酶法改变甘草苷糖醛酸基提高其甜度的研究（II）：能水解甘草苷糖 …

以酶法改变甘草苷糖醛酸基提高其甜度的为目的,对新分离筛选的Ｍ－２和甘Ｍ６－６霉菌产的β－葡萄糖醛酸苷酶进行了分离提纯和酶学方面的研究,结果表明,两株菌产生的β－葡萄糖醛酸苷酶被６０％饱和硫酸铵沉淀较好,经ＤＥＡＥ－ＣｅｌｌｕｏｓｅＤＥ５２离子交换层析柱梯度洗脱,得到纯酶,提纯倍数分别为１０．６７和６．１５倍,收率分别为３３．０％和２４．２％,其中甘Ｍ－２菌产β葡萄糖醛酸苷酶只能将甘草苷水解成甘草次     

酶法改变甘草苷糖醛酸基提高其甜度的研究(Ⅰ)——能水解甘草苷糖醛酸基酶的微生物的选择与产酶的研究

以酶法改变甘草苷糖醛酸基提高其甜度为目标,研究了９种新菌株能产水解甘草苷糖醛酸基的β－葡萄糖醛酸苷酶产率。结果：细菌甘Ｅ－１、霉菌甘Ｍ－３和甘Ｍ－６等产β－葡萄糖醛酸苷酶较好,产率分别为５６．７３Ｕ／ｍｌ、４２．５２Ｕ／ｍｌ和３１．２６Ｕ／ｍｌ,产酶最佳培养时间分别为细菌１８ｈ和霉菌４８ｈ。酶解甘草苷的最佳反应条件为：ｐＨ６,反应时间为１２ｈ,反应温度为４０℃。     

酶法改变甘草苷糖醛酸基提高其甜度的研究(Ⅱ)——能水解甘草苷糖醛酸基酶的提纯与酶性质研究

以酶法改变甘草苷糖醛酸基提高其甜度为目的,对新分离筛选的甘Ｍ－２和甘Ｍ－６霉菌产的β－葡萄糖醛酸苷酶进行了分离提纯和酶学方面的研究。结果表明,两株菌产的β－葡萄糖醛酸苷酶被６０％饱和硫酸铵沉淀较好,经ＤＥＡＥ－ＣｅｌｕｏｓｅＤＥ５２离子交换层析柱梯度洗脱,得到纯酶,提纯倍数分别为１０．６７和６．１５倍,收率分别为３３．０％和２４．２％,其中甘Ｍ－２菌产β－葡萄糖醛酸苷酶只能将甘草苷水解成甘草次酸（ＧＡ）;甘Ｍ－６菌产β－葡萄糖醛酸苷酶水解甘草苷主要变成甜度很高的单葡萄糖醛酸基甘草苷（ＧＡＭＧ）;两种酶在ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳都得到电泳单点,其酶蛋白相对分子质量分别为６００００和４２０００;酶反应最适ｐＨ分别为５．０和６．０,最适温度均为４０℃,均在ｐＨ４．０～８．０和２０～７０℃范围内相对稳定。     

产单葡萄糖醛酸甘草次酸菌株的筛选及发酵条件的优化

从甘草土壤中筛选纯化得到一株产β-D-葡萄糖醛酸苷酶（β-D-glucuronidase,β-GUS）的菌株,采用常温室压等离子体诱变技术（ARTP）对原始菌株进行诱变,筛选得到高产突变菌株。经传代10次培养验证该菌株遗传性状稳定。通过菌落形态、显微镜制片观察和ITS序列比较确定菌株为蓝状真菌属,命名为Talaromyces sp.02。对其进行发酵产酶优化,确定发酵产酶的工艺。结果表明,以5 g/L的甘草酸为诱导剂,3 g/L的硝酸钠为氮源,初始p H 5.5,发酵温度30℃,10%的接种量,发酵144 h,在此条件下,该菌株可水解甘草酸（Glycyrrhizin,GL）生成单葡萄糖醛酸甘草次酸（Glycyrrhetinic acid monoglucuronide,GAMG）,产量可达4.03 g/L,且几乎无副产物甘草次酸的生成,其发酵产率可达到87.88%,葡萄糖醛酸苷酶的酶活为162.20 U/m L,是原始复筛菌株的3.23倍,是一株具有开发前景和应用潜力的葡萄糖醛酸苷酶生产菌株。      

雪里蕻腌菜风味物质的研究（Ⅰ）：雪里蕻腌菜氨基酸及有机酸成分检？…

借助于离子色谱（ＩＣ）和氨基酸分析仪对两种市场销售的咸雪菜中的有机酸和氨基酸成仇进行了检测。检测结果为，咸雪菜卤汁中的有机酸主要为乳酸、醋酸、柠檬酸、丁二酸和苹果酸。咸雪菜卤汁中的氨基酸含量高达１％左右。卤汁和菜体中呈鲜味的主要氨基酸Ｇｌｕ和Ａｓｐ的总含量随着腌渍时间的延长，增加的幅度很大，咸雪菜中的蛋白质是一种符合人体需要的良好蛋白质。