米非司酮对子宫内膜癌裸鼠移植瘤细胞凋亡调控的研究

目的探讨抗孕激素米非司酮对人子宫内膜癌HHUA细胞裸鼠移植瘤细胞凋亡的调控作用。方法体外培养人子宫内膜癌HHUA细胞,裸鼠皮下接种HHUA细胞建立裸鼠移植瘤动物模型,随机分为2组,分别应用米非司酮、精制花生油治疗4周,应用流式细胞术(FCM)检测各组裸鼠移植瘤细胞周期时相和凋亡率;免疫组化技术检测凋亡基因bcl2、Fas和FasL蛋白的表达情况。结果米非司酮治疗组裸鼠移植瘤细胞G0/G1期比例升高,S期细胞比例(SPF)降低(P<0.05),移植瘤细胞凋亡率为15.03%±2.19%,明显高于对照组(3.06%±1.13%)(P<0.01);移植瘤细胞bcl2蛋白表达水平明显下降,而Fas蛋白表达水平升高,与对照组比较,均有显著性差异(P<0.05)。结论抗孕激素米非司酮通过调节移植瘤细胞周期分布和凋亡基因,抑制肿瘤细胞增殖,诱导细胞凋亡。     

米非司酮对裸鼠子宫内膜癌细胞HHUA移植瘤生长及COX-2、CDK4的影响

背景与目的子宫内膜癌是女性常见的恶性肿瘤,内膜癌中存在COX-2,CDK4的表达,并与肿瘤的发生发展有关,近年来发现米非司酮有抗肿瘤作用,但其作用机制不十分明了,我们研究米非司酮(mifeprisitone,MIF)对人子宫内膜癌HHUA细胞株裸鼠移植瘤生长的抑制作用及对COX-2,CDK4的影响,以确定米非司酮能否通过干预肿瘤中COX-2,CDK4的表达而抑制肿瘤生长。方法体外培养人子宫内膜癌HHUA细胞,裸鼠皮下接种细胞建立裸鼠移植瘤动物模型,随机将10只移植瘤荷瘤裸鼠分为两组,MIF组采用灌胃法[50mg/(kg·d)],对照组灌等量溶剂。观察治疗前后移植瘤的体积变化。免疫组织化学染色法检测移植瘤组织COX-2、CDK4的表达,后采用Leica IM50免疫组织化学评分软件(HSCORE)对染色结果进行半定量分析,HE染色观察肿瘤组织的病理变化。结果治疗6周后,MIF组移植瘤体积(115.25±10.97)mm3,对照组移植瘤体积(313.25±43.92)mm3,两者相比,差异有非常显著性(P<0.01);HE染色见MIF组较对照组移植瘤坏死面积显著增加;MIF组COX-2HSCOREs为(78.2±11.3),对照组(205.9±26.7),两者相比,差异有显著性(P<0.01);MIF组CDK4HSCOREs为(113.4±18.2),对照组HSCOREs为(238.7±35.9),两者相比,差异有非常显著性(P<0.01)。结论MIF具有抑制人子宫内膜癌细胞HHUA裸鼠移植瘤生长的作用;其机制可能与下调COX-2、CDK4的表达有关。     

雌孕激素及米非司酮对人子宫内膜癌细胞体外生长影响及其机制的探讨

目的:探讨雌激素、孕激素及米非司酮对表达不同孕激素受体(PR)亚型的人子宫内膜癌细胞体外生长的影响。方法:体外培养表达不同PR亚型的人子宫内膜癌细胞HECCA(PR-)、HECCA-A(PRA+)、HEC-CA-B(PRB+)及HECCA-AB(PRA+和PRB+),分为对照组、E2组、E2+R5020组和E2+R5020+RU486组,在24、48、72和96 h采用四甲基偶氮唑蓝比色法检测细胞生长情况,流式细胞仪测定96 h各个细胞周期的比例,比较S期细胞比率(SPF值)。结果:雌激素作用72 h后,四株细胞生长及SPF值明显高于对照组,P<0.05;E2+R5020作用72 h后,HECCA-B及HECCA-AB细胞生长均较E2组减慢,S期细胞比率下降,P<0.05;E2+R5020+RU486作用72 h后HEC-CA-B、HECCA-AB生长明显快于E2+R5020组,S期细胞比率明显升高,P<0.05,而HECCA细胞生长及S期细胞比率明显低于E2组及E2+R5020组,P<0.05。结论:雌激素促进子宫内膜癌细胞的生长,孕激素主要通过PRB的介导拮抗雌激作用。米非司酮在表达PRB细胞拮抗孕激素的...     

丁酸钠对子宫内膜癌抑制作用的裸鼠体内实验研究

目的:探讨丁酸钠(NaB)对人 子宫内膜癌细胞株HHUA裸鼠皮下移 植瘤的生长抑制作用及其作用机制。方 法:将2×107个人子宫内膜细胞株 HHUA细胞接种于裸鼠皮下,建立 HHUA皮下移植瘤模型,然后随机分成 两组,实验组用NaB治疗,对照组用 PBS,治疗4～6周。治疗过程中定期测 量肿瘤大小,于治疗结束时取肿瘤组织 切片进行HE染色、电镜观察和TUNEL 标记,取心、肝、肾组织切片进行药物毒 性评估。结果:实验组裸鼠生长良好,无 明显毒性反应。心、肝、肾组织切片光镜 下检查未见异常。在NaB治疗过程中 肿瘤体积逐渐缩小,而对照组肿瘤体积 逐渐增大。光镜和透射电镜下可见实验 组出现大量凋亡细胞,TUNEL法进一步 分析显示实验组肿瘤细胞凋亡率显著高 于对照组,P<0.01。结论:NaB对裸鼠 皮下移植瘤有明显的生长抑制作用,其 机制可能与NaB诱导肿瘤细胞凋亡有 关。治疗剂量的NaB对裸鼠心、肝、肾组 织无毒性。     

雷帕霉素抑制子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长活体成像的观察

目的:观察雷帕霉素(RA-PA)对不同PTEN表达子宫内膜癌裸鼠移植瘤的抑制作用。方法:通过慢病毒转染构建稳定表达绿色荧光蛋白(GFP)的HEC-1A(PTEN阳性)和Ishikawa(PTEN阴性)细胞株,建立裸鼠移植瘤模型。活体成像系统观察肿瘤的生长情况。观察RAPA治疗后肿瘤的体积及重量的变化。HE染色观察肿瘤的病理形态学变化。结果:建立稳定表达GFP的子宫内膜癌细胞系及裸鼠移植瘤模型,活体荧光成像显示,治疗组裸鼠荧光强度较对照组明显减弱。治疗组肿瘤体积及重量明显小于对照组(P<0.05),Ishikawa细胞组的抑瘤率(67.1%)较高于HEC-1A细胞组的抑瘤率(48.1%)。治疗组的肿瘤组织可见大片肿瘤细胞坏死,对照组肿瘤细胞坏死少。结论:RAPA对PTEN阳性及阴性的子宫内膜癌生长均有明显的抑制作用,PTEN的丢失可增加RAPA抗子宫内膜癌的敏感性。     

通路抑制剂LY294002对子宫内膜癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的:观察磷脂酰肌醇3激酶通路抑制剂LY294002对子宫内膜癌裸鼠移植瘤细胞增殖、凋亡及p-AKT表达的影响.方法:体外培养人子宫内膜癌Ishikawa细胞,12只裸鼠皮下接种Ishikawa细胞后建立子宫内膜癌裸鼠移植瘤模型,随机分为2组,每组6只,分别给予腹腔注射生理盐水和LY294002干预,观察2组移植瘤的生长情况,绘制肿瘤生长曲线,计算移植瘤体积、抑瘤率等,观察药物对移植瘤的抑制作用,移植瘤组织标本进行HE染色镜下观察移植瘤的坏死程度、范围及细胞凋亡情况,并用免疫组织化学方法检测移植瘤组织内p-AKT的表达.结果:1)用药组裸鼠移植瘤体积增长相对缓慢(2 027.30±251.16)mm3,对照组肿瘤体积增长明显(3 110.60±599.66)mm3,差异有统计学意义(t=4.082,P=0.005),且抑瘤率为(32.49±16.39)%.2)HE染色见用药组较对照组移植瘤细胞凋亡及坏死面积显著增加;免疫组化结果显示用药组p-AKT的表达低于对照组(χ2=6.133,P<0.05).结论:PI3K通路抑制剂LY294002能够抑制子宫内膜癌裸鼠移植瘤的生长,促进其凋亡.     

丁酸钠对人卵巢癌KK细胞和子宫内膜癌HHUA细胞生长的抑制作用

目的：探讨丁酸钠（NaB）对人卵巢癌KK细胞和子宫内膜癌HHUA细胞生长的影响和分子机制及其作为新型抗肿瘤药物的潜力。方法：NaB作用于体外培养的人卵巢癌细胞系KK和人子宫内膜癌细胞系HHUA，用HE染色及DNA荧光染色观察细胞形态学及染色质改变，用流式细胞仪定量分析细胞周期分布及细胞凋亡，用2％琼脂糖凝胶电泳检测DNA ladder，用Western blot分析PARP，Fas,Bcl-2和Bax蛋白表达。结果：NaB处理两种细胞24小时后，低浓度（≤2mol/L）出现细胞周期停止，G1期细胞百分率达70％以上；中浓度（4mol/L和10mol/L）出现典型凋亡细胞的形态学和染色质改变，高浓度（＞10mol/L）则引起细胞坏死。Western blot分析显示NaB能上调HHUA细胞Fas蛋白表达，而Bcl-2和Bax蛋白表达水平不变。结论：NaB通过诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡而抑制HHUA和KK细胞生长，浓度不同细胞的反应性也不同，低浓度诱导细胞周期G1期阻滞，中浓度诱导细胞凋亡，NaB对细胞生长的抑制作用具有药物浓度和时间依赖关系，其诱导HHUA细胞凋亡的机制可能与上调Fas蛋白表达有关。NaB对HHUA和KK细胞生长的影响提示其有可能成为一种新型抗肿瘤药物。     

丁酸钠对人子宫内膜癌细胞系HHUA细胞增殖影响的研究

目的 :探讨丁酸钠 (NaB)对人子宫内膜癌细胞系HHUA细胞体外增殖的影响及机制。方法 :不同浓度的NaB作用于体外培养的人子宫内膜癌细胞系HHUA ,通过绘制细胞生长曲线观察NaB对细胞生长的抑制作用 ;用流式细胞仪定量分析细胞周期分布 ;用WesternBlot分析p2 1、p5 3、pRb和E2F1蛋白表达。结果 :NaB能诱导HHUA细胞周期G1期阻滞 ,上调p2 1蛋白表达 ,促进pRb去磷酸化 ,下调E2F1和p5 3蛋白表达。结论 :NaB能抑制HHUA细胞体外生长 ,其诱导细胞周期G1期阻滞可能与p2 1等细胞周期调节蛋白的表达改变有关。     

丁酸钠对人子宫内膜癌细胞系HHUA细胞增殖影响的研究

目的：探讨丁酸钠(NaB)对人子宫内膜癌细胞系HHUA细胞体外增殖的影响及机制。方法：不同浓度的NaB作用于体外培养的人子宫内膜癌细胞系HHUA，通过绘制细胞生长曲线观察NaB对细胞生长的抑制作用；用流式细胞仪定量分析细胞周期分布；用Western Blot分析p21、p53、pRb和E2F1蛋白表达。结果：NaB能诱导HHUA细胞周期G1期阻滞，上调p21蛋白表达，促进pRb去磷酸化，下调E2F1和p53蛋白表达。结论：NaB能抑制HHUA细胞体外生长，其诱导细胞周期G1期阻滞可能与p21等细胞周期调节蛋白的表达改变有关。     

依西美坦对子宫内膜癌细胞HHUA体外增殖的抑制作用

背景与目的:子宫内膜癌发生发展与雌激素相关,芳香化酶抑制剂依西美坦可以竞争性灭活芳香化酶,降低雌激素水平,影响细胞的凋亡。本实验观察芳香化酶抑制剂依西美坦对子宫内膜癌细胞HHUA体外增殖凋亡活性及芳香化酶P450、雌激素受体(ER)、Survivin表达的影响,以确定依西美坦能否抑制子宫内膜癌的生长及其可能的作用机制。方法:应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度依西美坦作用的子宫内膜癌HHUA细胞的吸光度(A);应用流式细胞仪(FCM)检测6×10-7mol/L依西美坦作用的子宫内膜癌HHUA细胞的凋亡率;采用免疫组化法检测依西美坦作用的子宫内膜癌HHUA细胞的ER、Survivin蛋白表达变化;应用RT-PCR法检测依西美坦作用的子宫内膜癌HHUA细胞P450、survivin mRNA转录。结果:不同浓度依西美坦对HHUA细胞体外增殖有抑制作用,增加细胞凋亡率。依西美坦显著下调ER、Survivin蛋白表达(P<0.05)。依西美坦浓度为6×10-7mol/L,培养72 h,HHUA细胞ER、Survivin蛋白表达染色评分分别为2.62±0.36和1.89±0.57,与对照组染色评分3.77±0.12和3.47±0.15比较,差异有显著性(P<0.05)。同样条件下,P450 mRNA光密度比值为1.67±0.15,对照组2.94±0.25,两者相比,差异有显著性(P<0.05)。survivin mRNA光密度比值为1.56±0.14,对照组2.57±0.21,两者相比,差异有显著性(P<0.05)。结论:依西美坦对子宫内膜癌细胞HHUA有增殖抑制和促凋亡作用,其抗肿瘤作用可能与降调P450、ER、survivin表达有关。     

miRNA在肝癌发生与转移中的研究进展

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是我国常见的恶性肿瘤。转移、扩散是其预后不良的主要原因。因此,探索肿瘤发生、发展和侵袭转移的分子机制,寻求新的治疗靶点,对于提高肝癌的疗效具有重要意义。microRNA简称为miRNA,通常长度为19-25个核苷酸,广泛存在于真核生物中,是一类高度保守的非编码的小分子单链RNA。miRNA通过与靶mRNA3’-UTR区完全或部分互补结合,导致靶区降解或转录后翻译抑制,从而调控靶基因的表达。miRNA具有癌基因和抑癌基因的作用,直接或间接参与肝癌发生和发展。     

CXCL12对宫颈癌细胞放射敏感性影响的实验研究

目的 探讨趋化因子12（CXCL12）在调控宫颈癌放疗敏感性中的作用。方法 采用阳离子脂质体法将CXCL12 siRNA转染至宫颈癌HeLa细胞（siRNA转染组）,另设置空白对照组和阴性对照组。采用不同剂量（4、8 Gy）照射上述各组HeLa细胞, CCK-8法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,ELISA法和实时荧光定量PCR（QPCR）检测CXCL12表达变化,流式细胞仪检测CD44表达。结果 接受4 、8 Gy照射后siRNA转染组的细胞存活率分别为62.0％和44.0％,低于阴性对照组的79.0％和59.0％,差异有统计学意义（P＜0.05）;接受4 、8 Gy照射后siRNA转染组的细胞凋亡率分别为28.0％和51.0％,高于阴性对照组的21.0％和39.0％,差异有统计学意义（P＜0.05）。接受4 、8 Gy照射后siRNA转染组的CD44蛋白表达量为1.33±0.02和1.40±0.01,低于阴性对照组的1.55±0.02和1.85±0.02,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 沉默CXCL12可通过抑制细胞增殖、促进细胞凋亡来增加宫颈癌细胞的放射敏感性,CXCL12可能为宫颈癌放疗提供新的增敏靶点。     

抗肿瘤药物对肾上腺机制影响的研究进展

多种抗肿瘤药物如激素类、化疗、靶向药物和免疫检查点抑制剂在发挥抗癌作用的同时对内分泌腺具有毒性作用,其中对肾上腺的影响逐渐受到临床重视。药物治疗相关的肾上腺功能不全若无法及时诊治,可导致肾上腺危象的发生甚至危及生命。本文将就抗肿瘤药物对肾上腺机制影响进行综述,为临床防治肿瘤患者的肾上腺功能异常提供指导。