结直肠腺瘤—腺癌组织微阵列制作及上皮钙黏附素和β—链接素的检测

目的 建立结直肠癌组织微阵列,探讨上皮钙黏附素和β－链接素的表达在结直肠癌发生、发展过程中的作用。方法 应用微阵列制作机制作结直肠正常黏膜－腺瘤－腺癌微阵列,用免疫组织化学法检测组织微阵列22例结直肠腺瘤和结直肠癌63例中上皮钙黏附素和β－链接素的表达。结果 制作了85例患的结直肠腺瘤－腺癌组织微阵列;原发各层腺癌组织及其转移灶中出现不同程度的β－链接素核阳性表达,与正常黏膜相比（远处转移灶除外）,β－链接素细胞核内表达增加,差异有显性意义（P＜0．01）;上皮钙黏附素和β－链接素膜表达在结直肠癌的发生、发展过程中呈下降趋势,肌层内癌、浆膜层内癌和淋巴结转移癌灶与正常黏膜、腺瘤及黏膜、黏膜下癌相比,β－链接素膜表达减少（P＜0．01）,差异有显性意义;正常黏膜与各癌灶,淋巴结转移灶与原发各层癌组织之间上皮钙黏附素的膜表达差异有显性意义（P＜0．05）。结论 结直肠腺瘤－腺癌组织微阵列的建立使得结直肠癌相关基因或蛋白的筛选工作快捷、简便,黏附分子上皮钙黏附素和β－链接素的表达水平及表达部位异常与结直肠癌的发生、浸润转移有密切的关系。     

胆囊良恶性病变组织中IGF-1及其IGF-1R表达的研究

目的:研究胆囊腺癌、癌旁组织、腺瘤性息肉和慢性胆囊炎组织中IGF-1和IGF-1R的表达水平及其临床病理意义。方法:取108例胆囊腺癌、46例癌旁组织、15例腺瘤性息肉和35例慢性胆囊炎手术切除标本,常规制作石蜡包埋切片，IGF-1和IGF-1R染色方法均为EnVisionTM免疫组化法。结果: 胆囊腺癌IGF-1和IGF-1R表达阳性率分别为53.7%和51.9%,明显高于癌旁组织的23.9%和26.1%,腺瘤性息肉的13.3%和13.3%和慢性胆囊炎的5.7%和5.7%，均有高度显著性差异（均P<0.01）。高分化腺癌,肿块最大径<2 cm,无淋巴结转移及未侵犯周围组织者IGF-1和IGF-1R表达阳性率明显低于低分化腺癌,肿块最大径≥2 cm,淋巴结转移及侵犯周围组织者（P<0.05或P<0.01）。胆囊腺癌中IGF-1和IGF-1R表达呈高度一致性（χ2=65.32, P<0.01）。结论:IGF-1和IGF-1R表达水平可能是反映胆囊腺癌发生、进展、临床生物学行为及预后的重要标记物。     

miR-150 和miR-134 在结直肠癌及腺瘤中的表达

目的：探讨miR-150和miR-134在结直肠癌与结直肠腺瘤中的表达及意义。 方法：采用实时定量荧光PCR（qRT-PCR）检测40例结直肠癌组织及其癌旁正常组织与29例结直肠腺瘤组织中miR-150和miR-134表达,并分析两者与结直肠癌临床病理因素之间的关系。 结果：与癌旁正常组织比较,miR-150在腺瘤组织中表达明显升高,而在癌组织中表达明显降低（均P<0.05）;miR-134在腺瘤组织中表达明显降低（P<0.05）,但在癌组织中表达差异无统计学意义（P>0.05）;miR-150表达水平与结直肠癌的组织学类型及分化程度有关（P=0.033,P=0.041）;miR-134表达水平与结直肠癌的各项临床病理因素均无明显关系（均P>0.05）。 结论：miR-150在结直肠癌中表达下调,提示其可能有潜在的抑癌作用,miR-150和miR-134在结直肠腺瘤中的表达均发生异常,提示两者均可能与结直肠腺瘤的发生密切相关。     

HSP27 和claudin-10在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的：探讨HSP27和claudin-10在结直肠癌中的表达及其临床意义。 方法：应用免疫组化法检测50例结直肠癌组织、25例结直肠腺瘤组织、50例正常结直肠黏膜组织中HSP27和claudin-10的表达,并分析结直肠癌中两者表达的关系以及与结直肠癌患者临床病理因素及预后的关系。 结果：在结直肠癌组织、结直肠腺瘤组织、正常结直肠黏膜中HSP27阳性表达率分别为54.0%、20.0%、16.0%,差异有统计学意义（P<0.001）;claudin-10阳性表达率72.0%、56.0%、54.0%,差异无统计学意义（P>0.05）;结直肠癌中HSP27与claudin-10的表达呈正相关（r=0.318,P=0.024）。单因素分析显示,HSP27的阳性表达率与与淋巴结转移有关（P<0.05）;claudin-10的阳性表达率与肿瘤直径、浸润深度及淋巴结转移有关（均P<0.05）。生存分析显示,HSP27和claudin-10阳性表达患者平均生存期明显低于各自的阴性表达患者（均P<0.05）。多因素分析显示,HSP27、claudin-10表达及淋巴结转移是影响结直肠癌患者预后的独立风险因素（均P<0.05）。 结论：HSP27在结直肠癌中组织中表达上调,并可能与claudin-10协同在结直肠癌转移中起重要作用。     

结直肠癌组织中Ezrin蛋白的表达及其临床意义

目的：探讨结直肠腺癌组织中Ezrin蛋白表达情况及临床意义。方法：采用微波-EliVisionTM免疫组化染色方法检测100例结直肠癌、30例腺瘤及30例正常黏膜组织中Ezrin的表达分析其与结直肠癌浸润转移等的关系。结果：Ezrin蛋白在结直肠黏膜、腺瘤及结直肠癌中表达阳性率分别为23.3%（7/30）、50.0%（15/30）、72.0%（72/100）,两两比较差异均有统计学意义（P〈0.05）;而Ezrin蛋白高表达与结直肠癌浆膜浸润、淋巴结转移和肝转移关系密切（P〈0.05）,与其年龄、分化程度及TNM分期等无关（P〉0.05）。结论：Ezrin蛋白的高表达与结直肠癌发生、发展及转移等有一定相关性,可作为潜在预测结直肠癌浸润转移的敏感指标。     

galectin-3和CD105蛋白在结直肠癌中的表达及意义

目的探讨galectin-3和CD105在结直肠癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法应用微波-EliVisionTM免疫组织化学染色技术检测60例结直肠癌、30例结直肠腺瘤及30例结直肠正常黏膜组织(远离癌组织4 cm以上)中galectin-3蛋白和CD105蛋白的表达〔以微血管密度(MVD)反映CD105蛋白的表达〕,分析其与结直肠癌临床病理特征的关系。结果 galectin-3蛋白表达阳性率和MVD在结直肠正常黏膜、腺瘤至癌组织中逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05)。两者均与结直肠癌的TNM分期、浸润深度及淋巴结转移有关(P<0.05,P<0.01),且galectin-3蛋白表达还与肿瘤的分化程度有关(P<0.05)。结直肠癌组织中galectin-3蛋白的表达与MVD呈正相关(r=0.420,P<0.01)。结论 galectin-3和CD105蛋白的表达与结直肠癌高侵袭能力和淋巴结转移有一定关系,可作为预测结直肠癌浸润、转移的潜在敏感指标。     

结直肠癌组织中Twist和E-钙黏蛋白的表达及其相关性

目的观察Twist和E-钙黏蛋白（E-cadherin）在结直肠癌中的表达,分析两者与患者临床病理指标的关系,并探讨其在结直肠癌发生、发展中的作用以及与患者预后的关系.方法采用免疫组化EliVisionTM Plus法检测60例结直肠癌、20例结直肠腺瘤和20例癌旁正常肠黏膜中Twist蛋白的表达情况.结果 （1）Twist在结直肠癌组织中的阳性率（56.7%）显著高于腺瘤组织（10%）和癌旁正常黏膜组织（0%）;E-cadherin在结直肠癌组织中的阳性率（35%）显著低于结直肠腺瘤（70%）和癌旁正常黏膜组织（100%）;（2）Twist和E-cadherin在结直肠癌异常表达均与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期有关,与年龄、性别及肿瘤大小无关.结论 Twist是结直肠癌浸润和早期转移的重要生物学指标,联合检测Twist和E-cadherin有助于判断结直肠癌的转移和预后;Twist将来可能成为结直肠癌靶向治疗的一个新靶点.     

结直肠腺癌中Fascin-1蛋白表达与其临床病理特征的关系

目的探讨结直肠腺癌组织中Fascin-1蛋白表达及与其临床病理参数的关系。方法采用微波-EliVisionTM免疫组化染色方法检测60例结直肠腺癌、30例结直肠腺瘤及30例正常结直肠黏膜组织(远离癌组织4cm)中Fascin-1蛋白的表达情况,并分析其与结直肠腺癌浸润、转移等的关系。结果Fascin-1蛋白阳性表达主要在细胞质,其在正常结直肠黏膜组织、结直肠腺瘤组织及结直肠腺癌组织中的表达阳性率分别为3.3%(1/30)、30.0%(9/30)及53.3%(32/60),在3种组织中表达逐渐增强,两两比较差异有统计意义(P0.05)。Fascin-1蛋白在结直肠腺癌浆膜浸润、淋巴结转移和TNMⅢ+Ⅳ期中的表达阳性率明显高于无浆膜浸润、无淋巴结转移及TNMⅠ+Ⅱ期者(P0.05),不同性别、年龄及分化程度之间差异无统计学意义(P0.05)。结论Fascin-1蛋白表达与结直肠腺癌高侵袭能力及淋巴结转移有关,可作为潜在预测结直肠癌浸润、转移的敏感指标。     

长链非编码RNA HIF1A-AS2在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的检测LncRNA HIF1A-AS2在结直肠癌组织中的表达,并探讨其临床意义。 方法选取2012年12月至2015年12月行结直肠癌患者根治术的114例结直肠癌患者临床病理资料;收集其癌组织及相对应的癌旁组织(距病灶2 cm)和正常组织(距癌灶边缘>5 cm)标本。通过qRT-PCR检测结直肠癌组织、癌旁组织及癌旁正常组织中HIF1A-AS2相对表达水平。取114例入组患者HIF1A-AS2表达水平的平均数,将HIF1A-AS2表达水平大于等于平均数的89例纳入高表达组,其余纳入低表达组;分析HIF1A-AS2表达与临床病理特征之间的关系;Kaplan-Meier生存曲线分析两组患者术后5年生存情况,Log-rank检验比较生存差异;COX比例风险回归模型分析预后不良的独立危险因素;P<0.05为差异有统计学意义。 结果结直肠癌组织中HIF1A-AS2相对表达量高于癌旁组织及正常组织(P<0.001)。HIF1A-AS2表达与临床分期及组织分化程度显著相关(P<0.05)。HIF1A-AS2高表达组患者术后5年总生存率低于HIF1A-AS2低表达组(Log-rank χ²＝5.037, P＝0.025)。COX多因素分析显示淋巴结转移、临床分期Ⅳ期、中-低分化、有远处转移及HIF1A-AS2显著高表达是影响结直肠癌患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。 结论结直肠癌组织中HIF1A-AS2显著高表达,与临床病理及预后密切相关,是影响结直肠癌患者预后不良的危险因素之一。     

Galectin-3蛋白在结直肠癌中的表达及临床意义

目的研究Galectin-3蛋白在结直肠癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用快捷免疫组化MaxVi-sionTM法对50例正常结肠黏膜组织、60例结肠腺瘤性息肉组织、152例结直肠癌中Galectin-3蛋白进行检测。结果 Galec-tin-3蛋白在结直肠癌中的阳性率与正常结肠黏膜组织、结肠腺瘤性息肉组织相比,其差异均有统计学意义（P〈0.05）。在结直肠癌中,Galectin-3蛋白的表达与肿瘤的临床分期、组织的分化程度及有无淋巴结转移有关,临床分期越晚、组织分化越差,Galectin-3蛋白表达越高,有淋巴结转移组的表达率高于无淋巴结转移组,其差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 Galec-tin-3蛋白在结直肠癌的发生发展中起着重要作用。     

膀胱移行细胞癌中Dab2／DOC-2与GRB2表达的相关性及临床意义

目的探讨Dab2、GRB2在膀胱移行细胞癌中表达的临床意义及其相关性。方法应用免疫组织化学方法检测Dab2、GRB2在64例膀胱移行细胞癌中的表达,采用卡方检验分析两者表达与膀胱移行细胞癌临床病理学特征之间的关系。结果膀胱移行细胞癌中Dab2和GRB2阳性表达率分别是43．8％和81．3％,表达呈负相关（r=-0．383,P=0．002）。Dab2表达水平与肿瘤病理学分期有关,GRB2表达与肿瘤的病理学分级有关。结论Dab2、GRB2蛋白表达可作为判断膀胱移行细胞癌生物学行为的重要指标。     

抑癌基因RhoBTB2及其与乳腺癌的研究进展

RhoBTB2基因（rho—related BTB domain—containing 2，RhoBTB2）是2002年美国学者发现的乳腺癌主要候选抑癌基因。RhoBTB2蛋白质能够编码信号转导蛋白，参与各种信号转导途径，并通过影响细胞凋亡及细胞周期来调节细胞的生长。在正常乳腺组织中，RhoBTB2均呈低量但稳定的表达，而在3．5％的原发性乳腺癌中发生纯合性缺失，在58％的乳腺癌中表达缺失。它是目前与90％的散发性、非家族性乳腺癌相关的少数基因之一。     

P2Y2 receptors and GRK2 are involved in oscillatory fluid flow induced ERK1/2 responses in chondrocytes

Mechanical loading is an important factor regulating cartilage metabolism maintained by chondrocytes. However, some of its underlying mechanisms remain poorly understood. In this study, we employed a chondrogenic cell line ATDC5 to investigate roles of P2Y₂ and GRK2 in chondrocyte mechanotransduction. We first confirmed the expression of chondrocyte markers in differentiated ATDC5 cells. We then exposed both differentiated and undifferentiated ATDC5 cells to oscillatory fluid flow, and found that differentiated ATDC5 cells responded to oscillatory fluid flow by increasing COX‐2 and aggrecan expressions. More importantly, fluid flow induced ERK1/2 response in differentiated cells was increased more than 10 times compared to those in undifferentiated cells. Furthermore, we found that P2Y₂ mRNA and protein levels in differentiated ATDC5 cells were significantly higher than those in undifferentiated cells. In contrast, GRK2 protein levels in differentiated cells were significantly lower than those in undifferentiated cells. Finally, overexpressions of P2Y₂ and GRK2 in differentiated ATDC5 cells result in a 34% increase and a 21% decrease of the ERK1/2 phosphorylation, respectively, in response to oscillatory fluid flow, suggesting important roles of P2Y₂ and GRK2 in chondrocyte mechanotransduction. © 2010 Orthopaedic Research Society Published by Wiley Periodicals, Inc. J Orthop Res 29:828–833     

HER-2/neu过表达与雄激素非依赖性前列腺癌Gleason分级和临床分期的相关性研究

目的:检测HER-2/neu基因在雄激素依赖与雄激素非依赖性前列腺癌(PCa)组织中的表达情况,推测这一基因在雄激素非依赖性PCa发生中的意义。方法:收集30例雄激素依赖性PCa标本(雄激素依赖组)和24例激素非依赖性PCa标本(雄激素非依赖组),采用免疫组化方法检测HER-2/neu基因的蛋白表达,对照临床分期、Gleason分级进行分析。结果:HER-2/neu在雄激素依赖性PCa标本中的阳性表达率为10%,在雄激素非依赖性PCa的表达为33%;Gleason分级≤7分病例中HER-2/neu阳性表达率显著低于Gleason分级>7分病例组(14.29%vs26.92%,P<0.01);临床分期>T2病例中HER-2/neu阳性表达率显著高于≤T2病例组(34.62%vs7.14%,P<0.01)。结论:HER-2/neu在雄激素非依赖性PCa标本中阳性表达率高,而且随临床分期和Gleason分级的升高其阳性表达率升高。     

单侧隐睾大鼠对侧睾丸的损害与Bcl-2和Bax基因表达

目的:探讨单侧隐睾大鼠对侧睾丸生精细胞凋亡与Bcl-2/Bax基因表达的关系。方法:20只健康SD雄性大鼠(22日龄)随机分成隐睾组和对照组,每组10只。通过手术建立单侧隐睾动物模型。术后90 d取对侧睾丸,采用原位缺口末端标记(TUNEL)法检测生精细胞凋亡,免疫组化SP法检测Bcl-2/Bax基因表达。结果:与对照组相比,隐睾组对侧睾丸生精细胞凋亡显著增多(P<0.01),重量显著减轻(P<0.01),Bax表达显著升高(P<0.01),Bcl-2表达显著降低(P<0.01)。凋亡细胞主要是初级精母细胞和圆形精子细胞。结论:单侧隐睾大鼠对侧睾丸的生精细胞凋亡增多与Bcl-2基因表达降低、Bax基因表达升高密切相关。细胞内Bc l-2/Bax比值是影响生精细胞凋亡的重要因素之一。     

兔肝缺血-再灌注时PtiO_2,PtiCO_2和pHti变化的研究

目的　研究兔肝缺血 再灌过程中肝组织氧分压 (PtiO2 ) ,二氧化碳分压 (PtiCO2 )和酸碱度 (pHti)变化规律、原因及其临床意义。方法　将麻醉后的大白兔阻断肝十二指肠韧带 45min后开放 ,观察 12 0min。持续监测PtiO2 ,PtiCO2 和pHti值 ,并取肝组织行病理检查。结果　肝门阻断后 15minPtiO2 急剧下降至 4mmHg以下 ,PtiCO2 急剧升高至 (149 6 3± 9 80 )mmHg(P <0 .0 0 1) ,pHti急剧下降至 (7 0 5± 0 0 9) (P <0 .0 0 1)。肝门开放后 ,PtiO2 迅速回升 ,并于 6 0min后稳定在 (16 4± 4 7)mmHg ,PtiCO2 下降并稳定在 (6 0 6 0± 6 6 6 )mmHg ,pHti上升并稳定在 (7 40± 0 12 )。病理观察 (光镜、电镜 )发现肝门阻断 15min以上 ,肝细胞显微及亚显微结构损害明显重于阻断 15min以内。结论　 15min可能是兔肝门阻断的安全时限 ,4mmHg可能是兔肝门阻断的临界氧分压。肝组织PtiO2 ,PtiCO2 和pHti监测是肝脏缺血耐受能力的个体化检测     

ERBB3/HER3 and ERBB2/HER2 Duet in Mammary Development and Breast Cancer

ERBB3/HER3 is one of the four members of the epidermal growth factor receptor (ERBB) family. It is activated by binding to ligands Neuregulin-1 and Neuregulin-2. Since ERBB3 lacks intrinsic kinase activity, signal transduction occurs through formation of heterodimers with EGFR, ERBB2, and ERBB4. ERBB3 is a signaling specialist since it has six binding sites for the p85 SH2 adapter subunit of phosphoinositide 3' kinases. These lipid kinases coordinate regulation of metabolism, cell size, proliferation, survival, and angiogenesis. Not surprisingly, ERBB3 signaling has been linked to cancer etiology and progression. In breast cancer, the partnership of ERBB2 and ERBB3 may be crucial for the aggressive properties of cancers with ERBB2 amplification, and may contribute to pre-existing and acquired resistance to therapy. This partnership creates opportunities for improving efficacy of ERBB-targeted pharmaceuticals, by interfering with coupling of ERBB2 to ERBB3 through dimerization inhibitors, and by use of therapeutic compounds that target AKT-dependent pathways activated through ERBB3. Additional therapeutic opportunities may be identified through better understanding of how ERBBs are regulated and deployed in normal mammary gland processes. Work using mouse models has identified the main processes regulated by each of the four ERBBs, which has practical implications in understanding breast cancer etiology, and eventual development of better prognostic, predictive, and therapeutic tools.     

乳腺癌新辅助化疗疗效及ER/PR,HER2,Ki67,CyclinA2的化疗预测作用

目的探讨乳腺癌新辅助化疗疗效及ER/PR,HER2,Ki67,CyclinA2的疗效预测价值。方法 2004年10月～2009年12月50例Ⅰ～Ⅲ期原发性乳腺癌,采用含紫杉类（TP/TC或TE/PE/TEC方案）或蒽环类（EC/FEC方案）联合方案,术前化疗2～6周期,45例接受手术,术后完成规定化疗,应用B超结合触诊判断临床疗效。结果化疗前后肿瘤中位最大径分别为3.6 cm和2.2 cm,有统计学差异（Z=-5.723,P=0.000）。临床疗效：CR 3例（6%）,PR 35例（70%）,SD 11例（22%）,PD 1例（2%）,临床RR 76.0%（38/50）。45例接受手术,术后3例pCR（3/45,6.7%）,3例tpCR（3/45,6.7%）。4年无病生存期（DFS）为86.2%,4年总生存率为93.1%,中位DFS 62.4月[SE：2.535,95%CI（57.450～67.388）]。不同情况下肿瘤缩小比例并无统计学差异,包括月经状态（绝经前vs.绝经后,46.4%vs.40.6%,P=0.536）、激素受体状况（阳性vs.阴性,43.0%vs.42.2%,P=0.929）、HER2（阳性vs.阴性,41.3%vs.43.9%,P=0.774）、Ki67（阳性vs.阴性,47.2%vs.43.1%,P=0.363）、CyclinA2（阳性vs.阴性,34.3%vs.50.0%,P=0.375）、分化程度（高分化vs.中分化vs.低分化,44.1%vs.42.9%vs.41.3%,P=0.983）以及不同化疗方案（TP/TC vs.TE/PE/TEC vs.EC/FEC,52.7%vs.39.8%vs.38.9%,P=0.440）。结论紫杉类及蒽环类药物联合方案用于浸润性乳腺癌的术前化疗,可有效控制肿瘤。ER/PR,HER2,Ki67,CyclinA2的状态与肿瘤缩小比例之间并无统计学意义的关联性。     

GAS/CCK-2R及其拮抗剂在胰腺癌治疗中的作用

近年来发现胃泌素/胆囊收缩素-2受体(gastrin/cholecystokinin-2 receptors,GAS/CCK-2R)与胰腺癌的发生、发展有密切关系.它在人体内广泛分布,但不存在于正常胰腺外分泌部.CCK-2R在胰腺癌组织中出现异常表达,该表达引起了胰腺外分泌部蛋白的异常表达和激活,导致腺泡细胞形态学和表型的变化,并使胰腺对致癌物质的敏感性增加.一些GAS/CCK-2R拮抗剂可用于胰腺癌的早期和晚期治疗.     

HPC2/ELAC2 polymorphism associated with Japanese sporadic prostate cancer

BACKGROUND: HPC2/ELAC2 gene was identified by linkage analysis from familial prostate cancer (Pca) patients in USA. To determine the association of HPC2/ELAC2 gene with Japanese sporadic Pca, we performed a case-control study focused on two missense polymorphisms. METHODS: We genotyped the two polymorphic sites of Ser217Leu and Ala541Thr in sporadic Japanese Pca patients (n = 285) and matched controls (n = 233). Controls were unrelated Japanese outpatients who had no history of any cancer and normal PSA level (less than 4.0 ng/ml). Statistical analyses were performed by Mann-Whitney's U-test, Fisher's exact test, and logistic regression analysis. RESULTS: We observed a significantly higher frequency of the Thr allele at 541 polymorphic site in Pca patients (8.4%) compared to the control group (2.1%) (P = 0.0030, Odds Ratio (OR) = 4.02, 95% CI = 1.50-10.8). However, this SNP does not correlate with clinical stage, PSA level, Gleason score of biopsies or age at diagnosis. No association was identified at Ser217Leu polymorphic site. CONCLUSIONS: Our results indicate that Thr allele at 541 in HPC2/ELAC2 has strong significance in the predisposition of sporadic Pca in Japan. This polymorphism can be useful to predict the personal Pca risk, which lead the effective screening of Pca.