大鼠自体静脉移植后内膜增生与平滑肌细胞增值

研究大鼠颈外静脉移植入颈总动脉后内膜增生（ＩＨ）的发病机制。应用组织切片的特殊染色，单克隆抗ＰＣＮＡ抗体及抗Ｄｍ的免疫组化方法观察Ｈ的发生过程。结果：①术后１ｄ移植静脉的内膜消失，术后２ｄ出现ＩＨ并逐渐增生，ＩＨ中可见大量平滑肌细胞（ＳＭＣ），术后１２周ＩＨ的面积与术后１８周无显著差异；②ＩＨ中ＳＭＣ的Ｄｍ呈阳性；③ＩＨ中ＳＭＣ的ＰＣＮＡ指数于术后２ｄ骤然升高，术后２周达高峰。结论：ＩＨ发生在移植     

大鼠自体静脉移植后内膜增生与平滑肌细胞增值

研究大鼠颈外静脉移植入颈总动脉后内膜增生（IH）的发病机制。应用组织切片的特殊染色，单克隆抗PCNA抗体及抗Dm抗体的免疫组化方法观察IH的发生过程。结果：①术后1d移植静脉的内膜消失，术后2d出现IH并逐渐增生，IH中可见大量平滑肌细胞（SMC），术后12周IH的面积与术后18周元显著差异；②IH中SMC的Dm呈阳性；③IH中SMC的PCNA指数于术后2d骤然升高，术后2周达高峰。结论：IH发生在移植术后2d，逐渐增厚至术后12周方停止，术后早期发生的IH是由中膜的SMC移行至内膜并增殖所致。SMC增殖的高峰在术后第2周。     

C-myc siRNA抑制大鼠自体移植静脉再狭窄的研究

目的静脉移植术后c-myc基因持续高表达是导致血管内膜增生进而再狭窄的原因之一。文中探讨通过局部给药方法给予针对c-myc基因的小分子干扰RNA(siRNA)对自体移植静脉内膜增生的影响。方法建立SD大鼠自体颈外静脉-颈总动脉移植模型。32只大鼠按移植静脉外膜局部给药不同处理方式方法分为未处理组(No treatment组)、凝胶组(Gel组)、无义序列组(scramble sequence group,SCR组)、c-myc RNA干扰组(C-myc siRNA组),于术后3周处死大鼠取移植静脉,光学显微镜下测量内膜厚度,免疫组化染色检测移植静脉增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、c-myc蛋白的表达,Q-RT-PCR检测移植静脉c-myc mRNA的含量。结果 C-myc siRNA组内膜厚度[(15.0±2.2)μm]显著低于No treatment组[(58.3±8.3)μm]、SCR组[(60.5±6.1)μm]和Gel组[(63.5±5.4)μm]。C-myc siRNA组静脉内膜区和中膜区PCNA阳性细胞率显著低于SCR组[分别为(8.4±2.2)%vs(68.5±5.0)%,P<0.05和(15.0±3.1)%vs(55.2±7.5)%,P<0.05],c-myc蛋白阳性细胞率C-myc siRNA组显著低于SCR组[(30.6±2.6)%vs(48.5±3.5)%,P<0.05]。C-myc siRNA组移植静脉中c-myc mRNA的表达相对量显著低于SCR组(0.48±0.05 vs 1.00±0.12,P<0.05)。结论C-myc siRNA能抑制移植静脉中平滑肌细胞的增殖,抑制内膜的增生,减轻移植静脉再狭窄程度。     

自体移植静脉增生内膜内皮素I受体基因表达

目的　应用内皮素 (ET) I型受体基因 (ETA c DNA)原位分子杂交的方法观察自体静脉移植血管平滑肌细胞(VSMC)增殖与内膜增生 (IH)的量效关系 ,并评价其在定量检测 VSMC增殖中的作用 .方法　家兔股动静脉移植模型 ,探针制备 ,原位分子杂交 ,微机图像分析 .结果　血管移植术后 1 W即有较多 ETAc DNA基因表达 ,术后 4 wk达最高峰 ,1 6wk和 48wk保持相对稳定 ,表达密度分别为 (1 8.4±5.8) % ,(42 .3± 3.6) % ,(42 .7± 7.2 ) %和 (43.1± 3.6) % ,IH相对厚度变化趋势与表达密度趋势相仿 ,1 ,4,1 6和 48wk分别为 (1 7.6± 5.2 ) % ,(53.0± 9.3) % ,(54.7± 8.7) %和(57.2± 1 0 .2 ) % ,经等级相关分析显示两者呈正相关 ,表达密度愈高则相对厚度愈小 .结论　 VSMC增殖愈多对 IH贡献越大 ,应用 ETAc DNA基因探针定量分析自体静脉移植后增生内膜 VSMC变化准确特异 ;内皮素对血管 IH有重要作用     

兔自体静脉移植物的中膜平滑肌细胞超微结构变化

目的：观察臬体静脉移植物的中膜平没肌细胞超微结构变化及其增生特点,为内膜增生的防治提供实验依据。方法：以兔右颈外静脉间置于同侧颈总动脉为模形,术后３,７,１４,２８d分别获取移植段静脉,在透射电镜下观察其中膜平滑机细胞超微结构的变化。结果：术后３d时未见移植段静脉中膜平滑肌细胞增生,７d时可见增生,１４d时达高峰,可见正 在分裂 中的平滑肌细胞呈哑铃形,胞质内内质网和线粒体等丰富,核仁明显变大。２８d     

细胞周期相关因子Gli2在大鼠自体移植静脉中的表达

目的 研究细胞周期相关因子Gli2在大鼠自体移植静脉中的表达变化及其与内膜增生的关系.方法 雄性Wistar大鼠36只,8周龄,体质量140 g.建立颈静脉-腹主动脉移植模型,分别于术后14 d、28 d各处死18只大鼠,取材移植血管,免疫荧光检测Gli2蛋白在移植血管新生内膜中的表达,Western印迹法观察Gli2及细胞增殖核抗原(PCNA)的表达,RT-PCR检测Gli2-mRNA的表达;以对侧颈静脉作为对照.结果 免疫组化结果显示,正常静脉、术后14 d和术后28 d移植静脉Gli2+细胞数比例分别为(3.2±0.4)%、(41.3±0.6)%和(58.3±0.6)%,正常静脉与移植静脉差异有统计学意义(P＜0.01).Western印迹法显示术后Gli2表达水平增加并与PCNA表达呈正相关(r=0.826,P＜0.01).RT-PCR结果显示术后14 d组和术后28 d组的Gli2 mRNA表达增加,分别为对照组含量的8.9和13.6倍.结论 自体静脉移植术后,Gli2在新生内膜中高表达并可能与细胞增殖相关.     

移植静脉中基质金属蛋白酶-9的表达对内膜增生的作用

目的 探讨移植静脉中基质金属蛋白酶-9的变化对内膜增生的作用.方法 建立大鼠颈静脉-腹主动脉自体静脉移植模型,分别在术后3,7,14 d进行取材.采用免疫组织化学方法及明胶酶谱方法观察基质金属蛋白酶-9的表达,计算机图像分析仪观测内膜厚度的变化.结果 静脉移植后基质金属蛋白酶-9活性增高,伴有内膜显著增生,二者呈现平行关系.施加基质金属蛋白酶-9抑制剂强力霉素后,内膜受到明显抑制,呈现量效关系.结论基质金属蛋白酶-9是内膜增生的重要因素之一.强力霉素可以抑制内膜增生.     

可降解外套管抑制自体移植静脉内膜增生的研究

目的:研究可降解的外套管束缚自体移植静脉对减轻桥静脉内膜、中层增厚的作用,探讨其防止或延缓桥静脉再狭窄的机制。方法:建立犬自体股静脉至股动脉的端-端静脉移植模型,其中一侧桥静脉外加聚乳酸-聚乙醇酸(PLGA)做成的圆柱形外套管(外套管组),对侧单纯静脉移植作为对照组。超声多普勒观察在体移植血管的通畅性。术后2、4、6、8、24周再次手术取桥静脉。光镜观察移植静脉中段内膜、中层厚度,胶原、弹力纤维变化;透射电镜观察静脉壁基底膜、细胞排列、细胞增殖、凋亡,细胞骨架结构,细胞外基质(ECM)变化等;免疫组化观察静脉壁细胞增殖、凋亡及分布。结果:术后40条静脉均通畅,吻合口无狭窄。对照组术后2周见内膜、中层增厚;随时间延长,增厚更加明显。外套管组术后2周内膜、中层稍增厚;4~24周持续增厚,但各时间点均明显小于对照组(P<0.05,P<0.01);对照组术后2周见中层平滑肌、外膜弹力纤维断裂严重,而外套管组无明显断裂。新生静脉内膜由平滑肌细胞(SMCs)和大量ECM构成,中层主要为SMCs和ECM;术后2周,静脉壁细胞增殖和凋亡率都较高,主要分布在内膜和中层,外套管组明显低于对照组(P<0.01),4周以后两者显著下降,凋亡率高于增殖率(P<0.05)。结论:可降解外套管在术后早期可保持静脉结构的完整性,减轻管壁结构破     

Effects of extravascular trestle model coated phosphorus radioisotope on intimal hyperplasia in autologous vein grafts

Objective: To design an extravascular trestle model coated phosphorus-32, an isotope radiating beta rays,and investigate its effects on intimal hyperplasia of autologous vein grafts. Methods: ETA cDNA was used as a geneprobe specific to vascular SMCs on the basis of in situ hybridization. The femoral veins were transplanted reversely intocolateral femoral arteries in rabbits, and the animals were divided into control, chemical agents and phosphorus-32groups. The morphometry was applied to calculate the ETA cDNA expression and intimal thickness. Spearman correla-     

Experimental study on autogenous vein cuff alleviating arterial intimal hyperplasia

With increasing pOPularization of coronary arterybypasses and vascular bypasses, autogenous greatsaphenous veins and arm veins are already beyond thedemands of operation, thus artifieial vascular graftssueh as polytetralluoroethylene (PTFE) stands out asfirst choice of substitution of graft, hut the compliancebetween graft and host vascular tissues resulted inanastomotic stenosis and mid- and long-term impatencyaceounting foT the major cause Of operation failure.While the outflow anastomotic…     

自体静脉Cuff减轻动脉内膜增生的实验研究

目的：探讨聚四氟乙烯（ＰＴＦＥ）血管加自体静脉Ｃuff吻合对动脉内膜增生的缓解作用 及对流出道的改善作用。方法：健康杂种犬１２只（２４条腿），随机分成对照组产验组。对照组动脉阻断后以ＰＴＦＥ血管直接行旁路转流术；实验组以自体颈外静脉Ｃrff间置于ＰＴＦＥ与远端股动脉之间。术后第８周行动脉造影，制备标本行组织学观察及计算机图像分析，测定增生内膜、中膜的厚度、增生内膜的截面积、血管腔截面积及两者的比值、静脉     

应用c—mtc反义寡核苷酸防治自体静脉移植物内膜增生的实 …

目的：研究局部应用反义寡核苷酸c-myc对自体静脉移植物内膜增生的防治作用,为反义技 术防治血管人膜增生的早期临床应用提供实验依据。方法：３０只新西兰兔颈外静脉间置于同侧颈总动脉后随机分厉对照组、蛋白胶组、正义组、反义组及错配组,以医用生物蛋白胶分别溶解反义、正义及错配的c-myc基因片段（３３０ug）后直接涂于静脉移植物外膜。术 后２８d取材制片,显微镜进行形态观察,并用刘算机图像分析系统测量和计算内膜厚度及     

阿魏酸钠对球囊损伤大鼠颈总动脉血管内膜增生的影响

目的 :研究阿魏酸钠对球囊损伤大鼠颈总动脉内膜增生的影响。方法 :制作球囊损伤的大鼠颈总动脉内膜增生模型 ,Wistar雄性大鼠 15只随机分为①对照组 (n =7)腹腔内注射生理盐水 (4ml/d)。②阿魏酸钠治疗组 (n =8)腹腔内注射融于生理盐水的阿魏酸钠 (2 0 0mg/d) ,球囊损伤 14d后 ,损伤区域的血管段取材固定后 ,分析血管断面组织形态学的变化 ;免疫组化方法观察增殖细胞核抗原 (PCNA)阳性细胞以了解血管壁细胞的增殖情况。结果 :阿魏酸钠可明显减少新生内膜面积 ,增加管腔面积 ,抑制平滑肌细胞的增殖。结论 :阿魏酸钠具有抑制血管内膜增生的作用。     

Changes of Ca^2＋ activated potassium channels and cellular proliferation in autoge-nous vein grafts

Objective: To investigate changes of Ca2+ activated potassium channels ( KCa) in autogenous vein grafts. Methods: Contraction of venous ring was measured by means of perfusion in vitro. The intimal rabbits proliferation of vascular and proliferation of cultured smooth muscle cells ( vascular smooth muscle cells, VSMCs) were observed by the means of computerised image analysis and MTT method respectively. Furthermore, whole cell mode of patch clamp was used to record KCa of VSMCs isolated from autogenous vein grafts. Results: One week after transplantation there were no significant differences of contraction and intimal relative thickness between autogenous vein grafts and control. Contraction and intimal relative thickness of autogenous vein graft were significantly increased 2 weeks after transplantation (P < 0. 05 , n = 8 vs control) , and they was more enhanced 4 weeks after vein transplantation ( P < 0. 01 , n =8 vs control ). TEA( blocker of Ca2+ activated potassium channels) increased MTT A490 nm     

超声联合反义c-myc寡核苷酸对移植静脉内膜增生的影响

目的 观察超声辐照联合局部应用反义c-myc寡核苷酸对移植静脉内膜增生的影响,以期寻找防治内膜增生的新方法.方法 将24只兔随机分为4组,对照组、超声辐照组、反义核苷酸组、超声辐照加反义核苷酸组,每组6只,建立兔自体颈内静脉移植替代颈总动脉模型.超声辐照组术后当天至第7天使用超声(2.190 W/cm2,0.8 MH...     

辛伐他汀联合左旋精氨酸对自体移植静脉保护作用的实验研究

目的研究辛伐他汀联合左旋精氨酸对兔颈外静脉移植至股动脉后的保护作用,并探讨可能的机制。方法50只新西兰大白兔,随机分为辛伐他汀实验组、生理盐水对照组。术前3 d开始采用灌胃法给予辛伐他汀（10 mg/Kg溶于10 ml生理盐水）,经耳缘静脉给予左旋精氨酸（100 mg/kg）,对照组给与等量生理盐水,每天一次,直至术后取材。所有动物于术日建立自体静脉旁路移植模型：利用显微外科技术将颈外静脉端侧吻合于股动脉,于术后4周取血管桥标本,同时取0.5 cm移植静脉作为正常静脉参照。光镜下观察、测定移植静脉内膜中膜厚度变化。扫描电镜观察近吻合口处和中央部静脉桥的管腔狭窄程度（管腔增生面积与管腔面积比（S1/S2）,统计学分析各组间差异。结果移植4周后,各组静脉均有内膜及中膜较正常颈静脉明显增厚表现,辛伐他汀组内膜及中膜增厚较对照组轻。两组静脉桥的管腔狭窄程度进行比较存在明显差异。结论（1）兔颈外静脉移植至股动脉后内膜及中膜增厚。（2）辛伐他汀联合左旋精氨酸能抑制动脉化静脉内膜及中膜增厚,有减轻桥静脉狭窄的作用。