基质金属蛋白酶诱导因子和亲环素A在人根尖囊肿和根尖肉芽肿中的表达及临床意义

目的: 检测细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(CD147)和亲环素A(CypA)在根尖肉芽肿和根尖囊肿中的表达,探讨CD147和CyPA在人慢性根尖周炎发生发展中的作用。方法: 收集经根尖手术切除所获得的根尖肉芽肿35例和根尖囊肿30例作为实验组,同时收集埋伏阻生智齿拔除术或行牙槽骨修整术凿下的8例健康牙槽骨作为正常对照组。CBCT图像记录病例的病损大小。运用免疫组织化学法检测所有样本中CD147和CypA的蛋白表达,分析CD147和CypA的蛋白表达水平。结果: 根尖囊肿组两种蛋白的表达水平均高于肉芽肿组(P<0.05)。CD147和CypA 的蛋白表达水平在根尖囊肿和根尖肉芽肿中呈正相关(P<0.05);CD147和CypA 的表达水平均与慢性根尖周炎的病变大小呈正相关(P<0.05)。结论: CD147和CypA可能参与根尖周病损的炎性反应和骨质吸收。CD147-CypA相互作用在人慢性根尖周病的发生发展过程中可能发挥了某种协同作用。     

血清亲环素A浓度在环孢素诱导牙龈增生中的临床意义

目的:探讨环孢素诱导的牙龈增生(CIGO)与血清亲环素A(CyPA)之间的关系。方法 :本研究以73例用环孢素A(CsA)为主要免疫抑制剂抗排异患者为研究对象,经牙龈增生指数(GOI)评价后将患者分为牙龈增生组(GO+)和无牙龈增生组(GO-)。比较两组患者各临床相关因素之间的差异,重点观察血清CyPA浓度与CIGO发生及严重程度的关系。应用SPSS 17.0软件包进行统计检验,P<0.05表示差异有统计学意义。结果:与正常成人相比,肾移植术后服用CsA的患者,血清CyPA浓度显著降低(P=0.003)。其中,GO+组[(0.30±0.16)ng/mL]明显低于GO-组[(0.44±0.34)ng/Ml](P=0.036),且与牙龈增生的严重程度呈负相关(r=-0.233,P=0.047),但与CsA服药剂量和血清浓度无关(r=0.001,P=0.999;r=0.006,P=0.963)。结论:血清CyPA与CIGO发生密切相关,血清CsA/CyPA比值有望作为CIGO发生风险因素,帮助临床预判牙龈增生的发生。     

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子与牙周炎的关系

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子广泛地存在于人类各种肿瘤细胞和一些正常细胞中，能刺激基质金属蛋白酶的合成，促进细胞外基质的降解，在恶性肿瘤的浸润和转移、风湿性关节炎、心血管疾病、糖尿病和牙周炎的发生和发展中起着重要的作用。本文将就细胞外基质金属蛋白酶诱导因子及其与牙周炎关系的最新研究进展作一综述。     

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子与恶性肿瘤

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子广泛地存在于人体各种肿瘤组织中诱导基质金属蛋白酶的产生,从而促进肿瘤的侵袭并在恶性肿瘤的生长、浸润、转移和诱导肿瘤组织的恶性潜能等方面起重要作用.下面就细胞外基质金属蛋白酶诱导因子的作用机制、调节以及与口腔颌面部肿瘤的关系作一.     

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子与牙周炎的关系

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子广泛地存在于人类各种肿瘤细胞和一些正常细胞中,能刺激基质金属蛋白酶的合成,促进细胞外基质的降解,在恶性肿瘤的浸润和转移、风湿性关节炎、心血管疾病、糖尿病和牙周炎的发生和发展中起着重要的作用。本文将就细胞外基质金属蛋白酶诱导因子及其与牙周炎关系的最新研究进展作一综述。     

炎症状态下张应力对成骨细胞基质金属蛋白酶-13和金属蛋白酶抑制因子-1表达的影响

目的 观察炎症状态下周期性张应力对小鼠成骨细胞(MC3T3-E1细胞)基质金属蛋白酶-13和金属蛋白酶抑制因子-1表达的影响.方法 收集100 ng/ml的经牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.g-LPS)刺激小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7细胞)24 h后培养上清液,以20％稀释浓度作用于MC3T3-E1细胞24 h,采用四点弯曲细胞力学加载仪对正常培养与炎症状态下培养的MC3T3-E1细胞分别加载张应力0 h(对照组)、1h、3h、6h,采用荧光定量聚合酶链反应(real time PCR)和免疫组化法检测基质金属蛋白酶-13和金属蛋白酶抑制因子-1的mRNA及蛋白水平表达的变化.结果 炎症状态下周期性张应力作用于小鼠成骨细胞后,加力组基质金属蛋白酶-13和金属蛋白酶抑制因子-1的mRNA和蛋白表达量较非炎症状态下显著增加,并随着时间的延长而不断增加,且不同时间段的表达差异有统计学意义(P＜0.05).结论 炎症状态下张应力可显著影响成骨细胞基质金属蛋白酶-13和金属蛋白酶抑制因子-1的表达,从而为炎症状态与张应力共同作用下基质金属蛋白酶-13和金属蛋白酶抑制因子-1参与牙周组织细胞外基质代谢提供了理论依据.     

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子表达与唾液腺肿瘤侵袭性的关系

目的:检测唾液腺肿瘤组织中细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)的表达和定位,探讨其与唾液腺肿瘤侵袭性生物学行为的关系。方法:采用免疫组织化学方法,检测9例唾液腺正常组织、28例多形性腺瘤(PA)、25例黏液表皮样癌(MC)、33例腺样囊性癌(ACC)中EMMPRIN的表达和定位。采用SPSS10.0软件包进行多个样本率间的χ2检验或确切概率分析。结果:EMMPRIN在正常唾液腺组织、多形性腺瘤、黏液表皮样癌、腺样囊性癌的表达阳性率分别为11.11%、53.71%、84.00%和90.91%(P<0.05)。在正常唾液腺组织的表达主要见于导管上皮细胞的细胞膜;EMMPRIN蛋白在多形性腺瘤、黏液表皮样癌、腺样囊性癌的表达见于肿瘤细胞的胞膜或胞质。腺样囊性癌嗜神经现象组中,EMMPRIN表达的阳性率高于无嗜神经现象组,但差异无统计学意义。结论:EMMPRIN的表达与唾液腺肿瘤侵袭性生物学行为密切相关。     

舌鳞癌组织细胞外基质金属蛋白酶诱导因子的表达及其与预后的关系

目的：研究舌鳞癌组织中细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（EMMPRIN）的表达及其与舌癌患者临床病理特征和生存期之间的相关性。方法：应用SP免疫组织化学法,检测68例舌鳞癌组织及相应的癌旁组织中EMMPRIN的表达情况,并对68例舌鳞癌患者进行随访观察。应用非参数秩和检验检测两个独立样本的EMMPRIN的表达差异,应用SPSS 13.0软件包进行生存分析;应用Cox比例风险模型分析预后。结果：EMMPRIN在舌鳞癌组织中的表达阳性率高于相应的癌旁组织（P〈0.05）。舌鳞癌组织中EMMPRIN的表达与肿瘤大小和临床分期密切相关,与性别、年龄、淋巴结转移和肿瘤病理分化程度不相关。Cox比例风险模型多因素预后分析显示,EMMPRIN表达是影响舌鳞癌患者预后的独立因素。结论：EMMPRIN可以作为舌鳞癌预后判断的参考指标,并有望成为口腔癌生物治疗的潜在靶点。     

基质金属蛋白酶在涎腺良、恶性多形性腺瘤中的表达

目的:检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)、膜型基质金属蛋白酶1(MT1-MMP)、基质金属蛋白酶组织抑制剂2(TIMP-2)及细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN),在人正常涎腺组织和涎腺良、恶性多形性腺瘤中的表达,探讨其表达的生物学意义。方法:通过免疫组织化学技术SP法检测人66例正常涎腺组织、45例涎腺多形性腺瘤及42例涎腺恶性多形性腺瘤中,MMP-2、MT1-MMP、TIMP-2及EMMPRIN的表达,采用χ2检验比较3种组织中MMP-2、MT1-MMP、TIMP-2及EMMPRIN表达的差异。结果:MMP-2在人正常涎腺组织,涎腺良、恶性多形性腺瘤中的阳性表达率分别为9.09%、46.67%、85.71%;MT1-MMP在以上3种组织中的阳性表达率分别9.09%、53.33%、78.57%;TIMP-2在以上3种组织中的阳性表达率分别为10.61%、44.44%、59.52%;EMMPRIN在以上3种组织中的阳性表达率分别为13.64%、48.89%、83.33%。MMP-2、MT1-MMP、TIMP-2及EMMPRIN在涎腺多形性腺瘤中的表达显著高于人正常涎腺组织,且MMP-2、MT1-MMP及EMMPRIN在涎腺良、恶性多形性腺瘤中表达的差异有统计学意义。结论:在涎腺多形性腺瘤中,MT1-MMP、TIMP-2及EMMPRIN的表达与MMP-2的活化有关,且MMP-2、MT1-MMP、TIMP-2及EMMPRIN有可能作为判断多形性腺瘤侵袭性的有效指标。     

慢性牙周炎患者龈沟液中EMMPRIN及其配体CyPA的表达及意义

目的:通过检测慢性牙周炎患者龈沟液中EMMPRIN及其配体CyPA的表达,探索两者与牙周炎症的关系.方法:收集慢性牙周炎患者(牙周炎组)以及无缺牙、无牙周炎患者(对照组)的天然牙龈沟液,并进行临床检查.以ELISA法检测龈沟液中EMMPRIN及CyPA的表达,应用SPSS 17.0软件包分析两者与牙周炎的关系,比较2组之间的差异.结果:牙周炎组中,GCF总量与EMMPRIN总量、CyPA总量以及GI、SBI、AL呈显著正相关;EMMPRIN总量与GCF总量、CyPA总量以及GI、SBI、AL呈显著正相关,与吸烟情况呈负相关(P＜0.05);CyPA总量与GCF总量、EMMPRIN总量以及GI、SBI、AL呈显著正相关.对照组中,GCF、EMMPRIN及CyPA三者总量两两间均呈显著正相关.在牙周炎组与对照组之间,GCF、EMMPRIN及CyPA三者总量的组间差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:EMMPRIN及其配体CyPA在牙周健康患者、慢性牙周炎患者的龈沟液中均有表达,当牙周炎症临床症状较重时,分泌的龈沟液量明显增多,龈沟液中EMMPRIN及CyPA的表达也增多.     

金属蛋白酶组织抑制因子对牙周病的抑制作用

金属蛋白酶组织抑制因子是普遍存在于人与动物体内,专司调节基质金属蛋白酶活力的一个糖蛋白家族。随着对其结构、性质和功能的深入了解,它与多种疾病间的关系正不断被认识。研究表明:该因子在口腔不同部位的水平变化与牙周健康状况密切相关。探索和掌握这一家族成员在口腔中的动态分布规律及在牙周病中的作用机理,有望为牙周病快速诊断和治疗开辟新的途径。     

基质金属蛋白酶对牙本质粘接耐久性的影响

基质金属蛋白酶(MMP)是一组分解细胞外基质的钙锌离子依赖型蛋白酶的总称。牙本质粘接剂酸性环境可以激活MMP酶原,进而分解暴露的胶原纤维,破坏粘接界面而导致粘接的失败。抑制MMP可有效增加粘接耐久性。本文就MMP在粘接过程中的激活和对粘接耐久性的影响以及MMP抑制剂的研究进展作一综述。     

基质金属蛋白酶在舍格伦综合征患者唇腺组织中的表达及意义

目的:观察基质金属蛋白酶3、9(MMP-3、MMP-9)在舍格伦综合征患者唇腺中的定位及表达强度,探讨其在舍格伦综合征发病机制中的作用.方法:选取舍格伦综合征患者(病变组)和下唇黏液囊肿患者(对照组)唇腺组织标本各20例,通过免疫组织化学染色方法,观察MMp-3、MMP-9在2组唇腺组织中的表达;采用图像分析软件,定量分析MMP-3、MMP-9在2组唇腺组织中的表达强度,采用Mann-Whitney U检验进行统计学分析.结果:MMP-3、MMP-9表达于腺泡细胞及导管上皮细胞.MMP-9在病变组表达强度值为0.48±0.25,对照组为0.30±0.10,病变组表达显著高于对照组(P＜0.05);MMP-3在对照组无表达,在病变组强表达.结论:MMP-3、MMP-9在舍格伦综合征病变唇腺组织中的表达强度明显增强,特别是MMP-3;它们可能对淋巴细胞在腺实质细胞间的分布以及对腺体破坏发挥作用,参与腺泡及腺体基质的破坏过程,从而导致疾病的发生.     

转化生长因子β1/细胞外信号调节激酶/基质金属蛋白酶通路对腺样囊性癌侵袭和迁移的影响

目的 探讨转化生长因子β1/细胞外信号调节激酶/基质金属蛋白酶2(TGF-β1/ERKl/2/MMP-2)通路在腺样囊性癌(ACC)侵袭和迁移过程中的作用及机制.方法 以腺样囊性癌ACC-2细胞株为研究对象.用转化生长因子β1(TGF-β1)以及ERK通路抑制剂UO126处理ACC-2细胞.MTT检测ACC-2细胞的增殖情况,Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力,Westem blot蛋白印迹检测ACC-2细胞中ERKI/2的活化及MMP-2的表达情况,实时荧光定量聚合酶链反应检测ACC-2细胞中MMP-2的mRNA的表达情况.结果 TGF-β1及UO126干预后,ACC-2细胞增殖能力无明显变化;TGF-β1刺激可增强ACC-2细胞迁移、侵袭能力,增加ACC-2细胞p-ERKI/2和MMP-2蛋白以及MMP-2 mRNA的表达.而UO126阻断ERK磷酸化后,抑制了TGF-β1刺激的增强作用,ACC-2细胞的迁移、侵袭能力降低,MMP-2蛋白和mRNA的表达均下降.结论 TGF-β1/ERKl/2/MMP-2通路参与了人唾液腺ACC侵袭和迁移能力的调节.TGF-β1可通过上调ERK1/2,继而上调MMP-2,促进人唾液腺ACC细胞的侵袭和迁移能力,ERKl/2可能成为人唾液腺ACC侵袭防治的新靶点.     

糖基化终产物对人牙龈成纤维细胞2种基质金属蛋白酶表达的影响

目的研究糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)对人牙龈成纤维细胞(human gingivalfibroblasts,HGF)表达基质金属蛋白酶-1(matrix matelloproteinase-1,MMP-1)和基质金属蛋白酶-8(matrix matallo-proteinase-8,MMP-8)的影响,探讨糖尿病加速牙周炎发展的可能机制。方法将培养的HGF随机分成6组:空白对照组只加入培养液;阴性对照组仅加入含50μg/mL人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)的培养液;4个含AGE-HSA的实验组分别加入含0.5、5、50、100μg/mL AGE-HSA的培养液。培养24、48、72 h后,分别应用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和实时定量聚合酶链反应(real-time quantitativepolymerase chain reaction,QPCR)检测细胞MMP-1、MMP-8的蛋白和mRNA表达。结果 100μg/mL AGE-HSA组培养24、48和72 h后,MMP-1水平明显高于阴性对照组、空白对照组及0.5μg/mL AGE-HSA组,差异具有统计学意义(P<0.05)。各浓度AGE-HSA组MMP-1 mRNA水平均显著高于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。各浓度AGE-HSA组MMP-8水平与阴性对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05),MMP-8 mRNA表达均为阴性。结论 AGEs可能通过促进HGF合成MMP-1,介导胶原降解,从而加重糖尿病患者的牙周组织破坏,尚不能说AGEs影响MMP-8的表达。     

种植体周龈沟液中EMMPRIN及其配体CyPA的表达

［摘要］ 目的 判断种植体周龈沟液中细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(extracellular matrix metalloproteinase inducer,EMMPRIN)及亲环素A(cyclophilin A,CyPA)的表达情况。方法 收集种植体行使功能1年以上的患者(种植组)的种植体周龈沟液以及无缺牙、无牙周炎患者(对照组)的天然牙龈沟液,并进行相关临床检查,ELISA法检测龈沟液中EMMPRIN及CyPA的表达,应用SPSS 17.0软件包进行统计学分析,分析两者的表达与各临床检查指标之间的关系,比较两组间的差异。结果 种植组中,种植体周龈沟液(peri-implant crevicular fluid,PICF)总量与EMMPRIN、CyPA总量显著正相关;EMMPRIN总量与PICF、CyPA总量、牙龈指数(gingival index,GI)及改良菌斑指数(modified plaque index,mPLI)成显著正相关;CyPA总量与PICF、EMMPRIN总量及GI成显著正相关。在种植组与对照组之间,PICF/GCF、EMMPRIN、CyPA三者总量均无显著差异。结论 EMMPRIN及其配体CyPA在种植体周龈沟液中的表达与种植体周龈沟液的分泌量呈显著正相关。     

内毒素对牙龈成纤维细胞增殖活性及分泌基质金属蛋白酶的影响

目的观察内毒素对牙龈成纤维细胞增殖活性及分泌基质金属蛋白酶-1,3量的影响,探讨基质金属蛋白酶在牙周炎致病机制中的可能作用。方法通过改良酶消化组织块法进行牙龈成纤维细胞的原代培养,用内毒素对其进行刺激,运用MTT法观察内毒素对牙龈成纤维细胞增殖活性的影响,通过免疫组化法检测内毒素对牙龈成纤维细胞分泌基质金属蛋白酶-1,3的影响。结果MTT结果显示,低浓度内毒素在短期内可以促进牙龈成纤维细胞的增殖,但随着时间的延长,也表现为对细胞的毒性作用,抑制其增殖;高浓度内毒素抑制牙龈成纤维细胞的增殖;免疫组化研究结果表明,未受LPS刺激的牙龈成纤维细胞MMP-1,3表达弱阳性,受刺激后阳性表达增强,在12h时达到顶峰,且MMP-3的整体表达较MMP-1弱。结论LPS可以影响牙龈成纤维细胞的增殖活性;LPS可以促进牙龈成纤维细胞对基质金属蛋白酶的分泌,加快牙周细胞外基质的降解,加速牙周炎的进程。     

晚期蛋白氧化产物对人牙龈成纤维细胞增殖、凋亡及合成基质金属蛋白酶1的影响

目的 探讨晚期蛋白氧化产物(advanced oxidative protein products,AOPP)对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGF)增殖、凋亡及合成基质金属蛋白酶1(matrix matelloproteinast-1,MMP-1)的影响,探讨AOPP在糖尿病患者牙周病加重中的作用及其介导氧化应激的可能机制.方法 采用酶消化.组织块培养法获得HGF,在对照组中加入不含AOPP-人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)的培养基,在实验组中分别加入含有5、50、100 mg/L AOPP-HSA的培养基,甲基嚷唑基四唑(MTT)比色法检测在不同时间段下HGF增殖水平的变化;ELISA法测定HGF合成MMP-1的水平;与含50 mg/L AOPP-HSA培养基共培养72 h,经膜联蛋白V/PI双染后,流式细胞仪检测HGF的凋亡状况.结果 5、50、100 mg/L AOPP-HSA组对HGF增殖抑制率与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05),并在共培养的48 h达到峰值[分别为(19.01±6.28)%、(30.48±5.75)%、(39.75±4.60)%],呈浓度依赖关系;各实验组HGF的凋亡率与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05);共培养72 h后,0.5、5、50、100 mg/L AOPP.HAS组中MMP-1合成量[分别为(55.61±1.06)、(65.78±4.04)、(79.24±3.09)、(89.76±28.88)mg/L]均高于对照组[(34.90±3.15)mg/L,P＜0.05],MMP-1水平与AOPP-HSA呈浓度依赖关系.结论 AOPP能抑制成纤维细胞增值,该抑制作用不是通过诱导细胞凋亡来实现;AOPP可增加MMP-1的合成,促进胶原溶解,加速牙周病进程.     

基质金属蛋白酶8对牙本质树脂粘接的影响

目的 研究基质金属蛋白酶8(MMP-8)对牙本质树脂粘接的影响,探讨其抑制剂在粘接中的应用.方法 收集60颗口腔颌面外科拔除的人正常第三磨牙.其中20颗用于制备牙本质粉并随机平均分成4组,第一组不做处理,第二组磷酸酸蚀,第三组磷酸酸蚀后粘接剂处理,第四组磷酸酸蚀后先用基质金属蛋白酶8的特异性抑制剂(MMP-8 Inhibitor I)孵育;然后4组均粘接剂处理,提取蛋白质检测MMP-8的活性.另外40颗离体牙随机均分为对照组和MMP-8Inhibitor I处理组(实验组),制作牙本质树脂试件并储存在人工唾液中,分别在储存l天和3个月时进行微拉伸试验分析粘接强度的变化,电镜观察断面和混合层降解的情况.结果 MMP-8活性实验结果显示,第一组呈现少量酶活性:第二组活性大幅度提高;第三组活性下降;第四组未检测到MMP-8活性.微拉伸试验结果显示在相同的时间点,实验组的粘接强度高于对照组,差异有统计学意义.扫描电镜显示,3个月后实验组混合层的胶原纤维网比较完整,对照组的胶原纤维出现明显的降解.结论 MMP-8 Inhibitor I可以通过抑制牙本质中MMP-8的活性抑制混合层胶原纤维网的降解.     

过量氟对大鼠切牙基质金属蛋白酶-20及其组织抑制剂表达的影响

目的 研究过量氟对大鼠切牙生长过程中基质金属蛋白酶-20（MMP-20）和基质金属蛋白酶组织抑制剂-2（TIMP-2）表达的影响,探讨氟斑牙的发病机制。方法 选择20只Wistar大鼠,随机分为对照组和给氟组。8 周后处死动物,获取切牙标本,免疫组化染色观察MMP-20和TIMP-2在大鼠切牙中的表达定位和氟对二者表达的影响。结果 MMP-20和TIMP-2 在分泌期成釉细胞、成牙本质细胞以及成釉器均有阳性表达,给氟组MMP-20的表达明显弱于对照组,差异有统计学意义（P<0.01）;TIMP-2在两组的表达无显著性差异（P>0.05）。结论 过量氟可抑制MMP-20的表达, MMP-20和TIMP-2表达失衡,TIMP-2的抑制作用加强,致使釉基质蛋白清除延迟,导致矿化不全和釉质缺损。