土鳖虫与日本医蛭提取物抗凝血酶活性的比较研究

目的研究土鳖虫提取物的抗凝血作用,并与日本医蛭抗凝活性做了比较,为土鳖虫的新药开发提供实验依据。方法采用凝血酶直接滴定法。结果鲜(干)土鳖虫提取物的抗凝血活性均很强,与日本医蛭相当。但土鳖虫和日本医蛭抗凝血酶活性成分对热稳定性有差异。结论土鳖虫中含有直接作用于凝血酶的成分,但不同于日本医蛭的抗凝血酶成分。     

水蛭乙醇提取物体外抗凝血活性研究

目的:研究水蛭不同提取物对人血浆的抗凝活性及作用环节。方法:测定水蛭乙醇提取物不同萃取部位对凝血酶原时间(PT),凝血酶时间(TT),活化的部分凝血活酶时间(APTT),纤维蛋白原凝固时间(FCT)的影响。结果:水蛭的乙酸乙酯部位显著地延长人PT,APTT,TT和FCT;石油醚部位、正丁醇部位、水部位也有较弱抗凝活性。结论:水蛭乙酸乙酯提取部分抗凝作用最强,直接抑制凝血酶催化的纤维蛋白原凝固。     

土鳖虫活性组分F2-2体内抗凝药效试验

目的：以PT、APTT、TT、FIB、血小板聚集率及纤溶图参数为指标,评价土鳖虫抗凝组分F2-2的体内抗凝药效。方法：大鼠皮下注射肾上腺素5 天造成急性血瘀症模型后,对模型大鼠灌胃给药土鳖虫抗凝组分F2-2,9天后对各指标进行测定。结果：与模型组相比,灌胃给药后的大鼠PT/APTT均延长、FIB含量降低、血小板聚集率与血液最大凝固程度下降,TT则无差异。结论：土鳖虫抗凝组分F2-2有良好的体内抗凝药效,其作用机制尚有待进一步研究。     

土鳖虫纤溶活性蛋白抗小鼠血栓形成作用研究

目的:研究土鳖虫纤溶活性蛋白的抗凝、纤溶和抗血栓形成作用。方法:小鼠灌胃土鳖虫纤溶活性蛋白后,取血浆测定白陶土部分凝血活酶时间(KPTT)、凝血酶时间(TT)和凝血酶原时间(PT),测定组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)和其抑制物(PAI)的活性;用角叉菜胶诱发小鼠体内血栓形成,测量尾部血栓形成的长度。结果:土鳖虫纤溶活性蛋白能够显著延长小鼠TT,使t-PA活性增强,同时抑制PAI的活性,显著抑制角叉菜胶所致的尾部血栓形成。结论:土鳖虫纤溶活性蛋白能部分抑制凝血途径,激活纤溶系统,抑制血栓形成。     

土鳖虫多肽F2-2的体外药效研究

目的：通过体外试验,考察土鳖虫多肽F2-2的抗凝、抗血小板聚集与舒张血管药效。方法：以凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血酶原时间（APTT）、凝血酶时间（TT）、纤维蛋白原含量（FIB）、血小板聚集率、纤溶图参数与离体血管环张力等为指标,评价多肽F2-2是否具有活血化瘀的作用。结果：土鳖虫多肽F2-2具有延长家兔血浆APTT/PT/TT、降低FIB、降低血小板聚集率、延长凝血启动时间并降低最大凝固程度以及增加大鼠离体血管环张力的作用。结论：体外实验表明,多肽F2-2是中药土鳖虫的活性组分,有继续研究的价值。     

土鳖虫对大鼠体外血栓形成的实验研究

目的观察土鳖虫对大鼠体外血栓形成的影响。方法以土鳖虫水提液和生药粉悬液对大鼠灌胃7天后进行体外血栓测定。结果土鳖虫水提液组血栓重量和长度较空白对照组均明显增加(P<0.05),生药粉组血栓干重较空白对照组明显增加(P<0.05),土鳖虫对血栓长度的影响与血栓重量基本一致,此结果与以往土鳖虫具有抑制血栓形成的报道不一致。结论土鳖虫破血逐瘀的主要作用可能不在于抗凝血方面。     

基于体外药效学对土鳖虫不同酶解部位的抗凝活力研究

目的:通过对土鳖虫不同酶解产物进行体外抗凝药效学实验,筛选强活性部位。方法:以土鳖虫不同酶解产物的得膏率、总肽含量、抗凝活力为指标,以冷冻干燥将不同酶解产物制成冻干粉,利用体外溶血块实验、血液黏度测定比较其抗凝活力。结果:仿生酶解法(胃蛋白酶+胰蛋白酶)产物的得膏率41.84%、总肽含量为26.22 mg·m L~(-1)、其抗凝活力为2.9 U·m L~(-1),其体外溶血率最高,血液黏度最低。结论:与单一酶进行酶解相比,仿生酶解法所得酶解产物具有更强的抗凝活力。     

雄性土鳖虫中不同分子量多肽活性研究

目的:对雄性土鳖虫不同分子量物质进行活性测定,得到最强活性片段。方法:采用不同截留孔径的超滤、纳滤;DA201-c树脂、葡聚糖G25对样品进行分子量分离,得到不同分子量组分,并采用体外抗凝实验、溶栓实验、平板实验等测定其活性。结果:采用超滤、纳滤得到小于1000 Da、1000～3000 Da、大于3000 Da组分,并通过实验测定得到1000～3000 Da的物质活性最强,再通过DA201-C树脂对活性组分进行极性分离,得到三个洗脱组分:25%乙醇洗脱组分、50%乙醇洗脱组分、75%乙醇洗脱组分。并通过抗凝、溶栓试验得到50%乙醇洗脱组分活性最强。再将50%乙醇洗脱组分经过G25进行分离,得到三个峰位,分别记为FIV1、FIV2、FIV3。经抗凝、溶栓实验测得FIV2活性强。在经过高效液相得出FIV2组分的分子量集中于1000～1500 Da。结论:通过超滤、树脂、尺寸排阻色谱分离得到的活性组分,可以进一步进行分离,为以后的肽段测序奠定基础。     

土鳖虫不同工艺提取物抗凝作用的比较研究

目的研究土鳖虫的酶解法提取工艺。方法以提取液的得膏量、总肽含量、抗凝血酶活性及大鼠在体抗凝血作用为指标,检测各工艺提取液的成分含量及活性。结果仿生酶解法提取得膏量最大,总肽含量最高,抗凝血酶活性最强,大鼠血瘀模型凝血时间最长。结论与传统技术相比,仿生酶解技术提取土鳖虫提取更充分,效率更高,活性更强。     

土鳖虫水提物对大鼠抗凝血的实验研究

土鳖虫水提物连续给大鼠灌胃7天,大剂量组及常用量组均明显地延长大鼠出血时间和复钙时间,显著地抑制血小板聚集率(AGG_1、AGG_5),缩短红细胞电泳时间。但对全血粘度,血浆粘度,纤维蛋白原均无影响。     

基于HPCE指纹图谱的土鳖虫质量控制研究

目的:在建立基于高效毛细管电泳指纹图谱的基础上,建立更为全面、准确的土鳖虫药材质量控制与评价方法;方法:采用毛细管电泳法(HPCE法),使用熔融硅胶毛细管(75μm i.d.,总长30 cm,有效长度21 cm),以硼砂为缓冲液(10mmol/L,p H 9.7),进样电压5 kv 10 s,分离电压15 kv,检测波长214 nm,建立不同批次、来源土鳖虫药材的指纹图谱。根据所得指纹图谱,找出其中的共有峰,并使用峰面积归一化法计算各组分含量;结果:土鳖虫药材中存在7个共有峰,含量测定结果显示,上述成分的含量在不同批次、来源药材中存在统计学意义;结论:该法快速、高效、准确度高,精密度好,能够更为全面、系统地评价土鳖虫药材的质量。     

土鳖虫抗血栓活性部位及其性质研究

目的研究土鳖虫抗血栓活性部位,并对其性质进行研究。方法将土鳖虫分为壳、头、胸、腹4部分,采用反复冻融法提取成分并进行进一步实验。结果壳、胸两部分提取物无活性,头部、腹部提取物具有活性,但头部活性较小,腹部活性较大,其有效成分是糖蛋白,活性高于全虫提取物。结论腹部提取物(Tf)活性较高,具有很高的研究价值。     

赶黄草不同溶剂提取物抑菌活性的初步探讨

目的:研究赶黄草水提物及不同浓度醇提物的体外抑菌作用。方法:以抑菌圈直径为参考指标,采用滤纸片法,测定赶黄草水提物及30%、50%、70%、90%醇提物对几种常见病菌的体外抑菌活性。结果:各提取物对绿脓杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌均有不同程度的抑制作用,而对白色念珠菌、新生隐球菌、大肠杆菌的抑制作用不明显。结论:赶黄草不同溶剂提取物对4种供试菌均具有不同程度的抑制作用,是一种具有开发价值的天然抑菌资源。     

四角蛤蜊提取物抗氧化活性研究

目的对四角蛤蜊抗氧化活性进行评价研究。方法采用水提醇沉的工艺路线分别得到四角蛤蜊总提液(MV)、醇沉沉淀(MP)及醇沉上清液(MS)。采用背部皮下注射D-半乳糖建立小鼠衰老模型,评价MV、MP及MS对模型小鼠肝脏与血清中SOD、MDA、GSH-PX、CAT各项指标的影响。以不同极性溶剂对MS萃取,得到石油醚、乙酸乙酯、正丁醇与水部位,评价各部位清除DPPH自由基、清除超氧自由基、螯合和还原铁的能力。结果给予MV、MP、MS的小鼠肝组织SOD、GSH-PX、CAT显著升高(P0.05),MDA显著降低(P0.05),血清的SOD、GSH-PX显著升高(P0.05),MDA显著降低(P0.05)。MS萃取水部位对DPPH自由基清除、超氧自由基清除和还原能力最强;MS萃取乙酸乙酯部位螯合能力最强。结论四角蛤蜊具有较好的抗氧化活性,其活性较强部位是MS萃取水部位。     

大黄不同工艺产物泻下活性比较研究

目的:研究大黄溶剂工艺、SFE-CO_2工艺与SFE-CO_2及药渣树脂精制工艺产物的泻下活性。方法:采用炭末推进法考察各工艺产物对小鼠小肠和大鼠大肠活动的影响,观察小肠容积的变化,同时以肠段称重法考察了各工艺产物对小鼠小肠与大肠水分吸收的影响。结果:各工艺产物泻下活性的强弱为:SFE-CO_2及药渣树脂精制工艺组>溶剂工艺组>SFE-CO_2组。结论:分极性提取效果较好。     

赤雹果不同提取物的镇痛活性比较研究

目的评价赤雹果不同提取物的镇痛活性,筛选镇痛活性强的提取物,为进一步提取和分离其镇痛活性部位或成分提供依据。方法采用小鼠扭体法、小鼠热板法对赤雹果石油醚提取物(F1)、醋酸乙酯提取物(F2)、正丁醇提取物(F3)、乙醇提取物(F4)和水提取物(F5)的镇痛活性进行了比较研究。结果所用的5种赤雹果提取物对2种疼痛模型均有一定的镇痛作用,对小鼠扭体反应的抑制率依次为:F553.6%,F339.4%,F436.3%,F234.6%,F119.0%;在小鼠热板实验,痛阈提高率依次为:F554.6%,F442.9%,F315.6%,F213.0%,F19.1%。结论赤雹果5种提取物均有不同程度的镇痛活性,其中F5镇痛活性最强;F4和F3也有一定的镇痛活性,F2和F1的镇痛活性较弱,结果提示赤雹果镇痛活性物质主要存在于F5,其次是F4和F3。     

虎舌红不同溶剂提取物抗氧化活性研究

目的研究虎舌红不同溶剂提取物的体外抗氧化活性,为虎舌红的开发利用提供科学依据。方法药材经95%乙醇超声提取,醇提取物(BH-T)用不同极性溶剂进行萃取分离,得到石油醚(BH-P)、乙酸乙酯(BH-E)、正丁醇(BH-B)及水(BH-W)4个不同极性萃取部位。各部分分别配制成适当质量浓度的溶液,采用DPPH法、ABTS法、水杨酸法和普鲁士蓝法分别测定各部位的自由基清除能力和铁离子还原力。结果虎舌红不同溶剂提取物均具有一定的体外抗氧化作用,且在相同浓度下BH-E的抗氧化活性最强,其次是BH-P和BH-T。结论虎舌红提取物清除能力与提取物样品浓度在一定范围内具有良好的量效关系,其中极性较小的BH-P和中等极性的BH-E抗氧化活性及还原能力相对较强。     

远志抗惊厥活性部位的研究

目的:明确中药远志的抗惊厥活性部位,为阐明其抗惊厥物质基础提供实验依据。方法:70%乙醇做提取溶剂,采用索氏提取器提取后,依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯与甲醇萃取,得到不同极性萃取物。建立最大电休克模型(MES)及皮下戊四唑(PTZ)致小鼠惊厥模型,腹腔注射给予各萃取物,初筛抗惊厥活性部位。采用MES、PTZ、3-巯基丙酸(3-MP)致惊厥模型及旋转棒法对活性部位进行定量活性评价。结果:与模型组相比,石油醚和二氯甲烷萃取物无抗惊厥活性,乙酸乙酯和甲醇萃取物对MES和PTZ致小鼠惊厥模型具有保护作用。其中,甲醇萃取物的抗惊厥活性较好。定量活性评价结果显示其抗MES、PTZ、3-MP的半数有效量(ED_(50))分别为143.3、517.1、469.9 mg·kg~(-1);旋转棒法结果显示其半数中毒量(TD_(50))为890.5 mg·kg~(-1),神经毒性远低于阳性药卡马西平。结论:甲醇萃取物为远志抗惊厥的主要活性部位,值得进一步研究。     

三七伤药片的抗凝血药理作用研究

目的:主要研究三七伤药片的抗凝血药理作用。方法:用不同浓度的三七伤药片药液对小鼠连续灌胃3 d,按毛细管法测定小鼠凝血时间。结果:与对照组相比,三七伤药片溶液极显著地延长了小鼠的凝血时间;且三七伤药片溶液对小鼠凝血时间的延长随药液剂量的增加而增加,呈一定的量效关系。结论:三七伤药片的抗凝血作用随给药剂量的增加而增强,且呈一定的量效关系。