肉桂醛通过PINK1/Parkin信号通路介导的线粒体自噬促进糖尿病大鼠创面愈合机制

目的 采用高糖高脂饲料喂养联合腹腔注射链尿佐菌素（STZ）及手术制备全层皮肤缺损的方法制备糖尿病大鼠创面模型,观察肉桂醛对糖尿病大鼠创面愈合情况的影响,并基于PTEN诱导假定激酶（PINK）1/帕金森病蛋白（Parkin）信号通路介导的线粒体自噬探讨肉桂醛对糖尿病大鼠创面的治疗机制。方法 48只雄性SD大鼠随机分为空白组12只,糖尿病组36只,糖尿病组随机分为模型组、肉桂醛组和贝复新组,每组12只,空白组与模型组创面常规消毒后予生理盐水,肉桂醛组创面局部外敷含4 μmol·L^-1肉桂醛的聚乙二醇400（PEG 400）凝胶,贝复新组创面外敷贝复新凝胶,每日换药1次。观察各组创面愈合率,取干预后7、14 d大鼠创面组织,苏木素-伊红（HE）染色观察局部组织病理变化,免疫组化（IHC）检测白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、血管内皮生长因子（VEGF）、胶原纤维的表达情况,免疫荧光（IF）、实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测PINK1、Parkin、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ（LC3Ⅱ）蛋白和mRNA的表达情况。结果 腹腔注射STZ后,与空白组比较,糖尿病组大鼠随机血糖值显著升高（P<0.01）,均高于16.7 mmol·L^-1,且在造模后一段时间持续保持高血糖状态。与空白组比较,模型组大鼠创面肉芽组织生长、愈合情况较差,创面愈合率显著降低（P<0.01）;干预后7 d,空白组创面已有鳞状上皮覆盖,与空白组比较,模型组大鼠创面仅创缘少量结痂,创面中大量炎细胞浸润,组织IL-6、TNF-α蛋白表达水平显著上升（P<0.01）,PINK1、Parkin、LC3Ⅱ蛋白表达及mRNA水平显著降低（P<0.01）;干预后14 d,空白组创面肉芽组织成熟,愈合良好,与空白组比较,模型组创面炎细胞浸润和红细胞渗出尚未完全消退,组织VEGF、胶原纤维蛋白表达水平显著降低（P<0.01）,PINK1、Parkin、LC3Ⅱ蛋白表达及mRNA水平显著升高（P<0.01）。与模型组比较,肉桂醛组和贝复新组大鼠创面愈合情况较好,创面愈合率显著升高（P<0.01）,干预后7 d组织IL-6、TNF-α蛋白表达水平显著降低（P<0.01）,PINK1、Parkin及LC3Ⅱ蛋白表达及mRNA水平显著升高（P<0.01）,干预后14 d组织VEGF、胶原纤维蛋白表达水平显著上升（P<0.01）,PINK1、Parkin、LC3Ⅱ蛋白表达及mRNA水平显著降低（P<0.01）。结论 肉桂醛能促进糖尿病创面愈合,上调创面愈合率,降低炎症因子IL-6、TNF-α的水平,增加VEGF、胶原纤维蛋白的水平,其机制可能是通过调节PINK1/Parkin信号通路表达,激活线粒体自噬,抑制炎症反应,增加血管新生和胶原合成,从而达到促进糖尿病大鼠创面愈合的目的。     

白术对慢传输型便秘大鼠结肠组织Cajal间质细胞的影响

目的:运用免疫组化方法检测白术对慢传输型便秘(slow transit constipation,STC)大鼠结肠组织Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)的影响,进一步阐释白术治疗STC的机制.方法:随机将成年健康SD大鼠60只分为空白对照组、模型对照组、白术低剂量组(30g生药/kg)、白术中剂量组(60 g生药/kg)、白术高剂量组(120g生药/kg),每组12只.应用大黄对除空白对照组以外的大鼠进行慢传输型便秘模型制备.造模成功后,空白及模型对照组给予生理盐水2mL灌胃,白术低、中、高剂量组分别给予3 g生药/mL、6 g生药/mL、12 g生药/mL的白术水煎液2 mL,早晚2次,连续15 d.15d中连续观察大鼠皮毛光泽、活动范围、进食量及排便情况.末次给药后用免疫组化法观察结肠ICC的形态和数量.结果:模型对照组大鼠结肠较其他各组粗大、迂曲,肠腔内有较大块较多粒粪便存留,差别有统计学意义(P<0.05或P＜0.01).各组大鼠在给药前体质量差别均无统计学意义(P＞0.05),而处死前各组大鼠体质量差别均有统计学意义(P<0.05或P＜0.01).c-kit免疫组化法染色半定量分析,各组差别有统计学意义(P＜0.05).400倍光镜下白术低剂量组、白术中剂量组镜下所见与空白对照组相似,区别不大,ICC数量差异不大;而模型对照组及白术高剂量组ICC均有所改变,形态出现异常,体积变小,核周胞浆突起变钝、变短,ICC数量差异较大,差别有统计学意义(P＜0.01).结论:白术可以改善结肠组织中ICC形态并提高ICC数量,剂量60g的生白术能将上述效应发挥最好.     

中药干预慢传输型便秘鼠的结肠动力信号通路的研究进展

细胞信号转导通路近年来已经成为研究慢传输型便秘的热点之一,诸多研究表明结肠动力与慢传输型便秘密切相关。以近5年慢传输型便秘基础研究为背景,综述中药防治慢传输型便秘的实验研究概况。结果发现多条信号通路参与慢传输型便秘形成过程,中药复方治疗慢传输便秘具有多层次、多靶点优势,对中药复方的物质基础缺乏深入研究,需要全面深层次的研究探讨其作用的靶点和机制,为临床有效治疗慢传输型便秘提供思路。     

基于PINK1/Parkin通路研究槲皮素减轻血管性痴呆大鼠海马神经元损伤的作用机制

目的 基于PTEN诱导激酶1（PTEN-induced putative kinase 1,PINK1）/帕金蛋白（Parkin）通路研究槲皮素减轻血管性痴呆（vascular dementia,VD）大鼠海马神经元损伤的作用机制。方法 通过双侧颈总动脉永久性结扎法建立VD大鼠模型,分为模型组及槲皮素低、中、高（25、50、100 mg/kg）组和欧来宁（14.8 g/kg）组,另取12只大鼠作为假手术组,给予药物干预21 d后,采用穿梭箱实验评价大鼠学习记忆能力,比较各组大鼠步入潜伏期（step-through latency,STL）及在暗室中花费的总时间（total time spent in the dark chamber,TDC）;采用Nissl染色检测大鼠海马组织神经元损伤情况;采用透射电镜观察大鼠海马区神经元超微结构;采用ELISA法检测大鼠脑组织中乙酰胆碱（acetylcholine,Ach）、5-羟色胺（5-hydroxytryptamine,5-HT）水平和血清中白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）、IL-17、IL-1β水平;采用Western blotting检测大鼠脑组织中自噬相关蛋白与PINK1/Parkin信号通路相关蛋白表达。结果 与假手术组比较,模型组大鼠海马组织神经元损伤及超微结构受损严重,神经元内出现少量自噬体;STL显著降低（P＜0.05）,TDC显著升高（P＜0.05）;脑组织中Ach和5-HT水平显著降低（P＜0.05）,血清中IL-6、IL-17和IL-1β水平显著升高（P＜0.05）;脑组织中微管相关蛋白1轻链3 II（microtubule-associated protein 1 light 3 II,LC3II）/LC3I、Beclin1、PINK1和Parkin蛋白表达水平均显著升高（P＜0.05）。与模型组比较,槲皮素组大鼠海马组织神经元损伤及超微结构受损减轻,且神经元自噬现象增强;STL显著升高（P＜0.05）,TDC显著降低（P＜0.05）;脑组织中Ach及5-HT水平显著升高（P＜0.05）,血清中IL-6、IL-17和IL-1β水平均显著降低（P＜0.05）;脑组织中LC3II/LC3I、Beclin1、PINK1和Parkin蛋白表达水平均显著升高（P＜0.05）。结论 槲皮素可激活PINK1/Parkin信号通路,降低VD大鼠炎性细胞因子水平,减轻海马神经元炎症损伤,提高大鼠学习记忆能力,改善其痴呆症状。     

通便汤调节SIRT1通路恢复慢传输型便秘大鼠结肠动力的机制研究

目的:观察SIRT1在慢传输型便秘中的表达情况,并探讨通便汤恢复慢传输型便秘大鼠结肠动力的作用机制。方法:采用大黄酸法制备大鼠慢传输型便秘模型,造模组40只大鼠,大鼠随机分为模型组、通便汤低、中和高剂量组(每组各10只),另取10只作为正常组。记录大鼠一般情况、粪便含水量、测定结肠肌电变化、肠道传输功能及结肠超微结构情况,并运用免疫组织化学技术检测结肠SIRT1蛋白的分布、表达及相对含量。利用RT-PCR法测SIRT1、FoxO1mRNA表达情况并进行统计学分析。结果:与模型组相比,通便汤高剂量组可显著增加粪便含水量(P0.05),通便汤中、高剂量组可降低频率和振幅变异系数(P0.05),稳定结肠慢波节律。除此之外,通便汤低、中和高剂量组可显著减少肠嗜铬细胞和神经分泌颗粒。免疫组化结果显示通便汤低、中、高剂量组能不同程度提高SIRT1蛋白表达(P0.05),以通便汤高剂量组最为明显。RT-PCR结果显示通便汤各剂量组大鼠结肠组织SIRT1、FoxO1mRNA显著升高(P0.05)。结论:慢传输型便秘发生发展过程中SIRT1信号通路发生改变,通便汤恢复结肠动力的机制可能通过提高SIRT1活性,使得FoxO1去乙酰化,增强FoxO1活性。     

电针对帕金森病小鼠SIRT3/PINK1/Parkin通路介导的线粒体自噬的影响

目的：观察电针“风府”“太冲”“足三里”对帕金森病（PD）小鼠中脑黑质沉默调节蛋白3(SIRT3及其下游PTEN诱导的假定激酶1(PINK1)、PARK2基因编码蛋白（Parkin）介导的线粒体自噬的影响,探讨电针治疗PD的可能机制。方法：C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、电针组、假电针组,每组12只。采用腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶复制PD小鼠模型。电针组小鼠给予针刺“风府”“太冲”“足三里”,每天1次,每次20 min,连续12 d。以旷场实验评估各组小鼠的运动能力;免疫组织化学法检测各组小鼠中脑黑质区酪氨酸羟化酶（TH）、α-突触核蛋白（α-syn）阳性表达;透射电镜观察黑质区神经元超微结构;免疫荧光染色法检测小鼠黑质自噬轻链蛋白3(LC3)的阳性表达;实时荧光定量PCR法检测小鼠黑质TH、α-syn、SIRT3、PINK1、Parkin和线粒体自噬受体蛋白P62、Beclin-1、LC3ⅡmRNA表达水平;Westernblot法检测小鼠黑质TH、α-syn、SIRT3、PINK1、Parkin、P62、Beclin-1、LC3Ⅱ蛋白表达水平。结...     

白术七物颗粒治疗结肠慢传输型便秘的多中心临床研究

目的研究白术七物颗粒治疗气阴两虚兼气滞型结肠慢传输型便秘的临床疗效。方法将120例病例随机分为白术七物颗粒组、便通胶囊组、莫沙必利组,每组40例;3组患者分别给予相应的治疗药物,疗程均为14天,观察临床疗效及主要症状体征积分、结肠运输试验变化情况。结果白术七物颗粒组、便通胶囊组、莫沙必利组总有效率分别为92．5％、85．O％、87．5％;白术七物颗粒组与便通胶囊组、莫沙必利组临床疗效比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗前后组内比较,3组主要症状体征积分及不透x线标志物残留数差异均有统计学意义（P〈0．05）;白术七物颗粒组与便通胶囊组、莫沙必利组治疗后比较,主要症状体征积分及不透X线标志物残留数差异有统计学意义（P〈0．05）。结论白术七物颗粒可有效用于治疗气阴两虚兼气滞型结肠慢传输型便秘。     

电针对慢传输型便秘大鼠结肠Cajal间质细胞自噬相关蛋白表达的影响研究＊

目的 探讨电针治疗慢传输型便秘大鼠（Slow transit constipation，STC）的可能机制。方法 将40只雄性SD大鼠按随机数字表法分为空白组（10只）、STC组（30只）。采用复方地芬诺酯灌胃法复制STC模型，造模14天后评价造模效果，造模成功后STC组大鼠随机分为模型组（10只）、电针组（10只）、假电针组（10只）。电针组采用毫针交替针刺同侧“大肠俞”、“天枢”，后接韩式电针仪（HANS-200E）。假电针组针刺腧穴同电针组，夹持电极但不予通电。以上两组每次均干预30 min，每日1次，5次为1个疗程，疗程之间休息2天，共治疗10次。空白组、模型组仅抓取固定。干预结束后观测各组大鼠首粒黑便排出时间及小肠推进率，Western Blot检测结肠Cajal间质细胞（Interstitial cell of Cajal，ICC）标志物C-kit蛋白及自噬相关蛋白Beclin1、P62的表达水平。结果 与空白组比较，模型组大鼠首粒黑便排出时间延长（P < 0.01），小肠推进率明显降低（P < 0.01），结肠组织C-kit蛋白、P62蛋白表达下调，Beclin1蛋白表达上调（P < 0.01）；与模型组比较，电针组大鼠首粒黑便排出时间缩短（P < 0.01），小肠推进率明显升高（P < 0.01），结肠组织C-kit蛋白、P62蛋白表达上调，Beclin1蛋白表达下调（P < 0.01）；与假电针组比较，电针组大鼠首粒黑便排出时间减少（P < 0.05），结肠组织C-kit蛋白、P62蛋白表达上调，Beclin1蛋白表达下调（P < 0.01）。结论 电针可能通过抑制结肠ICC过度自噬，促进ICC数量和结构的恢复，从而改善STC模型大鼠肠道动力障碍。     

白术七物颗粒对结肠慢传输型便秘小鼠肠道传输功能的影响

目的：研究中药白术七物颗粒对结肠慢传输型便秘小鼠肠道传输功能的影响。方法：将60只昆明种小鼠随机分为正常组（15只）和模型组（45只）。模型组小鼠皮下注射盐酸吗啡2．5mg·kg-1·d11建立结肠慢传输型便秘（STC）模型,正常组皮下注射等量等渗生理盐水,共45d。将造模成功的40只小鼠随机分为3组：对照组（10只）、白术七物颗粒组（15只）和莫沙必利组（15只）。各组小鼠分别予以相应药物灌胃治疗,正常组和对照组小鼠予等量等渗生理盐水灌胃,每天1次,连续14d。于给药第14天计算每组小鼠当天粪便干重,末次给药后测定并对比分析各组小鼠肠道墨汁推进率。结果：治疗后各治疗组小鼠粪便干重均有不同程度增加,肠道墨汁推进率提高,且白术七物颗粒组改善程度优于莫沙必利组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：白术七物颗粒能增强结肠慢传输型便秘小鼠的肠道传输功能。     

左、右归丸干预PINK1/Parkin信号通路调控绝经后骨质疏松症自噬的机制

目的：观察左、右归丸对绝经后骨质疏松症（PMOP）大鼠骨髓组织磷酸酶及张力蛋白同源物（PTEN）诱导激酶1(PINK1)/Parkin信号通路介导自噬的影响,以此探索左、右归丸防治PMOP的机制。方法：将100只2月龄未生育雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、左归丸组、右归丸组和补佳乐组,每组20只。除假手术组,其余组均摘除双侧卵巢,连续给药12周后取材,检测骨密度（BMD）、骨体积分数（BV/TV）、骨小梁厚度（Tb.Th）、骨小梁分离度（Tb.Sp）、血清骨钙素（BGP）含量以及PINK1、Parkin、微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅰ、LC3Ⅱ蛋白表达等指标。结果：与假手术组比较,模型组BMD、BV/TV、Tb.Th显著降低（P<0.01）,Tb.Sp显著升高（P<0.01）,血清BGP含量显著增加（P<0.01）,PINK1、Parkin、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ蛋白表达均显著上调（P<0.01）,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ显著下调（P<0.01）。与模型组比较,各给药组BMD、BV/TV、Tb.Th显著升高（P<0.05,P<0.01）,Tb.S...     

基于SCF/c-kit信号通路探讨理气通便方对气滞型慢传输型便秘大鼠肠道动力的影响

目的 基于SCF/c-kit信号通路探讨理气通便方对气滞型慢传输型便秘（STC）大鼠肠道动力的影响。方法 将36只Wistar雌性大鼠按随机数字表法分为对照组6只和造模组30只。造模组采用“洛哌丁胺混悬液+夹尾刺激”复制气滞型STC大鼠模型,连续刺激14 d。当大鼠表现出激惹、易怒、烦躁等情况,正常喂养饲料时出现大便干硬、排便数量减少等表现时,说明气滞型便秘模型造模成功。将造模成功的大鼠按照随机数字表法分为模型组、西药组、低剂量组、中剂量组和高剂量组各6只,低、中、高剂量组分别按5.15、10.3、20.6 g/（kg·d）给予理气通便方药液灌胃;西药组按0.18 mg/（kg·d）给予琥珀酸普芦卡必利片混悬液灌胃;对照组和模型组按10 mL/（kg·d）给予无菌水灌胃,每日1次,连续灌胃14 d。比较6组末次给药后6 h的粪便排出量、粪便含水量和小肠推进率;HE染色观察结肠组织病理变化;免疫组化检测结肠组织c-kit蛋白表达水平;Western blot检测结肠组织c-kit、SCF蛋白表达量。结果 HE染色显示：对照组大鼠结肠黏膜完整,杯状细胞和腺体排列整齐,未见炎症细胞聚集;模型...     

从慢传输型便秘大鼠结肠c-kit/SCF的基因表达及信号传导通路探讨四磨汤的调节机制

目的:研究四磨汤对慢传输结肠的c-kit/SCF的基因表达及信号传导通路影响,探索理气中药改善结肠动力的作用机制。方法:选取120只SD大鼠,随机分为正常组30只,造模组90只,造模组饲喂含复方苯乙哌啶的饲料,造模成功后,将90只大鼠再随机分为3组,一组为空白对照组,一组为盐水对照组(安慰剂组),一组为四磨汤治疗组,每组30只。停药7 d后,分别从四组中各抽取10只大鼠,测首例黑便排出时间。结肠肌电检测,验证"四磨汤"对STC大鼠结肠肌电的影响效应。通过Realtime-PCR检测,分别检测c-kit和SCF的mRNA在STC结肠组织中的表达情况。计算机辅助图像分析表达情况。结果:四磨汤组大鼠首粒黑便排出时间较对照组和安慰剂组明显缩短(P0.05);较正常组有所延长(P0.05)。四磨汤组大鼠肌电频率、振幅、频率变异系数、振幅变异系数与正常组相比无统计学意义(P0.05),模型组大鼠肌电频率低于正常组(P0.05),振幅、频率变异系数、振幅变异系数高于正常组,有统计学意义(P0.05)。c-kit mRNA相对含量四磨汤组高于对照组及安慰剂组(P0.05),低于正常组(P0.05)。SCF mRNA相对含量四磨汤组高于对照组及安慰剂组(P0.05),低于正常组(P0.05)。结论:STC模型大鼠的结肠c-kit和SCF基因表达下调,c-kit/SCF系统受损。四磨汤能够显著提高c-kit mRNA、SCF mRNA相对含量,显著抑制造模药物对大鼠结肠慢波的影响,是通过调节c-kit,SCF基因表达及相应的信号通路来治疗慢传输型便秘的。     

中医药调控PI3K/Akt信号通路治疗慢传输型便秘的研究进展

基于磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路对中医药治疗慢传输型便秘的研究进行整理总结,以期为中医药治疗慢传输型便秘提供更多参考。通过整理分析发现,中药复方、中药单体、中药提取物、电针疗法可通过调控PI3K/Akt信号通路改善结肠传输动力和分泌,发挥通便的作用,主要机制涉及抗氧化应激、调节肠神经递质、调节细胞自噬、调节肠道水通道蛋白表达、修复受损肠神经元等途径,具有多成分、多靶点、多层次的优势。在未来仍需进一步研究,明确中医药的有效成分及其具体治疗靶点和机制,提高中医药治疗慢传输型便秘的临床疗效。     

“朴实方”对慢传输型便秘小鼠结肠Cajal细胞及SCF/c-Kit信号通路的影响

目的：观察朴实方对慢传输型便秘（STC）模型小鼠结肠Cajal间质细胞（ICC）及干细胞因子（SCF）/酪氨酸激酶受体（c-Kit）信号通路的影响,探索朴实方治疗STC的作用机制。方法：50只ICR小鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组（普芦卡必利,每日灌胃给药量为0.3 mg/kg）和朴实方高、低剂量组（每日灌胃给药量分别为17.0、8.5 g/kg）,每组10只。除正常组外,其余各组小鼠采用复方地芬诺酯混悬液连续灌胃2周构建STC模型。造模成功后各给药组每日分别予相应药物灌胃,正常组和模型组每日灌胃给予同体积生理盐水,各组均连续灌胃2周。干预完成后,使用活性炭灌胃法测定各组小鼠肠道推进率,苏木精-伊红（HE）染色比较各组小鼠结肠组织学特征,酶联免疫吸附（ELISA）法检测各组小鼠血清SCF含量,蛋白质免疫印迹（Western blot）法检测各组小鼠结肠组织c-Kit蛋白、SCF蛋白表达情况,酶联实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测各组小鼠结肠组织c-Kit mRNA、SCF mRNA表达。结果：模型组小鼠肠道推进率明显低于正常组（P<0.01）,各给药组小鼠...     

附子-肉桂调控结肠VIP/cAMP/PKA/AQP通路改善大鼠阳虚型慢传输型便秘

目的：通过血管活性肠肽（VIP）/环状磷酸腺苷（cAMP）/蛋白激酶A(PKA)/水通道蛋白（AQP）通路探究附子-肉桂对阳虚型慢传输便秘（STC）大鼠肠道功能的影响及作用机制。方法：将SD大鼠随机分为6组（n=6）,包括正常组、模型组、附子-肉桂高剂量组、附子-肉桂中剂量组、附子-肉桂低剂量组及普芦卡必利组。除正常组以外,其余组均采用盐酸洛哌丁胺联合冰水灌胃造模法,建立阳虚型STC大鼠模型。记录各组大鼠首次黑便排出时间,粪便数量,粪便含水量,肠道推进率及粪便性状评分。通过苏木素-伊红（HE）染色观察结肠组织病理形态,阿利新蓝-过碘酸-雪夫（AB-PAS）染色观察结肠黏液分泌情况。酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中VIP的水平。实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测结肠组织中AQPs mRNA表达水平,免疫组化检测结肠和肾组织中AQPs表达,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测结肠组织中cAMP、PKA及VIP的蛋白表达水平。结果：与空白组大鼠相比,模型组大鼠首粒黑便排出时间显著加长,粪便粒数及含水量显著减少,粪便性状评分及肠道推进率显著降低（P...     

白术七物颗粒对结肠慢传输型便秘小鼠胃肠功能的影响及机制

目的:研究白术七物颗粒对结肠慢传输型便秘小鼠胃肠功能的影响及相关机制。方法:40只ICR小鼠以灌胃复方地芬诺酯法构建结肠慢传输型便秘模型,以10只灌胃等量生理盐水为空白组。将建模成功的38只小鼠随机分为4组,分别为模型组与对照组,每组9只,观察组低剂量组与高剂量组,每组10只。低/高剂量实验组分别予以白术七物颗粒生药量16.3 g/kg、65.2 g/kg灌胃,对照组予以2.0 g/kg枸橼酸莫沙必利溶液灌胃,模型组和空白组均灌胃等量生理盐水,1次/d,各组均连续干预14 d,末次给药的同时各组均给予1 m L纳米碳混悬液。干预结束后观察各组小鼠排便情况,测定肠道酶活性,免疫组化法检测结肠组织中5-羟色胺4(5-HT4)、血管活性肠肽(VIP)、一氧化氮(NO)、P物质(SP)表达情况。结果:与空白组比较,模型组小鼠第1次排黑便时间延长,排便粒数减少,粪便总重量降低,差异有统计学意义(P0.05);与模型组比较,对照组和观察组低/高剂量实验组小鼠第1次排黑便的时间缩短,排便粒数增加,粪便总重量升高,差异有统计学意义(P0.05);且低/高剂量实验组组间比较,差异有统计学意义(P0.05)。与空白组比较,模型组小鼠肠道蛋白酶和纤维素酶活性降低,木聚糖酶活性升高,差异有统计学意义(P0.05);与模型组比较,对照组与低剂量、高剂量实验组小鼠蛋白酶和纤维素酶活性升高,木聚糖酶活性降低,差异有统计学意义(P0.05),且低/高剂量实验组组间比较,差异有统计学意义(P0.05)。与空白组比较,模型组结肠组织中VIP、NO表达量增加,5-HT4、SP表达量减少,差异有统计学意义(P0.05);与模型组比较,对照组和观察组低/高剂量实验组结肠组织中VIP、NO表达量减少,5-HT4、SP表达量增加,差异有统计学意义(P0.05);且观察组低/高剂量实验组结肠组织中VIP、NO、5-HT4、SP表达量比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论:白术七物颗粒可调控结肠慢传输型便秘小鼠肠道相关酶活性,改善胃肠功能,可能与调控结肠组织中5-HT4、VIP、NO、SP蛋白表达相关。     

麝香保心丸调节PINK1/Parkin信号通路对糖尿病视网膜病变大鼠的影响

[目的] 探讨麝香保心丸（SBP）对糖尿病视网膜病变（DR）大鼠线粒体自噬及PTEN诱导激酶蛋白1（PINK1）/细胞质E3-泛素连接酶（Parkin）信号通路的影响。[方法] 建立DR大鼠模型,将大鼠随机分为正常组（Control组）、模型组（DR组）、麝香保心丸低剂量组（SBP-L组）、麝香保心丸高剂量组（SBP-H组）、麝香保心丸高剂量+雷帕霉素组（SBP-H+RAP组）。检测各组大鼠空腹血糖（FPG）及总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平;苏木精-伊红（HE）染色观察各组大鼠DR情况;酶联免疫吸附实验（ELISA）检测各组大鼠血管内皮生长因子（VEGF）、高迁移率族蛋白1（HMGB1）水平;透射电镜观察各组大鼠细胞线粒体形态;免疫组化检测线粒体自噬相关蛋白选择性自噬接头蛋白sequestosome-1（SQSTM1/P62）、微管相关蛋白轻链3Ⅱ（LC3-Ⅱ）的表达;蛋白免疫印迹法检测各组大鼠PINK1、Parkin蛋白表达。[结果] 与Control组比较,DR组视网膜结构破坏严重,细胞排列紊乱,水肿明显,细胞间隙变宽,线粒体损伤、肿胀明显,形态异常,FPG、TC、TG、LDL-C、VEGF、HMGB1、LC3-Ⅱ、PINK1、Parkin表达水平显著升高,SQSTM1/P62表达水平显著降低（P＜0.05）;与DR组比较,SBP-L组、SBP-H组视网膜细胞结构改善,细胞排列逐渐整齐,细胞水肿减轻,细胞、线粒体形态均趋于正常,线粒体肿胀减轻,FPG、TC、TG、LDL-C、VEGF、HMGB1、LC3-Ⅱ、PINK1、Parkin表达水平显著降低,SQSTM1/P62表达水平显著升高（P＜0.05）;与SBP-H组相比,SBP-H+RAP组视网膜细胞结构破坏加重,细胞排列紊乱,水肿明显,线粒体肿胀加重,形态异常,FPG、TC、TG、LDL-C、VEGF、HMGB1、LC3-Ⅱ、PINK1、Parkin表达水平显著升高,SQSTM1/P62表达水平显著降低（P＜0.05）。[结论] 麝香保心丸通过抑制PINK1/Parkin信号通路抑制DR大鼠线粒体自噬。     

大剂量生白术配伍枳实对慢传输型便秘大鼠结肠5-HT_3R、5-HT_4R表达的影响

目的研究大剂量生白术(70 g)配伍枳实(30 g)对慢传输型便秘(slow transit constipation,STC)大鼠结肠组织中5-HT_3R、5-HT_4R表达的影响。方法采用大黄酸灌胃法建立STC大鼠模型。将造模成功大鼠27只随机分为模型对照组、普芦卡必利组和枳术组,每组9只,另设10只为健康对照组。健康对照组、模型对照组予自然喂养,普芦卡必利组予0.018 mg/100 g(1 mL/100 g)普芦卡必利悬液灌胃,枳术组予0.9 mL/100 g枳术煎剂灌胃,连续给药4周。炭末推进率检测大鼠肠道传输功能,Real-time PCR及免疫组化检测大鼠结肠组织中5-HT_3R、5-HT_4R mRNA及蛋白的表达。结果与健康对照组比较,模型对照组大鼠活性炭推进率降低(P0.05),5-HT_3R、5-HT_4R mRNA及蛋白表达均降低(P0.05);与模型对照组比较,普芦卡必利组和枳术组大鼠活性炭推进率增强(P0.05),5-HT_3R、5-HT_4R mRNA及蛋白表达均升高(P0.05);普芦卡必利组和枳术组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论大剂量生白术配伍枳实可以上调STC大鼠结肠组织中5-HT_3R、5-HT_4R mRNA及蛋白的表达,促进肠道动力。     

基于磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/内皮型一氧化氮合酶信号通路，浅谈中医药治疗慢传输型便秘的研究进展

慢传输型便秘（Slow Transit Constipation,STC）是一种慢性功能性肠病,其主要特征为结肠传导动力不足,结肠传输速度缓慢,致肠内容物排出时间延长,淤积于肠道,不能顺畅排出体外。STC的病因及发病的机制复杂,目前尚无统一定论,大多数观点认为STC的病因及发病机制与Cajal间质细胞功能异常、水通道蛋白异常表达、肠神经功能病变、胃肠神经递质的异常分泌、肠道微生态紊乱及精神心理障碍等有关。近年来,细胞信号转导通路的异常改变,导致细胞信号转导通路下游的相关分子及蛋白的异常表达导致STC的发病,逐渐引起广大临床学者的关注。基于细胞信号转导通路,探讨STC的研究逐渐增多。大量研究表明,中医药治疗STC具有层次多、靶点丰富且通路广泛的优势,并且临床疗效显著。其中的机制也引起广大临床研究者的好奇。磷脂酰肌醇-3激酶（Phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）/蛋白激酶B(Akt)/内皮型一氧化氮合酶（Endothelial Nitric Oxide Synthase,eNOS）细胞信号转导通路是近年来中医药治疗STC研究的热点通路之一。故文章基于PI3...     

生白术对慢传输型便秘模型大鼠结肠水通道蛋白表达影响的研究

目的:通过观察不同剂量生白术对慢传输型便秘(Slow transit constipation,STC)大鼠结肠动力及结肠水通道蛋白3(Aquaporin 3,AQP3)、水通道蛋白4 (Aquaporin 4,AQP4)表达的影响。方法:将50只健康SD大鼠随机分为空白组(A组)、模型组(B组)、白术低、中、高剂量组(C、D、E组)共5组。采用复方地芬诺酯混悬液按15 mg/(kg·d)的剂量灌胃建立STC大鼠模型,造模成功后,C、D、E组分别给予含生药3.15 g/kg,6.30 g/kg,9.45 g/kg的生白术水煎液干预治疗。通过比较大鼠一般情况、大便含水量、炭末推进率,观察不同剂量生白术治疗STC的疗效。采用免疫组化检测各组大鼠结肠组织中AQP3、AQP4分布及表达情况。结果:与A组比较,B组大鼠结肠炭末推进率、大便含水量及AQP3表达MD值降低(P 0.05),AQP4表达MD值升高(P 0.05);与B组比较,C组、D组、E组结肠炭末推进率、大便含水量及AQP3表达MD值均升高,仅D组、E组差异有统计学意义(P 0.05),AQP4表达MD值均降低(P0.05)。结论:生白术可明显改善STC模型大鼠便秘症状,增加大便含水量、提高炭末推进率、促进肠道传输功能。白术通便存在一定的"剂量-效应"关系,中、高剂量作用优于低剂量。其作用机制可能与抑制结肠组织AQP4表达、增加AQP3表达有关。