺、万古霉素、替加环素、呋喃妥因、利福平100．00％敏感,对苯唑西林（96．55％）、庆大霉素（82．76％）、左氧氟沙星（81．03％）、四环素（81．03％）、环丙沙星（72．41％）、复方新诺明（72．41％）、克林霉素（58．62％）、红霉素（53．44％）、苄青霉素（5．17％）敏感。检出2株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）。结论本次实验中的58株金黄色葡萄球菌对13种抗生素敏感性较高,但对常用的苄青霉素、红霉素、克林霉素的耐药性较高且检出了MRSA菌株,在临床治疗和动物养殖的用药上需要合理使用抗生素。     

苏州市154株金黄色葡萄球菌耐药监测及脉冲场凝胶电泳分型

目的 分析苏州市2014 - 2017年金黄色葡萄球菌（staphylococcus aureus, SAU）的耐药情况和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin - resistance staphylococcus aureus,MRSA）的脉冲场凝胶电泳（pulsed - field gel electrophoresis, PFGE）分型特征,为临床合理使用抗生素提供参考,为MRSA感染溯源提供技术支持。方法 主要采用MIC法对常见的19种抗生素进行药敏试验,对检测为MRSA的菌株进行PFGE分析。结果 SAU耐药率达到93.5%,未发现万古霉素、达托霉素、奎奴普汀/达福普丁和利奈唑胺的耐药菌株。MRSA多重耐药率达到96.2%。MRSA对多种抗生素的耐药率明显高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌,且差异具有统计学意义（P＜0.05）。26株MRSA共有15个PFGE型别,有3株100%同源的菌株来自同一所医院3位不同病人。结论 苏州市SAU除对万古霉素、达托霉素、奎奴普汀/达福普丁和利奈唑胺敏感外,对其他抗生素均发现耐药现象,MRSA多重耐药率较高。因此,应用抗生素治疗时建议进行药敏试验。MRSA的PFGE基因型别呈现分布多样性,存在院内传播的可能性,应加强PFGE在溯源分析中的应用。