心肌肥厚大鼠心肌组织中肌醇磷酯途径活性研究

目的 观察肌醇磷脂信号传导通路在心肌肥厚形成中的作用。方法 对大鼠行腹主动脉部分缩窄术制作心肌肥厚模型,术后10d处死动物测全心重／体重比值,以免疫印迹法测左心室组织Gαq/11蛋白含量,以放射免疫法测左心室组织1,4,5三磷酸肌醇（IP3）含量,以非同位素法测定蛋白激酶C（PKC）相对活性。结果 术后10d时腹主动脉部分缩窄（CA)组大鼠全心重／体重比值明显高于假手术（SO）组（P＜0．01）,二组大鼠左心室组织Gαq/11蛋白含量无显著差异（P＞0．05）,CA组左心室组织IP3浓度明显高于SO组（P＜0．05）。和SO组比较CA组左心室组织胞膜PKC活性升高但胞浆PKC活性降低（P均＜0．05）。结论 肌醇磷脂途径参与压力超负荷性心肌肥厚病理过程。     

磷脂酰肌醇3激酶信号通路在缺血后适应中对大鼠心肌保护机制的研究

目的研究缺血后适应(IPost)对大鼠心肌保护作用及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K/Akt)信号通路机制。方法将32只雄性Wistar大鼠随机分为缺血再灌注组(A组),IPost组(B组),IPost+Wortmannin组(C组)和缺血再灌注+SB216763组(D组),每组8只。测定各组左心室收缩压(LVSP)和再灌注30 min冠状动脉流出液中乳酸脱氢酶和肌酸激酶含量。并测定心肌梗死面积,对心肌进行免疫组织化学染色,观察Akt磷酸化和GSK-3β磷酸化的表达。结果与B组比较,A组LVSP明显降低,乳酸脱氢酶和肌酸激酶含量明显升高(P0.05);同时IPost干预减小了心肌梗死面积(47.3% vs 29.5%),B组Akt磷酸化和GSK-3β磷酸化表达增加。结论 IPost对体外大鼠缺血再灌注损伤有明确的保护作用。Wortmannin可削弱IPost的保护作用,SB216763具有模拟IPost的心肌保护作用,Akt和GSK-3β的磷酸化水平在IPost的心肌保护作用信号通道传导机制中具有重要地位。     

大鼠心肌肥厚中骨桥蛋白基因表达

有研究表明骨桥蛋白参与多种组织间质重塑 ,本研究旨在探讨骨桥蛋白与左心室肥厚形成的关系。1 材料与方法 :雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 [(2 0 0± 2 0 )ｇ]分模型组(ｎ =10 )及对照组 (ｎ =8)。模型组以 6号针头行腹主动脉缩窄术。对照组除腹主动脉分离后不缩窄外 ,手术方法同模型组。术后分别饲养 4周后处死 ,计算左室游离壁加室间隔的质量 /体重指数。一部分心肌组织固定、石蜡包埋后取心底至心尖的中点横截面连续切片 ,脱蜡后行ＶＧ染色。用ＫＳ4 0 0图像分析系统对病理切片进行图像分析。另一部分心肌组织抽提总ＲＮＡ ,ＲＴ ＰＣＲ合成ｃＤ…     

信号蛋白Smad3在大鼠心肌肥厚过程中的表达

目的研究信号蛋白Smad3在大鼠心肌肥厚中的表达变化。方法结扎大鼠腹主动脉复制心肌肥厚模型，在不同时间点检测左心室重量指数(LVMI)，RT—PCR法检测肥大心肌组织中TGF—β1、Smad3的mRNA表达，Western blotting以及免疫组化法检测Smad3蛋白的表达。结果术后3d LVMI开始上升并持续至28d，肥大心肌组织中TGF—β1、Smad3 mRNA及蛋白表达术后3d开始上升，持续至28d，术后14d为表达高峰。结论信号蛋白Smad3参与了腹主动脉结扎诱导的大鼠心肌肥厚病理过程。     

自发性高血压大鼠G蛋白—肌醇磷脂途径的改变

目的：研究在基础状态下和Ｇ蛋白激活后，自发性高血压大鼠动脉平滑肌细胞内肌醇磷脂含量改变的可能性。方法：分别测定培养的自发性高血压大鼠动脉平滑肌细胞，在鸟苷酰－５′－（γ－０－硫）－三磷酸盐激活Ｇ蛋白前后细胞内肌醇磷脂的含量，并与对照组［ＷＫＹ（Ｗｉｓｔａｒ－Ｋｙｏｔｏ）大鼠］进行比较。结果：在基础状态下自发性高血压大鼠动脉平滑肌细胞内三磷酸肌醇的含量基本正常；Ｇ蛋白的持续激活使自发性高血压大鼠的三磷酸肌醇的增量显著大于ＷＫＹ大鼠（Ｐ＜０．０５）。结论：自发性高血压大鼠动脉平滑肌细胞内Ｇ蛋白—肌醇磷脂途径对外源性刺激的敏感性过高，这可能和这一途径的某些成分的数目、结构或功能存在着某些变异有关。     

细胞外反应激酶信号传导通路及其在心肌肥厚中的作用

细胞外反应激酶是细胞内广泛存在的有丝分裂原激活的蛋白激酶超家族成员 ,通过受体酪氨酸激酶通路和异三聚体 G蛋白耦连的受体通路两条途径激活 ,直接参与心肌肥厚的启动、诱发心肌细胞肥大的形态学改变 ,调控基因表达 ,在心肌肥厚的发生、发展过程中具有促进作用。     

压力超负荷性心肌肥厚大鼠心肌细胞内钙激活蛋白酶活性分布的研究

目的研究大鼠心肌肥厚时,钙激活蛋白酶(Calpain)在心肌细胞胞浆和细胞核的活性分布,并探讨细胞核钙摄取的改变,以进一步阐明心肌肥厚的发生机制.方法将100只健康雄性Wistar大鼠(150～200g)随机分为对照组(n＝50)和腹主动脉缩窄组(n＝50),制备腹主动脉缩窄大鼠心肌肥厚模型、差速离心和密度梯度离心提纯心肌细胞核,荧光法测酶活性,以45Ca2+测定细胞核摄取能力.结果与对照组相比,腹主动脉缩窄组大鼠左心室重量指数增加,伴有明显的血流动力学异常,有非常显著性差异(P＜0.01);其心肌细胞核Calpain活性亦增加40.78%,有显著性意义(P＜0.05);细胞浆Calpain活性下降21.71%,有非常显著性意义(P＜0.05).对照组心肌Calpain在细胞浆的活性显著高于在细胞核的活性,有非常显著性意义(P＜0.01),而腹主动脉缩窄组心肌Calpain在细胞核的活性与在细胞浆的活性无显著差异;细胞核45Ca2+摄入量也显著增加(较对照组高28%～97%,P＜0.01).结论肥厚心肌Calpain由细胞浆向细胞核转位、细胞核内Calpain活性增加,细胞核钙摄取能力增强,提示压力超负荷时Ca2+与Calpain调节的细胞核反应水平加强,可能在介导心肌肥厚的细胞核功能调控中起重要作用.     

心肌肥厚分子机制研究进展

心肌肥厚是心脏为适应血流动力学过负荷而发生的增生,它最终将导致心力衰竭,甚至猝死。心肌肥厚是许多心脏疾病发展的一个重要阶段,但是它的形成机制到现在还没有完全清楚。近年研究表明相关的信号通路主要集中在MAPK通路,Ca^2＋及其依赖的信号转导通路,磷脂酰肌醇-3激酶及其介导的信号转导通路和JAK／STAT信号通路等几条,并且信号通路之间相互联系。     

心肌肥厚大鼠心肌组织及肥大心肌细胞中环状RNA rno_circRNA_016002表达观察

目的 观察心肌肥厚大鼠心肌组织及肥大心肌细胞中环状RNA rno_circRNA_016002的表达变化,并探讨其在心肌肥厚过程中的作用.方法 将12只SD大鼠随机分为Control组与异丙肾上腺素(ISO)组,每组6只.ISO组每天腹腔注射ISO 3 mg/kg,Control组注射同等体积的生理盐水,连续注射两周后...     

生理性和病理性心肌肥厚组织中心钠素表达的差异研究

［摘要］　目的　研究心钠素（ANP）在生理性和病理性心肌肥厚组织中表达的差异及其在心肌肥厚发生、发展中的作用。方法　选择无特定病原体（SPF）级8周龄雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠15只,随机分为对照组（CON组）、异丙肾上腺素组(ISO组)和运动组(EXE组),每组5只。ISO组通过颈部多点皮下注射异丙肾上腺素构建病理性心肌肥厚模型。EXE组采用有氧运动（游泳）诱导生理性心肌肥厚。CON组不予特殊干预。在第8周末采用过量麻醉法处死大鼠,取心脏组织。采用HE染色法观察心脏组织病理、生理改变情况。采用Western-blot法和免疫组化染色法检测三组心肌组织中ANP的表达情况。结果　与CON组相比,EXE组和ISO组的心肌纤维明显增粗,且ISO组还出现了心肌纤维间隙增宽、排列紊乱等结构受损的特征,而EXE组的心肌纤维则排列整齐,结构完整。ANP主要表达于心肌细胞的胞浆中,ISO组ANP表达水平高于EXE组和CON组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论　ANP在病理性心肌肥厚组织中表达升高,可作为鉴别生理性和病理性心肌肥厚的辅助性指标。     

转录因子在心肌肥大中的调控作用

虽然近年来对心力衰竭的治疗有了很大的进步,但其病死率、致残率仍然很高。心肌重构是心力衰竭发展的一个重要病理机制,目前认为抑制心肌重构是预防和治疗心力衰竭的重要手段,而心肌细胞肥大是心力衰竭发展过程中心肌重构的一个主要特征之一。大量研究表明心肌细胞转录因子在心肌细胞肥大过程中起重要调控作用,一些心肌细胞转录因子在受到肥大刺激信号作用后能够被激活并且在心肌肥大过程中起重要作用。该文对几种转录因子在心肌细胞肥大过程中的最新研究状况作一简单介绍。     

Elevated collagen content in volume overload induced cardiac hypertrophy

This investigation was designed to determine if chronic volume overload is associated with altered collagen content of five regions of the myocardium. Five adult cats were subjected to a 6-week period of chronic volume overload induced by atrial septotomy and five untreated animals served as controls. Significant (P < 0.05) right ventricular hypertrophy was present as indicated by the right ventricular body weight ratio. For control animals this ratio was 0.68 ± 0.04 g/kg; for volume overloaded animals it was 0.83 ± 0.05 g/kg.) The collagen content was assessed by measuring the hydroxyproline content of the dried cardiac muscle. Right ventricular endocardium hydroxyproline in volume overloaded animals was significantly elevated above that in control animals (in the latter it was 5.30 ± 0.36 μg/mg; in the former it was 6.33 ± 0.18 μg/mg) while the epicardial collagen content was unchanged. Similarly, the amount of collagen found in the left ventricle was significantly increased in the endocardium and normal in the epicardium. Septal collagen concentration was unaltered in volume overloaded animals. This study demonstrated that alterations in cardiac muscle collagen concentration are associated with volume overload and that these cellular changes are nonuniform.     

cFLIP在压力超负荷诱导的心肌肥厚及纤维化中的作用

目的利用基因工程小鼠研究细胞型Fas相关死亡区域蛋白样β白介素-1转换酶抑制蛋白基因(cFLIP)在压力超负荷诱导的心肌肥厚及心肌纤维化中的作用。方法 cFLIP杂合子小鼠(heterozygote,HZ)和cFLIP野生型小鼠(wild type,WT)各20只分别随机分为模型组和假手术组,每组10只。主动脉缩窄术建立小鼠心肌肥厚模型,术后4周超声检测小鼠心室腔大小及左室短轴缩短率,组织病理学方法评价心肌肥厚及纤维化程度,实时定量聚合酶链式反应在mRNA水平检测心肌肥厚标志物心钠肽,脑钠肽,β-MHC以及心肌纤维化标志物结缔组织生长因子(CTGF),Ⅰ、Ⅳ型胶原(collagenⅠ,Ⅳ),TGF-β1。结果术后4周,HZ模型组较WT模型组和HZ假手术组心室腔增大,左室短轴缩短率下降(P<0.05,n=10);心肌肥厚及纤维化组织病理学检测及相关标志物表达水平模型组较假手术组升高(P<0.05,n=10),而HZ模型组表达增加程度较WT模型组更为显著(P<0.05,n=10)。结论cFLIP可抑制心肌肥厚及纤维化,对心功能起保护作用。     

麝香保心丸对压力负荷性心室肥厚大鼠的影响

目的:观察麝香保心丸(SXBXW)对压力负荷性心室肥厚大鼠的作用。方法:用腹主动脉缩窄术制备压力负荷性心室肥厚模型,将实验大鼠随机分为手术组(含麝香保心丸亚组、美托洛尔亚组、心室肥厚亚组)、假手术组,手术组中前2亚组分别给予麝香保心丸13.5mg/kg、美托洛尔10mg/kg,心室肥厚亚组和假手术组给予等量0.9%氯化钠溶液灌胃,持续8周。8周后行心脏超声检查,处死并记录每只大鼠体重、全心重和左室重量(LVW),计算全心质量指数(HWI)、左心质量指数(LVWI)。用ELISA法检测大鼠血清脑钠肽(BNP)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;RT-PCR观察心肌组织BNP mRNA的表达水平。结果:麝香保心丸亚组大鼠的体重与其他各组相比,差异无统计学意义(P>0.05),但其全心重明显轻于心室肥厚亚组(P<0.05),而与美托洛尔亚组和假手术组相比,差异无统计学意义(P>0.05);其他重量指标如LVW、HWI、LVWI及心脏超声指标如室间隔收缩末厚度、室间隔舒张末厚度、左室后壁收缩末厚度、左室后壁舒张末厚度较假手术组和心室肥厚亚组均有改善(P<0.05),与美托洛尔亚组相比差异无统计学意义(P>0.05...     

卡维地洛改善大鼠肥厚心肌能量代谢及其机制

目的探讨卡维地洛对压力超负荷大鼠肥厚心肌能量代谢的影响及其机制。方法将雄性SD大鼠随机分为假手术组、腹主动脉缩窄组和卡维地洛治疗组,15周后观察大鼠血流动力学参数、心室重构指标。采用密度梯度法提取大鼠心肌线粒体,用抑制剂终止法测定线粒体腺苷酸转运体（adenine nucleotide translocator,ANT）的转运活性,高效液相色谱法测量心肌组织及线粒体内腺苷酸含量。结果大鼠腹主动脉缩窄术后15周出现左心室肥厚及心功能减退;组织及线粒体内ATP、ADP及（ATP+ADP）含量及ANT转运活性降低。卡维地洛减轻心室肥厚、改善心功能的同时,增加组织及心肌线粒体腺苷酸含量,增强ANT转运活性。结论肥厚心肌心功能减退,心肌线粒体腺苷酸含量及ANT活性降低,使能量的产生和利用异常。卡维地洛改善心肌肥厚和心功能,且可能通过增强ANT活性而促进线粒体内产能,从而改善心肌能量代谢。     

一氧化氮合酶mRNA在压力超负荷心肌肥厚中的作用

目的:研究一氧化氮合酶(NOS)mRNA在心肌肥厚发生发展中的作用以及卡托普利防治心肌肥厚的机制。方法:采用腹主动脉狭窄术建立压力超负荷心肌肥厚动物模型,应用RT-PCR方法于术后1、2、4周,分别检测对照组、心肌肥厚组和卡托普利组大鼠左心室心肌组织NOS mRNA表达的变化。结果:①与对照组相比,术后1、2、4周心肌肥厚组大鼠左室重/体重(LVW/BW)指标及SBP均显著升高;左心室eNOS mRNA表达降低,iNOS mRNA表达升高,nNOS mRNA表达无明显变化。②与心肌肥厚组相比,术后1、2、4周卡托普利组大鼠LVW/BW及SBP均显著降低;左心室eNOS mRNA表达升高,iNOS mRNA表达降低,接近对照组。结论: eNOS和iNOS参与心肌肥厚的发生发展过程,但二者起不同作用。卡托普利防治心肌肥厚的作用可能与其调节NOS mRNA表达密切相关。     

早期生长应答因子-1在压力超负荷诱导的心肌肥厚及纤维化中的作用

目的通过早期生长应答因子-1基因敲除(EGR-1-/-)小鼠研究其在压力超负荷诱导的心肌肥厚及心肌纤维化中的作用。方法将20只EGR-1-/-小鼠和20只EGR-1野生型(EGR-1+/+)小鼠分别随机分为模型组和假手术组(n=10),通过主动脉缩窄术建立小鼠心肌肥厚模型,运用超声检测评价手术4周后小鼠心功能,组织病理学方法评价心肌肥厚及纤维化程度,实时定量聚合酶链式反应在mRNA水平检测心肌肥厚标志物心钠肽、脑钠肽及心肌纤维化标志物Ⅰ、Ⅲ型胶原。结果主动脉缩窄术后4周,EGR-1-/-模型组与EGR-1+/+模型组相比,EGR-1-/-模型组小鼠心功能有关指标得到明显改善(P<0.05,n=10),且心肌肥厚及纤维化有关指标显著降低(P<0.05,n=10)。结论 EGR-1基因敲除后能显著降低心肌肥厚及纤维化的程度。