应用聚合酶链反应（PCR）检测血清HBV—DNA

用ＰＣＲ技术检测２１３分血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ，ＥＬＩＳＡ法检测其血清五项标志（ＨＢＶＭ）。结果表明，在不同类型的ＨＢＶ感染标志物中其血清ＰＣＲ结果有所不同。１０例健康正常人血清无１例检出ＨＢＶ－ＤＮＡ，２０３例免疫标志各异的血清共检出５４例存在ＨＢＶ－ＤＮＡ。     

聚合酶链反应检测HBV—DNA与HBV血清学标志的关系

目的探讨聚合酶链反应检测ＨＢＶ—ＤＮＡ与ＨＢＶ不同血清学标志中的关系。方法采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对２７０例ＨＢＶ不同血清学标志及不同组合进行了ＨＢＶ—ＤＮＡ的检测。结果ＨＢＶ—ＤＮＡ在ＨＢｅＡｇ标志中检出率最高，阳性率为１００％；其次是ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｃ和抗—ＨＢｅ，阳性率分别为６６０％、６５９％和４６２％；在抗—ＨＢｓ标志物中未能检出ＨＢＶ—ＤＮＡ；在ＨＢｓＡｇ滴度为≤５１２、＞５１２和阴性者中阳性率分别为６０６％、７５７％和２１９％；在ＡＬＴ异常和正常者中阳性率分别为６８８％和２９５％。结论ＨＢＶ—ＤＮＡ在ＨＢＶ血清学标志不同组合、不同ＨＢｓＡｇ滴度和不同肝功能中的阳性率有着非常显著性差别。     

应用聚合酶链反应（PCR）检测乙型肝炎患者的HBV—DNA

应用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）检测１０３例乙型肝炎患者血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ，在不同类型的ＨＢＶ感染标志物（ＨＢＶＭ）的血清中结果有所不同：（１）在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率８６．１１％（３１／３６）；（２）在ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｅ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率５５．８８％（１９／３４）；（３）在抗ＨＢｅ和ＨＢｃ阳性血清     

PCR法在检测HBV DNA上的应用

作者应用聚合酶链反应(PCR)检测了12份乙型肝炎两对半阳性血清,并将PCR分析结果与两对半结果相比较,以探讨其在检测HBV DNA上的应用。     

定量聚合酶链反应检测血清乙型肝炎病毒DNA及其意义

采用定量PCR技术检测了140例病毒性肝炎患及31例HBaAg携带血清乙型肝炎病毒（HBV）DNA基因音量．结果显示123例乙型肝炎患及31例HBsAg携带血清HBV DNA基因音量范围在10^1至10^p拷贝／微升，17例其它类型肝炎及30例健康正常人均未检出HBV DNA；与定性PCR及分子斑点杂检测比较，定量PCR的灵敏度更高．该方法是一种快速、敏感、特异的定量PCR技术，可用于乙型肝炎的临床诊断和实验研究。     

聚合酶链反应检测孕妇HBsAg携带者血清HBV DNA

PCR技术是检测HBV DNA的重要手段,采用PCR技术检测54例孕妇HBsAg携带者血清HBV DNA,12例(22％)HBV DNA(+)。其中HBeAg(+)者全部HBV DNA(+);HBsAg(+)抗HBC(+)者(7/49)仍有HBV的复制。说明孕妇HBsAg携带者血清中有HBV的存在。因此对这类孕妇应引起足够的重视,加强围产期保健。     

用聚合酶链反应技术检测血清中HBV－DNA

本文报道了以聚合酶链反应技术检测血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ的方法。将血清在０．１ＭＮａＯＨ中３７℃孵育６０分钟使ＨＢＶ－ＤＮＡ从病毒中释放出来。再经琼脂糖检测２７ＤｂＰ的ＨＢＶ－ＤＮＡ片段。本方法检测ＨＢＶ的最低检测限为１０￣（－２）ｐｇ。用建立的方法检测５０例已被证实或怀疑为慢性乙型肝炎感染的病人血清。在１６例ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ为阳性的病人中，斑点杂交和ＰＣＲ分析均为阳性；１９例ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｂ为阳性的病人中，斑点杂交法检出５例，ＰＣＲ法检出１４例；在１５例抗－ＨＢｃ病人中，杂交法检出４例，ＰＣＲ法检出１０例阳性。结果表明ＰＣＲ法比杂交法敏感。     

聚合酶链反应检测HBV DNA在HBV不同血清免疫学标志组合中的应用价值

乙型肝炎病毒(HBV)感染是一种世界性传染病,我国为高流行区, 约1亿人口为乙型肝炎表面抗原携带者。     

应用聚合酶链反应快速检测女性生殖道沙眼衣原体

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对１２８例女性生殖道沙眼衣原体进行了检测。３７份标本沙眼衣原体阳性，其中５例伴淋菌感染，９例伴解脲支原体感染，显示沙眼衣原体感染常与其它性病伴发，对妇女的健康构成威胁。ＰＣＲ方法简便、快速、敏感、特异，适用于沙眼衣原体的检测     

荧光定量聚合酶链反应检测HBV-DNA观察

乙型肝炎病毒（HBV）感染的实验诊断主要依据血清学标志（HBV—M）和HBV—DNA的检测。以往运用的普通PCR检测只能定性,其后处理过程易导致假阳性污染,且所用的染色剂溴乙锭是强致癌物。因此,普通PCR的应用和推广受到一定限制。我们采用实时荧光定量聚合酶链反应（Fluorescence quantitative,FQ—PCR）克服了常规PCR的不足。直接检测146份血清标本乙型肝炎病毒核酸的拷贝数,并同时与酶联免疫吸附试验（ELISA）进行对照,现将结果报道如下。     

HBeAg阴性乙型肝炎患者HBV-PreS1及HBV-DNA检测分析

目的分析HBeAg阴性的乙型肝炎患者血清HBV-PreS1及HBV-DNA检测的价值。方法收集114份HBeAg阴性的乙型肝炎患者血清标本,分别采用实时荧光定量PCR检测HBV-DNA、ELISA法检测HBV-PreS1抗原。结果 114例乙型肝炎患者血清中,HBV-DNA阳性69例,总检出率为60.5%,PreSl抗原阳性77例,总检出率为67.5%,HBV-DNA与PreSl抗原具有较好的相关性,HBeAg阴性的乙型肝炎患者血清HBV-DNA、HBV-PreS1阳性率差异无统计学意义;HBV-DNA复制拷贝数从<103～>107拷贝/ml,HBV-PreSl抗原检出率随HBV-DNA含量的增加逐渐上升。结论 HBeAg阴性的乙型肝炎患者血清中HBV-Pre-Sl抗原检测可以作为HBV-DNA检测的有效补充。     

HBeAg阴性乙型肝炎患者HBV-LP及HBV-DNA检测分析

目的 分析HBeAg阴性的乙型肝炎患者血清HBV-LP及HBV-DNA检测的价值.方法 收集64份HBeAg阴性的乙型肝炎患者血清标本,分别采用实时荧光定量PCR检测HBV-DNA、ELISA法检测HBV-LP.结果 64例HBeAg阴性的乙型肝炎患者血清中,HBV-DNA阳性36例,总检出率为56.3％;HBV-LP阳性44例,总检出率为68.8％;HBV-DNA与PreS1抗原具有较好的相关性,HBeAg阴性的乙型肝炎患者血清HBV-DNA、HBV-LP阳性率差异无统计学意义,HBV-DNA复制拷贝数为＜103、103-5、106-7、＞107拷贝/ml,HBV-LP 检出率分别为60.7％、82.6％、60.0％、66.7％.结论 HBeAg阴性的乙型肝炎患者血清中HBV-LP检测可以作为HBV-DNA检测的有效补充.     

乙型肝炎患者血清和唾液中HBV-DNA的水平

目的探讨乙型肝炎(乙肝)患者唾液中HBV-DNA水平,为乙型肝炎病毒(HBV)经唾液传播提供临床依据。方法采用实时荧光定量PCR法检测乙肝患者血清和唾液中HBV-DNA含量。结果 99例乙肝患者血清和唾液中HBV-DNA的阳性率分别为90例(90.9%)、65例(65.7%)。结论乙肝患者唾液中HBV-DNA的阳性率与血清HBV-DNA的阳性率之间差异有统计学意义(P0.01),乙肝患者唾液中HBV-DNA含量与血清HBV-DNA含量呈显著正相关(r=0.82)。     

HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者血清中透明质酸、MAO水平与HBV-DNA载量联合监测相关性分析

目的通过检测HBeAg阴性慢性乙肝(CHB)患者血清中透明质酸酶(HA)、单胺氧化酶(MAO)、HBV-DNA的水平,探讨它们之间的相关性及临床意义。方法采用化学发光法检测HA水平,采用化学比色法测定MAO水平,采用实时荧光定量PCR方法检测HBV-DNA。结果 138例HBeAg阴性CHB患者血清中,HA、MAO、HBV-DNA水平都显著高于对照组,差异均具有统计学意义(P <0. 05); HBV-DNA水平不同复制组间HA和MAO水平差异均具有统计学意义(P <0. 05),HA水平与HBV-DNA水平呈正相关(相关系数r=0. 41),且呈直线关系趋势; HA水平与MAO水平具有相关性,但不呈直线关系趋势。结论 HBeAg阴性CHB患者血清中,无论HBV-DNA水平如何,HA、MAO水平在各组间差异均有统计学意义,且HA与HBV-DNA水平呈正相关; MAO水平与HA水平升高存在一致性,因此联合检测HA、MAO以及HBV-DNA水平对早期诊断肝纤维化,进一步指导临床早期抗肝纤维化治疗有重要意义。     

携带乙肝病毒的孕妇阴道分泌物中乙肝病毒DNA检测情况分析

目的分析携带的乙型肝炎病毒孕妇阴道分泌物中乙肝病毒(HBV)携带情况以及探讨阴道分娩的安全性问题。方法将159例孕期检测乙肝血清学指标HBsAg阳性的孕妇作为研究组,及70例乙肝标志物阴性的健康孕妇作对照组,采用荧光定量PCR技术检测其阴道分泌物中的HBV标记物,并与血清乙肝标志物和HBV-DNA含量的检测结果进行比较。结果159例乙肝血清学指标HBsAg阳性孕妇阴道分泌物中有84例检出HBV-DNA(52.8%),而对照组中无1例阳性;HBeAg阳性组孕妇阴道分泌物的阳性率为93.4%(57/61),明显高于HBeAg阴性组的27.6%(27/98)(P<0.01);HBeAg阳性组孕妇阴道分泌物中HBV-DNA平均拷贝数(104.37)高于阴性组孕妇阴道分泌物中HBV-DNA平均拷贝数(102.24)(P<0.01)。另外,孕妇血清中HBV-DNA浓度与阴道分泌物中HBV-DNA浓度呈正线性相关(r=0.536,P<0.01)。结论对乙肝标志物阳性孕妇,应检测其阴道分泌物中的HBV-DNA。若阴道分泌物中HBV-DNA阳性,应慎重选择分娩方式。     

核苷类药物治疗肝衰竭患者乙型肝炎表面抗原与HBV-DNA定量动态变化

目的 探讨乙型肝炎慢性与急性肝衰竭患者核苷(酸)类药物治疗过程中血清HBsAg定量和HBV-DNA载量的动态变化.方法 51例使用核苷(酸)类药物治疗的乙型肝炎慢性与急性肝衰竭患者,检测并分析19例好转出院患者(存活组)在入院时、极期(MELD评分最高时)、康复出院时以及32例死亡患者(死亡组)入院时、临终前的血清乙型肝炎表面抗原(HBsAg)定量(电化学发光法)和HBV DNA载量(实时荧光定量PCR).结果 血清HBsAg定量在存活组入院时、极期、康复出院时分别为(3.63±0.44)、(3.82±0.18)、(3.60±0.56) log10COI,组内两两比较,P=0.095～0.815;死亡组入院时和临终前分别为(3.39±0.66)、(3.15±0.79) log10COI(P=0.111);组间比较提示存活组极期HBsAg显著高于死亡组临终前水平(P＜0.01);HBV-DNA载量在各个时点逐渐下降,组内比较P＜0.01,但两组间比较,差异无统计学意义.结论 乙型肝炎慢性与急性肝衰竭患者使用核苷(酸)类药物治疗,无论其转归如何,病程中血清HBV-DNA显著下降,而血清HBsAg定量没有变化,但死亡患者临终前血清HBsAg定量显著低于存活患者极期水平,可能与致死性肝坏死造成HBsAg合成下降有关.     

乙型肝炎病毒前S1抗原与血清HBV-DNA及HBVM的相关性分析

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)前S1抗原与血清HBV-DNA及HBVM的相关性分析,并探讨HBsAg与HBV-DNA之间的关系,HBsAg与前S1抗原之间的关系及HBV-DNA与前S1抗原之间的关系,为临床提供依据。方法选取2012年9月-2013年7月医院接受诊治的乙型肝炎195例患者HBsAg均为阳性,其中HBV-DNA应用核酸扩增荧光定量检测,HBVM(包括前S1抗原、HBeAg、HBeAb、HBcAb、HBsAg、HBsAb)应用ELISA法检测,选取健康体检者96名作为对照组。结果 195例HBsAg阳性患者的血清标本中HBV-DNA的阳性率最高为75.90%,其次为前S1抗原的阳性率51.28%、HBeAg的阳性率28.21%;前S1抗原与HBsAg、HBV-DNA与HBsAg结果差异均有统计学意义(P<0.05),且HBV-DNA与前S1抗原的阳性检出率均显著高于HBsAg;HBV-DNA与前S1抗原两种检测结果差异均有统计学意义(P<0.05),且HBV-DNA阳性率高于前S1抗原;96例健康者其检测结果表明前S1抗原亦均为阴性。结论乙型肝炎病毒前S1抗原与血清HBV-DNA及HBeAg三者在反映病毒复制水平上具有一定的相关性,目前S1抗原与HBV-DNA具有较高的符合率,可以为HBV感染的监测提供更加全面的分析依据。     

乙型肝炎病毒感染患者HBV-DNA载量与血清及肝纤维化标志物的关系

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染患者HBV-DNA载量与血清及肝纤维化标志物的相关性。方法选取2012年1月-2015年12月医院收治的86例HBV感染患者,按照HBV血清标志物分为A组(大三阳)21例、B组(小三阳)35例、C组(除外大小三阳的HBsAg+表型)24例、D组(抗体阳性及全阴)6例,根据HBVDNA载量分为5个级别分为<10~3 IU/ml组、10~3~10~5 IU/ml组、10~5~10~6 IU/ml组、10~6~10~8 IU/ml组和>10~8IU/ml组。结果 A组HBV-DNA载量显著高于B组和C组,差异有统计学意义(P<0.05);C组HBV-DNA载量显著高于B组(P<0.05);透明质酸(HA)随着HBV-DNA复制水平的增高而增高,5个不同级别HBV-DNA载量组两两比较差异有统计学意义(P<0.05);层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)、Ⅳ型胶原(CⅣ)在<10~3IU/ml组、10~3~10~5 IU/ml组、10~5~10~6 IU/ml组中随着患者血清HBV-DNA载量上升也随之递增,而在10~6~10~8 IU/ml组和>10~8 IU/ml组中随着血清HBV-DNA载量上升出现相对降低的现象。结论 HBV-DNA载量与HBV血清标志物不同模式组存在相关性,并与LN、PⅢP、CⅣ存在相关性,但不呈直线相关关系,与HA呈正相关。     

FQ-PCR检测HBV携带者精液、前列腺液HBV-DNA结果分析

目的 通过检测HBV携带者的血清、前列腺液和精液中乙型肝炎病毒(HBV)-DNA含量,研究三者的关系及其临床意义.方法 选择经血清学检测诊断为男性HBV携带者120例.采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术测定其血清、前列腺液和精液中HBV-DNA含量,并对所有检测指标进行相关性分析.结果 120例携带HBV男性中,HBsAg、HBeAg、HBcAb三项阳性者的血清、前列腺液和精液中HBV-DNA的阳性检出率均为100.0%;HBsAg、HBeAb、HBcAb三项阳性组中阳性率分别为86.0%、83.7%和83.7%;HBsAg、HBcAb两项阳性组中的阳性率分别为87.2%、82.1%和84.6%.精液HBV-DNA含量与血清HBV-DNA含量呈正相关(r=0.896),且血清HBV-DNA含量高于精液含量10倍左右;前列腺液HBV-DNA含量与血清HBV-DNA含量呈正相关(r=0.893),且血清HBV-DNA含量高于前列腺液含量10倍左右;前列腺液HBV-DNA含量与精液HBV-DNA含量呈正相关(r=0.993),且前列腺液HBV-DNA含量与精液含量比较差异无统计学意义.结论 精液、前列腺液与血清三者中HBV-DNA含量呈正相关.血清HBV-DNA阳性的育龄男性应做精液、前列腺液HBV-DNA检测,以对其阳性者采取防治措施,其性伴侣也应加强防护并进行预防接种.     

慢性乙型肝炎和重型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群与HBV-DNA、HBeAg的关系

目的 分析慢性乙型肝炎(CHB)和慢性重型乙型肝炎(CSHB)患者T细胞亚群特点,探讨外周血T淋巴细胞亚群变化与乙型肝炎病毒(HBV)复制的关系.方法 使用流式细胞仪检测57名CHB患者及25例CSHB患者外周血T细胞亚群.结果 HBV-DNA(+)CHB组与HBV-DNA(-)CHB组的T细胞亚群比较:HBV-DNA(+)CHB组CD8+T绝对值显著低于HBV-DNA(-)CHB组(P＜0.01),CD4+T/CD8+T比值显著高于HBV-DNA(-)CHB组(P＜0.01).HBV-DNA(+)CSHB组与HBV-DNA(-)CSHB组的T细胞亚群比较:HBV-DNA(+)CSHB组CD8+T绝对值显著高于HBV-DNA(-)CSHB组(P＜O.05); HBV-DNA(+)CSHB组CD4+T/CD8+T比值显著低于HBV-DNA(-)CSHB组(P＜0.01).高HBV-DNA载量-CHB组和低HBV-DNA载量-CHB组的T细胞亚群比较:高HBV-DNA载量-CHB组CD8+T绝对值显著低于低HBV-DNA载量-CHB组(P＜0.05).HBeAg(-)CHB患者HBV-DNA(+)组与HBV-DNA(-)组的T细胞亚群比较:在HBeAg(-)CHB患者中,HBV-DNA(+)组CD8+T绝对值显著低于HBV-DNA(-)组(P＜ 0.05);HBV-DNA(+)组CD4+T/CD8+T比值显著高干HBV-DNA(-)组(P＜0.05).结论 不同的临床转归患者T细胞亚群状态不同,T细胞亚群紊乱程度和CD8+T绝对值与HBV-DNA载量、HBeAg有关.