多聚谷氨酸化甲氨蝶呤浓度与类风湿关节炎疗效相关性研究

目的 探讨经甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)治疗的类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者红细胞内多聚谷氨酸化甲氨蝶呤(methotrexate polyglutamate,MTXPG)的浓度与其疾病活动度的关系.方法 选取76例经MTX治疗3个月的RA患者进行横断面研究,采用EL...     

单克隆抗体酶联免疫吸附测定甲胎蛋白方法的建立

应用二种抗甲胎蛋白(AFP)不同抗原决定簇的单克隆抗体分别与纤维素及酶结合,建立酶联免疫吸附测定(ELISA)法。应用这种方法测定18例人血清标本,结果与放射酶免疫测定比较,二者趋于一致。此外,本文对单克隆抗体的ELISA与抗血清的RIA进行了比较与讨论。     

大观霉素酶联免疫吸附检测方法的建立

目的建立大观霉素直接竞争酶联免疫吸附（ELISA）分析方法。方法通过大观霉素与载体蛋白偶联,制备免疫原和检测抗原,用杂交瘤技术制备单克隆抗体（mAb）,鉴定mAb的特异性,并用于竞争ELISA检测。结果获得3株能稳定分泌抗大观霉素的单克隆抗体杂交瘤细胞株,大观霉素竞争ELISA检测的下限为1ng／mL。结论抗大观霉素的mAb具有抗原结合特异性,可用于大观霉素竞争ELISA免疫学检测。     

微粒子酶免法与酶联免疫吸附法测定血清β-HCG的研究

目的对异位妊娠和葡萄胎等疾病孕妇以及正常孕妇进行微粒子酶免法与酶联免疫吸附法两种测定方法检测血清β-HCG水平并进行比较。方法分别采用微粒子酶免法和酶联免疫吸附法对160例病人进行血清β-HCG水平测定。结果微粒子酶免法与酶联免疫吸附法两种测定方法结果无差异（P〉0．05），但微粒子酶免法更迅速、直接。结论微粒子酶免法比酶联免疫吸附法更迅速、直接，更适用于临床。     

酶联免疫吸附法在沙门氏菌检测中临床应用

目的为了探讨酶联免疫吸附法在沙门氏菌检测中临床应用效果。方法本研究于2012年1月～2012年6月对我院接受的临床样本应用沙门氏菌特异性单抗3～47～26建立竞争ELISA法来进行沙门氏菌检测,通过与国标法对样品进行比较检测,分析该方法在沙门氏菌检测中的敏感性、特异性和准确性。结果国标法的检测限为4.9×101CFU/g粪便;C～ELISA为5.0×104CFU/g粪便。ELISA法检测的敏感性为94.4%,特异性为97.7%,准确性为97.1%。结论酶联免疫吸附法在沙门氏菌的临床检测中具有良好的特异性、准确性和敏感性,值得推广使用。     

抗旋毛虫单克隆抗体竞争酶联免疫吸附试验的建立及初步应用

作者选用1株高特异性抗旋毛虫单克隆抗体2G_8B_(10)H_2,建立了单克隆抗体竞争酶联免疫吸附试验(competitive ELISA,简称cELISA),并进行了初步应用。结果表明:20只日本大耳兔在感染旋毛虫后17天有35％呈现阳性,31天全部阳性.对其中5只感染兔的血清终点滴度观察了142天,了解特异性抗体的变化规律.该规律为病程估计提供了线索。另外,其他蠕虫感染兔血清29份无1例假阳性发生。可以认为,单克隆抗体cELISA是一种灵敏、特异的旋毛虫病免疫诊断方法。     

即刻法用于酶联免疫吸附试验室内质控的探讨

目的探讨即刻法在酶联免疫吸附试验（ELISA）室内质量控制（IQC）中的局限性,建立一种适用于日常质控更加准确有效的操作方法。方法采用即刻法和控制变异系数（CV）的方法同时统计初始阶段的质控数据,并用Excel 2000对质控数据自动统计、分析并绘制出即时累积的L-J质控图,将此操作方法用于日常质控进行评价。结果即刻法中前3次的质控数据直接影响随后的结果,如前3个质控数据的CV〈5%,随后统计的结果会出现假失控,前3个质控数据的CV〉10%,随后的结果会出现假在控。同时结合即时累积的L-J质控图可以直观质控结果和质控图曲线。结论采用即刻法进行室内质控时,应用控制变异系数的方法可减少假失控和假在控的结果,同时结合即时累积的L-J质控图能更准确有效的进行评价,效果明显优于单用即刻法。     

酶联免疫吸附法检测结核抗体的临床意义

为探讨血清结核抗体的辅助诊断价值,采用酶联免疫吸附试验法,对２０５例各型肺结核患者,５２例非结核感染患者,１０２例正常人进行了血清特异性结核抗体检测。结果表明,结核组结核抗体阳性１８８例,非结核组２ ,正常人组３例,提示酶联免疫吸附法测定结核抗敏感性高,且简单,快速,便于基层推广。     

碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶斑点酶联免疫吸附试验方法的建立

本文建立碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶(APAAP)斑点酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,对实验条件加以选择,同时检测了鼠源单克隆抗体(McAb)及甲胎蛋白(AFP)及免疫球蛋白G(IgG).结果表明:该法所选用的3种包被液,pH9.5 0.05 mol/L碳酸缓冲液,pH7.2 TBS,pH7.6 PBS无差异。底物溶液以坚固红溶液较理想。6种鼠源McAh腹水稀释8000～32000倍仍能测定。另外,可检测AFP,IgG最小量分别为10.94μg/L和152.03μg/L.APAAP-斑点ELISA可望用于McAb筛选和微量抗原的检测。     

血清T4固相酶联免疫法测定方法的建立

目的 以T4（3,5,3',5'-四碘－L－甲状腺素）测定为模式,研究建立血清激素固相试管酶免测定方法。方法 将抗T4抗体包被到固相试管壁,血清中的T4和T4标记物竞争结合固相抗体,标本的浓度通过内插法从标准曲线上求得,并和磁酶免测定法平均对比测定。结果 该种方法和磁酶免测定法进行对比实验并作了直线回归分析,提示两种方法高度相关,r=0.921,直线回归方程为：Y＝0.468 0.864X。配对样本t检验双侧P＞0．05,提示两种检测方法无显著性差异。结论 以T4测定为模式,研究建立的固相试管酶免测定方法简便、准确,具有较高的灵敏性和稳定性。     

尿调蛋白酶联免疫吸附试验检测方法的建立及其在IgA肾病中的应用

目的:建立尿尿调蛋白的酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assays,ELISA)检测方法,并对IgA肾病患者的尿尿调蛋白水平监测进行进一步验证。方法:以多克隆抗体作为包被抗体,单克隆抗体作为检测抗体,建立尿调蛋白的快速双抗夹心检测方法,检测其精确性及重复性,随机选取55例尿液标本,同时以商品化试剂盒与本实验方法进行检测,比较166例IgA肾病患者和正常人的尿尿调蛋白水平。结果:获得的标准曲线为0.78～12.5μg/L,实验室内变异系数为7.5%,实验室间变异系数为7.9%。55例尿液标本的商品化试剂盒与本实验方法结果比对,相关系数为r=0.615,P<0.001;166例IgA肾病患者的尿尿调蛋白/尿肌酐比值低于正常人。结论:尿尿调蛋白的ELISA检测方法灵敏,重复性较好,可运用于大样本的人群检测,IgA肾病患者的尿尿调蛋白分泌低于正常人。     

高灵敏酶联免疫分析法测定人脂肪细胞瘦素分泌

目的 建立高灵敏、特异的酶联免疫分析法测定人脂肪细胞瘦素的分泌.方法 制备兔抗人瘦素多克隆抗体和鼠抗人瘦素单克隆抗体,建立生物素一亲和素放大酶联免疫分析方法(BAELISA),观测原代培养的人网膜前脂肪细胞分化过程中瘦素的分泌及曲格列酮对其影响.结果 BA-ELISA方法灵敏度可达0.03 ng/ml,曲线工作范围0.05～5 ng/ml,批内批间变异系数分别小于7.4%和9.3%,平均回收率97.8%.测定经柱层析分离的混合人血清或脂肪细胞培养上清,仅显示单峰游离瘦素.观测到人网膜前脂肪细胞随诱导分化成熟而瘦素分泌量递增;10 umol/L曲格列酮可使瘦素的分泌峰值增加1倍.健康成人空腹血清瘦素水平女性显著高于男性(均值:7.6 ng/ml vs 3.2 ng/ml,P<0.001),与体重指数均有较强的相关性(r=0.61、0.67;P<0.001).结论 建立了高灵敏的BA-ELISA测定游离瘦素水平,尤其适于瘦素浓度低的临床血样本测定及基础研究之用.     

酶联免疫法与胶体金法在乙肝表面抗原检测中的应用

目的探讨酶联免疫法与胶体金法在乙肝表面抗原检测中的应用价值。方法选取2018年1～7月我院健康体检人员血液标本780份,所有标本均采用真空管采集。运用酶联免疫法与胶体金法检测所有血液标本,统计分析酶联免疫法与胶体金法在乙肝表面抗原检测中的阳性情况,并对比酶联免疫法与胶体金法在乙肝表面抗原检测中的应用价值。结果酶联免疫法与胶体金法在乙肝表面抗原检测中的阳性率9.23%(72/780)、8.72%(68/780)之间差异不显著(P0.05)。将常规法设定为酶联免疫法,胶体金法在乙肝表面抗原检测中的敏感度为72.22%(52/72),特异度为97.74%(692/708),准确度为95.38%(744/780),阳性预测值为76.47%(52/68),阴性预测值为97.19%(692/712)。结论酶联免疫法与胶体金法在乙肝表面抗原检测中的应用价值相当,临床应该依据实际情况合理选择检测方法。     

血浆甘油三酯对酶联免疫吸附试验检测乙型肝炎病毒表面抗原的影响探讨

目的 探讨甘油三酯(TG)对酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)的影响.方法 收集HBsAg阳性血浆样本,用蒸馏水做对倍稀释至1:8,分成4个组,对照组用蒸馏水稀释10倍,实验组用TG浓度不同的脂血浆稀释10倍.用ELISA法检测HBsAg的吸光度(A)值并做定性判读.结果 试验组HBsAg的A值与对照组之间差异有统计学意义,试验组间HBsAgA值差异有统计学意义;HBsAg的定性判读试验组1与对照组间差异无统计学意义,试验组2、3与对照组间差异有统计学意义,试验组间差异有统计学意义.结论 TG浓度明显影响ELISA法检测HBsAg,TG浓度和A值有明显的相关性.在HBsAg滴度相同TG浓度不同的样本中,TG浓度增高,A值减低.在低滴度的HBsAg样本中,高TG浓度可导致A值低于临界值,出现假阴性.样本HBsAg滴度越低,高浓度TG的影响越明显.     

TP-ELISA诊断梅毒螺旋体感染的可行性评价

目的使用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法诊断梅毒螺旋体感染的可行性.方法用目前国内最常用的诊断梅毒螺旋体感染的TRUST试剂及ELISA试剂检测63例梅毒患者和22例自身免疫性疾病患者的血清样本,同时与梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)的检测结果进行比较,从而得到各试剂的假阴性率和假阳性率.结果对63份阳性和22份阴性样本的检测中,所用TRUST试剂的假阴性率和假阳性率分别为28.57%、18.18%;TP-ELISA试剂的假阴性率和假阳性率分别为0%和0%.结论使用灵敏特异的ELISA方法诊断梅毒螺旋体感染是可行的.     

酶联免疫吸附试验检测对大疱性皮肤病诊断的评价

目的：评价酶联免疫吸附试验（ELISA）用于大疱性皮肤病血清学诊断的临床应用及意义。方法用 ELISA 法检测34例天疱疮患者、32例大疱性类天疱疮患者和33例非大疱性皮肤病患者血清,分别检测血清中的 Dsg1、Dsg3和 BP180的表达。结果 ELISA法检测大疱性皮肤病抗体的特异度为93．94％,敏感度为87．88％。结论 ELISA法对大疱性疾病具有诊断价值,在疾病的分型上有重要意义。     

应用酶联免疫吸附试验检测血清桥粒芯蛋白抗体水平监测寻常型天疱疮患者病情变化

目的:研究较大样本寻常型天疱疮(pemphigus vulgaris,PV)患者,血清抗桥粒芯蛋白(desmoglein,Dsg)1和抗Dsg3特异性抗体酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)指数长期的变化情况,观察其与病情变化的相关性,探讨其用于病情监测、预测疾病复发和指导治疗的可行性。方法:对20例确诊PV的患者进行长期随访,收集患者在各随访时间点的血清,记录每次随访时的病情并进行评分(autoimmune bullous skin disorderintensity score,ABSIS);检测患者血清的间接免疫荧光(indirect immunofluorescence,IIF)滴度、Dsg3 ELISA指数和Dsg1 ELISA指数;利用统计学方法和做图方法分析病情评分与Dsg3 ELISA指数、Dsg1 ELISA指数和IIF滴度之间的关系。结果:PV患者皮肤和口腔的病情评分,分别与Dsg3 ELISA指数、Dsg1 ELISA指数和IIF滴度均具有显著性关联(P<0.01),患者疾病活动期和临床缓解期两组间Dsg3 ELISA指数、Dsg1 ELISA指数和IIF滴度差异均有统计学意义(P<0.01)。各组患者相关性分析发现,Dsg3 ELISA指数、Dsg1 ELISA指数和IIF滴度几乎均与病情平行波动变化,ELISA指数优于IIF的平行性,并且ELISA指数可以预测病情是否会反复,从而指导治疗。结论:PV患者血清抗Dsg3抗体ELISA指数与病情变化平行波动,可以反映疾病的活动程度,可用于病情监测,并可为临床上预测疾病复发,指导临床调整治疗提供有利的实验室证据。     

人血清中青霉素抗体的酶联免疫吸附测定

目的: 建立检测青霉素抗体的ELISA法,并探讨其临床意义。方法: 以氨苄西林用SPDP法与兔血清白蛋白交联,用此交联物为包被抗原,HRP-抗人IgG为酶标抗体,建立检测青霉素抗体的ELISA法,并对部分临床标本进行青霉素抗体检测。结果: 建立的方法其批内、批间变异系数分别为6.8%、8.4%。氨苄西林-兔白蛋白交联物免疫家兔获得兔抗氨苄西林的抗体,以此抗体作阻断试验,抑制HRP-抗人IgG的显色。临床标本检测结果表明,不同疾病患者青霉素抗体的阳性率不同。结论: ELISA可用于临床对青霉素抗体的检测,具有较好的特异性、敏感性和重复性。     

双抗体夹心酶联免疫法检测不同样品中的蓖麻毒素

目的 应用酶联免疫吸附分析方法（ELISA）检测待测样品中的蓖麻毒素。方法 用蛋白 G亲和层析柱纯化蓖麻毒素单克隆抗体（4C13,3D74,5E4和5H6）,以3D74及辣根过氧化物酶(HRP)标记的4C13建立的双抗体夹心ELISA对含有蓖麻毒素的多种样品进行检测。结果 抗蓖麻毒素的单克隆抗体经亲和层析纯化后具有较高的蛋白纯度,应用HRP标记的4C13与3D74建立双抗体夹心ELISA,对于溶解于磷酸缓冲液中的蓖麻毒素标准品的检测灵敏度可达2.5 μg·L^-1;对于土壤、面粉、牛奶、咸菜汁、雪碧、可乐和腐乳汁中的蓖麻毒素样品检测的灵敏度为2.5～5.0 μg·L^-1;与磷酸缓冲液样品相比较,含有相同浓度蓖麻毒素的小鼠和人血清样品ELISA的阳性结果明显减弱。结论 双抗体夹心酶联免疫法能够有效用于含有蓖麻毒素样品的检测分析。