巨噬细胞移动抑制因子在自发性高血压大鼠主动脉血管壁上的表达

目的：了解巨噬细胞移动抑制因子（MIF）与自发性高血压大鼠血管重构的关系。方法：观察不同周龄高血压大鼠（SHR）和SD大鼠主动脉的显微结构,采用免疫组化方法比较MIF在不同周龄SHR和SD大鼠主动脉的表达。结果：随着周龄增加,SHR主动脉中膜胶原纤维及弹性纤维相对面积比增加。主动脉平滑肌细胞（SMC）MIF阳性表达增多。结论：MIF可能与SHR血管重构有密切关系。     

PPA Rα与自发性高血压大鼠主动脉重构的关系研究

目的：阐明自发性高血压大鼠（SHR）主动脉血管重构（VR）与PPARα的关系,为进一步明确高血压动脉VR的分子机制奠定理论基础。方法：10只雄性SHR大鼠为实验组,10只同周龄雄性Wistar大鼠（WKY）为对照组,于16周龄和24周龄进行主动脉组织学观察和弹性纤维染色,观察VR的形态学表现,测定 PPARα蛋白在各组动物中的表达水平。结果：（1）16周龄SHR大鼠主动脉中膜血管平滑肌细胞（VSMC）总数无明显增加,24周龄SHR大鼠VSMC总数多于同周龄WKY组。（2）16周龄SHR主动脉管壁中层弹性膜排列紊乱,24周龄SHR弹性膜松散、断裂、厚薄不均。（3）PPARα蛋白在SHR组表达高于相同周龄WKY组,在16周龄SHR大鼠PPARα蛋白表达明显高于16周龄WKY大鼠。结论：PPARα蛋白的高表达在SHR主动脉VR中发挥重要作用。     

N-ras在自发性高血压和两肾一夹型高血压大鼠肾脏动脉丛表达的比较研究

目的比较观察N-ras在自发性高血压大鼠(SHR)和两肾一夹型高血压大鼠(2K1C)肾脏血管平滑肌细胞中的表达,探讨N-ras与高血压肾脏血管重构的关系及高血压血管重构发生的机制。方法用免疫组织化学和Western blot方法检测16周龄和24周龄SHR大鼠和2K1C大鼠肾脏血管丛平滑肌细胞以及肾小球内皮细胞中N-ras的表达,同周龄正常血压WKY大鼠作为对照。结果 N-ras在SHR组和2K1C组表达高于WKY组(P<0.05)。N-ras在16周龄和24周龄2K1C组各级肾脏血管丛,包括小叶间动脉、弓形动脉、叶间动脉和入球小动脉的血管平滑肌细胞,以及肾小球内皮细胞的表达均高于SHR组(P<0.05)。结论癌基因N-ras的高表达可能参与了高血压大鼠肾脏的血管重构,两肾一夹型高血压大鼠肾脏中的N-ras表达高于自发性高血压大鼠。     

自发性高血压大鼠主动脉平滑肌细胞C－Src癌基因表达增强

自发性高血压大鼠主动脉平滑肌细胞Ｃ－Ｓｒｃ癌基因表达增强北京医科大学第三医院中心实验室朱应葆，韩　云，傅　欣在各种正常和恶性的动物组织中都有Ｃ－Ｓｒｃ癌基因不同程度的表达。Ｓｒｃ癌基因的产物是酪氨酸蛋白激酶，已有研究表明转化细胞中的自分泌生长是由Ｓｒ...     

原发性高血压大鼠动脉血管重构的形态学研究

目的探讨自发性高血压大鼠(SHR)大动脉及肾小、细动脉血管重构(VR)的形态学改变,为进一步明确高血压状态下动脉VR的分子机制奠定基础。方法将4、16、24周龄组雄性SHR作为实验组,同周龄雄性Wistar大鼠(WKY)作为对照组,各组5只大鼠。进行主动脉和肾小、细动脉组织学测量和弹性纤维染色观察,高血压动脉VR情况。结果 SHR组主动脉中膜血管平滑肌细胞(VSMC)总数多于同周龄WKY组。24周龄SHR主动脉管壁中层弹性膜排列紊乱、松散、厚薄不均、断裂。SHR组肾小动脉相对内径随周龄增加逐渐减小,相对中膜厚度随周龄增加逐渐增加。24周龄SHR肾小动脉管壁纤维化,肾细动脉未见明显纤维化改变。结论 SHR各组动脉VR的形态学表现不一致,可能其具有不同的分子机制。     

二氧化硫对自发性高血压大鼠主动脉平滑肌细胞内质网应激的影响

目的探讨二氧化硫(sulfur dioxide,SO2)对自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)主动脉平滑肌细胞内质网应激的调节作用。方法4周龄正常血压WKY(wistar-kyoto rat)大鼠7只作为WKY对照组。4周龄SHR大鼠12只分为SHR(spontaneously hypertensive rat)对照组及SHR+SO2供体(Na2SO3/NaHSO3)组,每组6只。5周后检测大鼠血压,采用高效液相色谱(HPLC)法测定血浆SO2水平,采用免疫组织化学方法检测主动脉平滑肌细胞GRP78和caspase-12的蛋白表达。结果9周时SHR对照组血压明显高于WKY对照组,血浆SO2水平显著低于WKY对照组,主动脉平滑肌细胞GRP78和caspase-12蛋白表达显著增高。与SHR对照组比较,SHR+SO2供体组大鼠血压明显降低,血浆SO2含量升高,主动脉平滑肌细胞GRP78和caspase-12蛋白表达降低。结论SO2可能抑制高血压大鼠主动脉血管平滑肌细胞内质网应激反应的激活。     

自发性高血压大鼠血管平滑肌及心肌内成纤维细胞生长特性的研究

目的　探讨自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats, SHR)主动脉平滑肌细胞(aorta smooth muscle cell, ASMC)与心肌内成纤维细胞(cardiac fibroblast, CFB)在体外培养生长的特性。方法　16周龄自发性高血压大鼠(SHR)和正常大鼠(WKY)测血压后处死，取心脏与胸主动脉，组织块法分别培养CFB与ASMC)。分别观察(1)CFB     

5-LO在SHR大鼠脑动脉平滑肌细胞中的表达及意义

【摘要】 目的 探讨5脂氧合酶（5-LO）在自发性高血压大鼠(SHR)脑动脉平滑肌细胞中的表达及意义。方法 选取16周龄雄性SHR和WKY大鼠,各15只,WKY大鼠作为正常对照。采用免疫荧光法检测5-LO在脑动脉血管中的表达,透射电镜观察动脉内膜表现,ELISA检测血清及动脉5-LO表达。结果 WKY大鼠动脉内膜光滑,平滑肌细胞排列整齐无增生,SHR大鼠内皮细胞肿胀,平滑肌细胞肥大变形排列紊乱;SHR大鼠脑动脉平滑肌细胞5-LO荧光强度为（110.93±5.92）,明显强于WKY大鼠（P＜0.05）;SHR大鼠血清和脑动脉5-LO水平分别为（2671.04±30.18）ng/l和（1950.04±30.08）ng/l,明显高于WKY大鼠,差异比较有统计学意义（P＜0.05）。结论 5-LO在SHR大鼠脑动脉平滑肌细胞和血液中表达异常增高,可能在高血压脑血管损害过程中起作用。     

清热降压方防治自发性高血压大鼠血管重塑机制研究

目的:探讨中药清热降压方治疗自发性高血压大鼠胸主动脉重塑的机制。方法:放免法检测血清PCⅢ、ColⅣ、TGFαI、GFⅡ含量,免疫组化法检测胸主动脉生长因子bFGF表达,免疫荧光细胞化学法检测胸主动脉平滑肌细胞CD62P含量。结果:清热降压方能降低ColⅣ和TGFα含量,抑制主动脉bFGF表达,降低主动脉平滑肌细胞CD62P含量。结论:清热降压方抑制自发性高血压大鼠胸主动脉重塑的机制与其降低血清ColⅣ和TGFα含量、抑制主动脉bFGF表达、降低主动脉平滑肌细胞间的黏附有关。     

慢性高血压对自发性高血压大鼠主动脉pCx43分布及表达的影响

目的:观察慢性高血压对自发性高血压大鼠(SHR)主动脉磷酸化的缝隙连接蛋白43(pCx43)分布及表达的影响。方法:SHR和Wistar-Kyoto大鼠(WKY)喂养8周后分离主动脉,采用激光共聚焦扫描成像及Western-Blot检测总Cx43(TCx43)和pCx43表达变化。结果:SHR主动脉TCx43表达比WKY减少,pCx43减少更为明显,荧光显微镜观察到内皮细胞及平滑肌细胞pCx43分布比WKY大鼠稀疏。结论:慢性高血压导致自发性高血压大鼠主动脉pCx43分布及表达紊乱。     

OVER-EXPRESSION OF EXTRACELLULAR SIGNAL-REGULATED KINASE IN VASCULAR SMOOTH MUSCLE CELL OF HYPERTENSIVE RATS

VASCULARsmoothmusclecell(VSMC)iscon sideredasamajorcomponentinvolvedintheves selsremodeling.17Itisproposedthatacertaincytokines,suchasplatelet derivedgrowthfactor(PDGF),couldspeciallylinkwiththeirreceptorstotransformthe phenotypesandproliferationactivityo…     

PPAR-γ在自发性高血压大鼠血管平滑肌表达的增龄性变化

目的研究过氧化物酶体活化增殖受体γ（PPAR-γ）在自发性高血压大鼠（SHR）动脉血管平滑肌的表达随龄性变化。探讨PPAR-γ与高血压的发生发展关系。方法采用免疫组织化学方法检测PPAR-γ在不同周龄SHR血管组织表达变化。同时培养大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）。用RT—PCR检测PPAR-γmRNA。用Western Blot分析PPAR-γ蛋白在不同周龄大鼠原代及低代培养的VSMCs表达。采用同龄同种系正常血压的京都种大鼠（WKY）作为对照组。结果PPAR-γ在SHR血管组织的表达有随着鼠龄增加而增强的趋势。而24周与16周相比表达不再增加,PPAR-γ在4周和24周SHR和WKY表达差异无统计学意义。而8周和16周SHR的PPAR-γ表达明显高于WKY．在VSMCs。4周、8周和16周SHR和WKY的PPAR-γmRNA以及蛋白表达随着鼠龄的增加而增加．4周和24周SHR与WKY相比PPAR-γ mRNA以及蛋白表达差异无统计学意义。但是PPAR-γ表达量在8周、16周SHR VSMCs表达高于WKY,24周时在SHR VSMCs表达不再增加。表达量与同龄WKY相当。结论PPAR-γ的表达随着血压、血管平滑肌增殖和鼠龄的变化而有所不同。此变化提示PPAR-γ参与了高血压的发生发展。     

EFFECTS OF CERTAIN VASOACTIVE PEPTIDES ON PATHOGENESIS OF VASCULAR RESTENOSIS

Objective. To investigate the effects of several vasoactive peptides on the development of arterial restenosis after balloon angioplasty.Methods. In rat aortic artery restenosis model produced by denudation of aortic endothelia, we observed changes of endothelin (ET), angiotensin II (AII), calcitonin gene-related peptide (CGRP) and adrenomedullin (Adm) in plasma and aorta with radioimmunoassay and expression of hypertension-related gene (HRG-1) with semi-quantitative RT-PCR, and studied the effects of these peptides on intimal hyperplasia, intima/media ratio and MAPK activities of aortic artery after angioplasty respectively. Furthermore, in cultured cells, we studied the effects of these peptides on vascular smooth muscle cell (VSMC) proliferation and expression of HRG-1 of VSMC from spontaneously hypertensive rats (SHR) and Wistar-Kyoto (WKY) rats with 3H-TdR incorporation and RT-PCR respectively.Results. After angioplasty, the levels of ET and AII in plasma and aorta significantly increased, accompan     

Cx37和Cx40在自发性高血压大鼠不同动脉间的表达差异

目的：观察自发性高血压和正常血压大鼠肠系膜动脉和主动脉上连接蛋白（Cx）表达的变化。方法应用RT‐PCR和Wersternblot技术比较自发性高血压大鼠（SHR组）和正常血压大鼠（对照组）肠系膜动脉和主动脉上Cx37和Cx40的mRNA和蛋白表达水平。结果SHR组肠系膜动脉Cx37mRNA的表达降低（P＜0．05）,主动脉降低更为显著（P＜0．01）;肠系膜动脉Cx40mRNA的表达显著降低（P＜0．01）,而主动脉则没有变化（P＞0．05）。SHR组肠系膜动脉Cx37蛋白的表达降低（P＜0．05）,主动脉降低更为显著（P＜0．01）;肠系膜动脉Cx40蛋白的表达降低（P＜0．05）,而主动脉则没有变化（P＞0．05）。结论高血压可能通过降低血管细胞上Cx37和（或）Cx40的表达造成细胞间缝隙连接通讯异常。     

川芎嗪对PDGF-BB诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖和骨桥蛋白mRNA表达的影响

目的:探讨川芎嗪对血小板源生长因子(PDGF BB)诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及骨桥蛋白mRNA表达的影响。方法:大鼠胸主动脉平滑肌细胞体外培养,PDGF BB刺激VSMC ,采用MTT法和流式细胞仪测定川芎嗪对VSMC增殖的影响,逆转录聚合酶联反应(RT PCR)测定VSMC骨桥蛋白mRNA的表达水平。结果:川芎嗪可显著地抑制VSMC增殖(P <0 .0 1) ,使细胞生长停滞于G0 /G1期;PDGF BB诱导骨桥蛋白mRNA呈高表达,川芎嗪下调了这种表达。结论:川芎嗪能抑制体外的VSMC增殖,提示川芎嗪可能作为防治血管成形术后再狭窄的一种药物。     

血管活性肽在大鼠血管再狭窄形成中的作用

目的 研究血管活性肽在血管再狭窄形成中的作用。方法 在大鼠主动脉内皮球囊拉伤模型上,采用放射免疫法测定大鼠血浆及主动脉组织内皮素（ＥＴ）、降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）和肾上腺髓质素（Ａdm）含量以及组织中血管紧张素Ⅱ（ＡⅡ）含量,用∧３Ｈ－ＴdＲ掺入法和组织学分析观察血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增生以及血管内膜／中膜面积比值。并在培养的ＶＳＭＣ上,采用∧３Ｈ－ＴdＲ掺入法研研究血管活性肽对细胞增生的影响。采用ＲＴ－ＰＣＲ法观察血管活性肽对自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）和ＷＫＹ大鼠的主动脉和ＶＳＭＣ高血压相关基因－１（ＨＲＧ－１）表达的影响。结果 术后１０d ,血浆及主动脉ＥＴ达高峰,分别较对照组升高６９％和1２４％（Ｐ＜０．０１）;主动态ＡⅡ含量升高８０％（Ｐ＜０．０１）。应用ＥＴ抗血清或卡托普利可明显抑制血管损伤诱导的ＶＳＭＣ增殖和内膜增厚。血浆和主动脉ＣＧＲＰ水平在术后３d升高６４％和８９％（Ｐ＜０．０１）, 术后１０d血浆和组织Ａdm分别升高１２９％和１０２％（Ｐ＜０．０１）。在体应用ＣＧＲＰ（２５μg/kg）可显著抑制管损伤诱导的ＶＳＭＣ增殖和内膜增厚（抑制率分别为６６％和７９％,Ｐ＜０．０１）。ＥＴ和ＡⅡ抑制血管ＨＲＧ－１表达,激活丝裂素活化蛋白素酶（ＭＡＰＫ）;ＣＧＲＰ和Ａdm诱导ＨＲＧ－１表达,并抑制ＭＡＰＫ活性。结论 ＥＴ和ＡⅡ可促进损伤血管内增殖,而ＣＧＲＰ和Ａdm具有代偿性抗内膜增殖作用。ＥＴ、ＡⅡ、ＣＧＲＰ和Ａdm等血管活性肽可通过调节ＨＲＧ－１表达和ＭＡＰＫ途径以调控ＶＳＭＣ增殖,影响损伤血管狭窄的形成。     

气体分子硫化氢对自发性高血压大鼠主动脉结构重建的调节作用

目的: 研究新型气体分子硫化氢(H2S)对自发性高血压(SHR)大鼠高血压形成期主动脉几何形态和显微结构的影响并初步探讨其调节主动脉结构重建的作用机制.方法: 4周龄雄性SHR及正常血压(WKY)大鼠各自随机分为对照组、 NaHS(H2S供体)组及 PPG(H2S代谢酶抑制剂)组,5周以后,应用图像采集与分析系统对Weigert染色的胸主动脉显微形态结构做定量分析,应用免疫组织化学的方法检测细胞增殖核抗原(PCNA).结果: 9周龄SHR 对照组大鼠血压显著高于 WKY对照组大鼠[(184±12) mm Hg对(108±23) mm Hg],而SHR NaHS 组大鼠的血压[(158±12) mm Hg]显著低于SHR对照组.SHR对照组大鼠胸主动脉的血管内径、外径、中膜面积以及壁厚与内径的比均显著高于WKY对照组[血管外径(1 999±45) μm对(1 790±96) μm,内径(1 759±91) μm对(1 636±94) μm,中膜面积(0.60±0.06) μm2对(0.48±0.03) μm2,壁厚与内径的比(0.066±0.006)对 (0.060±0.004)],血管平滑肌细胞增殖指数也高于WKY对照组[(0.24± 0.06)对(0.11±0.05)].SHR NaHS组大鼠的多数血管结构指标低于SHR对照组大鼠[外径(1 864±66) μm,内径(1 634±66) μm,中膜面积 (0.53±0.06) μm2,只有壁厚内径比(0.063±0.003)与SHR对照组相比差异无显著性],血管平滑肌细胞增殖指数显著低于SHR对照组大鼠(0.151±0.028).结论: H2S是影响高血压主动脉结构重建的关键因素之一,外源性给予其供体NaHS有助于缓解自发性高血压形成期的主动脉结构重建.     

Expression of p-PPARγ in the aging thoracic aorta of spontaneously hypertensive rat and inhibitory effect of rosiglitazone

ObjectiveTo investigate the expression of phosphorylated peroxisome proliferators-activated receptor γ (p-PPARγ) in the aging thoracic aorta of spontaneously hypertensive rat (SHR) and the inhibitory effect of rosiglitazone on the phosphorylation of PPARγ.Methods16, 32 and 64 week-old Wistar-Kyoto rats (WKY) and SHR were randomly and respectively divided into WKY, SHR and SHR+rosiglitazone group (9 in each group). The rats in SHR+rosiglitazone group were treated with rosiglitazone (5 mg/kg, intragastrically) for 56 d, whereas normal saline was applied in WKY and SHR groups. Systolic blood pressure (SBP) of rats was measured by tail cuff method. Histopathological damage of thoracic aorta was analyzed using Hematoxylin-Eosin (HE) staining. Immunohistochemical staining and western blot were performed to test the level of p-PPARγ protein in the thoracic aorta arising from each group.ResultsThe SBP in 16, 32 and 64 week-old SHR were significantly higher as compared with those in matched WKY rats (P<0.05, respectively). HE staining showed increased content of smooth muscle cell, wrinkled lining endothelium and increased thickness of internal elastic lamina in the thoracic aorta of SHR. Immunohistochemical staining and western blot indicated that the levels of p-PPARγ in the thoracic aorta arising from SHR were obviously higher than those in the thoracic aorta arising from WKY rats (P<0.05, respectively). Importantly, the high SBP, histopathological abnormalities of the thoracic aorta and elevated p-PPARγ expression were prominently abrogated by rosiglitazone treatment in SHR (P<0.05, respectively). Furthermore, the SBP, histopathological abnormalities of the thoracic aorta and p-PPARγ expression were positively correlated with age in SHR (P<0.05, respectively).ConclusionsThe PPARγ phosphorylation was observed in the thoracic aorta of SHR and its expression was increased by the increase of age. Furthermore, rosiglitazone inhibited the PPARγ phosphorylation and suppressed vascular aging in SHR.     

磷酸化细胞外信号调节激酶和P21ras在高血压血管平滑肌细胞中表达增强

目的探讨高血压血管平滑肌细胞增生和ERK激活的机制。方法采用免疫组织化学和Westernblotting技术,对比观察肾血管性高血压和自发性高血压大鼠肾细小动脉平滑肌细胞中磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)和P21ras表达。结果实验期间,Wistar肾血管性高血压组动脉血压从(104±18)mmHg升高到实验结束时的(198±33)mmHg,自发性高血压大鼠16周龄时的血压为(163±23)mmHg。肾血管性高血压组肾小球发生了明显的纤维化(P<0.05),自发性高血压大鼠肾小球纤维化等与对照组无显著性差异。肾血管性高血压组入球动脉、小叶间动脉、叶间动脉和弓形动脉血管平滑肌细胞中磷酸化ERK1/2染色阳性率分别为7.09%、14.57%、29.44%和13.63%,均明显高于对照组(P<0.01)。自发性高血压大鼠入球动脉、小叶间动脉、叶间动脉和弓形动脉血管平滑肌细胞中磷酸化ERK1/2染色阳性率分别为16.09%、24.17%、32.44%和18.61%,均明显高于对照组(P<0.01);肾血管性高血压组和16周龄自发性高血压大鼠入球动脉、小叶间动脉和弓形动脉平滑肌细胞中P21ras的阳性率明显高于对照组(P<0.01);Westernbloting检测可见高血压组和16周龄自发性高血压大鼠肾组织磷酸化ERK1/2和P21ras蛋白含量明显高于对照组(P<0.01)。结论在大鼠两肾一夹型高血压和自发性高血压时,P21ras基因表达增加使部分血管平滑肌细胞丝裂原激活蛋白激酶系统激活,导致部分小动脉血管平滑肌细胞增生。     

心钠素对神经肽Y刺激培养的血管平滑肌细胞蛋白合成的影响

为研究高血压时肽类神经激素与血管壁结构改变之关系，应用自发性高血压大鼠（SHR）及Wistar大鼠动脉平滑肌细胞（SMC）培养以及3H－胸腺嘧啶核苷、3H－亮氨酸掺入方法，观察到用神经肽Y（NPY）作用48h后可促进SHR离体培养的血管SMCDNA合成增加28．0％，蛋白会成增加54．6％（与血清对照组比较），而细胞数无明显增加。当同时加入心钠素（ANP）后，正常血压大鼠中DNA和蛋白合成分别下降42．3％和44．3％，而SHR中仅分别降低11．4％和10．6％。结果表明NPY可促进血管SMC肥大（蛋白含量增加40％即表明细胞肥大），ANP可拮抗NPY促细胞肥大效应，但在SHR中ANP对血管SMC的调节作用减弱是引起细胞肥大的重要原因之一。