不同给药时机对裸鼠脑胶质瘤增生和浸润的影响

脑胶质瘤是人类最常见的颅内肿瘤,术后化疗仍然是其重要辅助治疗措施.目前理想的治疗方案是抗肿瘤增殖和抗肿瘤病理血管增生两种药物联用,但有关治疗时机对疗效的影响目前尚不十分清楚.     

脑胶质瘤的综合治疗

脑胶质瘤的综合治疗刘薇，郎国林，刘永吉（第一临床学院神经外科）关键词脑胶质瘤，治疗脑胶质瘤没有完整的包膜，肿瘤向周围组织呈浸润性生长，而手术只能沿肿瘤边界切除，或行大部份切除，所以很难避免复发，也难以长期存活。国内只有李氏分析长期存活的８例胶质瘤的报...     

裸鼠皮下胶质瘤病理特征和血管特性的研究

目的：建立裸鼠皮下胶质瘤模型,观测其病理特征及血管特性。方法：取BALB／c裸小鼠11只．将C6细胞接种于裸鼠右股皮下形成胶质瘤模型,随机选取6只每隔4d测量肿瘤长、短径,绘制肿瘤生长曲线图,剩余5只处死取肿瘤作检测。分别做HE染色和血管内皮细胞标记物CD31检测,观察肿瘤病理特征和血管化情况。结果：肿瘤形成的潜伏期约4d,全部形成皮下肿瘤,肿瘤生长情况良好,皮下胶质瘤微血管密度很高,各种管径的毛细血管形态多样,分支较多。结论：建立的胶质瘤模型可作为研究胶质瘤发病机制和基因治疗的动物模型,肿瘤的病理特征及血管特性符合胶质瘤的形态学特征。     

快速建立裸鼠胶质瘤模型的实验研究

目的:探讨快速建立裸鼠C6犁脑胶质瘤动物模型的方法及在科研实验中应用的可行性.方法:将C6型鼠胶质瘤细胞悬液分别接种至雌雄裸鼠皮下,或用瘤组织块行异体移植至雌雄裸鼠皮下,观察裸鼠皮下移植瘤长出时间,并研究肿瘤的病理组织学及免疫组织化学特征.结果:(1)两种方法所建肿瘤模型其成功率均为100%,肿瘤生长状况良好,肿瘤病理组织学及免疫组织化学检查均符合胶质瘤细胞的形态学特征;(2)采用细胞接种法建立裸鼠脑胶质瘤模型所需的时间长,在雌雄裸鼠皮下生长速度不一,差别有统计学意义,P<0.05;(3)采用瘤组织块行异体移植法建立的肿瘤模型,其所需时间均较细胞接种法明显缩短,雌雄裸鼠肿瘤组织块生长速度基本相同,差别没有统计学意义.P>0.05.结论:(1)利用肿瘤组织块移植的方法可快速建立裸鼠皮下移植瘤模型,并能作为研究胶质瘤发病机制、生物学特性以及基因治疗的可靠动物模型;(2)利用肿瘤组织块异体移植的方法,可以缩短肿瘤研究中用于建立动物模型的时间,节约经济成本.     

局部免疫治疗脑胶质瘤

局部免疫治疗脑胶质瘤徐培坤，李汉杰，杨次文脑胶质瘤的局部免疫治疗是一种新开展的疗法。我科１９９２年７月～１９９３年５月期间对１６例脑胶质瘤患者行肿瘤切除后使用了白细胞介素－２（ＩＬ－２）局部治疗。报道如下。１临床资料１．１性别与年龄男性１３例，女３例...     

端粒酶活性在脑胶质瘤中的检测

目的 :通过检测脑胶质瘤中端粒酶的表达活性及肿瘤增殖标记抗原 Ki-67的表达 ,初步探讨端粒酶活性水平与脑胶质瘤的相关性及临床意义。 方法 :采集 4 0例脑胶质瘤手术切除标本、4例正常脑组织 ,通过半定量端粒重复序列扩增 ( TRAP)银染法检测端粒酶活性水平 ;采用免疫组化法检测胶质瘤标本的增殖活性标记抗原 Ki-67。 结果 :4 0例胶质瘤标本中有 3 3例 ( 82 .5% )检出端粒酶活性 ,而正常脑组织中无端粒酶活性表达 ;不同级别胶质瘤之间端粒酶活性水平有明显差异。端粒酶活性高低与 Ki-67的表达呈显著正相关 ( r=0 .74 5,P<0 .0 5)。 结论 :提示端粒酶活性可作为脑胶质瘤的恶性程度标记之一。     

低剂量辐射对裸鼠移植人胶质瘤(U251)细胞凋亡的影响

目的：探讨低剂量辐射对裸鼠移植人胶质瘤U251细胞凋亡的影响。方法：35只荷人胶质瘤U251裸鼠,随机分为7个实验组(每组5只),即假照组(0 mGy),D₁组(75 mGy),D₂组(4Gy),D₁-12 h+D₂组(D₁照射后12 h给予D₂),D₁-24 h+D₂组(D₁照射后24 h给予D₂),D₁-48 h+D₂组(D₁照射后48 h给予D₂)和D₁-72 h+D₂组(D₁照射后72 h给予D₂)。各实验组以不同方式照射后4 d,荷瘤裸鼠全部处死,采用TUNEL法检测裸小鼠移植人胶质瘤组织的细胞凋亡。结果：D₁（75 mGy）照射后,细胞凋亡指数（AI）增至(0.19±0.07),但与假照组（0.17±0.07）比较差异无显著性（P＞ 0.05）。D₂（4 Gy）组、D₁+D₂各组细胞凋亡指数均明显增加,分别为0.54±0.05、0.64±0.04、0.63±0.04、0.65±0.11及0.67±0.07,与假照组比较差异均具有显著性（P＜0.01）。与D₂组比较,D₁+D₂各组细胞凋亡指数增加更为明显,两者比较差异均具显著性（P＜0.05）。结论：75 mGy照射对胶质瘤细胞凋亡可能有一定程度的影响,低剂量辐射与大剂量辐射有协同促胶质瘤细胞凋亡的作用。     

替莫唑胺治疗恶性脑胶质瘤97例多中心随机对照研究

目的 评价国产替莫唑胺(TMZ)胶囊治疗恶性脑胶质瘤的临床疗效和安全性.方法 采用多中心、随机、双盲、阳性药平行对照研究,将恶性脑胶质瘤患者随机分为试验组(TMZ组)和环已亚硝脲对照组(CCNU)组.试验组于第1～5天给予TMZ胶囊150 mg/m2口服,第1天需同时口服CCNU安慰剂130 mg/m2;对照组于第1天口服CCNU胶囊130 mg/m2,第1～5天口服TMZ安慰剂150 mg/m2.两组均每28天为1个周期,连续治疗3个周期.结果 共入组97例,可评价疗效者86例:TMZ组42例,CCNU组44例.治疗12周后,TMZ组:完全缓解(CR)1例,部分缓解(PR)14例,稳定(SD)23例,进展(PD)4例;CCNU组:CR 3例,PR 1例,SD 29例,PD 11例.TMZ组和CCNU组的有效率(CR+PR)分别为35.71%和9.09%(P<0.01),临床受益率(CR+PR+SD)分别为90.48%和75.00%(P<0.05).TMZ常见的不良反应为恶心呕吐,多为轻、中度.结论 国产TMZ胶囊治疗恶性脑胶质瘤的疗效优于CCNU,耐受性良好,是一种安全有效的治疗恶性脑胶质瘤的化疗药.     

整合素连接激酶对裸鼠前列腺癌的影响

目的：探讨应用整合素连接激酶（ILK）特异siRNA敲除ILK基因对人DU145细胞系裸鼠原位前列腺癌生长及进展的影响。方法：将合成的ILK特异siRNA转染人DU145细胞系,应用逆转录PCR检测ILK在转录水平的表达情况;使用Western blot方法检测ILK在蛋白水平的表达情况。初步探讨敲除ILK基因后对人DU145细胞的黏附、侵袭性的影响及其对细胞骨架结构的影响。分别将ILK siRNA和对照DU145细胞注入裸鼠皮下,每5天1次,连续4周,检测裸鼠前列腺癌肿瘤的大小、分化程度、凋亡及增殖状态来观察ILK对前列腺癌生长的影响。结果：siRNA显著降低了ILK基因的表达,ILK mRNA及蛋白的表达分别被抑制87%与81%。与对照组相比,实验组DU145黏附力及侵袭力显著下降,实验组细胞骨架结构破坏明显。裸鼠种植DU145细胞后5周,实验组与对照组相比,细胞在裸鼠种植部位形成的肿瘤体积明显减小［（18.1±1.3） mm³ vs (157.6±9.7) mm³,P<0.01）］,分化程度变好［Gleason评分（5.8±0.2） vs （ 8.8±0.3）,P<0.05］,凋亡指数增加［（64.75±5.87） vs （38.57±3.45）,P<0.01］,增殖指数减小［(42.75±4.76） vs （88.57±7.57）,P<0.01］。结论：动物实验表明,特异性的抑制ILK能抑制人DU145细胞的黏附及其侵袭能力,破坏DU145细胞骨架的形成,诱导前列腺肿瘤细胞的凋亡及抑制肿瘤细胞的增殖,从而在一定程度上抑制了肿瘤的生长及进展。     

5-氨基酮戊酸-光动力学疗法治疗荷瘤裸鼠宫颈癌的实验研究

目的 分析5-氨基酮戊酸-光动力学疗法(ALA-PDT)对宫颈癌裸鼠移植瘤的体内疗效,对不同给药途径的光动力学治疗(PDT)效果进行比较,以寻找光毒反应最小的给药方式.探讨ALA-PDT诱导宫颈癌细胞凋亡的作用途径.方法 选择人宫颈癌Me180细胞系建立裸鼠宫颈癌移植瘤模型,通过人宫颈癌裸鼠移植瘤体内抑瘤实验、常规染色、免疫组化法检测ALA-PDT对宫颈癌肿瘤组织凋亡抑制蛋白生存素(Survivin)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)蛋白表达的影响等方法,对局部给药和尾静脉给药两种给药方法 进行比较研究.相对实时荧光定量法检测ALA-PDT对宫颈癌肿瘤组织凋亡抑制基因Survivin和Bcl-2、促凋亡基因P53、Bax、Bad mRNA表达的影响.结果 局部给药PDT组的肿瘤体积[(0.09 ±0.02)cm3]与对照组[(0.67±0.06)cm3]相比明显减小,差异有统计学意义(P＜0.01),其中局部给药PDT组在7～14 d时体积最小,且体积减小最明显.HE常规染色可观察到PDT组肿瘤受激光照射的皮下细胞区域坏死明显.免疫组化检测结果 表明,ALA-PDT可显著地抑制宫颈移植瘤组织的Survivin和VEGF的蛋白表达.移植瘤组织mRNA的相对实时荧光定量结果 证明PDT治疗后凋亡抑制基因Survivin和Bcl-2的mRNA的表达明显降低(均P＜0.01),而促凋亡基因P53、Bax、Bad mRNA表达水平稍有增高,但差异无统计学意义.结论 ALA-PDT对宫颈癌治疗是有效的.临床用光动力治疗宫颈癌或癌前病变患者应尽量使用局部给药方式,以减少PDT光毒作用的危害和不便.     

降钙素对乳腺癌荷瘤裸鼠肿瘤生长和骨代谢的作用

目的 :研究降钙素对人乳腺癌细胞系MCF 7荷瘤裸小鼠的肿瘤生长和骨代谢的影响。方法 :建立MCF 7细胞皮下移植瘤的裸小鼠模型 ,分为A、B、C、D 4组 ,分别隔日肌注注射用水或鲑鱼降钙素 (sCT)0 .0 4、0 .2、1μg。 2 0d后观察瘤体大小 ,用邻甲酚酞酪合酮法检测血清钙 ,2 氨基 2 甲基丙醇法检测血清碱性磷酸酶 (ALP) ,以扫描电镜 (SEM)比较不同组裸小鼠的第三腰椎骨质结构。结果 :不同组的瘤体直径和血清钙水平差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。 4组的血清ALP水平分别为 (70 .5 0± 4 .32 )、(78.33± 9.31)、(83.83±8.95 )和 (85 .6 6± 8.5 0 )IU L ,方差分析和t检验显示 ,A组和C组、A组和D组间差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。SEM显示D组裸小鼠的骨质结构较A组致密。结论 :sCT能提高裸小鼠血清ALP活性和改善骨质结构 ,但未观察到其抑癌和降血钙作用。     

HIFU联合化疗对裸鼠皮下胶质瘤细胞凋亡及增殖的影响研究

目的:探讨高强度聚焦超声(High intensity focused ultrosound,HIFU)联合化疗对裸鼠皮下胶质瘤靶区周围细胞凋亡和增殖的影响.方法:建立人(U251)胶质瘤移植模型,随机分入3组,局部分别行单HIFU治疗、单盐酸尼莫司汀(Nimustine,ACNU)及HIFU联合ACNU治疗.治疗24 h后切取肿瘤组织,行HE染色观察组织病理变化,免疫组织化学法检测增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达和TUNEL法检测细胞凋亡.治疗7d后分别测量3组瘤块体积.结果:HIFU联合化疗组靶区周围组织凋亡细胞数较单HIFU组及单化疗组高(P＜0.01);而PCNA阳性细胞数较后两者降低(P＜0.01).联合治疗组肿瘤体积较单HIFU组及单化疗组缩小(P＜0.01).结论:HIFU治疗及化疗在胶质瘤的治疗中具有协同作用.HIFU联合化疗能明显提高HIFU治疗疗效,诱导靶区周围胶质瘤细胞凋亡并抑制其增殖发挥抗肿瘤作用,有利于胶质瘤的治疗.     

cyclinD1在卵巢癌裸鼠移植瘤组织中的表达及意义

目的探讨细胞周期蛋白D1(cyclinD1)在上皮性卵巢癌裸鼠移植瘤组织中的表达及意义。方法构建人上皮性卵巢癌3AO裸鼠皮下移植瘤模型;设阴性对照组及早、中、晚期3个肿瘤组,应用免疫组化方法及流式细胞术(FCM)检测正常组织及移植瘤卵巢癌组织中cyclinD1的表达。结果 3AO卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型平均成瘤率91.7%。正常组织cyclinD1表达阴性或弱阳性,而卵巢癌组织中cyclinD1呈过表达(54.63%)。早、中、晚期卵巢癌组织中cyclinD1阳性表达率分别是35.00%、55.60%和73.30%,肿瘤细胞凋亡率分别是7.97%、3.45%及1.83%,Mean值分别是23.15、37.31、63.28。结论 cyclinD1在卵巢癌组织中呈过表达,且其表达与移植瘤生长增殖呈正相关,cyclinD1的表达与卵巢癌发生发展关系密切。     

选择性环氧化酶-2抑制剂塞来昔布抑制肿瘤生长的裸小鼠体内实验研究

目的:观察选择性环氧化酶-2抑制剂塞来昔布对裸鼠胃癌移植瘤生长的抑制作用并探讨其抗肿瘤机制。方法:36只BALB/c裸小鼠随机分为A、B、C、D组,A组为对照组9只每天给予阿拉伯树胶溶液灌胃,B组9只每天给予塞来昔布15 mg/(kg.d)灌胃、C组9只给予塞来昔布30 mg(/kg.d)灌胃、D组9只给予塞来昔布60 mg(/kg.d)灌胃,3周后均建立裸鼠移植瘤模型,继续灌胃给药4周后实验结束;免疫组化检测移植瘤Ki-67、Bcl-2的表达。结果:塞来昔布具有抑制移植瘤生长的作用,B、C、D 3组移植瘤体积从建模后第7天即明显小于A组(P<0.001);组内比较发现,植瘤后第14天,B、C、D 3组移植瘤体积有差异(B∶C,P<0.01,B∶D,P<0.001,C∶D,P<0.01),D组较B组、C组更明显抑制移植瘤生长(D∶B,P<0.001,D∶C,P<0.01),这种抑制作用从实验第7天开始持续到本次实验结束。A组与B组比较,Ki-67蛋白表达无差异(P>0.05),然而A组与C组、D组比较,Ki-67蛋白表达有差异(P<0.01);B、C、D组内比较,Ki67蛋白表达有差异(B∶C,P<0.05,B∶D,P<0.001,C∶D,P<0.01),表现为D组较B组、C组更能抑制Ki-67表达(D∶B,P<0.001,D∶C,P<0.01)。B、C、D 3组与A组比较,Bcl-2表达有差异(P<0.001),然而Bcl-2表达在组内比较无差异(P>0.05),表现为塞来昔布可以抑制Bcl-2蛋白表达。结论:塞来昔布可以抑制裸鼠移植瘤的生长,有显著抗胃癌效应,塞来昔布抑制肿瘤生长的机制可能通过抑制肿瘤细胞增殖、增加肿瘤细胞凋亡途径实现。     

人鼻咽癌自发性高淋巴道转移模型的建立及生物学特性研究

目的在裸鼠体内建立人鼻咽癌自发性高淋巴道转移模型,并研究该癌细胞的有关生物学特性。方法将鼻咽癌单克隆细胞株（ＣＮＥ２ＺＨ５）移植于裸鼠皮下,待裸鼠发生转移时,取其淋巴结转移灶癌细胞再次移植裸鼠皮下传代,重复传９代后,观察各代裸鼠的转移率和转移途径;各代癌细胞体外增殖能力、癌细胞生长因子和受体表达的变化;裸鼠体内移植瘤增殖指数及瘤重和体积倍增时间的变化。结果癌细胞在裸鼠体内传９代后,各代裸鼠的淋巴结转移率一直稳定在８５％以上,且转移途径较为单一;各代癌细胞的体内外增殖能力不断增强。结论建立了人鼻咽癌自发性高淋巴道转移模型;鼻咽癌细胞在裸鼠体内演进中转移能力和增殖能力均不断增强,两者关系密切     

裸鼠胰腺癌高肝转移模型的建立

目的〓〖HTK〗建立高肝转移率的胰腺癌转移裸鼠模型,为抗胰腺癌肝转移药物的筛选和机理研究提供基础。〖HTW〗方法〓〖HTK〗人胰腺癌MIA-PaCa2细胞株脾内接种形成肝转移病灶,经反复体外原代培养和体内接种后筛选出高转移亚型MIA-PaCa2-3,MIA-PaCa2-3细胞DAPI荧光标记后尾静脉注射建立裸鼠胰腺癌模型,小动物光学分子成像系统动态观察肝脏转移肿瘤的生长变化,荧光显微镜观察肝脏肿瘤细胞转移情况。采用Western-blot的方法比较MIA-PaCa2-3细胞及其源细胞MIA-PaCa2细胞转移部分相关基因的蛋白表达水平。〖HTW〗结果〓〖HTK〗MIA-PaCa2-3细胞尾静脉注射裸鼠6～8周后,裸鼠活体肝脏区域及肝脏冰冻切片均可见明显弥漫性的荧光影像,肝脏转移率为80%（8/10）,明显高于其源细胞MIA-PaCa2（2/10）;MIA-PaCa2-3细胞转移相关基因基质金属蛋白酶2（matrix metallo proteinase-2,MMP-2）、基质金属蛋白酶9（matrix metallo proteinase-9,MMP-9）、血管内皮细胞生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF）表达水平明显高于MIA-PaCa2细胞。〖HTW〗结论〓〖HTK〗MIA-PaCa2-3细胞尾静脉注射可建立高肝转移率的裸鼠胰腺癌模型,借助荧光示踪可以简便、可靠地观察肝脏转移肿瘤的生长情况,适于胰腺癌肝转移机制研究和抗肝转移药物的筛选。