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研究山楂多酚氧化酶(PPO)的酶学特性。采用分光光度法测定PPO的酶活性,考察底物特异性、p H值、温度、热稳定性、底物浓度、金属离子以及抑制剂对PPO酶活性的影响。实验结果表明,山楂PPO的最适底物为邻苯二酚;最适p H值为6.5;最适温度为40℃;90℃热处理1.0 min或85℃处理1.5 min PPO酶活基本完全丧失;山楂PPO最适底物浓度为0.10 mol/L,PPO酶促褐变反应动力学符合米氏方程,相应的动力学参数Km=55.83 mmol/L,Vmax=98.04 U/min;Al3+对PPO酶活的抑制作用较强,Mn2+、Ca2+和Zn2+次之,Cu2+和Mg2+对PPO酶活抑制作用不明显,Fe3+对PPO酶活有一定的促进作用;四种抑制剂对山楂PPO酶活均有一定的抑制作用,且抑制效果与抑制剂浓度呈量效关系,相同浓度下抑制效果由强到弱顺序为:抗坏血酸L-半胱氨酸亚硫酸氢钠柠檬酸,抗坏血酸的抑制效果最为显著。 相似文献
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白萝卜作为我国第二大蔬菜。其贮运和加工过程中的褐变多以酶促褐变为主,全面系统地了解白萝卜多酚氧化酶(PPO)的酶学特性,并研究其抑制手段,对提升白萝卜及其制品的品质和商品价值有着重要的意义。本文以新鲜白萝卜为原材料,采用丙酮洗涤、0.2 mol/L磷酸盐缓冲溶液匀浆法从中提取PPO,考察了pH、温度对酶活的影响,分析了其温度稳定性、底物浓度对PPO活性的影响,探讨了过程的反应动力学,并对多种酶抑制剂对PPO活性的影响进行了比较,为控制加工过程中白萝卜的酶促褐变提供了理论依据。试验结果表明:以邻苯二酚为底物,该酶的最适pH 值为6.0,最适反应温度为40 ℃,Km和Vmax值分别为53.8 mmol/L和588 U/min。90 ℃热处理2.5 min或85 ℃热处理3.5 min可基本完全钝化其活性,Vc、异Vc和L-cys对PPO酶活的抑制较为明显。 相似文献
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白萝卜作为我国第二大蔬菜。其贮运和加工过程中的褐变多以酶促褐变为主,全面系统地了解白萝卜多酚氧化酶(PPO)的酶学特性,并研究其抑制手段,对提升白萝卜及其制品的品质和商品价值有着重要的意义。本文以新鲜白萝卜为原材料,采用丙酮洗涤、0.2 mol/L磷酸盐缓冲溶液匀浆法从中提取PPO,考察了pH、温度对酶活的影响,分析了其温度稳定性、底物浓度对PPO活性的影响,探讨了过程的反应动力学,并对多种酶抑制剂对PPO活性的影响进行了比较,为控制加工过程中白萝卜的酶促褐变提供了理论依据。试验结果表明:以邻苯二酚为底物,该酶的最适pH值为6.0,最适反应温度为40℃,Km和Vmax值分别为53.8 mmol/L和588 U/min。90℃热处理2.5 min或85℃热处理3.5 min可基本完全钝化其活性,Vc、异Vc和L-cys对PPO酶活的抑制较为明显。 相似文献
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苹果梨多酚氧化酶(PPO)的部分特性 总被引:11,自引:0,他引:11
苹果梨多酚氧化酶仅作用于邻苯酚,与对苯酚、间苯酚和一元酚无作用。以儿茶酚为底物,该酶的最适pH为6.5,在30℃下活性最强。除氯化钠和蔗糖外,供试的其它7种抑制剂均可不同程度地对该酶产生抑制,其中以焦亚硫酸钾效果最好。 相似文献
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研究苦杏仁多酚氧化酶粗提物的理化特性。结果表明:苦杏仁多酚氧化酶活性的最佳测定波长为410 nm,底物邻苯二酚最佳浓度为1.0 mol/L,Km和Vmax分别为20.53 mol/L和1.27 U/min,最适缓冲液pH值为7.40,最适反应温度和时间分别为40 ℃和3 min。热稳定性实验表明:苦杏仁多酚氧化酶在30~50 ℃范围内,热处理时间对其活性影响较小;在60~100 ℃范围内,随着温度增加酶活力也随之快速下降,使苦杏仁多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)活性丧失50%所需时间从60 ℃的15 min缩短到100 ℃的3 min左右。 相似文献
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目的:了解菜豆豆荚多酚氧化酶(polyphenol Oxidase,PPO)的酶学特性。方法:采用聚丙烯酰氨凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)法对菜豆豆荚PPO的最适pH值、最适温度、底物专一性、激活剂及抑制剂进行研究。结果:菜豆豆荚PPO最适pH值为6.0;最适温度为30℃,且温度为30℃时,该酶具有较强的热稳定性,80℃可使其完全失活;该酶对不同酚类物质表现出不同的底物专一性,邻苯二酚为该酶的最适底物;抗坏血酸、L-半胱氨酸、β-巯基乙醇、甘氨酸均能抑制该酶的活性,而1.0mmol/Lβ-巯基乙醇或抗坏血酸可完全抑制其活性;氯化铜、尿素对该酶均有激活作用,其中氯化铜的激活作用明显。结论:高温、偏碱性环境、β-巯基乙醇或抗坏血酸处理均可有效抑制菜豆豆荚PPO活性。 相似文献
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以紫花苏芡和紫花刺芡种仁为原料制备粗酶液,研究多酚氧化酶(PPO)酶学性质。结果表明:紫花苏芡和紫花刺芡PPO最适作用条件均为温度45℃和pH 6.5;铁离子和亚铁离子对芡实PPO酶活性具有较强的促进作用,钙离子低质量浓度时抑制酶活性,较高质量浓度时使酶活性反弹,没有表现出明显的激活作用,铝离子有一定的促进作用,铜离子低质量浓度对酶活性有促进作用,高质量浓度有抑制作用;有机酸柠檬酸、草酸、抗坏血酸和EDTA、还原剂亚硫酸氢钠和硫代硫酸钠对紫花苏芡和紫花刺芡PPO酶活性都有抑制作用。 相似文献
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以邻苯二酚为底物,采用分光光度法研究了芋头多酚氧化酶(PPO)的酶学特性。结果表明:芋头PPO的最适温度pH为7.5,最适温度为40℃;90℃高温处理2 min,可使酶完全失活;PPO催化的酶促褐变反应符合米氏动力学方程,相应动力学参数Km=0.0221mol/L,Vmax=46.08 U/min;4种抑制剂对PPO活性均有不同程度的抑制作用,抑制效果由强到弱顺序为:抗坏血酸>亚硫酸氢钠>L-半胱氨酸>柠檬酸;金属离子Sn2+对PPO活性具有较强的抑制作用,A13+、Cu2+、Mg2+、Ca2+和Co2+对PPO活性有一定的抑制作用,Zn2+对PPO活性具有激活作用,Fe3+、Fe2+和Mn2+对PPO活性几乎没有影响。 相似文献
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Halis Sakıroglu Ercan Yılmaz Mustafa Erat A. Emin Öztürk 《International Journal of Food Properties》2013,16(6):1314-1321
Polyphenol oxidase enzyme was isolated from Ispir sugar bean by ammonium sulphate precipitation and its biochemical properties were investigated. For this purpose, KM and Vmax values for optimum conditions of pH, temperature, and ionic strength were determined for catechol, catechin, and chlorogenic acid as substrates. Enzyme activities were measured spectrophotometrically at 420 nm using the same substrates at optimum conditions. KM values were found to be 2.4875, 1.3154, and 2.2487 M for catechol, catechin, and chlorogenic acid, respectively. Vmax values were 3.1480, 0.6130, and 0.5039 EU/ml.min for the same substrates, respectively. These results indicated that catechol was used as a subsrate for inhibition studies. For catechol substrate, dithiothreitol, glutathione, thiourea, and L-cysteine chlorid were inhibitors. For these inhibitors, Ki constants were calculated from Lineweaver-Burk plots and inhibiton types were estimated. Moreover, I50 values were also determined. The most effective inhibitor was found to be glutathione. 相似文献
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以蘑菇多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)为原料,研究不同温度热处理对PPO活性的影响。选取不同温度(50、55、60、65 ℃)处理10 min后的PPO样液,应用圆二色光谱(circular dichroism,CD)和荧光光谱研究热处理对PPO二级结构和三级结构的影响。结果表明:在各温度下进行热处理的PPO活性均随着处理时间的延长逐渐降低,热处理温度越高抑制效果越明显;CD光谱表明热处理后的PPO二级结构发生了改变,主要表现在α-螺旋含量下降,β-折叠含量升高,而β-转角及无规卷曲含量则没有太大的变化;荧光光谱表明热处理后的PPO三级结构发生改变,表现在最大荧光发射峰发生了明显红移。 相似文献