雷公藤总萜等药物对实验性过敏性脑脊髓炎动物发病的影响

采用雷公藤总萜、转化生长因子β（ＴＧＦ－β）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）及地塞米松对实验性过敏性腋脊髓炎（ＥＡＥ）豚鼠发病情况的影响进行了观察。结果发现，ＴＮＦ使动物发病的潜伏期缩短，使临床病情加重，使发病动物的体重损失更明显，而且使发病动物的死亡率增加。ＴＧＦ。ｐ和雷公藤总萜的作用恰恰与ＴＮＦ的作用相反，不仅使发病率降低，而且使病情减轻，病理改变也较轻。地塞米松的作用轻微。     

肿瘤坏死因子αmRNA在实验性过敏性脑脊髓炎猴脑…

应用逆转录聚合酶链反应技术，对．Ｃｊａｃｃｈｕｓ猴实验性过敏性脑脊髓炎脑组织中肿瘤坏死因子αｍＲＮＡ的水平进行了研究。结果表明：ＥＡＥ动物脑组织ＴＮＦαｍＲＮＡ明显高于正常动物；用一种ＴＮＦα释放抑制齐环戊苯吡酮可阻断免疫动物ＥＡＥ的发生和脑组织中ＴＮＦαｍＲＮＡ水平降低。     

胸腺五肽对实验性变态反应性脑脊髓炎的治疗机制探讨

目的:探讨胸腺五肽对实验性变态反应性脑脊髓炎的治疗效果及脑组织内肿瘤坏死因子-α水平的影响,为临床应用胸腺五肽提供理论依据。方法:成年雌性Wistar大鼠48只,随机分为正常对照组,EAE组,胸腺五肽治疗组。动态、对比观察实验各组在EAE诱导后7d、14d、21d时发病时间、发病率、病情程度、脑组织的病理变化及脑组织肿瘤坏死因子-α水平的改变。结果:胸腺五肽治疗组大鼠总发病率、发病程度与EAE组比较均明显降低(P<0.05),发病时间较EAE组比较平均延迟2.14d,但统计学差异不显著(P>0.05);脑组织病理改变较EAE组病灶出现晚且损伤减轻;对照组大鼠脑组织TNF-α蛋白有一定量的表达。EAE组大鼠TNF-α表达量显著高于对照组(P<0.01)和治疗组。胸腺五肽治疗组较对照组有所升高(无统计学差异,P>0.05),但比EAE组大鼠脑组织TNF-α含量明显降低,P<0.05)。结论:胸腺五肽能显著降低EAE大鼠的发病率、病情程度和减轻脑组织损伤,对EAE发病起到了治疗作用;通过脑组织TNF-α的含量变化表明,其发挥疗效的机制在于胸腺五肽显著降低了TNF-α蛋白的表达水平,减低了脑内炎症反应的程度所致。     

雷公藤内酯醇对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠脑和脊髓ICAM-1表达的影响

目的探讨雷公藤内酯醇(Triptolide,Tri)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠脑和脊髓细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法模型组采用豚鼠髓鞘蛋白匀浆和福(氏)完全佐剂诱发大鼠急性EAE,治疗组在此基础上给予不同剂量Tri[0.2 mg/(kg.d),0.4 mg/(kg.d)],观察其临床表现并进行评分。采用Loyez(氏)髓鞘染色法观察髓鞘病理改变,免疫组化法检测脑和脊髓ICAM-1表达。结果高剂量Tri治疗组大鼠未出现临床症状,其髓鞘结构完整;低剂量Tri治疗组临床症状较模型组轻且发病时间延迟,其髓鞘部分脱失。高剂量Tri治疗组ICAM-1阳性血管数为2.31±1.23,与模型组和低剂量Tri治疗组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论Tri对EAE的治疗作用与其抑制ICAM-1表达有关。     

实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠脑组织中NF-kBp65，TNF-a表达及雷公藤多甙的干预研究

目的观察Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）脑组织中核转录因子-KBp65（NF-KBp65）、肿瘤坏死因子-a（TNF-a）的表达情况,用雷公藤多甙（TWP）进行干预,探讨TWP对EAE的防治效果及作用机制。方法建立Wistar大鼠EAE模型,并选用TWP、泼尼松（PRD）干预治疗。65只Wistar大鼠随机分成5组：对照组5只,EAE组、TWPI组（EAE＋TWP10mg·kg-1·d-1）、TWPII组（EAE＋TWP30mg·kg-1·d-1）和PRD组（EAE＋PRD5mg·kg-1·d-1）各15只。观察各组大鼠发病情况并进行神经功能评分。大鼠脑和脊髓腰膨大段组织切片：苏木素一伊红（HE）染色＋罗克沙尔坚牢蓝（LFB）髓鞘染色,光镜下进行炎性病灶计数,并免疫组化方法检测大鼠脑组织内NF—KBp65、TNF-a的表达。结果EAE组及干预组大鼠脑组织内NF—KBp65、TNF—a表达水平随病情加重而升高,随病情缓解而降低。与EAE组比较,干预组大鼠发病率减低,潜伏期延长,神经功能评分及体重损失明显降低,脑组织炎性病灶数明显减少;同时脑组织NF—xBp65和TNF—a阳性细胞数量明显减少。TWP大剂量组与PRD治疗效果相当,且优于TWP小剂量组。结论NF—KBp65、TNF—a过表达可能参与EAE发生及进展;TWP有明显防治大鼠EAE作用,在一定程度上呈剂量相关性,其机制可能与下调NF—KBp65、TNF—a表达有关。     

实验性过敏性脑脊髓炎中枢神经系统中NF—kBp65的？…

目的 探讨核转录因子ＮＦ－ｋＢ在中枢神经系统炎性脱鞘病发病中的作用。方法 用牛脊髓髓鞘碱性蛋白加完全福氏佐剂对豚鼠进行免疫，诱发多发性硬化症的经典性动物模型－实验性过敏性脑脊髓炎（ＥＡＥ），并采用免疫组化方法对ＥＡＥ中枢神经系统中核转录因子（ＮＦ）ｋＢｐ６５的表达进行了研究。结果 在ＥＡＥ急性期血管周围浸润细胞和活化的小胶质细胞样细胞呈现ＮＦ－ｋＢｐ６５免疫反应阳性，而恢复期这种免疫反应明显减弱。     

转化生长因子-β与实验性变态反应性脑脊髓炎

多发性硬化 (multiple sclerosis,MS)是人类的一种自身免疫性疾病 ,而实验性变态反应性脑脊髓炎 (experience autoim-mune encephalomyelitis,EAE)则是研究 MS的经典动物模型。在 EAE的发病机制和治疗方面 ,有关细胞因子的深入探讨方兴未艾 ,其中转化生长因子 - β(Transformin     

苦参素对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠血清干扰素-γ及肿瘤坏死因子-α表达的影响

背景：大量文献证实实验性自身免疫性脑脊髓炎的发生发展与干扰素-γ和肿瘤坏死因子-α的表达增高有关。 目的：验证不同剂量的苦参素对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠血清中干扰素-γ和肿瘤坏死因子-α表达的影响。设计、时间及地点：对比观察实验,于2008-07/12在河南省中医药研究院和郑州大学第一附属医院完成。材料：清洁级Wistar大鼠40只,鼠龄6~8周,体质量180~220 g,建立实验性自身免疫性脑脊髓炎模型;苦参素注射液为正大天晴药业股份有限公司产品。方法：40只大鼠随机分成4组,每组大鼠均10只。应用豚鼠全脊髓匀浆和完全弗氏佐剂制成的抗原乳剂免疫Wistar大鼠建立实验性自身免疫性脑脊髓炎动物模型。模型组以6.7 mL/（kg•d）生理盐水16d腹腔注射,低剂量苦参素组以终浓度100mg/（kg•d）16d腹腔注射,高剂量苦参素组以终浓度150mg/（kg•d）16d腹腔注射,正常对照组干预方式同模型组。主要观察指标：造模后第16天应用苏木精-伊红染色观察实验大鼠脊髓组织病理学改变;酶联免疫吸附法检测实验大鼠血清中干扰素-γ的表达,放射免疫分析法检测实验大鼠血清中肿瘤坏死因子-α的表达;自造模当日起每日进行临床体征评分。结果：与模型组相比较,低剂量苦参素组和高剂量苦参素组大鼠临床体征评分降低（P<0.01）,脊髓内的炎性细胞浸润程度有所减轻,大鼠血清干扰素-γ和肿瘤坏死因子-α的表达水平均降低(P<0.01)。结论：苦参素能有效抑制实验性自身免疫性脑脊髓炎与其下调干扰素-γ和肿瘤坏死因子-α的表达有关。     

雷公藤内酯醇对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠行为和MMP-9表达的影响

目的:观察雷公藤内酯醇(Tri)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠中枢神经系统(CNS)中MMP-9表达的影响。方法:建立雌性EAE大鼠模型,将大鼠随机分为4组:治疗组(EAE Tri组);阳性对照组(EAE NS组);正常对照组(CFA Tri组、CFA NS组),观察Tri对EAE大鼠发病情况的影响,并通过免疫组化法观察Tri对EAE大鼠CNS中MMP-9表达的影响。结果:与EAE NS组比较,EAE Tri组的发病率明显降低,临床评分的平均值和最高值均降低,大鼠脑脊髓白质内炎性细胞浸润和病灶数比EAE NS组明显减少。免疫组化:EAE Tri组大鼠CNS中的MMP-9表达比EAE NS组明显减低。正常对照组大鼠均未发病,CNS中也无炎性细胞浸润及MMP-9表达。结论:Tri能抑制EAE大鼠CNS中MMP-9的表达,减轻EAE大鼠临床症状、降低发病率。     

实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠脑组织中NF-κB p65,TNF-α表达及雷公藤多甙的干预研究

目的 观察Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)脑组织中核转录因子-κBp65(NF-κB p65)、肿瘤坏死因子-α(TNF-a)的表达情况,用雷公藤多甙(TWP)进行干预,探讨TWP对EAE的防治效果及作用机制.方法 建立Wistar大鼠EAE模型,并选用TWP、泼尼松(PRD)干预治疗.65只Wistar大鼠随机分成5组:对照组5只,EAE组、TWPⅠ组(EAE+TWP 10 mg·kg-1·d-1)、TWPⅡ组(EAE+TWP 30mg·kg-1·d-1)和PRD组(EAE+PRD 5 mg·kg-1·d-1)各15只.观察各组大鼠发病情况并进行神经功能评分.大鼠脑和脊髓腰膨大段组织切片:苏木素-伊红(HE)染色+罗克沙尔坚牢蓝(LFB)髓鞘染色,光镜下进行炎性病灶计数,并免疫组化方法检测大鼠脑组织内NF-κB p65、TNF-α的表达.结果 EAE组及干预组大鼠脑组织内NF-κB p65、TNF-α表达水平随病情加重而升高,随病情缓解而降低.与EAE组比较,干预组大鼠发病率减低,潜伏期延长,神经功能评分及体重损失明显降低,脑组织炎性病灶数明显减少;同时脑组织NF-κB p65和TNF-α阳性细胞数量明显减少.TWP大剂量组与PRD治疗效果相当,且优于TWP小剂量组.结论 NF-κB p65、TNF-α过表达可能参与EAE发生及进展;TWP有明显防治大鼠EAE作用,在一定程度上呈剂量相关性,其机制可能与下调NF-κB p65、TNF-α表达有关.     

EAE发病机制及治疗的研究进展

几年来,分子生物学及分子免疫学的迅猛发展为医学研究拓宽了道路。在神经系统领域,通过细胞培养,单克隆抗体应用,以及聚合酶链反应等技术,证实了炎性脱髓鞘病中有粘附分子和细胞因子的参与。本文综述了EAE发病的神经免疫学进展。     

雷公藤和地塞米松联合使用对实验性自身免疫性脑脊髓炎单核细胞趋化蛋白-1的影响

目的探讨雷公藤内脂醇(TRD)和地塞米松(DXM)联合使用对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠临床指标和单核细胞趋化蛋白(MCP)-1 mRNA的影响。方法用完全抗原和百日咳原液免疫大鼠后7 d随机分成6组即EAE组、TRD1组、TRD2组、TRD3组、DXM组和联合用药组,经其腹腔分别注射0.5 mL NS/d、10μg TRD/d、20μg TRD/d、40μg TRD/d1、mg DXM/d和20μg TRD 0.5 mg DXM/d。取脑和脊髓制成石蜡切片,进行HE和MCP-1 mRNA原位杂交(ISH)染色,比较各项临床指标。结果TRD3组、DXM组和联合组的发病率分别为15%、0、0,临床评分分别为(0.5±1.29)、0、0,MCP-1 mRNA阳性细胞数分别为(15±6)、(2±1)(、6±2),与EAE组、TRD1组、TRD2组[发病率分别为82%、60%、73%,临床评分分别为(3.5±1.72)、(2.25±2.00)、(2.5±1.88),MCP-1 mRNA阳性细胞数分别为(69±26)、(57±33)、(62±28)]比较均显著降低(P<0.01)。结论减少TRD和DXM药量并联合使用对EAE疗效显著,可为临床治疗多发性硬化(MS)提供理论基础。     

己酮可可碱对实验性自身免疫性脑脊髓炎的影响

目的：观察己酮可可碱抑制急性EAE豚鼠发病,病情程度,以及对血清TNF,IL－6活性和PRL水平的影响。方法：将EAE模型豚鼠随机分为处理组和对照组,分别肌注己酮可可碱30mg/(kg.d)和等容量生理盐水,观察发生EAE的数目,临床评分,病灶计数及检测血清TNF,IL－6活性及血清PRL水平,并对数据进行显著性检验和相关性分析。结果：处理组豚鼠发病数减少,临床表现及病理变化明显减轻,血清TNF,IL－6活性及PRL水平较对照组显著降低。结论：己酮可可碱可能通过抑制TNF活性抑制EAE的发病。     

山茱萸总苷对大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎的初步观察

目的：观察山茱萸总苷（TGCO）对大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）的影响。方法：Wistar大鼠24只随机分为3组：正常对照组、EAE组和TGCO组。采用动物行为学、常规苏木精-伊红染色和LFB髓鞘染色观察大鼠的发病情况与中枢神经系统（CNS）的病理变化。结果：EAE组7／8只大鼠出现典型的EAE行为学改变、CNS炎性细胞浸润和髓鞘脱失。TGCO组有3,8只大鼠出现EAE行为学改变,评分最高为29,潜伏期延长,CNS内炎性细胞浸润和髓鞘脱失明显减轻。对照组未见动物行为学和CNS病理学改变。结论：TGCO能减轻EAE大鼠的临床症状、延长潜伏期和降低发病率。     

雌激素对实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠发病影响的研究

目的探讨雌激素对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)的影响。方法将30只大鼠随机分为EAE组及大、小剂量雌激素干预组,每组10只,制作EAE模型,大、小剂量雌激素干预组分别给予皮下注射苯甲酸雌二醇1 mg/kg/d、250μg/kg/d,连续10 d,观察各组的发病情况并采用HE染色观察脑和脊髓组织病理变化。结果大、小剂量雌激素干预组的临床症状均较EAE组轻,表现为发病率减少、潜伏期延长、进展期缩短、高峰期神经功能损害较轻。病理切片提示雌激素干预组脑和脊髓炎症细胞浸润明显减少,其中以大剂量组更明显。结论雌激素对多发性硬化动物模型EAE具有保护作用,且与剂量相关。     

实验性过敏性脑脊髓炎豚鼠中枢神经系统一氧化氮合酶的表达

目的探讨诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）在中枢神经系统脱髓鞘疾病中的作用。方法采用硫辛胺脱氢酶染色和抗诱导型一氧化氮合酶（抗ｉＮＯＳ）抗体的免疫组化方法，对髓鞘碱性蛋白诱导豚鼠产生的实验性过敏性脑脊髓炎（ＥＡＥ）病程中，脑和脊髓的一氧化氮合酶（ＮＯＳ）和ｉＮＯＳ表达情况进行研究。结果在ＥＡＥ的急性期主要为血管、血管周围细胞、浸润细胞和小胶质细胞显示ｉＮＯＳ免疫反应阳性，在恢复期星形细胞则出现免疫反应阳性。结论提示一氧化氮是ＥＡＥ早期血脑屏障破坏以及进展期髓鞘和少突胶质细胞破坏的重要介导物质。     

雷公藤内酯醇对实验性自身免疫性脑脊髓炎外周血及中枢神经系统中CD4+T淋巴细胞的影响

目的 探讨雷公藤内酯醇（Tri）对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）外周血及中枢神经系统中CD4^＋T淋巴细胞的影响，为Tri临床应用提供实验依据。方法 建立EAE大鼠模型，给予Tri预防性治疗．流式细胞术检测大鼠外周血的CD4^＋T淋巴细胞变化，免疫组化观察中枢神经系统中CD4^＋T淋巴细胞的浸润情况。结果 与生理盐水模型组比较，Tri治疗组的发病率显著降低，中枢神经系统中CD4^＋T淋巴细胞的浸润显著减少，而外周血CD4^＋T淋巴细胞的量变化不大。结论 Tri可能通过抑制CD4^＋T淋巴细胞在中枢神经系统的浸润，而阻止EAE的发病，提示Tri在治疗人类多发性硬化方面有一定应用前景。     

实验性变态反应性脑脊髓炎T淋巴细胞增殖和肿瘤坏死因子—α变化的意义

目的：探讨实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）T淋巴细胞增殖和肿瘤坏死因子（TNF）－α变化的意义。方法：观察Lewis大鼠主动免疫性EAE临床症状,T淋巴细胞增殖以及血清TNF－α水平,结果：EAE临床发病过程中,T淋巴细胞增殖活跃,血清TNF－α水平异常升高,并与临床症状呈正相关。结论：研究表明：EAE时,TI林巴细胞增殖旺盛和TNF－α生成增多。进而导致血脑屏障的破坏,炎细胞浸润,从而诱发EAE。     

咖啡因慢性干预对小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎影响的观察

目的：探讨不同剂量咖啡因慢性干预对小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）的影响及其分子免疫学机制。方法：C57BL／6小鼠随机分为CFA阴性对照组,EAE阳性对照组,咖啡因饮水干预组（1mg·k-1,10mg·kg-1,30mg·kg-1）。使用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55（MOG35-55）抗原诱导小鼠EAE模型,咖啡因干预至EAE造模后第20天与对照组小鼠同期处死为止。观察小鼠行为学变化、中枢炎症细胞浸润和损害程度、检测中枢细胞因子IL-17、IFN—γ、TGF—β的mRNA表达含量。结果：咖啡因干预组,特别是30mg·kg-1组的病情严重程度减轻,中枢炎症细胞浸润程度下降,促炎因子表达降低,抑炎因子表达上升。结论：慢性咖啡因干预,可通过降低促炎因子的表达,升高抑炎因子的表达,减轻小鼠EAE的炎症损伤。     

阿托伐他汀对实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠TNF-α和iNOS表达的影响

目的应用阿托伐他汀干预实验性变态反应性脑脊髓炎(experiment allergic encephalom yelitis,EAE)大鼠,探讨药物对于疾病发病、炎性细胞浸润及TNF-α和iNOS表达的影响。方法采用豚鼠脊髓匀浆诱导Wistar大鼠建立EAE模型,口服给药干预,观察药物对大鼠发病、炎性细胞浸润情况及TNF-α和iNOS表达的影响。结果阿托伐他汀降低了大鼠发病率(P<0.05),改善了大鼠发病的严重程度(P<0.05),抑制了炎性细胞向脊髓组织的的浸润(P<0.05),降低了脊髓中iNOS的表达(P<0.05),但对于血清中TNF-α的水平没有影响(P>0.05)。结论阿托伐他汀降低了大鼠的发病率,减轻了实验性变态反应性脊髓炎大鼠发病的严重程度及炎性细胞的浸润、iNOS的表达。