甘草酸二铵对新生大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的 观察甘草酸二铵对新生大鼠心肌细胞凋亡及对Bcl-2/Bax蛋白表达的影响.方法 取新生鼠心肌细胞培养36小时后,加入不同浓度甘草酸二铵(0.01～10 μmol/L).用丫啶橙荧光染色法和流式细胞仪检测心肌细胞凋亡.用免疫组化法测定心肌细胞的Bcl-2和Bax蛋白的表达.结果 不同浓度甘草酸二铵加入细胞24小时后,随着剂量的加大凋亡细胞所占比值逐渐增加;同时Bax蛋白平均光密度值(MOD)逐渐增加,Bcl-2蛋白MOD逐渐下降,Bcl-2/Bax比值下降,与对照组相比有显著性差异(P＜0.05).结论 甘草酸二铵明显促进心肌细胞的凋亡,且具有浓度依赖性,可能与Bcl-2/Bax蛋白表达下调有关.     

电针内关穴对体外循环大鼠心肌细胞凋亡和Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

目的 评价电针内关穴对体外循环(CPB)大鼠心肌细胞凋亡与相关蛋白Bax、Bcl-2表达的影响.方法 成年雄性SD大鼠60只,6～8月龄,体重400 ～ 450 g.采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组(n=20):假手术组(S组)、CPB组和电针内关穴组(EA组).采用尾动脉插管灌注,右颈静脉插管引流建立CPB模型.S组行麻醉和穿刺但不行CPB;CPB组行CPB 1 h;EA组行CPB 1h且在CPB期间使用电针刺激双侧内关穴.CPB结束后2h处死大鼠并取左心室心肌组织,TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况,Western blot法检测Bax和Bcl-2蛋白表达水平.结果 与S组比较,CPB组和EA组心肌细胞凋亡指数升高,Bax和Bcl-2蛋白表达上调,Bax/Bcl-2比值上升(P＜0.05);与CPB组比较,EA组心肌细胞凋亡指数下降,Bax蛋白表达下调,Bcl-2蛋白表达上调,Bax/Bcl-2比值下降(P＜0.05).结论 电针内关穴对CPB大鼠的心肌细胞有明显的保护作用,其机制可能与调节凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达从而抑制细胞凋亡有关.     

醛固酮对肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的 研究醛固酮(ALD)对体外培养的肾小管上皮细胞凋亡的影响及其机制.方法 人肾小管上皮细胞(HK-2)培养于无血清DMEM/F12培养液中,以不同浓度的ALD(O、10-11、10-10、10-9和10-8 mol/L)刺激细胞48 h后,Annexin V/PI双染流式细胞术检测ALD对HK-2细胞凋亡的影响 ;Western blotting检测ALD对HK-2细胞中Bax和Bcl-2蛋白表达的影响.结果 流式细胞术结果表明,随着ALD浓度的升高,凋亡细胞百分率逐渐增多,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).Western blotting结果表明,随着ALD浓度的升高,Bax蛋白表达量逐渐增加,Bcl-2蛋白表达量逐渐减少,Bax/Bcl-2比值增加.结论 ALD可以通过调节凋亡调控蛋白Bax和Bcl-2的表达促进肾小管上皮细胞凋亡,进而促进肾小管间质纤维化的进展.     

丹红注射液预处理对大鼠缺血再灌注心肌细胞损伤的影响

目的研究丹红注射液预处理对大鼠心肌细胞缺血再灌注损伤的作用。方法体外培养大鼠心肌细胞,将丹红注射液以2%、4%、8%、16%四种浓度分别加入培养基中,预处理24 h后,置于缺血再灌注（I/R）环境中培养,采用流式细胞仪技术检测各组细胞的凋亡率,免疫组织化学法检测凋亡基因Bax及Bcl-2蛋白表达变化。结果与正常对照组比较,缺血再灌组细胞凋亡率及Bas表达明显升高,Bcl-2表达则显著降低;而用丹红注射液预处理后呈浓度依赖性地下调凋亡率及Bas表达,上调Bcl-2表达。结论丹红注射液对缺血再灌心肌细胞有保护作用,且与浓度有一定的依赖关系,其作用可能是通过上调Bcl-2蛋白表达,抑制Bax蛋白表达实现的。     

神经生长因子对新生大鼠HIBD后海马区凋亡相关蛋白表达的影响

目的:应用新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型,观察神经生长因子对海马区细胞凋亡及相关蛋白Bcl-2和Bax的影响,探讨其神经保护作用的分子生物学机制. 方法:72只大鼠随机分为对照组、HIBD组和NGF治疗组. 应用改良RICE法制作大鼠HIBD模型,TUNEL法检测各组动物海马区细胞凋亡数,免疫组化染色观察Bcl-2, Bax蛋白的表达. 结果:与假手术组相比,新生大鼠HIBD后海马区存在不同程度的细胞凋亡,Bcl-2表达轻度升高,Bax表达明显升高. 与HIBD组比较,NGF治疗后,凋亡细胞减少(P＜0.01),Bcl-2蛋白表达升高(P＜0.01),Bax表达下降(P＜0.01). 结论:HIBD后,新生大鼠海马区细胞存在细胞凋亡,NGF治疗增强Bcl-2表达,减少损伤基因Bax表达,抑制细胞凋亡,具有脑保护作用.     

麝鼠香调控Bcl-2/BaX蛋白表达抑制缺血性大鼠心肌细胞凋亡

目的 研究麝鼠香(Muskrat musk,Mrm)对大鼠心肌缺血(myocardial ischemia,MI)模型心肌细胞凋亡及Bcl-2/Bax蛋白表达的影响.方法 通过结扎大鼠左冠状动脉前降支复制大鼠MI模型.实验动物随机分为6组:假手术组、模型组、阳性对照组、麝鼠香高、中、低(600、300、150mg·kg-1·d-1剂量组).采用原位末端标记(TUNEL)法进行细胞凋亡指数检测;免疫组化法检测Bcl-2、Bax蛋白表达.结果 与模型组比较,麝鼠香高、中剂量组心肌细胞凋亡指数明显降低,Bcl-2蛋白表达水平显著升高,Bax蛋白表达明显降低,Bcl-2/Bax比值升高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 麝鼠香通过调控Bcl-2/Bax蛋白表达,能有效抑制心肌细胞凋亡的发生,对缺血心肌提供保护作用.     

Effect of Depression on Cardiac Myocyte Apoptosis and the Expression of Bcl-2, Bax and Caspase-3 in Rats with Myocardial Infarction

目的:探讨抑郁对心肌梗死大鼠缺血心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax和Caspase-3的影响.方法:大鼠随机分为四组,各组8只,A组为假手术组,B组为抑郁大鼠假手术组,C组为心肌梗死组,D组为抑郁大鼠心肌梗死组.用TUNEL法检测心肌细胞凋亡,用免疫组织化学法和逆转录-聚合酶链反应方法检测Bcl-2、Bax和Caspase-3的基因表达.结果:各组大鼠心肌细胞凋亡指数以及心肌细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达和心肌细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3mRNA表达的差异有统计学意义(P＜0.01),C、D组大鼠心肌细胞凋亡指数以及心肌细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达和心肌细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3mRNA表达均高于A组和B组,差异有统计学意义(P＜0.01),D组大鼠心肌细胞凋亡指数以及心肌细胞Bax、Caspase-3蛋白表达和心肌细胞Bax、Caspase-3mRNA表达高于C组,而心肌细胞Bcl-2蛋白及mRNA表达低于C组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:抑郁可以加重心肌梗死大鼠缺血心肌细胞凋亡,其机制可能与上调促凋亡基因Bax及Caspase3表达、下调抗凋亡基因Bcl-2的表达有关.     

山奈酚、芹菜素、大豆苷元对H2O2诱导的心肌细胞凋亡的影响

目的 观察不同种类黄酮类化合物山萘酚(KA)、芹菜素(AP)、大豆苷元(DA)对H2O2诱导的心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达的影响.方法 取Wistar大鼠新生乳鼠心肌细胞做原代培养,MTT法检测几种黄酮的细胞毒浓度;H2O2(100μmol/L)诱导心肌细胞凋亡;Tunel法、流式细胞仪检测细胞凋亡率;免疫组化方法测定Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达.结果 MTT法显示各组药物在5、30μmol/L没有显著的细胞毒作用.KA、AP、DA均显著减小H2O2诱导的细胞凋亡率、Caspase-3蛋白表达,增加Bcl-2/Bax比值(P＜0.05),其中KA效果最显著(P＜0.01).结论 这些黄酮类化合物有抑制H2O2诱导的心肌细胞凋亡作用,其机制与其抗氧化活性有关,可能是通过调节Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达,起到心肌细胞保护作用,其中KA效果最好.     

促红细胞生成素对阿霉素诱导的心肌细胞凋亡的预防作用研究

目的:研究促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)预防阿霉素(Doxorubicin,DOX)诱导的心肌细胞凋亡的作用.方法:原代培养乳鼠心肌细胞,随机分为空白对照组、模型对照组及不同浓度(6.25、25、100 IU/ml)EPO预处理组,各组预处理24 h后加人5 μg/ml的DOX.24 h后采用流式细胞术检测细胞凋亡率,甲基噻唑基四唑(Methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞活力,流式细胞术检测凋亡蛋白Bcl-2和Bax的表达.结果:与空白对照组相比模型对照组细胞活力明显减低,凋亡率显著增高.不同浓度EPO预处理的心肌细胞活力较模型对照组显著增高,细胞凋亡率显著降低,并且凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达增高,凋亡蛋白Bax的表达降低.结论:EPO对DOX诱导的心肌细胞的损伤具有预防作用,其机制可能与调节凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax有关.     

软脂酸对胰岛细胞凋亡作用及机制的研究

目的 观察不同浓度的软脂酸对体外培养的原代胰岛细胞的凋亡作用,并探讨其凋亡机制.方法 体外培养Wistar大鼠胰岛细胞,用不同浓度软脂酸(分别为0.125、0.25、0.5mmol/L)共同孵育48h,用Tunel法计算胰岛细胞凋亡率,用油红染色观察细胞内脂质堆积,用硝酸还原酶法分别测定培养0小时、24小时、48小时后培养液上清NO的浓度.用免疫组化法测定Bax/Bcl-2蛋白表达.结果 0.125、0.25、0.5mmol/L的软脂酸均有促进胰岛细胞凋亡的作用(P<0.05),且呈浓度依赖性.油红染色见各软脂酸处理组胰岛细胞内均有脂质堆积,尤以高浓度组明显.不同浓度软脂酸均能使胰岛细胞合成NO增加,24小时、48小时与对照组比较,差异有显著性(P<0.05).免疫组化法显示:对照组Bax蛋白表达阴性,Bcl-2蛋白表达阳性,0.125mmol/L软脂酸处理组,Bax蛋白表达弱阳性,Bcl-2蛋白表达阳性,0.25mmol/L及0.5mmol/L软脂酸处理组Bax蛋白表达阳性,Bcl-2蛋白阴性.结论 不同浓度的软脂酸均有促进胰岛细胞凋亡的作用,其机制可能与胰岛细胞内脂质的堆积和NO合成增加及Bax/Bcl-2蛋白的异常表达有关.     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

阴道炎1236例病原检查分析

对１２３６例阴道炎患者的阴道分泌物作直接镜检和病原菌分离培养检查；结果，细菌感染９００例，念珠菌２３４例，滴虫１０２例。９００例细菌经鉴定；葡萄球菌３００例，阴道加特纳菌２７６例，淋病奈瑟菌１７０例，其它细菌１２４例。结果表明，葡萄球菌，阴道加特纳菌，淋病奈瑟菌是细菌性阴道炎最常见的致病菌。     

碱量法测定壳多糖脱乙酰度的方法探讨

目的：评价壳多糖脱乙酰度测定的减量法的影响因素。方法：通过实验评价碱量法的精准度及样本含潮量等因素对测定结果的影响,并对汪氏推荐计算公式和本文作者提出的改良公式作出评价。结果：碱量法测定壳多糖脱乙酰度受样本性状、含潮率、反应体系中酸量的影响。改良公式更能反映样本实际脱乙酰度。结论：碱量法简便易行,评价指标在可接受范围,可用于壳多糖研制中的质量评价。     

喉癌主癌灶手术切缘的临床特点分析

目的探讨研究喉癌主癌灶手术的安全切缘在临床上的特点。方法回顾性分析2007年6月—2011年3月已经确诊喉癌的患者100例,随机分成A、B两组,A组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取镜下观察分析;B组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取肉眼观察分析,将结果进行临床特点分析比较。结果早期的喉癌患者和晚期的喉癌患者的阳性切缘例数,差异无统计学意义（P〉0.05）;晚期的阳性切缘发生次数高于早期的阳性切缘发生次数,差异有统计学意义（P〈0.05）。声门上区[SG]2、3和5、10mm;跨声门型[TG]2、3mm和5、10mm的切缘对比,差异有统计学意义（P〈0.05）。SG、G、TG、IG的2mm和3mm,5mm和10mm对,差异无统计学意义（P〉0.05）。肉眼阳性切缘观察39个,镜下阳性切缘观察43,两者差异无统计学意义（P〉0.05）。结论依据原发不同部位、不同分期和不同范围选取适合的切线,就可以有效地减少阳性切缘的发生。     

儿童腹痛328例病因诊断及分析

目的：根据儿童急性腹痛的特点,诊断儿童腹痛应综合临床及相关检查提供的依据,做出准确诊断,给予适当治疗。方法：对临床328例腹痛患儿进行选择性辅助检查和分析。结果：小儿腹痛病因复杂,腹腔内疾病占64．63％,共17种病因;腹腔外疾病占35．37％,共6种病因。结论：仔细询问病史、认真体格检查、密切观察病情、针对性地选择辅助检查,在儿童腹痛的诊断上具有重要的意义。     

手术治疗髋臼骨折45例效果观察

目的:探讨髋臼骨折患者的手术治疗效果。方法:系统性回顾收治的45例髋臼骨折患者手术治疗效果。结果:本组患者随访2～8年,治疗的总优、良患者38例,总优良率达到84%,手术切口全部愈合,未发生切口感染及深部感染,在患者中5例出现并发症:1例坐骨神经损伤,1例股骨头坏死,1例异位骨化,2例创伤性关节炎。结论:充分的术前计划,恰当的手术时机,正确的入路选择以及良好的术后锻炼,是治疗髋臼骨折的有效方法。     

癫痫常见临床误诊原因分析

目的通过对癫痫和非癫痫误诊病例及24小时脑电图确诊癫痫患者的临床特点分析,提高癫痫的诊断率,减少癫痫误诊。方法纳入四川大学华西医院2009年10月～2011年4月收治的误诊病例及经脑电图确诊的癫痫患者共172例,分析其误诊原因和临床特点。结果在纳入的172例患者中99例非痫性发作误诊为癫痫发作,43例癫痫发作误诊为非痫性发作,30例经24小时脑电图确诊为癫痫。癫痫最易被误诊为短暂性脑缺血发作(TIA)、晕厥、假性发作。反之,非癫痫发作误诊癫痫发作多见于假性发作、TIA。对24小时脑电图确诊的癫痫发作患者的临床特点分析发现不自主咂嘴合并吞咽动作、上腹部不适是最常见待诊患者的临床表现。结论熟练掌握癫痫与非癫痫发作性疾病的临床表现,仔细询问病史,认真做好体格检查,结合脑电图尤其是24小时视频脑电图等检查进行综合分析,可以减少癫痫的误诊,提高癫痫的诊断率。     

87株幽门螺旋杆菌VacA等位基因的分析

目的以研究方法LiPA（Line Probe Assay）分析VacA等位基因的表达,了解幽门螺旋杆菌致病机理的理解。方法从三个不同城市87位进行胃镜检查患者的胃粘膜中培养出幽门螺旋杆菌,提取DNA,用LiPA方法分析VacA等位基因。结果（1）87位患者以sic（88．5％）和m2a（63．2％）分布为主,未发现s1b和s2;（2）混合菌株感染率为41．4％,远远高于西方国家,其中上海的混合感染率最高（62．5％）,与北京（41．0％）和南宁（20．8％）相比具有显著性差异,P〈0．01;（3）北京、海、南京三个不同城市s1、m等位基因亚型分布率存在差异;（4）溃疡病和非溃疡病患者m1和m2的分布率没有显著性差异。结论我国幽门螺旋杆菌多重菌株感染率较高,不同的m基因型与消化性溃疡的发生无显著性相关。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。