DNA甲基化在结直肠癌早期诊断中的研究进展

DNA甲基化作为表观遗传修饰的重要方式,可以在不改变DNA序列的情况下调控基因的表达。在结直肠癌的发生发展过程中,DNA异常甲基化发挥着重要作用,而且该异常现象在早期肠癌患者的外周血、粪便等体液中就可检测到。因此,DNA甲基化检测有望成为结直肠癌无创早期诊断的有效手段,对临床肿瘤的防治有着重要意义。     

结直肠癌的DNA甲基化研究进展

结直肠癌的发生是肠上皮细胞上一系列的遗传学和表观遗传学改变的结果。众多研究表明,几乎所有的结直肠癌中都存在基因异常甲基化,尤其是启动子区域基因的异常甲基化在结直肠癌的发生发展中扮演着重要角色。对甲基化基因的研究发现,结直肠癌中存在一个独特的分子群,即CpG岛甲基化表现型,而且这类肿瘤存在高甲基化聚集现象。近年结直肠癌表观遗传学研究进展迅速,在结直肠癌发生发展、早期诊断、治疗及预后评价中具有重要的指导意义,有望成为一种重要的生物学标志。本文就DNA甲基化在结直肠癌表观遗传学中的研究进展做一综述。     

DNA甲基化与结直肠癌

DNA甲基化是肿瘤常见的表观遗传学改变,是一种在原核和真核生物基因组中常见的复制后修饰,参与体内多种重要的生理过程,同时在肿瘤的发生和发展中也起着重要的作用。近年来,DNA甲基化成为表观遗传学研究的热点,一些甲基化事件可望成为早期诊断结直肠癌的重要分子靶标,因此对结直肠癌DNA甲基化进行深入研究,对于结直肠癌的临床早期诊断、治疗和预防都具有重要的指导意义。现就结直肠癌中的DNA甲基化研究进展作简要综述。     

结直肠癌与DNA甲基化

表观遗传调控是真核基因的表达调控之一,在结直肠癌的发生发展中具有重要作用。DNA甲基化修饰是表观遗传调控中目前研究较多的部分,DNA甲基化异常引起抑癌基因失活和癌基因激活是结直肠癌形成的分子机制之一。DNA异常甲基化的逆转可能有助于结直肠癌的诊断和治疗。     

散发性结直肠癌中hMLH1基因甲基化的实验研究

[目的]检测散发性结直肠癌患者hMLH1基因启动子区CpG岛甲基化状态,分析该基因甲基化与患者临床病理特征的相关性.[方法]采用重亚硫酸盐修饰测序法检测患者肿瘤组织和配对正常组织hMLH1基因甲基化状态,采用免疫组化方法检测其蛋白表达水平,并将甲基化状态与相应的蛋白表达水平及临床病理学资料进行统计学分析.[结果]正常组织的所有CpG位点均为非甲基化.肿瘤组织中CpG岛1(CGI-Ⅰ)甲基化阳性率为20%(6/30).hMLH1蛋白表达阳性率为50%(15/30).经X2检验,CGI-Ⅰ甲基化组与非甲基化组的hMLH1蛋白表达阴性率有显著性差异(P<0.05);低分化组的甲基化阳性率(100%)显著高于高中分化组(14.29%)(P<0.05).[结论]hMLH1基因启动子区CpG岛1甲基化可能导致hMLH1蛋白不表达;甲基化还与肿瘤的分化程度存在关联,提示甲基化还可作为结直肠癌预后的参考指标之一.     

DNA甲基化与结直肠癌早期诊断的研究现状

结直肠癌中DNA甲基化异常已经被广泛地研究,特别是基因如APC的甲基化状态改变为结直肠腺瘤-癌的发展步骤之一已被广泛认同。回顾和总结国内外对结直肠癌相关基因甲基化异常改变的研究及其进展发现,结直肠癌中除有基因突变外,同时都存在启动子CpG岛的异常甲基化。现对CDKN2/p16、MGMT、p53、Maspin等基因甲基化与结直肠癌的关系及其在早期临床诊断中的应用进行综述。     

DNA甲基化与妇科肿瘤

DNA甲基化是哺乳动物表遗传机制，也是哺乳动物DNA惟一的自然化学修饰方式。但异常甲基化则为肿瘤发生的重要因素，在人类多种妇科肿瘤中都可以发现不同程度的DNA异常甲基化现象。本文介绍了哺乳动物DNA甲基化的特点及其抑制转录、表达的机制，DNA异常甲基化与妇科肿瘤发生、发展的关系，甲基化的检测方法及展望等。     

DNA甲基化与肿瘤的关系

肿瘤的形成受遗传学修饰和表观遗传修饰的影响，DNA甲基化是真核细胞正常的修饰方式，是一种重要的表观遗传修饰，其异常在肿瘤等多种疾病的发生、发展中有重要的作用。DNA甲基化是遗传外修饰的重要的调控方式，也是脊椎动物DNA唯一的自然修饰方式。DNA甲基化后核苷酸顺序未变，而基因表达受到影响。这种修饰反应通常发生在CDG二核苷酸上，     

散发性结直肠癌中CpG岛甲基化表型研究及其与微卫星不稳定的关系

目的 研究散发性结直肠癌(SCRC)中CpG岛甲基化表型(CIMP)阳性的发生率及其临床病理特征,并探讨其与微卫星不稳定(MSI)的关系.方法 采用甲基化特异性PCR(MSP)方法对91例散发性结直肠癌患者行P16、hMLH1、MINT1、MINT2和MINT31共5个基因启动子甲基化检测,分析散发性结直肠癌中CIMP阳性病例的临床病理特征.同时应用荧光标记多重PCR法扩增两个微卫星位点BAT25和BAT26,分析两个微卫星位点状况,探讨CIMP与MSI的关系.结果 91例散发性结直肠癌患者中共检出CIMP阳性者22例,阳性率为24.2％.CIMP阳性者与CIMP阴性者相比,前者好发于近端结肠(P=0.02)、分化程度上低分化癌多见(p=0.03)、组织学类型上黏液腺癌或印戒细胞多见(P=0.04).27.3％的CIMP阳性病例表现为MSI,54.5％的MSI病例表现为CIMP阳性(P=0.02).结论 CIMP的散发性结直肠癌具有好发于近端结肠、低分化癌及黏液腺癌或印戒细胞多见等特点,CIMP与MSI两者具有密切关系.     

DNA甲基化与结直肠癌发生发展的关系

表观遗传调控在肿瘤的形成、发展、转移中起着重要作用,为研究肿瘤的发生机制及预防、诊断和治疗提供了重要线索。DNA甲基化是表观遗传学中研究比较成熟的一种修饰形式,是肿瘤发生、发展的分子机制之一。在此详细论述了DNA甲基化在结直肠癌与肿瘤基因/抑癌基因间的关系,目的为治疗结直肠癌提供新的思路。     

DNA甲基化与大肠癌相关性的研究

DNA甲基化属于表观遗传学范畴,它能在DNA序列不发生改变的情况下参与基因的调控与表达。在大肠癌的发病过程中,伴随着DNA的异常甲基化。抑癌基因和原癌基因的异常甲基化均影响肿瘤的发生发展。现对目前与大肠癌相关的基因甲基化的情况,以及在治疗和预防中的作用进行总结与展望。     

甲基化芯片技术检测粪便DNA甲基化在海南地区少数民族人群大肠癌筛查中的应用

目的 分析甲基化芯片技术检测粪便DNA甲基化在海南地区少数民族人群大肠癌筛查中的应用价值。方法 选取2020年6月—2022年6月海南省人民医院就诊的大肠癌高危少数民族人群102例。另选取同期该院招募的30例健康志愿者作为对照组。留取所有患者在结肠镜检查前自然排出或服用泻药后的第一段粪便,通过甲基化芯片技术检测粪便DNA甲基化。根据肠镜病理检查结果,将102例患者分为大肠癌组、腺瘤组、增生性息肉组。对比4组粪便DNA中VAV3、IKZF1、RIMS1基因甲基化状态。将肠镜病理检查结果作为金标准,评估粪便DNA中VAV3、IKZF1、RIMS1基因联合检测大肠癌、腺瘤的诊断效能。结果 大肠癌组VAV3、IKZF1、RIMS1基因单独及联合检测甲基化率高于腺瘤组、增生性息肉组、对照组（P <0.05）。腺瘤组与增生性息肉组VAV3、IKZF1、RIMS1基因单独及联合检测甲基化率比较,差异无统计学意义（P>0.05）。VAV3、IKZF1、RIMS1基因联合检测大肠癌的特异性、敏感性、阴性预测值、阳性预测值、准确率最高,分别为100.00%、92.31%、92.59%、100....     

血浆游离DNA SEPT9甲基化与结直肠癌不同病理类型的相关性

目的研究血浆游离DNA中SEPT9甲基化在结直肠癌(CRC)不同组织病理学类型、不同大体形态分型中的检出水平及临床意义。方法选取北京市肛肠医院术前检测SEPT9甲基化,术后进行病理学分析的大肠良恶性肿瘤209例,包括结直肠癌182例,腺瘤及神经内分泌瘤27例,统计SEPT9甲基化在结直肠癌不同组织学类型、不同大体形态分型的阳性检出率。结果SEPT9在不同组织学类型:腺癌(非特殊性)、腺癌(特殊型,如印戒细胞癌)、鳞癌、腺瘤、肠道其他肿瘤(主要为神经内分泌瘤、平滑肌瘤、间质瘤)中的阳性检出率分别为66.7%、63.6%、33.3%、4.5%和0;在不同大体形态分型:隆起型、溃疡型、隆起溃疡型中的阳性检出率分别为35.3%、50.0%和67.0%。结论SEPT9在不同组织学类型中阳性检出率不同,可能与大肠癌的发病机制及发病阶段有关。SEPT9在隆起型、溃疡型、溃疡隆起型肿瘤中阳性检出率依次升高,可能与肿瘤随着肿瘤进展,逐渐增大有关。     

DNA氧化损伤和结直肠癌发病风险的相关研究

目的 探讨总抗氧化能力,DNA氧化损伤和单核苷酸多态性（SNP）与结直肠癌的相关风险.方法 收集175份人血液样本,其中80例健康对照,67例肠息肉,28例结直肠癌患者.分别采用碱性和经DNA糖基化酶修饰的彗星试验,测定外周血白细胞的直接与DNA氧化损伤,以及血浆中的总抗氧化能力,并采用Applied Biosystems公司的引物系统对单核苷酸多态性进行等位基因鉴别检测.结果 结直肠癌患者氧化应激诱导的DNA损伤水平显著高于健康对照组（P＜0.05）.肠癌组直接DNA损伤水平也表现出明显升高的趋势（P =0.071）.肠息肉人群总抗氧化能力显著高于对照组.分析肠癌与生活方式（如吸烟和饮酒）关系,肠癌组吸烟率显著高于健康对照组（P＜0.01）.分析DNA损伤和修复,代谢和解毒等基因的单核苷酸多态性,hOGG1和GSTM的单核苷酸多态性与结直肠癌之间有一定的相关性.结论 高水平的氧化应激诱导的DNA损伤与结直肠癌的发病风险增加相关,是值得进一步研究的潜在的肿瘤生物标志物.     

高甲基化导致EphA7基因在结直肠癌中低表达

目的：Eph基因和配体在多种肿瘤中呈高表达，并可能在肿瘤的发生、发展及预后中发挥重要作用。作者探讨EphA7基因在大肠癌细胞系和结直肠癌组织及其正常黏膜中的表达情况，以及EphA7基因在大肠癌发生、发展中的作用。方法：定量RT—PCR检测大肠癌细胞系和原发性结直肠癌标本中EphA7的表达。经甲基化特异性PCR（MSP）和亚硫酸氢钠处理后，用DNA测序等方法分析EphA7基因启动子区CpG岛甲基化状况。构建pEGFPN3-EphA7质粒，并转染至EphA7表达丢失的大肠癌细胞系中，对转染子进行mRNA基因表达芯片分析。结果：大肠癌细胞系DLD1、HT29、HCT116、SW480和SW620中Epha7基因低表达。59例进行定量RT-PCR测定的原发性结直肠癌患者中，29例患者癌组织中EphA7基因的表达水平低于来源相同患者的正常黏膜（P=0．008）。经MSP、亚硫酸氢钠处理后DNA测序等发现，EphA7基因启动子区CpG岛高甲基化。EphA7的高甲基化与肿瘤分化、性别以及肿瘤发生部位等有关。对EphA7质粒转染子mRNA基因芯片分析，观察到多种基因表达改变。结论：EphA7基因启动子区CpG岛甲基化是EphA7在大肠癌中低表达的机制。Epha7基因可能在结直肠癌的肿瘤发生、发展中起重要作用。     

DNA 甲基化与骨肉瘤关系的研究进展

骨肉瘤的早期诊断、复发与转移的预测以及避免化疗耐药已成为目前骨肉瘤治疗领域的关键。 DNA甲基化是导致癌基因激活和抑癌基因失活的主要原因,目前已证实多种基因的甲基化与骨肉瘤临床指标及靶向治疗密切相关,故有望用于骨肉瘤的临床诊治。文中就DNA甲基化与骨肉瘤关系的研究作一综述。     

精神分裂症的DNA甲基化研究进展

环境因素在精神分裂症发生过程中具有重要作用。研究发现,环境因素可能通过DNA甲基化机制调控基因表达,导致精神分裂症的发生风险增加。文章就DNA甲基化对环境因素影响及其在精神分裂症发生中作用的相关研究进展作一综述。     

结直肠癌中PAQR3甲基化水平及mRNA表达的研究

目的：研究结直肠癌组织中抑癌基因PAQR3 mRNA表达情况及甲基化水平,探讨PAQR3基因异常甲基化与结直肠癌的关系。方法收集结直肠癌及正常组织标本54组,用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测结直肠癌标本中PAQR3 mRNA表达水平;用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）法检测结直肠癌标本中PAQR3基因甲基化水平,用以分析PAQR3甲基化水平与临床病理资料的关系。结果54组结直肠癌标本中PAQR3 mRNA表达降低发生率为57.4%（31/54）,正常组织PAQR3 mRNA表达降低发生率为18.5%（10/54）,表达差异有统计学意义（P=0.000）;癌组织PAQR3基因启动子甲基化发生率为33.3%（18/54）,正常组织PAQR3基因启动子甲基化率为5.6%（3/54）,二者差异有统计学意义（P=0.000）;PAQR3基因甲基化与年龄、分化程度、浸润深度、临床分期、淋巴结转移有关,与性别、部位无关。结论结直肠癌组织中PAQR3表达降低,与其基因启动子发生高甲基化有关。