胶质细胞源性神经营养因子对脑出血大鼠神经功能的保护作用

目的:研究胶质细胞源性神经营养因子(glialcellline-derivedneu-rotrophicfactor,GDNF)对脑出血大鼠的保护作用,探讨其发生机制。方法:克隆胚胎鼠的GDNF基因,构建pCDNA3-GDNF-GFP质粒,注射于大鼠脑出血部位。选用成年SD大鼠制备脑出血模型,共分9组,每组20只,假手术Ⅰ组,脑出血Ⅰ组,干预Ⅰ组观察大鼠行为学、脑组织含水量、Na,K离子浓度的变化;假手术Ⅱ组,脑出血Ⅱ组,干预Ⅱ组观察++血脑屏障的改变;假手术Ⅲ组,脑出血Ⅲ组,干预Ⅲ组观察组织形态学和GDNF阳性细胞的表达。结果:出血组和干预组相比,神经缺损评分在出血后24h为8.53±1.44和8.34±1.28(P>0.05),72h,7d,14d为7.58±1.08,5.46±0.74,3.06±0.43和4.21±0.76,3.25±0.52,1.92±0.26(P<0.01)。72h,7d时脑组织含水量为(84.26±0.64)%,(80.38±0.86)%和(78.26±0.42)%,(77.51±0.33)%(P<0.01)。72h,7d时Na,K++离子浓度两组比较,差异有显著性意义(P<0.01)。干预组坏死体积较出血组减小,GDNF阳性细胞表达明显增加(P<0.01)。结论:GDNF能改善出血大鼠行为学,减轻脑水肿,促进神经功能恢复,增加脑组织抗损伤能力,有一定的治疗意义。     

胶质细胞源性神经营养因子基因修饰骨髓基质干细胞移植脑出血大鼠神经营养因子的表达

背景:研究证实,细胞移植和神经营养因子相结合治疗脑损伤能促进大鼠神经功能的恢复。目的:观察移植胶质细胞源性神经营养因子基因修饰的骨髓基质干细胞对大鼠脑出血后神经营养因子表达的影响。方法:通过脑立体定位仪向SD大鼠脑尾壳核注射胶原酶和肝素建立脑出血动物模型,将48只模型鼠随机分为3组,骨髓基质干细胞组、胶质细胞源性神经营养因子/骨髓基质干细胞组和对照组于建模后第3天在脑出血部位分别移植骨髓基质干细胞、胶质细胞源性神经营养因子/骨髓基质干细胞以及生理盐水。结果与结论:与对照组和骨髓基质干细胞组相比,胶质细胞源性神经营养因子/骨髓基质干细胞组大鼠神经功能恢复更好;与对照组相比,移植后1,2周其他2组各神经营养因子表达均显著增加(P<0.05)。提示胶质细胞源性神经营养因子基因修饰的骨髓基质干细胞移植治疗脑出血大鼠比单纯骨髓基质干细胞有更好的神经保护作用。     

移植胶质细胞源性神经营养因子基因修饰骨髓基质干细胞对脑出血大鼠的神经保护作用

背景:研究显示,细胞移植对脑出血脑损伤有保护作用,有学者在脑梗死后移植骨髓基质于细胞能促进大鼠神经功能恢复.目的:观察移植胶质细胞源性神经营养因子基因修饰的骨锈基质干细胞是否比单纯骨髓基质干细胞移植对脑出血有更好的保护作用.方法:采用自体血制作大鼠脑出血模型,36只SD成年大鼠随机抽签法分为3组,每组按不同时间点分为2个亚组,每个时间点6只.胶质细胞源性神经营养因子/骨髓基质干细胞组、骨髓基质干细胞组分别在脑出血壳核注射胶质细胞源性神经营养因子基因修饰的骨髓基质干细胞、骨髓基质干细胞20μL/只:对照组注射生理盐水20μL.分别在1,2周处死大鼠,免疫组织化学染色观察突触素和神经生长相关蛋白在脑出血周边区的表达.结果与结论:各时间点胶质细胞源性神经营养因子/骨髓基质干细胞组的突触素和神经生长相关蛋白43免疫阳性产物比骨髓基质干细胞组和对照组显著增加(P＜0.05).提示胶质细胞源性神经营养因子基因修饰的骨髓基质干细胞比单一骨髓基质干细胞对大鼠脑出血有更好的保护作用.     

胶质细胞源性神经营养因子对脊髓前角运动神经元的保护作用

目的：证实胶质源性神经营养因子(glial cell line—derived neurotrophic factor，GDNF)对脊髓前角运动神经元有保护作用。方法：切断SD大鼠一侧坐骨神经建立脊髓前角运动神经元损伤模型，借助单盲端硅胶管系统在损伤神经局部给予GDNF，术后不同时间分别取L5脊髓切片，利用酶组织化学染色方法显示胆碱酯酶和酸性磷酸酶(acid phosphatase，ACP)活性并进行图像分析。结果：坐骨神经切断后第4，9，16及21d，对照组和GDNF组胆碱酯酶活性分别为21．53&;#177;1．54和23．67&;#177;1．08(P&;lt;0．05)，19．82&;#177;1．35和22．87&;#177;1．04(P&;lt;0．01)．22．55&;#177;1．20和25．25&;#177;1．13(P&;lt;0．01)，25．52&;#177;1．43和28．92&;#177;1．37(P&;lt;0．01)：对照组和GDNF组ACP活性(平均灰度)分别为37．49&;#177;1．39和35．40&;#177;1．18(P&;lt;0．05)，40．94&;#177;1．38和38．43&;#177;1．31(P&;lt;0．05)，22．55&;#177;1．20和25．25&;#177;1．13(P&;lt;0．05)．37．15&;#177;1．52和34．68&;#177;1．43(P&;lt;0．05)结论：GDNF对损伤的脊髓前角运动神经元有保护作用。     

复发性抑郁症患者血清脑源性神经营养因子和胶质细胞源性神经营养因子水平的研究

目的探讨复发性抑郁症患者血清中脑源性神经营养因子(BDNF)与胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)水平。方法采用酶联免疫吸附法测定49例治疗前的复发性抑郁症患者以及36例正常对照者血清BDNF和GDNF水平,采用汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评定复发性抑郁症患者的抑郁症状。结果复发性抑郁症患者治疗前血清BDNF和GDNF水平显著低于对照组(P<0.01)。在复发性抑郁症患者组,血清BDNF水平与HAMD总分呈显著负相关(P<0.01)。结论复发性抑郁症患者可能存在神经营养因子水平低下,这种变化是否为抑郁发作的生物学指标尚不清楚。     

胶质细胞源性神经营养因子与癫痫研究进展

癫痫形成和发展与神经损害密切相关。癫痫发作的启动因子是神经损伤,而癫痫发作又进一步加重神经损伤,导致恶性循环。胶质细胞源性神经营养因子（g1ialCeHline-derived neurotrophie factor,GDNF）具有促进受损神经元存活、调节突触可塑性、刺激轴突生长等多方面的生理功能。虽然癫痫损伤本身可启动中枢神经系统的神经保护机制而促进内源性GD-NF的释放,但是GDNF的释放可能存在持续时间短及分泌量不足的情况,因此,提高内源性GDNF的表达和分泌,都将成为治疗各种癫痫的一个方向。     

胶质细胞源性神经营养因子对大鼠局灶脑缺血损伤的作用

目的 研究胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）对大鼠局灶性脑缺血的作用及其机制。方法 健康雄性Wistar大鼠120只，随机分为GDNF组和生理盐水组，每组又分为假手术组、缺血0，3，6，24h组，采用大脑中动脉线栓模型，于栓塞同时大鼠脑室内分别给予GDNF和生理盐水。检测脑梗死体积百分比、半胱氨酸蛋白酶（Caspase-3）的表达、细胞凋亡等改变。结果 GDNF组脑梗死体积比明显小于生理盐水组；神经元损伤明显轻于生理盐水组，特别是海马区神经元在GDNF组无明显损伤；GDNF组Cas-pase-3和TUNEL染色阳性细胞数少于生理盐水组。结论 GDNF对大鼠局灶性脑缺血有保护作用，抑制Caspase-3的表达和细胞凋亡是其保护机制之一。     

胶质细胞源性神经营养因子的生物学研究

胶质细胞源性神经营养因子（glial cell line-de-rived neurotrophic factor，GDNF）是Lin等在1993年首先发现，来源于神经胶质细胞，对多巴神经元有明显的营养与促存活作用。神经损伤后其靶器官及损伤区域GDNF表达增加，提示损伤神经元对GDNF的需求增加。大量研究工作表明：损伤的中枢神经元具有可塑性，也能再生且在神经营养因子作用下再生速度及质量均有显著增强。GDNF作为神经营养因子（NTFs）之一，对神经元细胞的支持及存活作用已成为中枢神经研究的热点。     

胶质细胞源性神经营养因子对大鼠海马神经元N-甲基-D-天冬氨酸诱发电流的保护作用

目的：研究N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-asparate，NMDA)在大鼠海马神经元上诱发电流的特性以及胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor，GDNF)对大鼠海马神经元NMDA诱发电流(INMDA)的影响。方法：实验于2002-10／2003-02在解放军第二军医大学膜片钳研究室进行，运用常规全细胞膜片钳技术，在原代培养第七八天的大鼠海马神经元上记录INMDA，以及GDNF对INMDA的影响，由Clampex 8．0软件采样系统获得的图形，直接进入Clampfit8．0软件处理数据。结果：NMDA可在海马神经细胞上诱发出大的内向离子流。当钳制电压为-60mV时，细胞外单独给予GDNF(0．1，1．0，10．0μg／L)对静息膜电导及电压门控离子通道无影响。但细胞外同时给予NMDA(100μmol／L)和GDNF(10μg／L)时，INMDA的峰值为(-578．238&;#177;100.493)pA，INDMA的峰值被抑制( t=-7．248，P&;lt;0．01)，峰值受抑制率为(21．502&;#177;7．898)％。洗去GDNF后，抑制作用消失。结论：NMDA诱发的电流呈现出明显的内向整流特性，GDNF能抑制海马神经元NMDA通道的兴奋性，从而发挥神经保护作用。     

胶质细胞源性神经营养因子对肌萎缩侧索硬化症培养模型的保护作用

目的：利用肌萎缩侧索硬化症的脊髓片培养模型,观察胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）对运动神经元的保护作用。方法：取出生后8天乳鼠的腰段脊髓组织切片做脊髓器官型培养,随机分为对照组、模型组、不同浓度GDNF组（1ng/ml、5ng/ml和50ng/ml）,倒置显微镜观察脊髓片形态变化,SMI-32免疫组化观察前角运动神经元数目的变化。结果：对照组体外生长良好,而模型组生长不良,SMI-32阳性细胞较对照组减少,GDNF各组脊髓运动神经元存活数目较模型组显著增多,且具有量效关系。结论：GDNF能保护运动神经元免受谷氨酸兴奋毒性的损伤。     

胶质细胞源性神经营养因子家族信号转导及其在神经系统中的作用

神经营养因子在神经元的存活、生长、分化、神经再生、突触形成与突触可塑性以及神经退行性疾病的过程中起着重要的作用，对它的研究已成为目前神经科学领域中的重要课题之一。胶质细胞源怀神经营养因子(glial cell hnederired neurotrophic factor，GDNF)家族配体包括GDNF，neurturin(NRTN)，persephin(PSPN)和ARTNemin(ARTN)，它们在结构和功能上有很大的相关性。GDNF家族受体由两类亚基组成，即GDNF受体Alpha亚基(GFRαs)和受体酪氨酸激酶RET亚基。GFRαs亚基又包括各亚型，即GFRα1～4。GDNF家族各营养因子与受体的相互作用、信号转到及其在神经系统中的作用是目前研究的热点。     

胶质细胞源性神经营养因子对中小型神经元痛温觉调控研究

目的：胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurntrophic factor,GDNF)在神经系统内较多的区域均有分布，并且发挥营养、促进再生等生物学作用。最近的研究证明它在调节靶细胞功能方面具有更广泛的功能.通过研究GDNF及其受体GDNFR-α和Ret在背根节内的分布特点，探讨其对中小型神经元痛温觉调控作用。方法：背根节冰凉切片，免疫组织化学ABC法染色，观测GDNF及其受体GDNFR-α和Ret在背根节的分布。结果：GDNF及其受体GDNFR-α和Ret在背根节均有分布，而且主要分布于中小型神经元。结论：GDNF对背根节内的中小型神经元有特异性的作用，可能参与了痛觉过程的调控。     

胶质细胞源性神经营养因子的生物学活性和临床应用前景

胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）是近年来才被发现而且在实验研究中被证明有确定生物学活性的一种神经营养因子，已经成为众多学的研究热点。结构特点显示GDNF为TGF－β家族中的一个新的亚家族，但其在促进神经细胞的功能维持和损伤修复方面有其他神经营养因子不能比拟的强效作用。其对多巴胺能神经元的相对特异性营养作用已为众多学所认可，且在美国已进入临床验证阶段。有关GDNF的许多研究正在进行，虽然目前大多限于基础研究，但取得了相当的成果，可以预见GDNF将会有很好的临床应用前景。     

帕金森与胶质细胞源性神经营养因子

1817年一位叫做Pa rkinson的英国内科医生发现了一种常见于中老年人群的疾病，主要表现为静止性震颤、强直、运动迟缓和姿势反射障碍，此后大家以詹姆斯？帕金森博士的名字命名这种疾病Pa rk in son d isea se，PD。PD是一种黑质纹状体系统多巴胺（dopamine，DA）神经功能受损所致DA与乙酰胆碱平衡失调的一种慢性疾病。其病理改变主要涉及中脑黑质DA能神经元缺失，[第一段]     

脑损伤后大鼠脑干胶质细胞源性神经营养因子及其受体的表达

目的探讨创伤性脑损伤对大鼠脑干胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)及其受体(GFRα-1、Ret)表达的影响。方法采用Marmarou's大鼠落体打击损伤模型,将55只大鼠随机分为正常对照组、手术对照组及损伤后1h组、2h组、4h组、8h组、12h组、24h组、48h组、72h组和5d组,每组5只。制备组织芯片,采用免疫组化法检测脑干GDNF、GFRα-1、Ret的表达情况。结果正常对照组、手术对照组脑干中可见到GDNF及其受体低水平表达,损伤后2h脑干GDNF的表达达到高峰,损伤后72h降至正常水平;GFRα-1和Ret的表达在损伤后4h达到高峰,于伤后48h降至正常。结论大鼠创伤性脑损伤后脑干GDNF及其受体在早期即明显表达,两者在脑损伤后表达的时序性变化特点基本一致。     

胶质细胞源性神经营养因子对大鼠海马神经元N-甲基-D-天冬氨酸诱发电流的保护作用

目的:研究N-甲基-D-天冬氨酸N-methyl-D-asparate,NMDA在大()鼠海马神经元上诱发电流的特性以及胶质细胞源性神经营养因子(glialcellline-derivedneurotrophicfactor,GDNF)对大鼠海马神经元NMDA诱发电流(IN)的影响。MDA方法:实验于2002-10/2003-02在解放军第二军医大学膜片钳研究室进行,运用常规全细胞膜片钳技术,在原代培养第七八天的大鼠海马神经元上记录IN,以及GDNF对INMDAMDA的影响,由Clampex8.0软件采样系统获得的图形,直接进入Clampfit8.0软件处理数据。结果:NMDA可在海马神经细胞上诱发出大的内向离子流。当钳制电压为-60mV时,细胞外单独给予GDNF(0.1,1.0,10.0μg/L)对静息膜电导及电压门控离子通道无影响。但细胞外同时给予NMDA(100μmol/L)和GDNF10μg/L时,IN()MDA的峰值为(-578.238±100.493)pA,INMDA的峰值被抑制(t=-7.248,P<0.01),峰值受抑制率为(21.502±7.898)%。洗去GDNF后,抑制作用消失。结论:NMDA诱发的电流呈现出明显的内向整流特性,GDNF能抑制海马神经元NMDA通道的兴奋性,从而发挥神经保护作用。     

胶质细胞源性神经营养因子的生物学活性和临床应用前景

胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)是近年来才被发现而且在实验研究中被证明有确定生物学活性的一种神经营养因子,已经成为众多学者的研究热点。结构特点显示GDNF为TGF-β家族中的一个新的亚家族,但其在促进神经细胞的功能维持和损伤修复方面有其他神经营养因子不能比拟的强效作用。其对多巴胺能神经元的相对特异性营养作用已为众多学者所认可,且在美国已进入临床验证阶段。有关GDNF的许多研究正在进行,虽然目前大多限于基础研究,但取得了相当的成果,可以预见GDNF将会有很好的临床应用前景。     

胶质细胞源性神经营养因子基因转染雪旺氏细胞的实验研究

目的应用胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因转染雪旺氏细胞,观察GDNF基因在雪旺氏细胞内的表达效果,以及对雪旺氏细胞的营养作用。方法将雪旺氏细胞分为空白对照组、载体组、空载体组,通过阳离子脂质体介导,将GDNF基因转染雪旺氏细胞。用细胞增殖实验(MTT)、免疫组化、流式细胞仪观察在24h、48h、72h各组转染后对细胞的营养作用。结果在载体组细胞的生长状况较其他两组增殖良好。免疫组化可见GDNF在载体组细胞内呈现高表达。流式细胞仪观察基因转染后对雪旺氏细胞有明显的营养作用。结论GDNF基因转染雪旺氏细胞后,在细胞内呈现高表达,并对细胞有明显的营养作用。     

胶质细胞源性神经营养因子对大鼠脊髓损伤后运动诱发电位的影响

目的探讨胶质源性神经营养因子（ GDNF）对大鼠脊髓损伤后运动诱发电位（ MEP）的影响。方法改良 Allen方法致 T13脊髓不完全损伤,蛛网膜下腔分别给予生理盐水（ NS）或 GDNF 20μ l,伤后 1h、 5h、 1d、 3d及 5d测定 MEP。结果脊髓损伤后, MEP波幅降低、潜伏期延长。 GDNF组波幅恢复在伤后 5h,1d,3d明显优于 NS组,潜伏期伤后 3d恢复超过 NS组（ P< 0.05）。结论 GDNF在脊髓损伤后能够早期促进 MEP波形的恢复,是脊髓功能恢复的必要条件。     

胶质细胞源性营养因子及内皮素B受体基因共转染小鼠神经干细胞

背景:胶质细胞源性神经营养因子与内皮素B受体基因的缺失将导致肠神经系统发育异常.神经干细胞移植不仅可以从解剖和功能上修复神经系统,还可以作为基因转染的载体.目的:拟将携带胶质细胞源性神经营养因子和内皮素B受体基因的重组腺病毒转染至小鼠神经干细胞,并观察目的基因的表达.设计:细胞-基因学观察.材料:新生昆明小鼠由华中科技大学同济医学院动物实验中心提供.jetPEI转染试剂为PolyPlus公司产品;携带绿色荧光蛋白的胶质细胞源性神经营养因子、内皮素B受体基因共表达腺病毒由本室孙念峰博士和张景辉博士构建并惠赠.方法:无菌条件下取新生小鼠脑组织,制备单细胞悬液.取携带绿色荧光蛋白的胶质细胞源性神经营养因子和内皮素B受体基因共表达腺病毒,溶解于NaCI中制备JetPEI/DNA复合体.用DMEM/F12完全培养基调整次代神经干细胞密度为5×10~8L~(-1),向24孔板中每孔加入400 μL细胞悬液、100 μL、JetPEI/DNA复合体,置37℃、体积分数为5%的CO_2培养箱中,分别于转染24,48,72 h后收集神经干细胞.主要观察指标:采用荧光显微镜、流式细胞仪检测转染效率,RT-PCR检测目的基因在神经干细胞内的表达.结果:转染24 h后即可在荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白的表达,转染24,48,72 h后绿色荧光蛋白阳性率分别为15.36%,24.67%,25.73%.各转染时间点神经干细胞均表达胶质细胞源性神经营养因子及内皮素B受体基因,转染24 h条带亮度较低,72 h时外源基因表达水平最高.结论:运用jetPEI试剂成功将目的基因转染至小鼠神经干细胞内,且胶质细胞源性神经营养因子和内皮素B受体基因在靶细胞中得到有效转录和表达.