乙型肝炎病毒感染孕妇死胎组织中乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸的检测

孕妇感染乙型肝炎病毒 (ｈｅｐａｔｉｔｉｓｖｉｒｕｓＢ ,ＨＢＶ)是导致新生儿发育不良和死亡的重要因素之一[1] 。为了解ＨＢＶ母婴传播 (ｍａｔｅｒｎａｌ ｆｅｔａｌｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ ,ＭＦＴ)所致胎儿多脏器组织感染的机理 ,我们对 40例ＨＢＶ感染孕妇及其胎儿脏器进行研究 ,现将结果报告如下。一、资料和方法1.孕妇乙型肝炎病毒标志物 (ＨＢＶＭ)检测 :采集 1995～2 0 0 0年在我院分娩的、ＨＢＶ感染孕妇 40例及其分娩的死胎 ,孕妇年龄 2 5～ 3 2岁、分娩孕周 3 6～ 40周。分娩前采集孕妇静脉血 ,检测乙型肝炎表面抗原 (ＨＢ…     

乙型肝炎孕妇死胎胎儿肝组织中HBV的表达

探讨通过产妇传播乙型肝炎病毒在胎儿肝组织中表达的高危因素。方法：采集５０例乙型肝炎产妇娩下的死胎,常规尸检,取肝组织,用链酶卵白素－生物素（ＳＰ）法检测ＨＢＶ;与婴母产前静脉血ＨＢＶ的检测结果对照。结果：在肝细胞浆内 ＨＢｃＡｇ阳性颗粒呈弥散分布,肝细胞核不着色;含 ＨＢｃＡｇ 颗粒的肝细胞胞浆里弥漫棕黄色,成点、灶片状分布于肝组织中;毛细胆管上皮和管腔内也可见到棕黄色ＨＢｃＡｇ颗粒。５０例乙型肝炎产妇娩下的死胎肝组织中ＨＢｃＡｇ阳性２１例（４２．００％）,其中静脉血ＨＢＶ单项阳性（两时半一项阳性）、小三阳（ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｂ、ＨＢｃＡｂ皆阳性）和大三阳（ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢｃＡｂ皆阳性）的婴母分娩的死胎肝组织中 ＨＢｃＡｇ 阳性分别为 ３ ／１２例（２５．５％）、２／１２例（１６．６７％）和 １６／２６例（６１．５２％）,前两者差异不显著（Ｐ＞ ０．０５）;后者与前两者差异有显著性（Ｐ＜ ０．０５）。结论：婴母静脉血ＨＢＶ大三阳是乙型肝炎病毒通过母婴垂直传播在胎儿肝组织中表达的高危因素。     

死胎胸腺组织中HBsAg检测的临床和病理研究

目的 :观察乙型肝炎病毒通过产妇传播在胎儿胸腺组织中表达的情况。方法 :采集 4 0例乙型肝炎产妇产下的死胎 ,常规尸检 ,取胸腺组织 ,SP法检测 HBs Ag;回访婴母产前静脉血 HBVM的检测结果 ;取百分率行 U检验。结果 :死胎胸腺组织胸腺小体数量明显减少 ;HBs Ag阳性颗粒在胸腺细胞间呈点状分布 ,胸腺细胞核不着色 ,毛细血管内可见到棕黄色 HBs Ag颗粒。HBV呈大三阳的婴母较 HBV呈单项阳性、小三阳的婴母分娩的死胎胸腺组织中 HBs Ag阳性率明显升高、胸腺小体数量明显减少 ,差异显著 (P<0 .0 5 ) ;HBV呈单项阳性、小三阳的婴母分娩的死胎胸腺组织中 HBs Ag阳性率、胸腺小体数量比较 ,差异不显著 (P>0 .0 5 )。结论 :婴母静脉血 HBV大三阳是乙型肝炎病毒通过母婴垂直传播在胎儿胸腺组织中表达的高危因素。     

HBV在原代胎盘滋养细胞内复制的初步探讨

目的:从体外实验研究HBV在胎盘滋养细胞的感染和复制,初步探讨HBV经胎盘传播的机制。方法:收集HBV携带孕妇足月胎盘12例,采用密度梯度离心法联合反复贴壁法分离、纯化滋养细胞,提取滋养细胞进行培养。流式细胞术检测滋养细胞中CK-7表达,进行细胞纯度鉴定;免疫双标法结合激光扫描共聚焦显微镜技术检测滋养细胞CK-7及间质Vimentin的表达,进行细胞形态学鉴定。PCR-荧光探针法检测体外培养24、48、72h滋养细胞上清HBV DNA的表达;微粒子酶免疫分析技术检测体外培养24、48、72h滋养细胞上清HBs Ag和HBeAg的表达。流式细胞分选技术分选出纯度98%以上的滋养细胞,荧光定量PCR检测滋养细胞中HBV ccc DNA的表达。结果:12例HBV携带孕妇胎盘滋养细胞体外培养24、48、72h,上清均可检测到HBV DNA和HBsAg、HBeAg的阳性表达。HBV-M滴度在24h表达量最高,随着时间的推移,HBV DNA滴度逐渐下降,而HBs Ag和HBe Ag滴度呈先下降后上升的趋势,但3个时间点均无统计学差异(P0.05);3个时间点上清HBs Ag和HBe Ag的表达量有良好的相关性(P0.05)。12例HBV胎盘滋养细胞标本中,4例检测出HBV cccDNA阳性,阳性率为33.3%,表达量(copies/ml)分别为5.67×103、2.12×104、1.72×104、4.90×104。Pearson相关分析结果显示,母血HBV DNA滴度和滋养细胞HBV cccDNA滴度呈良好的正相关(r=0.977,P=0.023)。结论:HBV可感染胎盘滋养细胞并在滋养细胞内繁殖复制。     

链酶卵白素-生物素法检测乙型肝炎产妇分娩的死胎肝组织中乙型肝炎病毒及其标志物的研究

目的：探讨乙型肝炎病毒（HBV）通过产妇传播在胎儿肝组织中表达的高危因素。方法：采集40例患乙型肝炎的产妇分娩的死胎，常规尺检，取肝组织，链酶卵白素－生物素法检测HBsAg；回访孕妇产前静脉血HBV及其标志物的检测结果；取百分率行u检验。结果：HBsAg阳性颗粒在肝细胞胞浆内呈弥散分布，肝细胞核不着色；含HBsAg颗粒的肝细胞胞浆呈弥漫性棕黄色，呈点、灶片状分布于肝组织中；毛细胆管上皮和管腔内也可见到棕黄色HBsAg颗粒。40例乙型肝炎产妇分娩的死胎肝组织中HBsAg阳性20例（50．00％），其中静脉血HBV：①单项阳性（两对半任一项阳性）、②小三阳[HBsAg( ),HBeAb( ),HBcAb( )]和③大三阳[HBsAg( ),HBeAg( ),HBcAb( )]的孕妇分娩的死胎肝组织中HBsAg阳性分别为13例（13／27）（48．15％）、1例（1／5）（20．00％）、6例（6／8）（75．00％），①和③比较差异不显著（P＞0．05）；②和①、③比较，差异显著（P＜0．05）。结论：死胎肝组织HBsAg表达与孕妇静脉血中HBV标志有关；孕妇静脉血HBV大三阳[HBsAg( ),HBeAg( ),HBcAb( )]是乙型肝炎病毒通过母婴传播在胎儿肝组织中表达的高危因素。     

HBV感染胎盘BCRP的表达与IL-1β的相关性

目的:探讨乳腺癌耐药蛋白(BCRP)在乙型肝炎病毒(HBV)感染胎盘组织中的表达及其意义.方法:选取被HBV感染的足月胎盘20例(乙肝组),同时选取未被HBV感染的足月胎盘20例(正常对照组).采用实时荧光定量(RT-PCR)分别检测两组胎盘组织BCRP mRNA表达.蛋白免疫印迹法分别检测两组胎盘组织BCRP的表达.ELISA分别检测两组胎盘中白细胞介素-1β(IL-1β)的表达.结果:①各组RT-PCR检测BCRP mRNA的相对表达量:乙肝组0.424±0.358,正常对照组0.144±0.116,两组相比,差异有高度统计学意义(P=0.003).②蛋白免疫印迹法检测BCRP表达量:乙肝组0.4250±0.3106,正常对照组0.1129±0.1045,两组相比,差异有高度统计学意义(P=0.000).③ELISA法分别检测胎盘中IL-1β的表达:乙肝组290.145±229.393 pg/ml;正常对照组66.522±61.832 pg/ml,两组相比,差异有高度统计学意义(P=0.000).④经Spearson相关分析,IL-1β与BCRP mRNA和BCRP表达呈正相关关系(r=0.930,P=0.000;r=0.887,P=0.000).结论:BCRP在HBV感染胎盘组织中表达的升高,可能与HBV感染胎盘组织中IL-1β表达的升高有关.     

KiSS-1基因在孕早期绒毛组织中表达的初步研究

目的 研究早孕绒毛中KiSS—1基因mRNA的表达及定位，探讨其与滋养细胞浸润的关系。方法 采用半定量RT—PCR对100例(分为8个孕周组)正常早孕绒毛组织中KiSS—1mRNA的表达水平进行检测，并采用原位杂交方法进行其组织学定位。结果 在整个孕早期绒毛组织中均有KiSS—1基因表达，孕5周时表达最低，至9-12周达高峰。KiSS—1mRNA表达与妊娠天数呈直线正相关。原位杂交法检测结果提示孕早期KiSS—1mRNA在滋养细胞胞浆中的表达随孕周增加而增强。结论以KiSS—1基因在滋养细胞表达随孕周增长而增加，提示该基因在调控早孕滋养细胞的浸润行为中起重要的作用。     

卵巢癌组织中P—糖蛋白表达及其与化疗效果关系的初步观察

卵巢癌组织中Ｐ－糖蛋白表达及其与化疗效果关系的初步观察温宏武刘书文郝纯毅何洛文多药耐药基因及表达产物Ｐ－糖蛋白（Ｐ－ｇｐ），被认为与化疗耐药有关［１，２］。本研究对卵巢癌的Ｐ－ｇｐ表达进行检测，并分析其与化疗效果的关系。一、材料与方法１．研究对象：病...     

HBeAg阳性慢性乙型肝炎孕妇胎盘组织Toll样受体3的表达及意义

目的探讨孕妇胎盘组织Toll样受体3(TLR3)的表达与乙型肝炎病毒(HBV)持续感染的关系。方法2008年11月至2009年5月在南方医科大学南方医院产科选取22例HBeAg阳性(HbeAg阳性组)和24例HBeAg阴性(HBeAg阴性组)慢性乙型肝炎(乙肝)孕妇,及正常孕妇25例。建立实时荧光定量RT-PCR检测胎盘组织中TLR3mRNA水平,同时以免疫组化法检测其在胎盘组织中的表达,并采用实时荧光定量PCR和微粒子酶免疫分析法(MEIA)分别定量检测其血清HBV-DNA和HBeAg水平。结果HBeAg阳性孕妇胎盘组织中TLR3mRNA水平(×10-1)(3.204±0.395)明显低于正常对照组(7.834±0.970)和HBeAg阴性组(5.746±0.580),两组相比P0.01;HBeAg阳性孕妇血清HBeAg及HBV-DNA水平[562.2±337.4和(7.15±3.69)×107copy/mL]明显高于正常对照组(0.29±0.06,1.00×103copy/mL)和HBeAg阴性组[0.35±0.07,(2.40±1.71)×103copy/mL](P0.01);胎盘组织中TLR3mRNA表达与HBeAg水平呈负相关(r=-0.495,P0.05),而与血清HBV-DNA水平无显著相关性。结论胎盘组织中TLR3的表达与其持续感染HBV有一定关系,HBeAg对胎盘组织TLR3表达起负调节作用。     

妊娠高血压综合征患者血清和胎盘组织中血管细胞黏附分子-1表达的研究

近年来 ,在妊娠高血压综合征 (妊高征 )病因研究方面 ,血管内皮损伤及胎盘浅着床学说受到广泛关注。血管内皮的完整性对维持机体正常生理功能有着十分重要的作用 ,有关研究证明 ,血管内皮细胞损伤与白细胞激活有重要关系[1] ,白细胞的激活是由表达于白细胞和内皮细胞表面的黏附分子所调节[2 ] 。本研究检测了妊高征患者血循环中的可溶性血管细胞黏附分子 1(VCAM 1)的水平 ,以及VCAM 1在胎盘组织螺旋动脉中的表达 ,以探讨其与妊高征发病的关系。一、资料与方法1 研究对象及分组 :选取 2 0 0 0年 3月～ 2 0 0 2年 2月在我院分娩的正常初孕…     

单纯性疱疹病毒Ⅱ型母婴垂直传播初步研究

目的 :研究孕妇及胎儿单纯疱疹病毒 型 (HSV- )的感染及其母婴传播。方法 :采用聚合酶链反应法 (PCR)对 5 74例妊娠晚期孕妇的宫颈分泌物测 HSV- 型 DNA;用酶联免疫吸附法 (ELISA)对其中的 5 3 1例孕妇分娩时抽取母血及新生儿脐血测 HSV- 型Ig G、Ig M抗体。结果 :孕妇血 HSV- 型的 Ig G阳性检出率为 3 7.48%、Ig M阳性检出率为 1 0 .92 % ;胎儿脐血 HSV- 型的 Ig G阳性检出率为 2 9.3 8%、Ig M阳性检出率为2 .6 4 % ;孕妇宫颈分泌物 HSV- 型阳性检出率为 0。新生儿畸形 1例 ,为先天性耳聋。结论 :妊娠晚期孕妇存在 HSV- 的活动感染 ,及母婴宫内垂直传播     

原位杂交检测同源框基因HoxAll在人月经周期子宫内膜的表达

了解HoxAll基因在人月经周期子宫内膜的表达及变化,探索该基因对正常内膜周期的调节功能。应用地高辛标记的RNA探针进行原位杂交。HoxAll基因主要在内膜间质细胞中表达,增殖期与分泌期比较未见明显差异。腺上皮细胞中HoxAll基因的表达量虽较间质细胞少,但有明显的周期性变化,以增生殖期腺上皮细胞表达量较高,分泌早期开始下降,到分泌中晚期表达量极低或不表达。HoxAll基因在月经周期人子宫内膜中的这种表达时空的变化与孕酮受体(PR)非常相似,提示HoxAll基因的表达与卵巢激素及其受体的调控有着密切的关系,HoxAll在分泌中期内膜腺上皮中表达下降是内膜分化的重要指标志。     

原位杂交检测同源框基因HoxA11在人月经周期子宫内膜的表达

了解 Hox A1 1基因在人月经周期子宫内膜的表达及变化 ,探索该基因对正常内膜周期的调节功能。应用地高辛标记的 RNA探针进行原位杂交。 Hox A1 1基因主要在内膜间质细胞中表达 ,增殖期与分泌期比较未见明显差异。腺上皮细胞中 Hox A1 1基因的表达量虽较间质细胞少 ,但有明显的周期性变化 ,以增生殖期腺上皮细胞表达量较高 ,分泌早期开始下降 ,到分泌中晚期表达量极低或不表达。Hox A1 1基因在月经周期人子宫内膜中的这种表达时空的变化与孕酮受体 (PR)非常相似 ,提示 Hox A1 1基因的表达与卵巢激素及其受体的调控有着密切的关系 ,Hox A1 1在分泌中期内膜腺上皮中表达下降是内膜分化的重要指标志。     

NM23-H1B基因mRNA在卵巢上皮性肿瘤组织中表达的研究

目的研究NM23-H1B基因与卵巢上皮性肿瘤的相关性。方法收集2003年4月至2004年2月手术切除的卵巢上皮性肿瘤标本48份,其中卵巢上皮性癌（卵巢癌）40份,卵巢交界性上皮性肿瘤8份,正常卵巢组织标本8份。采用RT-PCR技术、RNA印迹（northern blot）法、原位杂交实验,检测NM23-H1B基因mRNA的表达。结果经RT-PCR方法检测在所有的标本中均有NM23-H1B基因mRNA的表达,在正常卵巢组织中表达较低,而在所有的卵巢肿瘤中表达均高于正常卵巢组织,早期（Ⅰ、Ⅱ期）卵巢癌中的表达高于晚期（Ⅲ、Ⅳ期）。northern blot法检测结果显示NM23．H1B基因mRNA在正常卵巢组织的表达较低,交界性肿瘤中的表达则与正常卵巢组织中相似,而在卵巢癌组织中表达明显增高,在早期卵巢癌中分化好（G1级）者表达明显高于分化较差（G2、G3级）者。原位杂交实验检测结果显示,在所有的卵巢癌标本中NM23-H1B基因mRNA阳性表达率为100％（40／40）,在正常卵巢组织中阳性表达率为0,在8份卵巢交界性肿瘤标本中,有2份NM230H1B基因表达阳性,阳性表达率为2／8。结论NM23-H1B基因与卵巢癌发生发展有相关性。