大麻素受体2激动剂在谷氨酸氧化应激损伤中保护作用实验研究

目的:评价大麻素受体2(CB₂受体)通过抗氧化应激机制在谷氨酸对共培养小胶质细胞和神经元损伤中的保护作用。方法:采用随机数字表法将培养的N9小胶质细胞和HT22神经元分为四组(n=24):对照组(Con组)、谷氨酸组(Glu组)、CB₂受体激动剂AM1241+谷氨酸组(AM1241+Glu组)和AM1241+CB₂受体拮抗剂AM630+谷氨酸组(AM1241+AM630+Glu组)。Con组正常培养24 h; Glu组用含10 mmol/L谷氨酸的培养基孵育24 h; AM1241+Glu组用含2μmol/L AM1241和10 mmol/L谷氨酸的培养基孵育24 h; AM1241+AM630+Glu组含2μmol/L AM1241、6μmol/L AM630及10 mmol/L谷氨酸的培养基孵育24 h。采用MTT法测定细胞活力,采用化学比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)的含量。结果:与Con组比较,Glu组和AM1241+AM630+Glu组细胞活力和SOD活性降低,LD...     

乌司他丁对脑出血模型兔血清基质金属蛋白酶-9、半胱天冬氨酸蛋白酶-3的影响

目的观察乌司他丁对脑出血模型兔血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的影响,探讨乌司他丁的脑保护作用。方法将造模成功的20只新西兰兔随机分为脑出血模型组(模型组)和乌司他丁治疗组(治疗组),每组10只。分别给予生理盐水和乌司他丁注射液,静脉推注,共7天。应用ELISA法测定各组兔脑出血后第1、3、5、7天动脉血基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)含量。结果与模型组比较,治疗第1天治疗组MMP-9[(951.72±216.35)ng/L]、Caspase-3[(58.11±5.07)μmol/mL]差异无统计学意义(P0.05);治疗第3、5、7天,治疗组MMP-9[分别为(887.02±205.77)ng/L、(892.79±123.94)ng/L、(858.90±97.37)ng/L]及Caspase-3[分别为(58.00±4.99)μmol/mL、(49.05±9.30)μmol/mL、(48.22±10.28)μmol/mL]含量均明显下降,差异有统计学意义(P均0.05)。结论乌司他丁可下调脑出血模型兔血清MMP-9及Caspase-3含量,对脑出血具有一定的脑保护作用。     

冬凌草甲素对内皮细胞炎症因子表达的影响

目的：研究冬凌草甲素（ oridonin）对高糖高脂诱导的人脐静脉内皮细胞（ HUVECs）炎症反应的影响。方法体外培养HUVECs,将细胞分为空白对照组、高糖高脂组（给予33μmol/L葡萄糖+500μmol/L棕榈酸作用48 h）、高糖高脂+2.5μmol/L oridonin预处理组（给予2.5μmol/L oridonin预处理后,给予高糖高脂处理,以下简称2.5μmol/L oridonin组）、高糖高脂+5μmol/L oridonin预处理组（给予5μmol/L oridonin预处理后,给予高糖高脂处理,以下简称5μmol/L oridonin组）。酶联免疫吸附法（ ELISA）检测上清液中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素6（IL-6）的浓度,以观察细胞的炎症情况。结果高糖高脂组HUVECs细胞上清中炎症因子TNF-α、IL-6浓度明显高于空白对照组（t=14.77、14.05,P均<0.01）。与高糖高脂组相比,2.5μmol/L oridonin组、5μmol/L oridonin组HUVECs细胞上清中炎症因子TNF-α（t=-4.81、-9.07,P均<0.01）及IL-6（t=-4.23、-10.06,P均<0.01）的浓度明显下降。结论冬凌草甲素能抑制高糖高脂诱导的HU-VECs细胞炎症反应。     

脓毒症相关肺损伤中内质网应激诱导的铁死亡机制研究

目的 探讨急性呼吸窘迫综合征(ARDS)中内质网应激(ERs)诱导的铁死亡机制。方法 为了确定LPS对小鼠毛细血管肺泡上皮细胞(MLE12细胞)氧化应激和Fe²⁺水平的影响,用LPS(0、1、2、5μg/ml)处理细胞24 h。将MLE12细胞分为对照(Con)组、脱铁抑制剂(Fer-1)组、LPS组和LPS+Fer-1组以验证铁死亡在脂多糖(LPS)诱导的细胞死亡中的作用。LPS+Fer-1组用10μmol/L Fer-1预处理6 h,随后将细胞暴露于5μg/ml LPS 24 h; Con组用融媒DMSO处理24 h, Fer-1组用10μmol/L Fer-1预处理6 h,随后用DMSO处理24 h; LPS组将细胞暴露于5μg/ml LPS 24 h。将MLE12细胞分为Con+载体(Vector)组、Con+序列相似性家族134成员B(FAM134B)组、LPS+Vector组、LPS+FAM134B组,细胞用Vector或FAM134B过表达质粒转染48 h后,暴露或不暴露于5μg/ml LPS 24 h。使用CCK-8法测定细胞活力;测量不同组的丙二...     

高尿酸痛风患者给予非布司他辅助治疗临床 疗效及安全性

目的 探讨高尿酸痛风患者给予非布司他辅助治疗临床疗效和安全性.方法 方便选取2014年2月—2017年3月该院收治80例高尿酸痛风患者随机分为非布司他组(非布司他治疗,40例)和别嘌呤组(别嘌呤醇片治疗,40例),比较两组患者治疗后尿酸水平、 疗效及不良反应发生率.结果 治疗前两组患者尿酸水平比较差异无统计学意义[(821.2±132.5)μmol/L vs(816.9±164.0)μmol/L,P>0.05];治疗1、2、3个月非布司他组患者尿酸水平均显著低于别嘌呤组[(543.1±53.1)μmol/L vs(653.7±49.8)μmol/L,(351.3±36.8)μmol/L vs(511.2±49.8)μmol/L,(311.6±40.7)μmol/L vs(423.7±38.2)μmol/L,P<0.05].非布司他组患者疗效显著于别嘌呤组[95.00%vs.75.00%,P<0.05].非布司他组患者关节疼痛、肾功异常发生率低于别嘌呤组[2.50%vs 17.50%,0.00%vs 15.00%,P<0.05].结论 高尿酸痛风患者给予非布司他治疗可显著降低患者尿酸水平,提高临床疗效,降低药物不良反应发生率,具有显著临床疗效和较高用药安全性.     

蛋白酶体抑制剂联合亚砷酸对NB4细胞survivin基因表达的影响

目的 研究蛋白酶体抑制剂硼替佐米(bortezomib)单药应用及其联合亚砷酸(As2O3)对急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞株NB4中survivin mRNA表达的影响.方法 将受试对象分为9组:未加药空白对照组(D组);As2O3组,0.5 μmol/L(A1组)和1μmol/L(A2组);bortemmib组,5 nmol/L(B1组)和10 nmol/L(B2组);联合组,0.5/μmol/L As2O3 5 nmol/Lbortezomib(C1组),0.5μmol/L As2O3 10 nmol/L bortezomib(C2组),1μmol/L As2O3 5 nmol/L bortezomib(C3组),1μmol/LAs2O3 10 nmol/L bortezomib(CA组).作用时间分为三个水平:24 h,48 h和72 h.应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测药物作用前后抑凋亡基因survivin mRNA的表达水平.结果 bortezomib和As2O3单药组中survivin mRNA的表达水平下降,且存在剂量与时间依赖性,联合组survivin mRNA的表达水平亦下降,且比单药组下降更明显.结论 bortezomib与As2O3可通过抑制NB4细胞株survlvin mRNA的表达诱导细胞发生凋亡,两药联合具有协同效应.     

不同剂量氯化镧对氧化铝陶瓷颗粒诱导RAW264.7细胞产生炎症反应的保护作用

目的观察不同剂量氯化镧（LaCl3）对氧化铝（Al2O3）陶瓷颗粒诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7产生炎症反应的作用效果,为研究LaCl3在Al2O3陶瓷颗粒诱导无菌性松动中的作用提供理论基础。方法体外培养小鼠巨噬细胞RAW264.7。根据培养液的不同分成8组：空白对照组（培养基中不含LaCL3和Al2O3）、Al2O3组（含1 mg/mL Al2O3）、LaCl3＋Al2O3组（加入1 mg/mL Al2O3后分别加入2.5、10、100μmol/L LaCl3）以及LaCl3组（含2.5、10、100μmol/L LaCl3）。分别采用ELISA、RT-PCR及Western blotting法检测炎症因子白介素1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、核因子-κB（NF-κB）mRNA和蛋白的表达。结果 ELISA检测结果显示：与空白对照组比较,Al2O3组和100μmol/L LaCl3组IL-1和TNF-β的蛋白分泌量均显著升高,差异有统计学意义（P〈0.05）;与Al2O3组比较,Al2O3＋2.5μmol/L LaCl3组、Al2O3＋10μmol/L LaCl3组均显著降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;2.5和10μmol/L LaCl3组均明显低于100μmol/L LaCl3组,差异也有统计学意义（P〈0.05）。RT-PCR和Western blotting检测结果显示IL-1β、TNF-α、NF-κB mRNA以及NF-κB蛋白表达的变化趋势与ELISA检测结果一致。结论 10μmol/L LaCl3可在一定程度上抑制巨噬细胞IL-1β和TNF-α的分泌。LaCl3的炎症抑制作用可能与NF-κB信号转导通路的抑制有关。     

IGF-1对IL-1诱导的兔关节软骨细胞NO和PGE2的影响

目的:检测合成性细胞因子胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)对损伤性细胞因子IL-1(interhukin-1)诱导的兔关节软骨细胞产生NO(nitric oxide)和前列腺素(prostaglandinE2,PGE2)的影响,探讨IGF-1在骨关节炎治疗中的作用机制.方法:实验分为IL-1β10μg/L组、IL-1β10 μg/L IGF-1 1μg/L组、IL-1β 10 μg/L IGF-1 10μg/L组、IL-1β 10 μg/L IGF-150 μg/L组、IL-1β 10 μg/L IGF-1 100 μg/L组、IGF-150 μg/L组和空白对照组.首先进行2月龄兔原代软骨细胞的培养并进行鉴定,然后将IL-1β 10 μg/L单独或与不同浓度的IGF-1共育于第2代兔关节软骨细胞,硝酸还原酶法测定实验组细胞上清液NO的含量,ELISA酶联免疫竞争法测定细胞上清液中PGE2含量,再对测定的NO和PGE＜2的浓度与IGF-1和IL-1的浓度进行有关的统计学分析.结果:IL-1β10μg/L组NO浓度为(89.971±10.224) μmol/L,PGE2浓度为(22.028±8.731)ng/L;空白组NO浓度为(12.404±8.809)μmol/L,PGE＜2浓度为(1.900±0.227)ng/L.IL-1β 10 μg/L组与空白组比较,NO和PGE＜2明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05).在IL-1β均为10 μg/L时,IGF-1可以呈剂量依赖地降低IL-1诱导的兔关节软骨细胞NO和PGE2的升高,并且在50 μg/L时即可达到最佳浓度.结论:IL-1能增加软骨细胞培养中的NO和PGE2的产生.IGF-1在体外可以呈剂量依赖地降低IL-1诱导的兔关节软骨细胞NO和PGE2的升高,其最佳浓度为50 μg/L.     

ARDS患者呼出气冷凝液和血清中NO、ET-1和8-isoPG检测的临床意义

目的：研究急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者呼出气冷凝液(EBC)和血清中一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)和8-异前列腺素(8-isoPG)的浓度变化及其临床意义。方法选取2012年9月至2014年7月在南通大学第二附属医院重症监护病房(ICU)中行机械通气的ARDS 52例患者为观察组,收集患者入院第1天及治疗后第7天呼出气冷凝液及血清标本。健康对照组为30例健康体检者,收集其EBC及血清标本。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定两组受检者EBC和血清中的NO、ET-1和8-isoPG浓度。结果观察组患者EBC中NO、ET-1和8-isoPG水平高于对照组[(7.33±2.21)μmol/L vs (2.37±0.79)μmol/L、(46.02±10.39)μmol/L vs (10.08±4.27)μmol/L、(55.87±13.78) pg/mL vs (21.86±9.24) pg/mL,P<0.05];血清中NO、ET-1和8-isoPG水平高于对照组[(122.82±64.88)μmol/L vs (22.42±6.56)μmol/L、(178.82±55.21)μmol/L vs (97.32±39.74)μmol/L、(241.94±43.98) pg/mL vs (122.09±36.62) pg/mL,P<0.05];治疗后观察组患者EBC中NO、ET-1和8-isoPG水平均较治疗前下降[(6.32±1.61)μmol/L vs (7.33±2.21)μmol/L、(32.49±10.55)μmol/L vs (46.02±10.39)μmol/L、(36.74±11.41) pg/mL vs (55.87±13.78) pg/mL,P<0.05];血清中ET-1和8-isoPG水平低于治疗前[(158.31±55.79)μmol/L vs (178.82±55.21)μmol/L、(170.20±53.37) pg/mL vs (241.94±43.98) pg/mL,P<0.05]。结论 EBC和血清中NO、ET-1和8-isoPG浓度变化可反映ARDS患者肺部炎症反应及肺损伤严重程度;EBC反映炎症反应较血清更灵敏。     

青蒿琥酯对高糖环境下大鼠下颌下腺上皮细胞凋亡的影响

目的：研究青蒿琥酯（ART）对体外高糖环境下大鼠下颌下腺上皮细胞凋亡的影响。方法：通过体外培养、纯化并鉴定大鼠下颌下腺上皮细胞。使用CCK-8和western blotting检测不同浓度葡萄糖对大鼠下颌下腺上皮细胞增殖和功能的影响。使用含50 mmol/L葡萄糖的培养基模拟体外高糖环境,将细胞分为正常对照组（Con组）、高糖模型组（HG组）和不同浓度ART干预组（HG+5μmol/L ART组、HG+10μmol/L ART组、HG+20μmol/L ART组、HG+40μmol/L ART组）。分别采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和western blotting法检测细胞水通道蛋白5(AQP5)、Bax、Bcl-2和Caspase-3基因和蛋白表达。结果：随着高糖环境中葡萄糖浓度的增加,大鼠下颌下腺上皮细胞抑制率升高,AQP5蛋白表达水平降低（P<0.05）。与Con组相比,HG组细胞AQP5蛋白、Bcl-2基因和蛋白表达水平明显降低,Bax、Caspase-3基因和蛋白表达水平明显升高（P<0.05）;与HG组相比,不同浓度ART干预组Bcl-2基因和蛋白...