血清铁的自动化分析法

我们以2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-二乙氨基酚(5-Br-PADAP)为显色剂,建立了双试剂 两点终点法自动化测定血清铁的新方法。该法血清用量少,准确、灵敏、快速,值得临床推 广应用。 　　一、材料和方法 　　1.仪器　UV-2201紫外分光光度计(日本岛津)、日立7060全自动生化分析仪、pH-3 C酸度计(上海雷磁分析仪器厂)。 　　2.试剂　(1)铁标准液：17.90 μmol/L。(2)试剂一：维生素C 1.0 g,Tween- 80 37.5 ml ,硫脲7.5 g,以pH4.0HAc-NaAc缓冲液溶解、混合并稀释至1000 ml。(3)试剂 二：0.2% 5-Br-PADAP乙醇液40.0 ml,盐酸胍(铁解离剂)156g,TritonX-100 7.5 ml,以蒸馏水稀释 至250 ml。     

血清铁5-Br-PADAP直接光度法自动分析试剂盒的研究与评价

目的　研制、评价血清铁 5 - Br- PADAP自动分析法试剂盒。方法　在表面活性剂存在下 ,用 2 - ( 5 -溴 - 2 -吡啶偶氮 ) - 5 -二乙氨基酚 ( 5 - Br- PADAP)作显色剂双试剂两点终点法测定血清铁。结果　该法线性范围 0～ 85 μmol/L,平均回收率为 99.7% ,批内变异系数 ( CV)和批间变异系数分别为 0 .0 1 4%～0 .0 1 6%和 0 .0 1 6%～ 0 .0 2 5 % ,与原子吸收分光光度法比较具有良好的相关性 ,Y=0 .9939X+ 0 .1 1 69,r= 0 .9889,P>0 .0 5。 1 0 7例健康人血清铁含量为 9.2 2～ 2 9.62 μmol/L( x± 2 s)。结论　用该试剂盒双试剂自动化分析法测定血清铁方法简便、灵敏可靠 ,适合临床应用     

缺铁性贫血患儿尿中铁的测定

试剂(全用双蒸水配制)①pH4.5醋酸盐缓冲液:取醋酸钠(CH_3COONa·3H_2O)68克溶于蒸馏水中,加入冰醋酸60ml,并加蒸馏水至1000ml。②储存铁标准液(1ml(?)100μg铁):取莫尔氏盐(NH_4)_2·Fe(SO_4)_2·6H_2O 0.7032克溶于蒸馏水中,加入0.1N硫酸1ml使之酸化,加蒸馏水至1000ml。③应用铁标准液(1ml(?)2μg铁):取储存铁标准液2ml,加蒸馏水至100m1。④10%抗坏血酸。⑤分析纯氯磺酸(HSO_3Cl,分子量116.52)。⑥邻二氮杂菲溶液:在100毫克4,7-二苯-1,10-邻二氮杂菲中加入0.5ml氯磺酸,在通气柜中煮沸30秒,迅速冷却,逐滴加入蒸馏水10ml,仔细混匀,置沸水浴中5分钟以溶解沉淀,将溶液转入200ml容量瓶中,加醋酸盐缓冲液至刻度。此试剂可保存、应用一年。     

5-Br-PADAP测定血清锌方法的探讨及应用

按 M.Ujiie提出的α- (α-吡啶重氮 ) 5-二甲基氨基酚 ( PADAP)作显色剂 ,测定血清锌浓度的新微量法。该法虽灵敏度高 ,操作简便 ,但显色剂来源受限 ,影响使用。现改用 5- Br- PADAP作显色剂进行方法的探讨取得了满意的结果 ,其吸收峰为 560 nm,回收率为 1 0 3.52 %～ 96.38% ,相当于血清在 50～ 2 0 0μg/dl范围成线性。该法具有灵敏度高 ,操作简便 ,测定值准确、可靠等特点 ,值得推广。     

自配试剂代替进口试剂盒测定血清氯

笔者参考意大利Sclavo血清氯测定试剂盒配方,全部采用国产化学试剂自行配制,经过实验对比,结果满意,现将方法及实验结果报告如下: 材料与方法一、原理血清(浆)中的氯离子与硫氰酸汞作用,形成氯化汞并释放出硫氰酸根离子;硫氰酸根离子再与铁离子作用,生成硫氰酸铁而显棕红色,颜色深浅与血清中氯离子含量成正比。二、试剂配制(一)氯标准液(100 mmol/L):上海生物制品所生产。(二)显色液:1.Hg(SCN)_21.9g溶于300ml二甲基亚砜中。2.Fe(NO_3)_3·9HO_2 16.16 g溶于200ml蒸溜水中,加浓硝酸     

触珠蛋白对便潜血单克隆抗体法检测的影响

单克隆抗体便潜血检测灵敏度高 ,不受饮食影响 ,特异性高。但笔者在工作中发现 ,有少数粪便标本在含一定量蛋白时潜血呈阴性 ,当除去蛋白后 ,结果为阳性 ,就这一现象我们进行了探讨。一、主要试剂　万华公司“速而准”便潜血单克隆抗体法试剂盒 ,触珠蛋白 ( HP)标准液 ( 1 g/L,上海亚都生物技术研究所 ) ,血红蛋白 ( Hb)标准液( 1 46g/L,解放军总医院临检科 )。二、方法　 ( 1 )首先试验　用 Hb标准液配成0 .0 0 1 g/L的 Hb液 ,分别取 5ml加入 1号和 2号管 ,1号管继加用标准品配成 0 .0 2 g/L的 HP液0 .5ml,2号管加生理盐水 0 .5ml,混…     

肌酐二点法测定对溶血干扰的排除

Jaffe显色法测定血清肌酐受各种因素影响 ,溶血所致血红蛋白的负干扰现象已有诸多报道。现就苦味酸二点法测定血清肌酐 ,通过适当改变延迟时间和读取吸光度测定时间来排除溶血干扰作一探讨。1　材料和方法1 .1　仪器　 BT2 2 4半自动生化分析仪。1 .2　试剂　肌酐二点法测定试剂盒 ,上海长征公司提供。1 .3　方法　二点法 ,温度 37°C,波长 5 1 0 nm,延迟时间 80s,测定时间 1 5 0 s(原法 :延迟时间 30 s,测定时间 6 0 s)。以蒸馏水调零 ,标准液 5 0μl( 1 32 .6μmol/ L) ,样本为 5 0μl,肌酐应用液 5 0 0μl。2　结果和讨论2 .1　反应时…     

一种新的快速特异的血清铁测定法

国内推荐的亚铁嗪血清铁测定法[1]，血清用量大、费时，而且受铜离子干扰。我们参照有关文献[2，3]，建立一种准确、特异、快速的血清铁测定法。1材料和方法1．1试剂与仪器1．1．1释铁剂：含吐温－200．5ml，硫晚0．5g，抗坏血酸0．1g，共溶于0．1mol／L盐酸溶液并稀释至100ml，4℃存放稳定4～5天。1．1．2显色剂：亚铁嗪5mol／L，于1．5mol／L乙酸钠溶液中。1．1．3铁标准应用液：Fe26．87μmol／L。1．1．4仪器：Beckman700自动生化分析仪或721型分光光度计，微量比色皿（温州东巨试剂厂）。所用试剂为分析纯，试剂配制所用水均为双重…     

IL－10、IFN－γ在Graves眼病中的意义

目的 :观察GO病人血清IL - 10、IFN -γ的变化。方法 :纳入初发的甲状腺功能正常的GO病人 ,使用酶联免疫法检测血清IL - 10、IFN -γ水平。结果 :GO病人血清IFN -γ为 3 36 1± 1 317IU/ml,较正常对照组(1 846± 0 75IU/ml)高 ,两组比较有统计学差异 ,P <0 0 5 ;GO组IL - 10为 383 181± 146 436pg/ml,较正常对照组 (32 7 32 6± 135 948pg/ml)高 ,两组比较无统计学差异 ,P >0 0 5。结论 :TH1/Th2样免疫反应在G0的发病中起一定作用。     

介绍一种测定血清总胆红素的碱性苯甲酸钠——脲法

测定血清总胆红素的苯甲酸钠——脲法有二个缺点:稳定性差:在中性条件下显色,测定结果受溶血及其它色素的影响较大。最近我们对该法进行了改良。建立了碱性苯甲酸钠——脲法。改良的要点是:在碱性条件下显色,改变血清、加速剂及重氮试刺的用量及甲液的浓度。现报道如下。一、试剂 1.15g dl苯甲酸钠——脲溶液(见本期第5页)。 2.甲液:5g对氨基苯磺酸及3ml浓盐酸,用蒸     

用新的水溶性吡啶偶氮染料作显色剂自动分析血清铁

我们以水溶性新吡啶偶氮染料 2 (5 溴 2 吡啶偶氮 ) 5 [(Ｎ ,Ｎ 二羧基甲基 )氨基 ]苯酚 (5 Ｂｒ ＰＡＤＣＡＰ)为显色剂 ,建立了血清铁自动化比色测定的新方法。临床应用表明 ,该法快速、简便 ,使用的水溶性吡啶偶氮染料不污染生化分析仪管道 ,适合全自动分析。1　材料和方法1 1　仪器　日本岛津ＵＶ 2 2 0 1紫外分光光度计、日立 7170全自动生化分析仪、上海雷磁分析仪器厂ｐＨ 3Ｃ酸度计。1 2　试剂1 2 1　铁标准液 17 90 μｍｏｌ/Ｌ。1 2 1　试剂Ⅰ　含维生素Ｃ、表面活性剂、掩蔽剂、血清铁解离剂、ｐＨ6 5ＨＡｃ ＮａＡｃ缓…     

新的色原试剂用于血清铁测定

血清铁测定最常用的色原试剂是亚铁嗪〔3-(2-吡啶基)-5,6-双(4-苯磺酸)-1,2,4-三嗪;ferrozine〕。作者采用新的铁铬合剂ferene-S〔3-(2-吡啶基)-5,6-双(2-〔5-呋喃基磺酸〕)-1,2,14-三嗪〕比亚铁嗪的吸收系数大约高25%。这种新方法既可用手工操作也可用RA-1000分析仪或其它仪器测定。材料及方法:醋酸盐缓冲液。取60ml 醋酸、60g 无水醋酸钠、16g 盐酸羟胺、2ml Triton X—405,70mg neocuproine,加蒸馏水溶解后至1升,     

VP试验的实验室评价

Vp试验常用C′Meara法,Barritt法,Coblentz法,Barry快速法及浸渍试剂的VP纸条法。在试验中经常出现矛盾现象,为此我们对各法进行比较。一、试剂1.O′Meara试剂:肌酸0.3g/dl溶于40%KOH中。2.Barritt试剂:(1)5%α-萘酚无水乙醇溶液。(2)40%KOH。3.Coblentz试剂:(1)5%α-荼酚酒精(95%)溶液。(2)O′Meara     

固相抗球蛋白试验

本文介绍一种借助于机器读数的固相抗球蛋白试验(SPT)。方法:①间接抗球蛋白试验(IAHG);在试管中加3滴血清和1滴3-5%洗涤红细胞悬液,37℃孵育30分钟,生理盐水洗3次,再加滴抗球蛋白试剂,混匀、离心、低倍显微镜看结果。以0-12积分评价结果,0为阴性,12为明显看到最强凝集。②固相物的制备:每支试管加纤维蛋白原溶液0.2ml至管底完全复盖为止。室温(21℃)放置5分钟,用磷酸盐缓冲液(PBS)冲洗3次,再加免疫球蛋白溶液0.1 ml,随后加1%戍二醛(?)滴(约50μl)。室温放置30分钟,再以PBS冲洗2次,以牛血清白蛋白(10g/L)冲洗5分钟以上。然后每管加多特异性抗人球蛋白0.1ml,室温放置5     

不除蛋白的血清5′-核苷酸酶测定法

血清5-核苷酸酶(5-NT)的测定,不外乎根据两个原理:①比色测定释放出的磷;②采用一系列有关的酶促反应。后者需多种保存期有限且代价较高的酶试剂。测磷法试剂简单,可作自动化分析,但现行方法须除蛋白,使操作时间延长,结果精密度减低,方法也不十分敏感。作者结合Lawrence法,利用敏感的氯化亚锡/钼反应来测磷,加入十二烷基硫酸钠可不除蛋白,操作简单,可靠,试剂便宜,且较稳定。试剂①巴比妥盐酸缓冲液(pH7.5在37℃时):将巴比妥钠8.25 g、硫酸锰0.238 g加水溶解并补充体至1升,加120 ml 0.2MHCl,必要时调pH至7.73(20℃),贮于4℃。②基质液:称取5-腺苷酸二钠(AMP·二钠·6H_2O)499.2 mg加水至100ml。按1.0 ml 1份分装后,贮于-20℃。③氯化镍(NiCl_2,     

慢怀肾衰竭血清芳香酯酶活性的变化及临床意义

目的 :研究探讨血清芳香酯酶 ( Ar E)活性在慢性肾衰竭 ( CRF)时的变化规律及其临床意义。方法 :通过测定 5 7例 CRF患者血清 Ar E活性及血脂、脂蛋白、载脂蛋白的浓度 ,然后将患者组和健康对照组进行统计处理 ,对比分析。结果 :CRF患者血清 Ar E活性 ( 0 .2 0 0± 0 .0 4 2 ) U/ ml,Ar E/ TC( 0 .0 4 4± 0 .0 0 3 ) ,Ar E/ HDL- C( 0 .18± 0 .0 4 ) ,Ar E/ HDL3- C( 0 .3 92± 0 .12 0 )水平显著低于对照组。其变化规律与 HDL - C、HDL2 - C、HDL - C/ TC、HDL2 - C/ HDL3- C、Apo- A1 / Apo- B1 0 0 相似 ,且 Ar E的水平与 HDL - C、HDL2 - C、Apo- A1 呈正相关 ,相关系数 r分别为 0 .3 7、0 .5 1和 0 .2 9、Ar E/ TC与 HDL - C/ TC、HDL2 - C/ TC、Apo- A1 / Apo- B1 0 0 的相关系数依次为 0 .60、0 .67、0 .5 7,为正相关关系。血清 Ar E和清蛋白呈正相关 ( r=0 .5 4 3 )而与肌酐呈负相关 ( r=- 0 .3 5 9)。Ar E活性降低先于 TC、HDL - C和 Apo- A1 水平的改变。结论 :血清 Ar E活性是反映 CRF患者并发脂代谢紊乱的较好指标 ,并能提示肾衰竭的严重程度。     

用4-氨基-3-联氨基-5-巯基-1,2,4-三唑作血清甘油三酯的定量测定

作者曾报道用4-氨基-3-联氨基-5-疏基-1,2,4-三唑(AHMT)作血清甘油三酯(TG)定量,该法灵敏度虽为Fletcher法的4倍,但有不足处。本文作者应用Soloni法抽提,从而使测定时间缩短、前处理简化,用酸液溶解AHMT,使显色试剂稳定。试剂①抽提剂,异丙醇/正壬烷,等容。②标准液:将TG溶于抽提剂配成100mg/dl的标准溶液。③皂化剂:将5.6g KOH溶于500ml异丙醇,回流热溶后过滤,取滤液备用。④氧化剂A:含0.003M偏高碘酸钠的1M乙酸溶液。⑤碱液:3M KOH。⑥显色剂:1g AHMT溶于0.5N HCl100ml即成。     

双氧水外用致过敏性休克1例

临床使用注射用头孢菌素类药物先做皮肤过敏试验已有定论 ,但配制方法和皮试液浓度尚无明确统一规定 ,现将我们的配制方法与应用体会介绍如下。1　方法取拟用药物 1支 (0 .5g或 1.0g) ,加生理盐水 (2 .5ml或 5ml)稀释 ,即含 2 0 0g/L ;取上液 0 .1ml加生理盐水至 1ml,含 2 .0g/L ;取上液 0 .1ml加生理盐水至1ml,含 2 .0g/L ;再取上液 0 .15ml加生理盐水至 1ml,含 0 .3g/L(即含 30 0mg/L)。取上液 0 .1ml做皮内注射 ,2 0min后观察反应。判断标准与青霉素皮试相同。2　结果我院自 1999年 1月应用拟用药物做皮试 2 6 3例 ,男 15 6例 ,女 10 7…     

氨基比林的过氧化酶染色法

一、试剂的配制1.染色液:取氨基比林和α-萘酚各2.0g,溶于100ml 无水乙醇中.2.稀双氧水(新鲜配制):在25ml 蒸馏水中加3%双氧水0.3ml.     

以cDNA为内参标RT-PCR定量检测心肌细胞内p53和Bcl-2基因mRNA表达量的方法研究

目的 :探讨 p5 3和 Bcl 2基因在急性心肌梗死时心肌细胞中 m RNA表达量的检测方法。方法 :用以c DNA为内参标的逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测 p5 3和 Bcl 2基因的 m RNA表达量。结果 :p5 3基因 m RNA表达量〔m RNA/总 RNA(ng/ g)〕依次为 :冠脉结扎后 4小时组 (5 76 4 8.78± 19776 .96 ) ng/ g>结扎后 6小时组 (339.0 6± 10 4 .11) ng/ g>结扎后 3小时组 (16 5 .4 4± 33.36 ) ng/ g>结扎后 2小时组 (88.2 5±16 .6 5 ) ng/ g>未结扎 (0 )组 (3.16± 0 .6 9) ng/ g和结扎后 1小时组 (16 .37± 2 .73) ng/ g、8小时组 (2 3.13±7.0 3) ng/ g、 12小时组 (6 .75± 2 .86 ) ng/ g,P均 <0 .0 5 ;Bcl 2基因 m RNA表达量〔m RNA/ g总 RNA(ng/ g)〕:冠脉结扎后 3小时组 (4.5 3± 1.5 9) ng/ g、 4小时组 (0 .0 2± 0 .0 1) ng/ g和 6小时组 (3.4 6±0 .39) ng/ g<结扎后 2小时组 (5 2 .4 8± 14 .18) ng/ g、8小时组 (5 9.2 4± 2 .91) ng/ g<结扎后 1小时组 (77.2 0±12 .4 8) ng/ g和未结扎 (0小时 )组 (81.77± 9.6 2 ) ng/ g<结扎后 12小时组 (99.6 0± 4 .71) ng/ g,P均 <0 .0 5。该种方法能对不同的样本检出不同量的 m RNA含量 ,其特异性强 ,且能检出 0 .0 2 ng/ g的 m RNA含量 ,敏感性高。结论