N端色氨酸修饰增强hemokinin-1拮抗绿脓杆菌的活性

为了明确色氨酸修饰是否增强HK1拮抗PA的活性,设计并合成了HK1及分别在其N端或C端进行的4个色氨酸修饰的短肽,采用猪皮模型测定了HK1及其色氨酸修饰肽对PA侵染率的影响,利用PA小鼠模型测定了HK1及其色氨酸修饰肽对PA感染小鼠的存活率及小鼠器官形态、重量的影响。结果表明:HK1及色氨酸修饰HK1能够显著降低PA对猪皮的侵染能力。其中,HK1的N端色氨酸修饰肽使PA相对侵染率降至3.4%,比HK1及其C端色氨酸修饰肽拮抗PA活性更强;HK1及其色氨酸修饰肽可增强小鼠抗PA感染能力,增加PA感染小鼠的存活率,减轻PA对主要器官的损害,其中HK1的N端色氨酸修饰肽促进小鼠抗PA感染的活性最强。     

拮抗水霉菌株的筛选及抑菌蛋白的分离纯化

水霉病是一种广泛存在于水体中的真菌性病原菌,无寄主选择性,目前渔业生产上主要依赖化学药物防治．导致病原菌的抗药性增强．本研究通过平板对峙培养法,筛选到5株具有拮抗活性的菌株．通过硫酸铵盐析、葡聚糖凝胶和离子交换树脂等方式进行分离纯化,从Bacillus subtilis strain TCCC11201发酵液中分离得到一个对水霉病菌具有抑制活性的蛋白,经SDS—PAGE电泳检测,其相对分子质量为2×10^4．菌株TCCC11201代谢产生的活性蛋白具有防治水霉病的潜在应用价值．     

一株产生广谱抗菌物质地衣芽孢杆菌的筛选与鉴定

采用异步培养法,从土壤样品中筛选到一株产抗菌物质活性较强的菌株F69．结合菌落形态、生理生化指标和16SrDNA序列分析对菌株F69进行菌种鉴定．菌株F69在系统发育上属于芽孢杆菌属,它和地衣芽胞杆菌菌株的16SrDNA序列相似性最高为99％,该菌株被鉴定为地衣芽孢杆菌（Bacilluslicheniformis）．菌株F69可作为抗菌物质产生菌进行进一步深入研究．     

一株海洋耐冷菌的分类鉴定及其生长特性和抗菌活性研究

从连云港海域潮间带采集的样品中筛选出一株产广谱高活性抗菌物质的海洋耐冷菌G1,该菌的生长温度范围为10~40℃,最适生长温度为20℃;生长的pH范围为3.0~12.0,最适生长pH为9.0;生长的NaCl质量分数为1%~9%,最适生长NaCl质量分数为4%,无NaCl不生长。根据其形态特征、生理生化特性和16S rRNA基因序列分析结果,确定其为交替假单胞菌。菌株G1抗菌活性研究表明,其发酵产物对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性菌以及大肠杆菌、鳗弧菌等革兰氏阴性菌都有显著的拮抗作用。结果揭示该菌在生防、食品及医药方面有潜在的应用价值。     

仙鹤草内生真菌的分离鉴定与抗菌活性

植物内生真菌代谢产物丰富, 作为一种寻找开发药物的重要资源已受到人们的日益关注.本 实验对中药仙鹤草内生真菌进行分离, 获得30 株内生真菌, 其中由根中分离得到17 株, 茎中分离 得到7 株, 叶中分离得到6 株.并采用形态学观察方法, 对分离得到的内生真菌菌株进行初步鉴定, 其分别归属于青霉属, 顶孢霉属, 镰孢霉属, 根霉属, 酵母属, 珠网霉属, 毛霉属和核盘菌属等8 个真 菌属.采用平板对峙法, 研究各菌株对金黄色葡萄球菌的抗菌作用, 通过初步筛选, 共计9 株表现抑 菌活性.再进一步用内生真菌发酵萃取液做抑菌活性, 发现仅3 株菌株有抗菌活性, 都属于镰孢霉 属.为后续的活性物质分离奠定了基础.     

一株新型乳酸菌素产生菌的分离及其鉴定

从新鲜牛乳中分离得到乳酸菌Ｘ４。该菌株在发酵过程中产生的乳酸菌素有较广的抑菌谱,不仅对芽孢杆菌,葡萄球菌、链球菌等革兰氏阳性细菌的生长具有较强的抑制作用,而且对大肠杆菌、沙门氏菌等革兰氏阳性铁生长也具有较强的抑制作用。经鉴定,Ｘ４菌株为乳脂链球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｃｒｅｍｏｒｉｓｓｐ．Ｘ４）。     

半夏软腐病内生拮抗放线菌的分离与鉴定

针对半夏生产过程中软腐病废水普遍和危害严重的现状,从7个半夏主产区的半夏植株上分离到47个内生放线菌,通过平板和组培苗拮抗活性筛选获得两个具有较强活性的菌株07JX3-2和07JX3-7,经形态、培养特征和生理生化实验鉴定,初步确定两个分离物均属于链霉菌属(streptomyces),至于其所在种有待进一步鉴定。两个拮抗菌株的获得为半夏软腐病的生物防治研究和应用奠定了基础。     

一株蛋白水解酶产生菌的分离鉴定及发酵产酶条件优化

从养殖柞蚕周边的土壤分离筛选和鉴定得到一株能够产生蛋白水解酶的菌株G1。通过单因素实验优化该菌株的培养基碳源、氮源、初始pH、发酵温度、发酵时间和接种量等产酶条件。实验结果表明,该菌株为Luteibacter anthropi。当培养温度为47℃,将菌株按4%接种量接种到以葡萄糖为碳源、蛋白胨为氮源、初始pH为8.0的培养基中发酵96h,在此最优发酵条件下产酶量达到1 520U/mL。     

一株微生物采油菌的16S rDNA鉴定和绿色荧光蛋白分子标记

筛选到一株高效生产多糖的YX菌,油田先导试验证明该菌可以用于微生物调剖提高原油采收率（Microbial Enhanced Oil Recovery,MEOR）.经16SrDNA分析鉴定,YX菌属于肠内杆菌属（Enterobacter.）,为跟踪监测其动态信息,构建表达绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）的重组质粒pET-30a（＋）-EGFP,利用CaCl2法将其转化至YX菌,利用荧光显微镜可以观察到重组YX（GFP）工程菌的绿色荧光.结果表明YX菌可以被绿色荧光蛋白基因标记,用于微生物采油研究.     

降解DON毒素的绿脓杆菌的分离、鉴定及其在玉米脱毒中的应用

脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)是污染谷物及其制品的最常见的真菌毒素之一,严重威胁谷物食品的安全性和经济价值。利用微生物降解对粮食和饲料中真菌毒素进行脱毒处理的方法具有潜在的应用价值。利用禾谷镰刀菌发酵产生的DON粗提物为唯一碳源从土样中筛选到了一株可高效降解DON的微生物,经16S rDNA序列比对分析确定该菌株为绿脓杆菌。该菌株可在48 h内降解64.6%的DON;对DON的降解起作用的物质主要存在于发酵上清液中,蛋白酶K处理发酵上清液可降低其毒素降解效率,初步判断上清液中存在可降解DON的酶类。利用超声波辅助提取DON污染的玉米中毒素及毒素降解试验表明:经3次提取处理,玉米中的呕吐毒素含量可降低99.0%以上,将绿脓杆菌接种于毒素提取液中72 h后呕吐毒素浓度可降低至50.0%。绿脓杆菌在粮食脱毒处理中具有较大的应用潜力。     

一株低温碱性脂肪酶产生菌TS182的分离与鉴定研究

通过Tween-80平板初筛和摇瓶发酵复筛,从连云港海域海水及海泥样品中分离的菌株中筛选获得一株低温碱性脂肪酶高产菌株TS182。通过形态学、生理生化以及分子生物学鉴定菌株TS182为荧光假单孢菌（Pseudomonas fluorescens）。菌株TS182所产脂肪酶最适温度和最适pH分别为15℃和9．0。     

一株氯苯降解菌的分离鉴定

氯苯是重要的化工原料,长期使用对环境造成了严重的危害．为了研究生物方法修复自然环境的可行性,采集化工厂排污口的污泥,利用富集驯化等方式,分离到一株能够降解氯苯的菌株KD131．通过分析该菌株的16SrRNA基因序列,并结合BIOLOG微生物鉴定系统的测定结果,确定KD131为短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus）,同时构建了系统进化树．利用气相色谱方法,对分离菌株KD131降解氯苯的能力进行了初步分析,24h内氯苯分解率达60．8％．进一步研究发现,KD131对苯和邻二氯苯也具有一定的降解能力．     

降解黄曲霉毒素B_1的绿脓杆菌的分离、鉴定及应用研究

黄曲霉毒素B_1(AFB_1)是霉变粮食和饲料中常见的真菌毒素之一,对其进行脱毒研究具有重要意义。利用以香豆素为唯一碳氮源的培养基分离出9个菌株,对AFB_1的降解率均超过60%,其中YM-1菌株的降解率为91.48%。对YM-1菌株的16S rDNA基因进行测序及序列比对,表明该菌株为绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)。对AFB_1降解动力学研究发现,发酵96 h后YM-1绿脓杆菌可降解NB培养基中90.70%的AFB_1,在24～48 h内降解速度最快,降解率为82.99%。绿脓杆菌YM-1发酵液中的降解活性主要位于发酵上清液中,同时细胞对AFB_1也具有一定的吸附作用;蛋白酶K反应及热处理后的YM-1发酵上清液对AFB_1的降解率明显降低,可初步判断上清液中可能存在可降解AFB_1的酶类。将绿脓杆菌YM-1接种到含AFB_1的霉变玉米粉中进行固态发酵6 d后,玉米粉中的AFB_1降解了88.87%。     

微生物絮凝剂产生菌的分离选育及鉴定

从内蒙古科技大学校区内土壤、生活污水、活性污泥中分离筛选到三株高效微生物絮凝剂产生菌.优化培养后,培养液对高岭土悬浊液的絮凝率均可达到90%以上.通过菌落特征、生理生化特征等试验,鉴定MBF-2,MBF-10微生物为固氮菌属细菌(Azotobacter sp);MBF-5微生物为气单胞菌细菌(Aeromonas sp).     

一株PTA降解菌的分离和鉴定

我们从土壤中分离了一株降解ＰＴＡ的６－８１菌株。６－８１株定名为恶臭假单胞菌（ＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓＰｕｔｉｄａ）。     

除油生物表面活性剂产生菌的分离及其特性

为了对石油污染的土壤进行生物修复,从大庆油田油泥和油田污水中富集培养、分离得到52株菌,通过对各菌株的排油活性及表面张力实验,优选出菌株B381、B101、B64和C43,它们产生的表面活性剂的表面张力较低,并且表面活性稳定.对纯化的表面活性剂分析表明,表面活性剂的主要成分为脂肽类(Lipopeptide)、鼠李糖脂(Rham nolipid)、槐糖脂(Sophrolipids)及甘油酯类(G lyceride)化合物.用这4株菌的发酵液进行了油泥处理实验,72 h后石油去除率平均达70%以上.与对照样品相比,石油去除率提高到大约7~9倍.     

抗菌活性粘细菌的筛选及鉴定

采用兔粪诱导法和酵母划线法,从淮安市采集的10份土壤样品中筛选次级代谢产物具有抗菌活性的粘细菌,并分离纯化。通过观察所筛选到菌株的营养细胞、粘孢子、子实体和菌落形态等特征,并对其进行生理生化试验,进行鉴定归属。共分离到13株粘细菌,经鉴定为粘球菌属、原囊菌属、孢囊杆菌属、多囊菌属和标桩菌属5个属。采用牛津杯法,以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、乙型副伤寒沙门氏菌、黑曲霉和酵母菌作为指示菌进行抗菌试验,13株菌的次级代谢产物均表现出不同程度的抗菌活性。     

烟草黑胫病菌拮抗菌的筛选及鉴定

从番茄种植地中分离获得1株对烟草黑胫病菌等多种植物病原菌和金黄色葡萄球菌有明显抑制作用的菌株ZJUT-K15,测定发现该菌株的发酵液及其无菌滤液对烟草黑胫病菌菌丝的延伸具有良好而持续的抑制作用,稀释100倍后其抑制率分别为92.29%和69.79%;24 h内可抑制烟草黑胫病菌孢子的萌发,48 h后抑制效果有所下降.通过形态特征观察、生理生化特征测定及16S rDNA序列分析,初步鉴定为枝芽孢杆菌属(Virgibacillus sp.),16S rDNA序列提交GenBank,序列号为EU639686.     

药用植物辣木内生真菌的分离及其抗菌活性分析

从新鲜植株辣木的茎和叶中分离出内生真菌35株。以金黄色葡萄球菌、藤黄八叠球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、白色念株菌、掷孢酵母为受试菌株，对其进行抗菌活性筛选。结果表明，共有29株内生真菌对1株或1株以上的受试菌株有抗菌活性，其中平板抑茵圈直径大于15mm的菌株有1株。研究结果表明，辣木内生真菌具有良好的潜在应用价值，值得做进一步研究。