微环境中黑曲霉脂肪酶催化油脂水解性能研究

研究了微乳液体系中黑曲霉脂肪酶LIPASE LVK催化红花油水解反应,考察了表面活性剂种类﹑微乳液ω0值、表面活性剂浓度、反应温度﹑p H值、添加剂等因素对水解率的影响,确定了微乳液体系中脂肪酶LIPASE LVK水解红花油的适宜条件:以异辛烷为有机溶剂,[AOT]=0.1mol/L,ω0=49,反应温度25℃,缓冲溶液的p H值为8.0,不加添加剂。     

固定化假丝酵母脂肪酶催化合成辛酸甘油酯

以自制固定化假丝酵母脂肪酶作为催化剂,研究了无溶剂体系中辛酸和甘油直接酯化合成辛酸甘油酯的反应条件。考察了酶的种类、底物的物质的量之比、温度、酶量、甘油的初始含水量和反应时间等因素对辛酸转化率和产物组成的影响。结果证明,以纺织物作为载体制备的固定化假丝酵母脂肪酶适宜催化辛酸甘油酯的合成。最优反应条件为：辛酸与甘油的物质的量之比为2∶1,固定化假丝酵母脂肪酶加量为0.5g/0.69g甘油,温度为40 ℃,振荡培养箱转速为190 r/min。最优反应条件下辛酸转化率可以达到94%以上,经过简单处理的固定化酶可以重复使用4批。     

无溶剂体系中脂肪酶催化亚麻油水解反应研究

研究了，无溶剂体系中脂肪酶催化的亚麻油水解反应。考察了反应温度、脂肪酶用量、水／亚麻油摩尔比等因素对反应速率及转化率的影响。结果表明，脂肪酶最佳使用温度范围、最大活性温度及完全失活温度分别为：33℃～37℃，35℃，45℃；n(水)：n(亚麻油)为30：l；脂肪酶用量以占反应物总质量的5％为宜。研究结果为开发α-亚麻酸的酶法生产工艺提供了基础数据。     

双水相系统分离纯化南极假丝酵母脂肪酶

对南极假丝酵母脂肪酶(CAL)在双水相中的分配情况进行了研究,考察了温度、聚乙二醇(PEG)相对分子质量、NaC l质量分数和(NH4)2SO4质量分数对分配系数K(CAL)的影响,结果表明:温度对K(CAL)影响不大;低相对分子质量PEG与蛋白质的疏水作用可促进CAL的分配;二相间电势差等对分配平衡、有较大影响。在PEG2 000/(NH4)2SO4双水相体系中,CAL最佳的萃取分离条件为:室温下,质量分数20%PEG2 000,12%(NH4)2SO4,1.5%NaC l,此时,K(CAL)为8.16,CAL回收率为91.2%。     

固定化脂肪酶催化天然油脂水解和甘油解

概述了国外用于工业化生产的效水解、甘油解油脂的微生物脂肪酶和固定化酶的各种载体，讨论了固定化脂肪酸论油脂水解和甘油解的影响因素，介绍了三种固定脂肪酶生物反应器。     

表面活性剂包衣Candida rugosa脂肪酶在无溶剂下油水两相体系中催化橄榄油水解

The surfactant-coated Candida rugosa lipase was used as catalyst for hydrolysis of olive oil in two-phase system consisting of olive oil and phosphate buffer without organic solvent. For both the coated and native lipases,the optimal buffer/oil volume ratio of 1.0, aqueous pH 6.8 and reaction temperature 30℃ were determined. The maximum activity of the coated lipase was ca 1.3 times than that of the native lipase. The half-life of the coated lipase in olive oil and the native lipase in phosphate buffer was ca 9 h and 12 h, and the final residual activity was 27% and 20% of their initial values, respectively. The final substrate conversion by the coated lipase was ca 20% higher than that of the native lipase.     

乙醛对假丝酵母脂肪酶催化活性的影响

采用紫外可见分光光度法和荧光发射光谱法研究了乙醛溶液对假丝酵母脂肪酶水解三油酸甘油酯的催化活性和构象的影响。结果表明,低浓度乙醛能提高酶的催化水解活力,当乙醛浓度为0.221 5 mmol/L时,酶活力提高了18.84%;高浓度乙醛对酶活力有抑制作用,当乙醛浓度为3.322 5 mmol/L时,酶活力降低了25.85%。低浓度乙醛使酶催化反应的最适p H向碱性方向偏移,紫外吸收光谱和荧光发射光谱均有显著增强和光谱峰偏移现象。动力学分析表明,加入乙醛后,酶的V_(max)增大,K_m减小。     

蚕丝固定化脂肪酶催化性能研究

研究了蚕丝固定化脂肪酶对橄榄油的催化水解特性，发现在５５℃，ｐＨ＝８．２的条件下，固定化脂肪酶活性最高。底物浓度高达５７％（Ｖ／Ｖ）时，仍无抑制，适宜的搅拌速度是４００～４５０ｒｐｍ。在上述条件下，固定化脂肪酶间歇水解橄榄油，重复使用１０次水解率从９６．５％降至５３．０％，间歇水解猪油的半衰期约为２６０ｈ。     

微乳液体系中脂肪酶催化油脂水解合成单甘酯

在微乳液体系中脂肪酶催化棕榈油水解可合成单甘酯,最佳条件下,单甘酯的含量为１２．９１％,此时单甘酯的得率为８１．７％。     

假丝酵母产脂肪酶在壳聚糖和硅胶上的固定化研究

本实验分别壳聚糖和氨基化后的硅胶作为固定化载体,用戊二醛作为交联剂,将脂舫酶共价固定化于载体上,壳聚糖的最佳固定化条件是戊二醛浓度2．5％,给酶量为4125U／g,氨基化硅胶的最佳固定化条件为戊二醛浓度2％,最佳给酶量在3456U／g,固定化酶活为2952U／g,最佳酶活表现率为85％。两种方法所得的固定化酶的耐温性和储藏稳定性都有了显著提高。氨基化硅胶固定化酶在50℃下保温3小时后仍保留有14％的酶活。结果显示假丝酵母产脂肪酶固定于弱亲水性载体上要比固定于强亲水性载体上效果更好。     

无溶剂体系脂肪酶催化制阿魏酸双油酸甘油酯

在无溶剂体系中以分散在硅藻土上的褶皱假丝酵母脂肪酶为催化剂,以阿魏酸乙酯与油酸甘油酯为原料,一步合成阿魏酸双油酸甘油酯。通过质谱和红外光谱对薄层层析分离纯化后的产物结构进行了表征。定量分析表明,当反应温度为50℃,n(阿魏酸乙酯)/n(油酸甘油酯)=1时,阿魏酸双油酸甘油酯的质量占生成物总质量分数较高。在1 mmoL阿魏酸乙酯,1 mmoL油酸甘油酯和70 mg脂肪酶组成的无溶剂反应体系中,50℃空气浴振荡120 h,总产率可达63.32%,其中阿魏酸双油酸甘油酯质量占生成物总质量的63.37%。     

响应面优化褶皱假丝酵母脂肪酶催化合成木质甾醇油酸酯

以木质甾醇转化率为指标,考察了10种常见商业化脂肪酶催化合成木质甾醇油酸酯的效果,确定褶皱假丝酵母脂肪酶(CRL)为优选生物催化剂,进一步筛选出正己烷为优选反应介质.在脂肪酶用量、油酸和木质甾醇的物质的量比、反应温度和反应时间这4个单因素考察基础上,通过响应面分析法对酶催化木质甾醇油酸酯合成工艺条件进行优化,并对优化条件进行验证和放大实验.CRL催化合成木质甾醇油酸酯的优化工艺参数为:CRL添加量为木质甾醇质量的10％,油酸与木质甾醇的物质的量比为3.8:1,反应温度为46℃,反应时间为28 h,木质甾醇的转化率为91.56％±0.25％.     

固定化假丝酵母99-125脂肪酶催化酯化脂肪酸低碳醇酯反应条件的研究

以硅藻土和纺织品为载体 ,采用吸附法制备固定化脂肪酶 ,研究了固定化假丝酵母 99 1 2 5脂肪酶在有机溶剂中催化脂肪酸低碳醇酯酯化合成过程中 ,有机溶剂性质、脂肪酸与低碳醇的结构、pH值、反应温度和体系含水量、低碳醇的抑制作用等因素对酯化过程的影响。试验结果表明 :底物低碳醇需要采用流加方式加入体系 ,石油醚是最适宜的有机溶剂 ,脂肪酸与醇的碳链越长 ,越易于酯化 ;固定化脂肪酶对直链醇的选择性优于支链醇。以石油醚为有机溶剂 ,在反应温度为 40℃、pH值为 7时 ,硬脂酸与甲醇的酯化率达 95 % ;反应后期应除去体系中的水以避免酶失活。固定化酶间歇催化油酸与甲醇的酯化时 ,重复使用 1 5次 (每次 2 4h) ,其操作半衰期约为 360h。     

南极假丝酵母脂肪酶发酵条件优化及酶学性质

分别用摇瓶和15L发酵罐,对南极假丝酵母产胞外脂肪酶的培养基成分和操作条件进行了实验研究。得到最优的培养基组成为:豆粉40g／L,淀粉15g／L,豆油5mL／L,K2HPO4g／L,MgsO4·7H2O1g／L,Tween-800.1％,酵母膏5g／L;操作条件为:温度24℃,初始pH值为6.0,通气量为10.0L／min。在此培养条件下,发酵周期缩短至54h。由15L发酵罐生产的酶液酶活达到19.2U／mL。酶液在pH值为4.0～6.0和7.5～9.0范围内较稳定,其最适宜pH值范围为6～8.5;70℃时酶的催化活性最大.在40～70℃的温度范围内保持1h后残留酶活为60％。     

无溶剂体系中共吸附固定化脂肪酶催化合成植物甾醇酯

以大孔树脂NKA吸附固定化脂肪酶为催化剂,以月桂酸和植物甾醇为反应物,在无溶剂体系中合成植物甾醇酯;以NKA为载体共吸附固定葡聚糖与酶,考察了反应温度、底物摩尔比、糖种类及葡聚糖添加量和反应时间对酶催化性能的影响. 结果表明,在酸/醇摩尔比6:1、葡聚糖与酶共同吸附固定时分子量为10 kDa的葡聚糖添加量为酶量7.5%的条件下,60℃下反应12 h,酯化率高达96.2%,酯化反应时间比简单吸附固定化酶缩短4 h.     

用蛋白质工程技术提取和修饰南极假丝酵母脂肪酶B

从南极假丝酵母中提取的脂肪酶B,具有较高的对应异构体选择性,广泛应用在培养基中,作为不对称有机化学的生物催化剂。近年来,一系列组合蛋白质工程研究和扩展了南极假丝酵母脂肪酶的催化和物理特性。这些工程不但生产出了指定的催化剂,还有助于阐明酶的结构一作用关系,并且有助于说明这些酶的对应异构体选择性。进一步的研究将在工程与酶的关系方面展开讨论。     

磁性壳聚糖纳米复合材料固定化褶皱假丝酵母脂肪酶催化合成木质甾醇酯

以磁性壳聚糖纳米复合材料共价固定的褶皱假丝酵母脂肪酶为催化剂,以木质甾醇和油酸为原料,对木质甾醇油酸酯的酶法合成工艺条件进行了优化。得到的最佳工艺条件为：催化剂用量12.7%（以底物总质量计）,油酸与木质甾醇物质的量比为2∶1,木质甾醇质量浓度为122.9 g/L,反应温度50℃,反应时间24 h。在该条件下,木质甾醇转化率为96.42%。对月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸不同碳链长度的脂肪酸或混合脂肪酸进行酯化反应,木质甾醇的转化率可达96.67%～98.74%,催化剂使用5次时,转化率仍可达82.45%。     

硫酸铵-丙酮协同沉淀法纯化南极假丝酵母产脂肪酶

采用硫酸铵-丙酮协同沉淀法,对南极假丝酵母产脂肪酶(CALB)进行了分离纯化研究.经正交实验确定纯化工艺为:向酶液中加入硫酸铵至饱和度45%的同时加入0.3倍酶液体积的丙酮;离心后再向上清液中加入硫酸铵至饱和度75%,分相后,相界面处沉淀即为脂肪酶粗品.经分离纯化后,酶活回收率为54%、纯化倍数为2.72.     

假丝酵母99-125脂肪酶促酯化合成生物柴油的研究

1 INTRODUCTION Biodiesel, that is long-chain fatty acid short-chain alcohol esters (methyl, ethyl, propyl and butyl ester), is produced by esterification of fatty acids or inter- esterification of oils and fats. These fatty acid alcohol esters are not only used as important industrial addi- tives and surfactants, but also used for biofuel. The biodiesel is a biodegradable, environmental friendly, renewable substitute of diesel fuel[1]. The traditional production of biodiesel is by chem- i…     

固定化脂肪酶催化菜籽油合成蜡酯

以菜籽油、鲸蜡醇为原料,采用实验室自制的固定化Candidia sp.99-125脂肪酶分别在有机溶剂和无溶剂体系下合成了蜡酯,在两种体系下对影响蜡酯合成的各种因素进行了比较研究,研究表明:以正己烷为反应介质,在40℃条件下反应12h,油醇摩尔比1∶2,酶量15%(质量分数,上同),水含量7.5%,蜡酯产率可达85.87%;无溶剂体系中在50℃条件下反应20h,油醇摩尔比1∶1.5,蜡酯产率可达80.68%。通过流加鲸蜡醇可以提高酶的使用寿命。