树突状细胞在食管癌T细胞抗肿瘤免疫中的作用

目的：研究食管癌组织中树突状细胞（ＤＣｓ）在肿瘤浸润性Ｔ淋巴细胞激活中的作用,方法：用免疫组化和ＲＴ－ＰＣＲ的方法,检测４６例食管癌手术标本中ＤＣｓ（ＣＤ１ａ）、Ｔ细胞亚群（ＣＤ３、ＣＤ４、Ｃ人刺激因子Ｂ７。结果：癌组织中的ＤＣｓ与ＣＤ３（＋）、ＣＤ４（＋）Ｔ细胞有相关性,与ＣＤ８（＋）、ＣＤ２５（＋）Ｔ细胞无明显关系,且Ｂ７ｍＲＮＡ表达均为阴性,结论：食管癌中ＤＣｓ不一定能有效地激活Ｔ细胞,其中Ｂ７基因表达受抑制,可能是不能有效激活Ｔ淋巴细胞产生免疫耐受的重要原因之一。     

树突状细胞在肿瘤中的研究进展

肿瘤的发生、发展与机体免疫状态密切相关。树突状细胞(DCs)是众多免疫细胞中的一种,具有专职抗原提呈功能,在肿瘤免疫过程中发挥关键的调节作用。肿瘤机体中DCs处于异常状态,如成熟障碍、功能异常和表型改变等,无法激活抗肿瘤的特异性免疫反应。目前,基于DCs的肿瘤免疫疗法备受关注,例如通过促进DCs成熟或者利用修饰过的DCs激活机体靶向肿瘤的免疫反应。本文拟对肺癌、结直肠癌、乳腺癌及肝癌等肿瘤中DCs异常相关机制研究以及临床关于DCs疫苗的研究作一综述。     

喉癌组织中树突状细胞S—100蛋白的免疫组化及临床研究

目的 探讨Ｓ－１００蛋白检测与喉癌的生物学行为及预后关系。方法 采用免疫组化方法以抗Ｓ－１００蛋白抗体标记６８例喉癌组织和２１例非喉癌组织中Ｓ－１００蛋白树突状阳性细胞。结果 ６８例喉癌组织中Ｓ－１００蛋白细胞阳性检出率为６３．２％（４３／６８），主要散在于肿瘤细胞间和间质中，非喉癌组织中很少见到Ｓ－１００蛋白阳性细胞（按同一标准Ｓ－１００蛋白细胞阳性检出率为０％），在癌组织中它与喉癌的病理分级、     

树突状细胞在食管癌T细胞抗肿瘤免疫中的作用

目的：了解食管癌组织中树突状细胞（ＤＣｓ）在肿瘤浸润性Ｔ淋巴细胞激活中的作用。方法：采用免疫组化和ＲＴ－ＰＣＲ的方法,对４６例食管癌手术标本中ＤＣｓ（ＣＤ１ａ）、Ｔ细胞亚群（ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ２５）及共刺激因子Ｂ７进行检测。结果：癌组织中的ＤＣｓ与ＣＤ３＾＋、ＣＤ４＾＋Ｔ细胞有相关性,与ＣＤ８＾＋、ＣＤ２５＾＋Ｔ细胞无明显关系,且Ｂ７ｍＲＮＡ表达均为阴性。结论：食管癌中ＤＣｓ不一定能有效     

树突状细胞与肿瘤免疫治疗

近年来,尽管由于手术、放疗、化疗技术的进步,一些恶性肿瘤仍不能得到痊愈。因此有必要探寻新的治疗策略,而抗肿瘤免疫治疗大有前景。其中,树突状细胞（Dendriticcells,DCs）在刺激初始免疫反应中起着极为重要的作用。特别是近几年体外大量扩增DCs技术的进展,使得以DCs为     

树突状细胞和PD-1/PD-L1通路相互作用的研究进展

树突状细胞（dendritic cells,DCs）是最强大的抗原呈递细胞,具有引起抗原特异性反应的能力,并且在调节免疫耐受中起重要作用。基于DCs的癌症免疫治疗已有二十多年的研究,是最重要的抗癌免疫疗法之一,但单一疗法在癌症治疗方面效果有限,需要继续深入研究以提高DCs的抗肿瘤作用,并寻找与其他方法协同治疗的方案。靶向于免疫检查点的单克隆抗体在公认的实体和血液恶性肿瘤的临床试验中均获得了成功,并在2018年获得诺贝尔医学奖。免疫检查点阻断疗法旨在解除肿瘤的免疫抑制以增强免疫系统的抗肿瘤作用,其中针对PD-1/PD-L1免疫检查点的阻断治疗已引起相当多的关注。虽然免疫检查点阻断治疗的效果令人鼓舞,但在尚未满足医疗需求的领域中仍需要进一步研究以提高临床效率。理论上DCs的PD-L1和/或T细胞的PD-1基因沉默或表达下调,可增强DCs启动有效的T细胞抗肿瘤反应。因此,将特异性DCs的抗肿瘤免疫治疗与PD-1/PD-L1信号通路阻断相结合的治疗方法是一个有希望的探索之路。本文主要综述DCs的功能、PD-1/PD-L1通路的抗肿瘤作用、DCs和PD-1/PD-L1信号通路相互作用在目前的研究现状以及前景。     

树突状细胞在肿瘤免疫中的研究进展

树突状细胞(DC)是最强的抗原提呈细胞(APC),APC捕获抗原提呈给T、B淋巴细胞,从而引发一系列的免疫应答。肿瘤患者体内由于肿瘤的调变可以降低DC提呈功能,使淋巴细胞杀伤肿瘤的效率减弱,目前DC体外可以大量扩增,故各种DC疫苗和DC细胞治疗应运而生,通过抗原负载的DC提高抗原提呈能力,激活细胞毒T细胞(CTL)的杀伤能力,治疗肿瘤,但抗原负载的方法很多．哪种抗原负载提高提呈功能的效率最高,每一种肿瘤的抗原有其特异性。这些都是DC疫苗广泛开展的障碍,而且DC疫苗在免疫系统低下的老年人群由于淋巴细胞的免疫应答功能下降,可能会免疫失败,这些都值得我们进一步思考应对策略。     

肺癌肿瘤全溶物脉冲自体树突状细胞体外诱生T细胞抗肿瘤反应的研究

目的　探讨非小细胞肺癌 (NSCLC)患者全瘤溶解物 (WTL)冲击的自体树突状细胞 (DCs)瘤苗体外诱生T细胞介导的抗肿瘤反应。方法　在含重组人粒细胞 巨噬细胞 集落刺激因子 (rhGM CSF)和重组人白细胞介素 4 (rhIL 4 )的培养条件下 ,以 10例患者的贴壁外周血单核细胞 (PBMCs)衍生不成熟的树突状细胞 (imDCs) ,分别添加肿瘤坏死因子 (TNFα)、自体WTL或WTL TNFα诱导成熟 ,即分别为DCs/TNF、DCs/WTL和 DCs/WTL ,用流式细胞仪和混合淋巴细胞反应 (MLR) ,检测细胞表面分子的表达变化及其刺激异基因或同基因的T细胞增殖能力。将 DCs/WTL和自体T细胞共培养1～ 2周 ,以诱导细胞毒性T淋巴细胞 (CTL) ,用计数γ 干扰素 (IFN γ)释放的酶联免疫斑点 (ELISPOT)试验和乳酸脱氢酶 (LDH)释放的细胞毒试验 ,分别检测该CTL中识别自体肿瘤细胞释放特异性IFN γ的T细胞数和溶瘤活性。结果　以 30 μg/ml蛋白的WTL体外冲击自体 10 6imDCs,可导致上调DC表型 ,包括CD1a、CD83和CD86以及HLA DR的分子表达 ,与常规TNFα诱导成熟的DCs表型相似。虽然两者均能显著刺激异基因T细胞的增殖 ,但其刺激自体T淋巴细胞的增殖能力 ,DCs/WTL却显著高于DCs/TNF(P <0 .0 5 )。将体外与 DCs/WTL共培养的自体T细胞作为反应或效应细胞 ,再次     

表皮生长因子受体在喉癌及癌前病变中的表达

目的：探讨表皮生长因子受体的表达在喉癌和癌前病变中的作用。方法：应用免疫组化ＡＢＣ法检测喉鳞癌３１例,喉上皮非典型增生１６例,正常喉粘膜１０例的表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）的表达。结果：发现正常喉粘膜组织全部阴性,喉癌的ＥＧＦＲ阳性率为４８％,非典型增生ＥＧＦＲ的阳性率为５６％,并随异型增生程度的增高ＥＧＦＲ表达增加,其差异有显著性（Ｐ〈０．０５）。但ＥＧＦＲ的表达与喉癌发生部位、肿瘤分期、组织分     

组织蛋白酶D在胃癌及癌前病变中的表达及意义

目的：探讨组织蛋白酶Ｄ（ＣＤ）在胃癌发生和转移中的作用。方法：采用免疫组化Ｓ－Ｐ法检测１８例浅表性胃炎、１４例萎缩性胃炎伴肠化、１６例不典型增生及５４例胃癌组织中ＣＤ的表达。结果：除不典型增生外,随着胃粘膜病变程度的加重,ＣＤ阳性表达率呈逐渐增高的趋势,ＣＤ阳性表达率在进展期胃癌显著高于早期胃癌及癌前病变（Ｐ＜０．０５）;ＣＤ表达与胃癌浸润深度。淋巴结转移和临床病理（ＴＮＭ）分期密切相关。结论：Ｃ     

Fractalkine transgene induces T-cell-dependent antitumor immunity through chemoattraction and activation of dendritic cells

Fractalkine (FK, also called neurotactin or CX3CL1) is a CX3C chemokine that can chemoattract T lymphocytes, monocytes and NK cells. In our study, we investigated the induction of antitumor response by FK gene transfer. FK gene-modified 3LL lung carcinoma cells (3LL-FK) could both secrete soluble form and express membrane-bound form of FK. The tumor growth of 3LL-FK was decreased. Vaccination with 3LL-FK was effective in the induction of protective immunity and CTL. In vivo depletion analysis demonstrated that CD8(+) T cells are the main participating cells of the antitumor response. Obvious infiltrations of CD8(+) T cells, CD4(+) T cells and dendritic cells (DC) were observed in the tumor sites, suggesting that 3LL-FK might induce antitumor immunity through chemoattraction and activation of T cells and DC. Then we investigated the chemoattraction and activation of DC by 3LL-FK. Chemotaxis assay showed that the supernatants of 3LL-FK could chemoattract immature DC, which were found to express FK receptor CX3CR1, and the immature DC could obviously adhere to 3LL-FK. Adherence of DC to 3LL-FK resulted in phenotypic maturation and upregulated IL-12 secretion of DC, and more strong stimulation of allogeneic T-cell proliferation by DC. The increased production of IL-2 and IFNgamma in 3LL-FK tumor tissue was also observed. Our data suggested that FK gene transfer to tumor cells could induce T-cell-dependent antitumor immunity through chemoattraction and activation of DC.     

骨髓瘤独特型抗原致敏树突细胞诱导的主动免疫反应

背景与目的:大多数多发性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)无法通过大剂量化疗和造血干细胞移植治愈,应用树突细胞(DCs)瘤苗清除MM患者化疗后残留的骨髓瘤细胞,是近年来骨髓瘤免疫疗法的新策略。本研究旨在探讨负载Id的DC独特型瘤苗对自体MM细胞的体外杀伤作用。方法:从MM患者外周血中分离获取DCs前体细胞,用GM鄄CSF与IL鄄4诱导分化,培养第5天加入从患者血清中提取的IgG的F(ab’)2片段(Id),第7天加TNF鄄α促成熟,将Id冲击致敏的DCs与自体T淋巴细胞共培养3天,获得肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)。MTT法检测致敏DCs促自体T淋巴细胞增殖能力,以及患者CTLs对自体MM细胞的特异性细胞毒杀伤作用。结果:GM鄄CSF、IL鄄4和TNF鄄α联合可以有效地从MM患者外周血单核细胞中诱导出大量成熟的功能性DCs。MM患者自体血清Id冲击致敏的成熟DCs能够显著提高T细胞增殖能力,且与DC∶T的比值呈正相关;同时在1∶10时刺激细胞为负载了Id的成熟DC组刺激指数(SI)值(39.1±6.0)%,明显高于未经Id刺激的成熟DC组、经Id刺激的未成熟DC组以及未经Id刺激的未成熟DC组[(19.3±7.7)%、(15.9±6.1)%和(11.4±4.9)%]。负载了Id的成熟DC能够使幼稚T细胞活化成为肿瘤独特型CTLs,各个剂量的CTLs均能诱导出针对自体MM细胞的抑制性杀伤反应,并且     

树突状细胞抗肿瘤免疫的研究进展

树突状细胞（dendritic cell,DC）是功能最强的抗原呈递细胞（antigen presenting cell,APC）。DC均来源于体内多能造血干细胞,主要分为髓系DC与淋巴系DC;按发育程度分为不成熟DC和成熟DC;按诱导免疫反应分为DC1和DC2两个亚群。DC前体细胞由骨髓进入外周血,再分布到全身各组织。DC可通过摄取、加工和提呈抗原,在其表面表达大量的MHC-肽复合物,上调共刺激分子及向外周淋巴组织迁移等作用,激活T细胞和诱导机体产生特异性免疫反应。目前,无论在动物模型和人体实验都可以用多种不同的前体细胞沿不同的分化途径在体外诱导扩增DC。以DC为基础的肿瘤疫苗已被广泛研究并应用于临床。     

CD44变异型在支气管粘膜上皮癌变过程中的表达及其意义

目的　探讨CD44变异型 (以下简称CD44v)表达在肺鳞癌发生中的作用。方法　应用免疫组织化学方法检测 3 4例肺鳞癌及其癌前病变标本中CD44v的表达 ,分析CD44v在肺鳞癌发生过程中出现表达的时间和频率。结果　癌旁正常支气管上皮细胞未见CD44v表达 ,在鳞状化生的支气管上皮细胞、轻→中→重度不典型增生、原位癌、浸润癌中 ,CD44v表达的阳性率逐渐升高。结论　本研究结果表明 ,CD44v可作为判断肺鳞癌发生可能性的标记物 ,在肺鳞癌的早期诊断中具有重要意义。     

癌前病变Caspase-3表达下调与胃黏膜癌变的关联

目的观察Caspase-3蛋白在胃癌及其癌前病变组织中的表达,分析它与细胞凋亡和细胞增殖的关系,探讨Caspase-3蛋白在胃癌发生过程中的生物学意义及相关分子病理学机制。方法选取184例胃黏膜活检和手术切除组织标本,其中胃癌20例,慢性萎缩性胃炎6例,萎缩性胃炎伴肠上皮化生(简称肠上皮化生)31例,萎缩性胃炎伴不典型增生(简称不典型增生)114例;正常对照13 例。采用SABC法检测Caspase-3蛋白的表达;通过图像域值分析计算其阳性指数,分析其与细胞增殖(Ki67蛋白阳性指数)和凋亡(TUNEL指数)的相关关系。结果 Caspase-3蛋白在重度不典型增生组织中的阳性指数(29．8％±3．9％)显著低于轻度(58．3％±4．2％)和中度不典型增生(50．4％± 4．8％)及萎缩性胃炎(68．3％±3．3％)或肠上皮化生(70．9％±4．3％),差异有统计学意义(P<0．05); 而与胃癌(26．9％±3．0％)相比,差异无统计学意义(P>0．05)。Caspase-3蛋白表达与细胞凋亡呈显著正相关(r=0．94,P<0．05),Caspase-3蛋白阳性组细胞增殖指数(18．3％±2．2％)显著低于阴性组(48．9％±3．1％;P<0．05)。结论 Caspase-3蛋白在萎缩性胃炎、肠上皮化生和(或)轻中度不典型增生黏膜中表达上调,而在重度不典型增生及胃癌组织中表达下调,且这种变化与细胞凋亡呈显著正相关。Caspase-3失活或表达下调相关的细胞凋亡和增殖紊乱可能在胃黏膜损伤及癌变过程中起某种作用。     

人肺癌组织总RNA转染树突状细胞方法的优化

背景与目的树突状细胞(dendriticcell,DCs)作为体内惟一能活化初始T细胞的抗原递呈细胞,是激发机体特异性免疫反应的关键,以DCs为基础构建的疫苗广泛应用于各种肿瘤免疫治疗中。其中RNA转染DCs构建DCs疫苗的方法,因避免了抗原的筛选和鉴定,所需肿瘤量小等优点,特别适于像肺癌这样的缺乏特异性肿瘤抗原、异质性大、抗原性弱的肿瘤。然而,目前缺乏RNA转染DCs的最佳时间和方法的研究。本研究以人肺癌组织总RNA体外转染DCs,试图摸索转染DCs的最佳条件。方法用免疫组化的方法选择肿瘤组织癌胚抗原CEA、粘蛋白MUC1双阳性的10例肺癌患者,一步法提取肿瘤组织总RNA,采集和分离外周血单核细胞,体外培养DCs和T细胞,将RNA于不同时间和不同方法转染DCs,用流式细胞仪检测CEA和MUC1的表达,混合淋巴细胞反应测定DCs刺激自体T细胞增殖能力。结果未成熟期DCs转染人肺癌总RNA后CEA和MUC1表达量(11.33±2.64和39.68±7.25)明显高于成熟期DCs(5.46±1.63和27.17±4.16),且刺激自身T细胞增殖反应能力更强。电穿孔法转染人肺癌总RNA后DCs表达CEA和MUC1的量(20.53±3.64和65.39±9.33)明显多于脂质体转染(11.33±2.64和39.68±7.25)和直接混合法(0.91±0.27和18.53±3.26),且刺激自身T细胞增殖反应能力更强。结论采用电穿孔法将肺癌总RNA体外转染未成熟DCs可以使DCs表达肿瘤抗原量更高,刺激T细胞增殖的活性更强。     

肺癌前病变、肺癌中FHIT基因表达的临床研究

背景与目的FHIT基因为近年发现的新的候选抑癌基因，位于3p14．2，跨越FRA3B易脆点，在包括肺癌在内的多种人类肿瘤中均存在异常表达。本研究旨在观察FHIT基因在人肺癌前病变、肺癌中的表达情况，探讨FHIT基因在肺癌发生、发展过程中的可能作用。方法采用免疫组化方法检测298例甲醛固定、石蜡包埋的标本（包括161例肺癌、51例肺癌前病变、30例正常肺组织、23例肺良性病变和33例肺癌转移淋巴结）中FHIT蛋白表达情况。结果FHIT蛋白在正常肺组织及肺良性病变组织中均无失表达，癌前病变组织和肺癌组织中失表达率分别为54．9％（28／51）和59．0％（95／161），肺癌转移淋巴结组织中失表达率为78．8％（26／33）；肺癌前病变、肺癌及转移淋巴结组织中FHIT蛋白失表达率显著高于正常肺组织及肺良性病变组织（P〈0．001）。肺癌组织中FHIT基因表达水平与肺癌组织学类型、肿瘤细胞分化程度、患者pTNM分期、淋巴结转移有密切关系（P〈O．05）。FHIT蛋白失表达组肺癌患者的术后5年生存率显著低于表达组（P〈0．01）。吸烟组患者FHIT基因失表达率69．1％显著高于无吸烟组49．5％（P〈0．01）。结论FHIT蛋白失表达可能是肺癌发生过程中的早期分子事件，与肺癌的发生、发展及预后有关；吸烟导致FHIT蛋白表达下降可能是诱发肺癌的原因之一。     

Progress in immunotherapy based on dendritic cells in pancreatic cancer

Dendritic cells (DCs) are ihe most powerful antigen-presenting cells in the Ixxly, which lias become a hot research topic in the field of tumor immunotherapy because of their pivotal role in the innate immune and adaptive immune response. Pulsed by tumor cells, tumor specific peptides and so on, DCs can induce T cells to effective cytotoxic T cells. 'Hie paper briefly reviews preclinical research and clinical treatment of DCs for immunotherapy in pancreatic cancer.