SLE患者外周血Tc1/Tc2与CD4/CD25双阳性细胞关联性分析

目的分析SLE患者外周血CD8淋巴细胞分泌的细胞因子与CD4/CD25双阳性细胞反应格局与疾病的关联性.方法用三色免疫荧光单细胞染色法检测了11例SLE患者外周血CD8T细胞分泌的细胞因子与CD4/CD5双阳性细胞的表达.结果所检测11例SLE患者中有3例表现为Tc0,即同时分泌IFN-γ和IL-4的Tc细胞.4例以分泌IFN-γ为主,为Tc1,4例以分泌IL-4为主,为Tc2.同时测定了SLE病人与正常对照组CD4/CD25双阳性细胞群发现CD4/CD25双阳性细胞群在活动期SLE中显著低下[(17.54±4.11%)%,而对照组为(35.42±3.30)%].结论SLE患者外周血中CD8亚群表现为异质性,且与CD4/CD25双阳性细胞有关.至于其在SLE发病中的意义正在进一步研究中.     

乙型肝炎外周血Th1/Th2、Tc1/Tc2表达失衡的临床意义

目的探讨Th1/Th2、Tc1/Tc2细胞因子在乙型肝炎中的表达及临床意义。方法采用流式细胞术分析乙型肝炎患者外周血不同T淋巴细胞亚群中细胞因子(IFN-γ、IL-4)的表达,分别比较急慢性乙型肝炎以及慢性轻、中、重度肝炎IFN-γ、IL-4表达水平的变化。结果慢性肝炎Th2、Tc2细胞高于急性肝炎(P<0.01;P<0.05);相对于轻度组,中度Th1、Tc1以及重度组Th1、Tc1均有升高(P<0.01),相对于中度组,重度组Th1、Tc1亦有增高(P<0.05;P<0.01)。结论乙型肝炎外周血Th2、Tc2与炎症慢性化有关;随着慢性乙型肝炎活动程度的加剧Th1、Tc1细胞逐渐增多。     

慢性乙型肝炎患者CD_4~＋CD_（25）~＋调节性T细胞及部分细胞因子的变化

目的研究慢性乙型肝炎（CHB）患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞和血清IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ和TGF-β的变化,探讨其与乙型肝炎慢性化的关系。方法选择24例CHB患者作为CHB组、8例急性乙型肝炎（AHB）患者作为AHB组,12例健康体检者作为正常对照组,流式细胞仪检测各组CD4＋CD25＋调节性T细胞的百分率,ELISA双抗体夹心法检测慢性乙型肝炎组和正常对照组上述5种细胞因子的水平。结果 CHB组CD4＋CD25＋调节性T细胞百分率均明显高于AHB组和正常对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）。CHB组和AHB组的CD4＋CD25＋Treg百分率与血清HBV-DNA及ALT之间无相关关系（P〉0.05）。CHB组血清IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ和TGF-β水平均高于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）。CHB组IL-2及IFN-γ分别与ALT正相关（P〈0.05）。结论慢性乙型肝炎患者存在免疫紊乱,CD4＋CD25＋调节性T细胞和Th1/Th2细胞的失衡与乙型肝炎慢性化有关。     

CD_4~+CD_(25)~(high)Tr和CTLA-4与炎症性肠病的关系研究

目的研究炎症性肠病(IBD)患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞(CD4+CD25highTr)及其表面功能性标志性分子细胞毒T淋巴细胞相关抗原(CTLA-4)水平的变化,分析其在IBD发病中的意义。方法采用流式细胞仪测定50例IBD患者,包括克罗恩病(CD)30例与溃疡性结肠炎(UC)20例,以及性别与年龄相配健康对照者(n=29)外周血CD4+CD25highTr及其CTLA-4,并进行对比分析。结果 IBD患者外周血CD4+CD25highTr水平明显低于健康对照组(P0.05);IBD患者外周血CTLA-4水平明显低于健康对照组(P0.05);IBD组患者外周血CD4+水平与健康对照组比较无明显差异;而CD与UC患者组间各指标对比无统计学意义。结论在IBD患者外周血中CD4+CD25highTr及CTLA-4均明显低于正常对照组,提示具有免疫抑制活性的调节性T细胞亚群缺乏或功能缺陷可能在IBD的发病中起着重要作用。     

CD4+CD25+调节性T细胞及其与GVHD的关联性

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞是一群表型和功能特异的T细胞亚群，具有免疫无能和免疫抑制两大特性，通过细胞直接接触或分泌抑制性细胞因子发挥对CD4^＋CD25^＋T细胞的抑制作用。GVHD是异基因造血干细胞移植最严重的并发症之一，近来有关CD4^＋CD25^＋调节性T细胞与GVHD关联性的研究得出了两种截然相反的结论，即该类细胞可有效防治GVHD的发生及该类细胞与GVHD的发生率成正比。这一研究结果的明确将为GVHD的临床治疗提供新的思路。本文就CD4^＋CD25^＋调节性T细胞及其免疫表型、特性、免疫调节作用机制及CD4^＋CD25^＋T细胞与GVHD的关联性的一些新的研究进展作一综述。     

循环毒毒蛇咬伤患者外周血Th1/Th2细胞因子的表达及意义

目的分析外周血Th1/Th2细胞因子在循环毒毒蛇咬患者中的表达,探讨其在病情评估中的意义。方法收集2016年3月至2017年10月循环毒毒蛇咬伤患者108例,根据国际蛇伤诊断标准分为轻度蛇咬伤组82例与重度蛇咬伤组26例,另外选择同期体检健康者30例为对照组。通过流式细胞术检测并比较分析各组患者T淋巴细胞亚群的分布情况及外周血Th1/Th2细胞因子的表达。结果与对照组比较,重度蛇咬伤组CD3^+、CD4^+T淋巴细胞水平偏低(P<0.01);细胞因子IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α表达水平升高(P<0.05)。蛇咬伤组两两比较,重度蛇咬伤组CD3^+、CD4^+T淋巴细胞水平低于轻度蛇咬伤组(P<0.05),IL-4、IL-6、TNF-α表达水平均高于轻度蛇咬伤组(P<0.05)。结论循环毒毒蛇咬伤患者中存在有明显的T淋巴细胞数量的改变和Th1/Th2细胞因子表达紊乱,且与病情严重程度相关。     

白三烯受体拮抗剂对毛细支气管炎外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg的影响及疗效观察

目的探讨白三烯受体拮抗剂(孟鲁司特)对毛细支气管炎患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的影响并观察其疗效。方法将48例毛细支气管炎患儿按入院顺序分成孟鲁司特干预组和常规治疗组,常规治疗组采取综合治疗,孟鲁司特干预组在综合治疗的基础上加用孟鲁司特4 mg,每晚1次口服。检测2组患者治疗前后外周血中CD4+CD25+Treg的水平,并观察2组患者咳嗽、喘憋、肺部体征的持续时间。结果治疗前2组患儿外周血CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞的百分比均明显低于健康对照组,差异有统计学意义(P0.01);治疗后孟鲁司特干预组外周血中CD4+CD25+Treg水平较常规治疗组显著上升(P0.05),同时咳嗽、喘憋、肺部体征持续时间与常规治疗组比较有统计学意义(P0.01)。结论孟鲁斯特纳可缩短病程,提高毛细支气管炎患儿外周血CD4+CD25+Treg的水平,在毛细支气管炎的治疗中起重要作用。     

肾癌患者外周血Th1/Th2和Tc1/Tc2细胞因子的表达

目的检测不同临床分期肾癌患者外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞中细胞因子的表达水平,分析Th1/Th2及Tc1/Tc2漂移对肾癌发生和转移的临床意义。方法用流式细胞仪检测60例不同分期肾癌患者和40例正常对照者外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞分泌的IFN-γ、IL-2、TNF-α、IL-4、IL-6和IL-10的表达水平。结果与正常对照组相比,无症状型肾癌患者各细胞因子的表达无明显差异,而局限型患者Th1、Tc1类细胞因子IFN-γ、IL-2和TNF-α分泌水平降低(P<0.01),局部进展型和转移型肾癌患者Th1、Tc1类细胞因子IFN-γ、IL-2和TNF-α分泌水平明显下降(P<0.01);而Th2、Tc2类细胞因子IL-4、IL-6(P<0.05,P<0.01)分泌水平升高。结论 Th1/Th2偏移和Tc1/Tc2偏移促进了晚期肾肿瘤的进展和转移。T淋巴细胞亚群改变导致免疫功能失调,使肿瘤细胞发生免疫逃逸。     

慢性乙型肝炎患者CD4+CD25+调节性T细胞及部分细胞因子的变化

目的研究慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞和血清IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ和TGF-β的变化,探讨其与乙型肝炎慢性化的关系。方法选择24例CHB患者作为CHB组、8例急性乙型肝炎(AHB)患者作为AHB组,12例健康体检者作为正常对照组,流式细胞仪检测各组CD4+CD25+调节性T细胞的百分率,ELISA双抗体夹心法检测慢性乙型肝炎组和正常对照组上述5种细胞因子的水平。结果 CHB组CD4+CD25+调节性T细胞百分率均明显高于AHB组和正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。CHB组和AHB组的CD4+CD25+Treg百分率与血清HBV-DNA及ALT之间无相关关系(P>0.05)。CHB组血清IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ和TGF-β水平均高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。CHB组IL-2及IFN-γ分别与ALT正相关(P<0.05)。结论慢性乙型肝炎患者存在免疫紊乱,CD4+CD25+调节性T细胞和Th1/Th2细胞的失衡与乙型肝炎慢性化有关。     

RA患者外周血CD4/CD8 T细胞比值及CD4+ CD25+ T细胞的检测及其临床意义

目的 观察活动期类风湿性关节炎（RA）患者外周血T细胞CD4／CD8比值及CD4^＋ CD25^＋T细胞（Tn细胞）的数量,探讨其在RA诊治中的价值。方法 用流式细胞术检测CD4^＋ CD25^＋T细胞及TR细胞的数量。结果 49例急性期RA患者的CD4／CD8比值和TR细胞数量显著高于正常人群组。28例RA患者治疗后的TR细胞数量显著高于治疗前,而CD4／CD8比值的变化无统计学意义。结论 RA治疗后症状改善患者,TR细胞数量明显上升,RA的发病和发展与该细胞数量密切相关。     

CD4+CD25+ T细胞发育调控模型的建立及其意义

目的 建立小鼠胸腺CD4^＋CD25^＋双阳性T细胞发育调控的模型,为天然调节性T细胞调控研究提供基础平台。方法 采用14.5天龄胚鼠胸腺进行体外培养,以FACS检测不同时间点胸腺CD4^＋CD25^＋细胞的变化,同时计数每个胸腺小叶的细胞数变化。结果体外胸腺培养的第1-6天胸腺细胞比例、细胞数量趋势变化与胸腺体内发育的第14.5、15、16、17、18、19天CD4^＋CD25^＋双阳性T细胞的比例、细胞数量的趋势变化相似;在胸腺体外培养的第1-6天,CD4^＋CD25^＋T细胞占CD4^＋T细胞的比例分别为58.29%、12.14%、6.08%、17.78%、9.06%、4.04%,占CD25^＋T细胞的比例分别为3.75%、10.81%、17.20%、51.93%、61.64%、80.06%,这一发育趋势与体内结果具有一致性。结论 体外培养的CD4^＋CD25^＋双阳性胸腺细胞数量和比例变化与体内发育变化趋势一致,这将为天然调节性T细胞的调控研究提供有效的参考依据。     

CD4+CD25+Foxp3+T调节细胞与小鼠异基因造血干细胞移植GVHD相关性研究

目的探讨CD4 CD25 foxp3 调节性T细胞与小鼠GVHD发生的相关性。方法取8～10周龄的SPF级CB6F1小鼠(H-2b/d,♀)30只,随机分为正常对照组、同基因移植组和GVHD组,每组10只,正常对照组不接受照射和移植,同基因移植组小鼠照射后接受CB6F1小鼠骨髓细胞(1×107)和脾细胞(3×107),GVHD组小鼠照射后接受C57BL/6(H-2b,♂)小鼠骨髓细胞(1×107)和脾细胞(3×107)。在发生GVHD的时间点检测3组小鼠脾细胞CD4 CD25 T细胞和foxp3 mRNA的表达。结果正常对照组、同基因移植组和GVHD组小鼠脾细胞中CD4 CD25 T细胞的比例分别为(8.47±1.03)%、(15.40±0.80)%和(24.03±0.85)%,均有显著性差异(P<0.01)。GVHD组小鼠脾细胞foxp3 mRNA的表达水平明显低于正常对照组和同基因移植组,有显著性差异(P<0.001)。结论CD4 CD25 foxp3 调节性T细胞与小鼠GVHD发生呈负相关,发生GVHD时小鼠脾细胞中CD4 CD25 foxp3 调节性T细胞明显减低。     

慢性乙型肝炎外周血T淋巴细胞亚群CD4+/CD25+和CD8+/CD28-的研究

目的 通过对慢性乙型肝炎患者外周血中CD4+/CD25+和CD8+/CD28-调节性淋巴细胞的分析,探讨其与慢性乙型肝炎患者临床状态的关系.方法 采用流式细胞技术多色荧光分析法,对280例慢性乙型肝炎患者、28例慢性病毒携带者以及22例健康体检者外周血中CD4+/CD25+和CD8+/CD28-淋巴细胞测定.结果 慢性病毒携带者外周血中CD4+/CD25+调节性淋巴细胞为(3.23±1.37)%,明显高于慢性乙型肝炎患者(1.85±1.38)%和正常健康对照(1.59±0.54)%(P＜0.05),但慢性乙型肝炎患者与正常健康对照差别无统计学意义(P＞0.05);而且HBeAg阴性慢性乙型肝炎(1.66±1.09)%与HBeAg阳性慢性乙型肝炎(1.96±1.43)%比较,差别无统计学意义(P＞0.05).慢性乙型肝炎患者和慢性病毒携带者外周血中CD8+CD28-调节性淋巴细胞分别为(79.53±16.07)和89.30±5.12)%,均明显高于正常健康对照(63.93±7.85)%(P＜0.05);另外,HBeAg阳性慢性乙型肝炎组(87.47±17.82)%,也明显高于HBeAg阴性慢性乙型肝炎组(64.90±15.26)%(P＜0.05).结论 慢性病毒携带者处于病毒携带状态可能与体内调节性淋巴胞CD4+/CD25+和CD8+/CD28-的升高有关.     

NOD鼠体内CD_4~+NKG2D~+T细胞与CD_8~+T细胞间关系

目的探讨NOD鼠体内CD_4~+NKG2D~+T细胞与CD_8~+T细胞间关系。方法动态监测NOD鼠外周血中CD_4~+NKG2D~+T及CD8+NKG2D~+T细胞在不同周龄频率。利用IGRP206-214特异性CTL清除的NOD鼠,对其外周血中CD_4~+NKG2D+/CD_4~+T及CD8+NKG2D+/CD_8~+T细胞频率进行分析。将磁珠分选所得CD_4~+NKG2D~+T细胞分别与经CFSE标记的纯CD_4~+NKG2D-T细胞、CD_8~+T细胞共培养4 d,检测体系中CD_4~+NKG2D-T细胞、CD_8~+T细胞CFSE的荧光强度变化。结果 NOD鼠外周血CD_4~+NKG2D+/CD_4~+T及CD8+NKG2D+/CD_8~+T细胞频率均随其1型糖尿病疾病进程发展逐渐升高,且二者之间呈正相关。IGRP206-214特异性CTL清除的NOD鼠,外周血中CD_4~+NKG2D+/CD_4~+T细胞频率随CD8+NKG2D+/CD_8~+T细胞频率降低显著下降。与单独培养的CD_4~+NKG2D-T细胞相比,加入CD_4~+NKG2D~+T细胞的培养体系中,CD_4~+NKG2D-T细胞增殖加快。但CD_4~+NKG2D~+T细胞对CD_8~+T增殖作用不明显。结论 NOD鼠体内存在着一群与1型糖尿病疾病进程正相关的CD_4~+NKG2D~+T细胞,且该群细胞极有可能是通过直接作用于CD_4~+NKG2D-T细胞而间接对CD_8~+T细胞产生作用。     

半乳凝素-10在CD4^＋CD25^＋CD127^low／-调节性T细胞中的表达与意义

目的探讨半乳凝素-10(galectin-10)在CD4 CD25 CD127low/-调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)中的表达及其与Foxp3的相关性。方法通过流式细胞术分选健康人外周血和胃癌患者癌旁淋巴结中Treg细胞与CD4 CD25-CD127 T细胞,经微量抽提RNA后,用RT-PCR检测galectin-10和Foxp3的mRNA表达水平。结果galectin-10和Foxp3的mRNA显著表达于Treg细胞,几乎不表达于CD4 CD25-CD127 T细胞。健康人外周血和胃癌患者癌旁淋巴结中的结果一致。结论ga-lectin-10基因高表达于Treg细胞中,可以作为Treg细胞一项新的标志物。     

肺癌患者外周血CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞的表达及临床意义

目的通过研究肺癌患者外周血中CD4 CD25 FOXP3 调节性T淋巴细胞的变化,探讨肺癌的发病机制。方法用荧光标记的单克隆抗体染色外周血单个核细胞,利用流式细胞仪检测CD4 CD25 FOXP3 调节性T淋巴细胞的改变。结果肺癌患者外周血CD4 CD25 FOXP3 调节性T淋巴细胞显著增多。结论CD4 CD25 FOXP3 调节性T淋巴细胞的增多与机体的免疫力下降以及肿瘤的发生发展有一定关系。